90384-仪器分析-荧光法直接测定水样中碱性玫瑰精含量
高效液相色谱法测定辣椒制品中的碱性橙和碱性玫瑰精含量
高效液相色谱法测定辣椒制品中的碱性橙和碱性玫瑰精含量杨 琳1，陈青俊1，梁晶晶1，王 京1，丁献荣2，吴 平3(1.浙江公正检验中心有限公司，浙江 杭州 310009 ；2.浙江公正检验中心有限公司浙中分公司，浙江 义乌 322000；3.杭州娃哈哈集团有限公司，浙江 杭州 310009)摘 要：辣椒制品中的非食用色素工业染料经甲醇-水(7:3，V /V )超声振荡数次提取，高速离心，采用HPLC 系统用20mmol/L 醋酸铵溶液和甲醇梯度洗脱，采用二极管阵列检测器检测，用外标法峰面积定量。
结果显示：4种工业染料在0.25～20.0μg/mL 范围内的峰面积与质量浓度的线性关系良好，加标回收率为94.4%～101.9%。
该方法简便易行，准确可靠。
关键词：辣椒制品；碱性橙；碱性玫瑰精；高效液相色谱；二极管阵列检测器Determination of Basic Orange and Basic Rhodamine B in Cayenne Pepper by RP-HPLCYANG Lin 1，CHEN Qing-jun 1，LIANG Jing-jing 1，WANG Jing 1，DING Xian-rong 2，WU Ping 3(1. Zhejiang Gongzheng Testing Center Co. Ltd., Hangzhou 310009, China ；2. Zhejiang Gongzheng Testing Center Co. Ltd.,Zhezhong Filiale, Yiwu 322000, China ；3. Hangzhuo Wahaha Group Co. Ltd., Hangzhou 310009, China) Abstract ：An HPLC method for the determination of inedible basic colorants (basic orange and basic rhodamine) in cayenne pepper was established. Samples were extracted with methanol-water (7:3, V /V ) under ultrasonic assistance and the extract was centrifuged. The supernatant was then analyzed by HPLC-DAD with gradient elution (20 mmol/L ammonium acetate and methanol as mobile phase) and quanti fi ed by external standard method. The concentrations of four industrial dyes (basic orange 2, 21 and 22 and basic rhodamine) in the range of 0.25–20.0 μg/mL showed good linearity with peak area. Recovery rates of basic orange 2, 21 and 22 and basic rhodamine in a known sample were in the range of 94.4%–101.9%. The HPLC method was simple and accurate.Key words ：cayenne pepper ；basic orange ；basic rhodamine ；HPLC ；diode array detector (DAD)中图分类号：O657.7 文献标识码：A文章编号：1002-6630(2012)24-0303-04收稿日期：2011-08-15碱性橙是一种偶氮类碱性工业染料，俗名“王金黄”、“块黄”等，主要用于纺织品、皮革制品及木制品的染色[1]；碱性玫瑰精又称罗丹明B 或玫瑰红B ，主要用于纸张和化妆品着色，也用于制色淀和染蚕丝，这两种染料都已经被认定长期食用是可以使人致癌的物质[2]，都被列为食品禁用物质[3]。
低共熔溶剂萃取荧光法快速检测辣椒油中的罗丹明B
科技与创新┃Science and Technology&Innovation·32·2017年第21期文章编号：2095－6835（2017）21－0032－02低共熔溶剂萃取荧光法快速检测辣椒油中的罗丹明B林纯忠1，王韦达2，陈美婷2，刘慧强2，张清1，杜业刚2（1.深圳市龙华区动植物检验检测中心，广东深圳518131；2.深圳市计量质量检测研究院，广东深圳518100）摘要：罗丹明B是一种碱性工业染料，由于它对人体具有潜在的致癌毒性而被禁止添加在食品中。
