抗A、抗B血凝素检查方法确认实验
实验四 抗A抗B血型定型检测
抗A抗B血型定型检测
一、实验目的
观察红细胞凝集现象，掌握ABO血型鉴定的原理。
二、实验原理
A型红细胞膜上含有A抗原，B型红细胞膜上含有B抗原，AB型红细胞膜上含有A，B两种抗原，O型红细胞膜上不含有A、B抗原。
抗A、抗B血型试剂是分别针对A抗原和B抗原的特异性抗体。
当将已知的抗A、抗B血型试剂与受验者的红细胞混合时，与抗A血型试剂发生凝集都即为A型血型，与抗B 血型试剂发生凝集者即为B型血型，与抗A、抗B血型试剂均发生凝集者为AB 型血型，与抗A、抗B血型试剂均不凝集者即为O型血型。
三、实验试剂和器材
1.试剂
抗A定型试剂、抗B定型试剂、抗D定型试剂、酒精棉球、自身血液
2.器材
大头针、玻璃板，移液枪
四、实验步骤
1.在玻璃板背面分别标记A、Rh、B，然后依次在正面各加一滴抗A定型试剂、
抗D定型试剂、抗B定型试剂。
2.用酒精棉球消毒手指，使用大头针扎破手指，并用移液枪吸取微量血液，分
别滴加在玻璃板上的标记处，并混匀各自样品点。
3.观察凝血现象
五、实验结果
从血液凝集现象可观察，A、B处没有发生明显的凝血现象，在Rh处有明显
颗粒状凝血现象。
故可以判读血型为O型。
abo血型系统定型原则和实验方法
abo血型系统定型原则和实验方法
ABO血型系统定型原则是利用凝集试验技术，通过正定型（红细胞定型）和反定型（血清定型）两组试验来准确鉴定ABO血型。
具体步骤如下：
1. 正定型：取75×12mm干净小试管2支，分别标记抗A、抗B。
按标记滴加抗A、抗B试剂血清1滴。
再各滴加3-5%待检者红细胞悬液1滴，混匀。
2. 反定型：取75×12mm干净小试管3支，分别标记A细胞、B细胞、O 细胞。
3管各滴加待检者血清1滴。
按标记分别滴加混匀的A型、B型、O 型试剂红细胞1滴，混匀。
5管同时2档（3400转/分-15秒）离心。
3. 轻轻摇动试管，观察反应结果。
对于结果解释，如果被检红细胞膜上有与该试剂血清抗体相对应的抗原，或者被检血清中有与该试剂红细胞抗原相对应的抗体，则为阳性，即凝集为阳性。
如果不凝集，则为阴性。
以上是ABO血型系统定型原则和实验方法，仅供参考，建议查阅专业书籍或咨询专业人士获取更准确的信息。
血型的鉴定方法及操作全解
血型的鉴定方法及操作全解血型是指人体血液中红细胞表面的抗原特征，主要分为A、B、AB和O四种血型。
了解一个人的血型对献血、输血和婚姻等方面都有重要意义。
下面将详细介绍血型的鉴定方法及操作步骤。
一、血型鉴定的试剂1.抗A血清：含有抗A抗体，加入A型血液会凝集。
2.抗B血清：含有抗B抗体，加入B型血液会凝集。
3.抗AB血清：含有抗A和抗B抗体，加入A型、B型和AB型血液会凝集。
4.抗Rh血清（抗D血清）：含有抗Rh抗体，加入Rh阳性的血液会凝集。
二、操作步骤2.涂血滴定法鉴定血型：步骤一：取一根牙签，将其浸入患者或供血者的新鲜封闭伤口、创口或皮肤直至有微量血液，然后将牙签上的血涂于三个试管中的三个凹槽中。
步骤二：加入抗A、抗B和抗Rh血清。
步骤三：用滴管分别向三个试管中加入一滴抗A血清，观察结果。
如果出现凝集反应，则表示該人的血液中有A抗原，血型为A型；如无凝集反应，则表示人的血液中无A抗原，进入下一步鉴定。
步骤四：用滴管分别向三个试管中加入一滴抗B血清，观察结果。
如果出现凝集反应，则表示該人的血液中有B抗原，血型为B型；如无凝集反应，则表示人的血液中无B抗原，进入下一步鉴定。
步骤五：用滴管分别向三个试管中加入一滴抗AB血清，观察结果。
如果出现凝集反应，则表示該人的血液中有A和B抗原，血型为AB型；如无凝集反应，则表示人的血液中无A和B抗原，进入下一步鉴定。
步骤六：用滴管分别向三个试管中加入一滴抗Rh血清，观察结果。
如果出现凝集反应，则表示該人的血液中有Rh抗原，血型为阳性（+）；如无凝集反应，则表示人的血液中无Rh抗原，血型为阴性（-）。
3.精确测定法鉴定血型：步骤一：利用滴管取适量血液加入试管中。
步骤二：加入抗A血清滴定至血液凝结。
步骤三：记录滴定的比率，若比率超过1∶3，即滴入的抗A血清多于血液凝集，则表示为A型血液。
步骤四：继续加入抗B血清滴定至血液凝结。
步骤五：记录滴定的比率，若比率超过1∶3，即滴入的抗B血清多于血液凝集，则表示为B型血液。
实验一、ABO血型的鉴定
A 抗B凝集素
B抗A凝集素
4、ABO血型的鉴定 用已知的标准血清（含有凝集素），检测未知的凝集原
[结果分析]
1、甲玻片上红细胞在含抗A、B两种凝集素标准 血清中都不发生凝集，说明红细胞上A、B两种凝 集原都没有，则血型为O型。 2、乙玻片上红细胞在含抗B标准血清中不凝集， 在含抗A凝集素标准血清中发生凝集，说明红细 胞上含A凝集原，则血型为A型。 3、丙玻片与乙玻片刚好相反，说明红细胞上含B 凝集原，则血型为B型。 4、丁玻片上红细胞在A、B两种标准血清中都发 生凝集，说明红细胞上含有A、B两种凝集原，则 血型为AB型。
[异常பைடு நூலகம்象讨论]
本实验一般不会出现异常情况，但有时所测血型与某人原 来正式鉴定过的血型不相符，其原因一方面可能所采用的 标准血清存放时间过长，已失去标准血清的作用，需要用 重新校准的新鲜标准血清；其次可能系实验场所不清洁， 红细胞悬液及血清有严重污染而产假凝集。 [思考题]
[结论]
红细胞上的A、B凝集原被测知，即可作出ABO血型鉴定。 [注意事项] 1、实验前对所用A、B两种标准血清要经过校准，合格 者才能用。 2、加入玻片或试管中的A、B两种标准血液切不可混淆错 乱。 3、制备红细胞混悬液摇匀时，不可用力摇振，要轻轻将 试管来回倒置，以防红细胞破裂溶血。 4、玻片或试管内加入红细胞混悬液时所用牙签要分别专 用，不能两侧共用。
若无标准血清，已知某人血型为A型或B型，能否用来鉴 定他人血型？如何鉴定？
实验一
A B O血型的鉴定
[目的要求] 加深理解血型分型的依据及其意义； 学会一种鉴定血型的方法。
abo凝集素检测方法
abo凝集素检测方法
ABO凝集素检测方法是一种用于检测血型的实验室方法。
ABO血型系统是人类最常见的血型系统之一，分为A型、B型、AB型和O型四种血型。
在ABO血型系统中，红细胞表面有抗原A、抗原B或两者都有，同时在血浆中存在相对应的抗体。
ABO凝集素检测方法主要用于确定个体的血型，这对于进行输血、器官移植等医疗操作非常重要。
在ABO凝集素检测中，通常使用ABO血型试剂来检测患者血浆中的抗体。
这些试剂包含抗A抗体、抗B抗体和抗Rh抗体。
首先，将待测血浆与ABO血型试剂混合，观察反应是否发生凝集。
如果待测血浆中的抗体与试剂中的抗原相结合，就会出现凝集现象。
凝集程度可以根据凝集的大小和数量来判断。
另外，ABO凝集素检测方法还可以通过使用反凝血剂来判断特定血型。
反凝血剂可以阻止血浆中的抗体与试剂中的抗原结合，从而阻止凝集的发生。
除了ABO凝集素检测方法，还有其他一些检测血型的方法，如RBCT和PCR等。
RBCT是一种通过将被测血红细胞与已知血型的血清进行混合，观察凝集情况来确定血型的方法。
而PCR则是一种通过检测特定基因的方法，可以准确地确定个体的基因型，从而确定其血型。
总的来说，ABO凝集素检测方法是一种常用的血型检测方法，可以快速准确地确定个体的血型。
它在医学领域中的应用广泛，为输血和器官移植等医疗操作提供了重要的依据。
血型鉴定操作步骤
血型鉴定操作步骤
血型鉴定，主要是通过红细胞凝集试验来进行，操作步骤如下：
1、准备材料：包括清洁玻片、抗A和抗B血清、待测红细胞样本等。
2、划线分组：在玻片上用蜡笔划成几个区域，分别标明抗A、抗B等。
3、滴血清：在相应的区域滴上抗A、抗B血清。
4、加红细胞：在血清上滴上待测红细胞样本。
5、混合：用玻片轻轻转动，使血清与红细胞充分混合。
6、观察：静置一段时间后，观察红细胞是否发生凝集现象。
7、判断结果：根据红细胞凝集情况，判断血型。
此外还有试管法血型鉴定，其操作步骤类似，只是在观察凝集现象时使用试管代替玻片。
测血型实训报告步骤及结果
一、实训目的通过本次实训，掌握血型鉴定的基本原理和方法，了解不同血型之间的差异，提高对血型鉴定的实际操作能力。
二、实训时间2021年10月15日三、实训地点护理与健康学院实验室四、实训材料1. 血型鉴定试剂盒：包括抗A、抗B、抗A+B、抗A-B血清，红细胞悬液，生理盐水，玻片，吸管，采血针，消毒棉签等。
2. 实验器材：显微镜，离心机，恒温箱等。
五、实训步骤1. 准备工作（1）检查实验器材是否完好，确保实验顺利进行。
（2）将血型鉴定试剂盒中的血清和红细胞悬液取出，放置在恒温箱中预热。