然而，一些不法商贩用罗丹明B作为食品着色剂掺杂在辣椒油中。
利用由氯化胆碱和乙二醇（摩尔比为1∶3）合成的低共熔溶剂作为提取介质，酶标仪作为荧光信号检测器实现了辣椒油中罗丹明B的快速定性检测。
关键词：罗丹明B；低共熔溶剂；酶标仪；氧杂蒽染料中图分类号：R187文献标识码：A DOI：10.15913/ki.kjycx.2017.21.032罗丹明B又称碱性玫瑰精（分子结构如图1所示，pKa= 3.7），是一种人工合成的氧杂蒽染料，作为荧光试剂被广泛应用在金属离子识别，蛋白标记等领域，但由于它对人体存在潜在的致癌、致畸性，被欧洲食品安全局禁止应用于食品中。
然而，一些不法商家在利益的诱惑下将罗丹明B用作着色剂对辣椒油进行染色，以增加产品的色泽。
尽管食品中罗丹明B的检测方法已有众多的报道，例如高效液相色谱法、液相色谱串联质谱法、酶联免疫分析法等，但这些方法检测周期长，不适用于对大批量的辣椒油进行快速筛查。
因此，有必要建立一种可以对罗丹明B进行快速定性的检测方法。
近年来，低共熔溶剂作为一类新型绿色环保溶剂在分离技术领域引起了广泛的关注。
杨国武等人发现，由氯化胆碱和乙二醇按照摩尔比1∶3组成的低共熔溶剂（DES-1）可以从辣椒油中选择性萃取罗丹明B。
考虑到罗丹明B的荧光特性，我们产生了通过直接读取提取液荧光信号对罗丹明B进行定性检测的想法。
玫瑰花检验标准操作规程
原药材检验标准操作规程目的：建立一个中药饮片原药材检验标准操作程序，确保检验结果准确可靠。
适用范围：中药原药材。
责任人：质量保证部主任、质量控制部主任、化验员。
标准来源：《中华人民共和国药典》2010年版一部、《安徽省中药饮片炮制规范》。
内容：1、性状取本品适量，放入白瓷盘中，用眼观察，可见以下性状特征：本品略呈半球形或不规则团状，直径0.7～1.5cm。
残留花梗上被细柔毛，花托半球形，与花萼基部合生；萼片5，披针形，黄绿色或棕绿色，被有细柔毛；花瓣多皱缩，展平后宽卵形，呈覆瓦状排列，紫红色，有的黄棕色；雄蕊多数，黄褐色；花柱多数，柱头在花托口集成头状，略突出，短于雄蕊。
体轻，质脆。
气芳香浓郁，味微苦涩。
2、鉴别主要使用仪器：电子分析天平、电子显微镜、紫外光灯等。
2.1显微鉴别：2.1.1 试液配制2.1.1.1水合氯醛试液:取水合氯醛50克，加水15毫升与甘油10毫升使溶解,即得。
2.1.1.2 甘油醋酸试液：取甘油、50%醋酸及水各等份混匀，即得。
2.1.1.3 稀甘油：取甘油33毫升，加水稀释至100毫升，再加樟脑一小块或液化苯酚1滴，即得。
2.1.2 供试品制备2.1.2.1 取本品10g，研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水合氯醛搅拌均匀，置酒精灯上加热透化；加稀甘油数滴，搅拌均匀，分装2~3片，加盖玻片，即得。
2.1.2.2 取研细的粉末少量置载玻片上，加甘油醋酸试液，搅拌均匀，加盖玻片，即得。
2.1.2.3取研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水搅拌均匀，同时滴加少许稀甘油，加盖玻片，即得。
2.1.2.4横切面制备：取供试品欲观察部位，经软化处理后，用徒手切片法切成10~20μm的薄片，选取平整的薄片置载玻片上，滴加水合氯醛试液后，在酒精灯上加热透化，并滴加稀甘油，盖上盖玻片。
2.1.3 置显微镜下观察本品萼片表面观：非腺毛较密，单细胞，多弯曲，长136～680μm，壁厚，木化。
腺毛头部多细胞，扁球形，直径64～180ptm，柄部多细胞，多列性，长50～340μm，基部有时可见单细胞分枝。
【高三】高考生物第二轮模拟复习题及参考答案
【高三】高考生物第二轮模拟复习题及参考答案年新课标高三生物二轮复习：选修一专题模拟练习2一、1.稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。