2. 样本采集（1）取静脉血少许，放入生理盐水中混匀，配成2%红细胞原液。
（2）在双玻片反面两侧写上A、B以方便区分两类血清。
3. 血型鉴定（1）在玻片正面相应位置滴下抗A血清和抗B血清。
（2）用酒精棉签消毒无名指（或中指）腹和采血针。
（3）待酒精干后，用采血针迅速刺入皮肤深2~3mm，让血液自行流出。
（4）有些同学出血过少便在针口近端稍加挤压让血液流出，分别滴入抗A、B血清1~2滴。
（5）用两个吸管使红细胞悬液与抗体充分接触，注意严防两种血清接触。
（6）5~10分钟后用肉眼观察有无凝集现象发生。
4. 结果分析根据凝集反应的结果，确定红细胞膜上A或B抗原的类型，从而确定血型。
六、实训结果本次实训中，同学们成功完成了血型鉴定实验，结果如下：1. A型血：观察到红细胞与抗A血清发生凝集反应，与抗B血清无凝集反应。
2. B型血：观察到红细胞与抗B血清发生凝集反应，与抗A血清无凝集反应。
3. AB型血：观察到红细胞与抗A血清和抗B血清均发生凝集反应。
4. O型血：观察到红细胞与抗A血清和抗B血清均无凝集反应。
七、实训总结通过本次实训，同学们掌握了血型鉴定的基本原理和方法，了解了不同血型之间的差异，提高了对血型鉴定的实际操作能力。
在实验过程中，同学们严格按照操作步骤进行，认真观察实验现象，对实验结果进行了分析。
在实训过程中，同学们还发现了一些注意事项，如实验用具严格消毒，消毒采血针应一人一针，吸管不可交叉使用等。
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体，确定受检者ABO及RhD血型。
(二)检验原理1.手工试管法、玻片法或纸板法利用标准IgM抗A／B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型，利用已知ABO 血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A／B 抗体即反定型，综合正反定型结果确定受检标本ABO血型；利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。
2.微柱凝胶法ABO／RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法ABO／RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。
(四)设备性能参数各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO 血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×12mm和75m m×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2.试剂Diana DG Gel ABO-CDE血型卡、DiaMed ABO／RhD血型卡、OTHROBiovueABO／RhD血型卡、2％氢氧化钠溶液、生理盐水、抗A／B标准血清、抗D标准血清、3％～5％反定型试剂红细胞、1％反定型试剂红细胞。
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抗A、抗B血凝素检查法
适用性验证
日期：
抗A、抗B血凝素检查法适用性验证方案
目录
1、主题内容 (4)
2、适用范围 (4)
3、引用文件 (4)
4、职责 (4)
5、概述 (4)
6、验证目的 (5)
7、实验要求 (5)
8、验证项目 (5)
9、偏差处理 (7)
10、验证结果评定与结论 (7)
1、主题内容
本方案规定了我公司抗A、抗B血凝素检查法验证实验方案的实验方法及标准。
制定本方案是为了明确抗A、抗B血凝素检测的测定方法，确保检验结果的准确性。
2、适用范围
本标准适用于本公司生产的静注人免疫球蛋白（pH4)的抗A、抗B血凝素检定。
3、职责
3.1 验证领导小组
3.1.1 验证领导小组：协调和组织验证实验项目，管理验证实验小组。
3.1.2 质量管理部负责人：赵学梅，审核验证实验方案及报告。
3.1.3 验证总负责人：刘欣晏，审批验证实验方案及报告，同时方法验证实验合格，签署合格证。
3.2验证小组
3.2.1验证小组组长：班凯，负责方法验证实验的组织和协调工作。
3.3 验证小组组员
3. 3.1姜志文：起草验证方案，负责实验的实施，起草验证实验报告。
3. 3.2邓应群、龙红玉：协助起草方案。
4、引用文件
4.1《中国药典》2010年版三部。
5、概述
根据<<中国药典>>2010版三部的要求,用于我公司生产的静注人免疫球
蛋白（pH4)的抗A、抗B血凝素检查。
6、验证目的
通过实验验证该方法是否适用于对我公司生产的静注人免疫球蛋白（pH4)抗A、抗B血凝素检查的目的。
7、实验要求
7.1 A、B、O型红细胞悬液: 取健康人静脉血A、B、O型各3人份，分别混合，用生理盐水洗涤3次，末次2000rpm 离心5min弃上清，用生理盐水溶液制成5％（ml/ml）红细胞悬液。
红细胞于采集之日起1周内使用。
7.2 抗人球蛋白血清：为多价抗人球蛋白血清，用前须标定，选择适宜稀释度用于试验。
7.3 AB型血清：分离AB型人血清，用于阴性对照。
7.4 抗D血清(IgG型)，用于阳性对照。
8、验证项目
8.1 实验人员的确认。
8.1.1 合格标准：人员已经培训，并能独立操作。
8.1.2 确认方法：查看是否有培训记录。
8.1.3 结果：见（附表1）
8.2 SOP的确认。
8.2.1 合格标准：与该验证有关的SOP都已经批准。
8.2.2 确认方法：记录与该验证有关的SOP的名称和文件编号。
8.2.3 结果：见（附表2）
8.3 实验依据的确认。
8.3.1 合格标准：《中国药典》2010年版三部附录。
8.3.2确认方法：查看《中国药典》2010年版三部附录是否有狂犬病抗体效价检查方法。
8.3.3结果：见（附表3）
8.4 实验仪器的确认。
8.4.1 合格标准：实验仪器在检定有效期内。
8.4.2 确认方法：记录恒温水浴箱、生物安全柜验证方案名称和文件编号，查看上述实验仪器使用时间是否在再验证时间之前。
8.4.3 结果：见（附表4）
8.5 实验试剂的确认。
8.5.1合格标准：实验试剂在检定有效期内。
8.5.2确认方法：记录实验所用试剂名称，查看是否在有效期内。
8.5.3结果：见（附表5）
8.6 实验样品确认。
8.6.1合格标准：实验样品为我公司生产制品。
8.6.2确认方法：查看制品名称、批号。
8.6.3结果：见（附表6）
8.7实验方法的确认。
8.7.1合格标准：按SOP执行，通过三次实验，阴性对照及红细胞对照结果均呈阴性，阳性对照结果不低于“+++”，试验成立。
抗A效价、抗B效价应不高于1：64。
8.7.2确认方法：查看实验记录。
8.7.3结果：见（附表9）及实验记录。
9、偏差处理
在验证方案实施过程中如有与验证方案不一致的地方将被视为偏差。
9.1验证方案实施人员应对所发生的偏差进行描述并记录；
9.2 验证小组应评估偏差对验证方案的实施和该系统质量的影响，提出偏差纠正措施并经QA审核批准后实施；
9.3 以上偏差纠正措施的实施均应填写偏差纠正措施实施记录；
9.4 验证小组应对偏差纠正措施实施后的效果进行评价。
10、验证结果评定与结论
10.1 验证小组负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论，发放验证证书。
对验证结果的评审应包括：
10.1.1 验证实验是否有遗漏？
10.1.2验证实施过程中对验证方案有无修改？修改原因、依据以及是否经过批准？
10.1.3验证记录是否完整？
10.1.4验证试验结果是否符合标准要求？是否需要进一步补充试验？
附表1
人员确认记录表
备注：
偏差处理：
结论：
确认人：复核人：确认日期：复核日期：
附表2
SOP确认记录表
备注：
偏差处理：
结论：
确认人：复核人：确认日期：复核日期：
附录3
实验依据确认表
备注：
偏差处理：
结论：
确认人：复核人：确认日期：复核日期：
附录4
实验仪器确认表
备注：
偏差处理：
结论：
确认人：复核人：确认日期：复核日期：
附表5
实验试剂确认表
备注：
偏差处理：
结论：
确认人：复核人：确认日期：复核日期：
附表6
实验样品确认表
备注：
偏差处理：
结论：
确认人：复核人：确认日期：复核日期：
附表7
实验方法确认表
备注：
偏差处理：
结论：
确认人：复核人：确认日期：复核日期：。