下列相关叙述错误的是( )A．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B．需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理2.与普通洗衣粉相比，加酶洗衣粉的优点不包括A．容易去汗渍 B．容易去油污C．容易除去奶渍 D．可以重复使用3.某DNA分子共有a个碱基，其中含胞嘧啶m个，则该DNA分子利用PCR技术循环了3次，需要游离的胸腺嘧啶脱氧核苷酸数为（）A.7（a-m）B.8(a-m)C.7（1/2a-m）D.8（2a-m）4.关于DNA在NaCl溶液中的溶解度，下面的叙述哪一个是正确的（）A.随着NaCl溶液浓度增大，DNA在NaCl溶液中的溶解度也增大B.随着NaCl溶液浓度的减小，DNA在NaCl溶液中的溶解度也减小C.DNA在NaCl溶液中的溶解度与NaCl溶液的浓度无关D.当NaCl溶液的浓度为0.14M时，DNA的溶解度最低5.常作为菌种鉴定的依据的是A．鞭毛的有无 B．荚膜的有无 C．芽孢的形成能力 D．菌落的形态6.研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的，如将从大肠杆菌中得到的三酯磷酸酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与微生物降解相比，其作用需要适宜的( )①温度②酸碱度③水分④营养A．①②③ B．①②④C．②③④ D．①③④二、题7.有4瓶失去标签的无色透明液体。
已知各装有：大肠杆菌超标的自来水，丙种球蛋白溶液（一种抗体），溶解着DNA分子的2mol/L的NaCl溶液，葡萄糖溶液。
⑴请根据提供的第一步鉴定方法，简要写出用相应物质进行鉴定的其余步骤和结果。
第一步：各取4种液体少许分别倒入4个试管中，缓慢加入蒸馏水并用玻璃棒搅拌，则。
玫瑰花检验标准操作规程
原药材检验标准操作规程目的：建立一个中药饮片原药材检验标准操作程序，确保检验结果准确可靠。
适用范围：中药原药材。
责任人：质量保证部主任、质量控制部主任、化验员。
标准来源：《中华人民共和国药典》2010年版一部、《安徽省中药饮片炮制规范》。
内容：1、性状取本品适量，放入白瓷盘中，用眼观察，可见以下性状特征：本品略呈半球形或不规则团状，直径0.7～1.5cm。
残留花梗上被细柔毛，花托半球形，与花萼基部合生；萼片5，披针形，黄绿色或棕绿色，被有细柔毛；花瓣多皱缩，展平后宽卵形，呈覆瓦状排列，紫红色，有的黄棕色；雄蕊多数，黄褐色；花柱多数，柱头在花托口集成头状，略突出，短于雄蕊。
体轻，质脆。
气芳香浓郁，味微苦涩。
2、鉴别主要使用仪器：电子分析天平、电子显微镜、紫外光灯等。
2.1显微鉴别：2.1.1 试液配制2.1.1.1水合氯醛试液:取水合氯醛50克，加水15毫升与甘油10毫升使溶解,即得。
2.1.1.2 甘油醋酸试液：取甘油、50%醋酸及水各等份混匀，即得。
2.1.1.3 稀甘油：取甘油33毫升，加水稀释至100毫升，再加樟脑一小块或液化苯酚1滴，即得。
2.1.2 供试品制备2.1.2.1 取本品10g，研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水合氯醛搅拌均匀，置酒精灯上加热透化；加稀甘油数滴，搅拌均匀，分装2~3片，加盖玻片，即得。
2.1.2.2 取研细的粉末少量置载玻片上，加甘油醋酸试液，搅拌均匀，加盖玻片，即得。
2.1.2.3取研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水搅拌均匀，同时滴加少许稀甘油，加盖玻片，即得。
2.1.2.4横切面制备：取供试品欲观察部位，经软化处理后，用徒手切片法切成10~20μm的薄片，选取平整的薄片置载玻片上，滴加水合氯醛试液后，在酒精灯上加热透化，并滴加稀甘油，盖上盖玻片。
2.1.3 置显微镜下观察本品萼片表面观：非腺毛较密，单细胞，多弯曲，长136～680μm，壁厚，木化。
腺毛头部多细胞，扁球形，直径64～180ptm，柄部多细胞，多列性，长50～340μm，基部有时可见单细胞分枝。
90348-仪器分析-《现代化学实验与技术2》实验讲义(24课时)
《现代化学实验与技术2》实验讲义实验1 有机化合物紫外吸收光谱的测定和分析一、实验原理具有不饱和结构的有机化合物，如芳香族化合物，在紫外区(200～400 nm)有特征的吸收，为有机化合物的鉴定提供了有用的信息。
紫外吸收光谱定性的方法是比较未知物与已知纯样在相同条件下绘制的吸收光谱，或将绘制的未知物吸收光谱与标准谱图(如Sadtler紫外光谱图)相比较，若两光谱图的λmax和κmax相同，表明它们是同一有机化合物。
极性溶剂对有机物的紫外吸收光谱的吸收峰波长、强度及形状有一定的影响。
溶剂极性增加，使n→π*跃迁产生的吸收带蓝移，而π→π*跃迁产生的吸收带红移。
二、仪器与试剂1．仪器UV-2401型紫外一可见分光光度计，带盖石英吸收池2只(1cm)。
2．试剂(1)苯、乙醇、正己烷、氯仿、丁酮。
(2)异亚丙基丙酮分别用水、氯仿、正己烷配成浓度为0.4 g·L-1的溶液。
三、实验步骤1．苯的吸收光谱的测绘在1 cm的石英吸收池中，加人两滴苯，加盖，用手心温热吸收池底部片刻，在紫外分光光度计上，以空白石英吸收池为参比，从220～360 nm范围内进行波长扫描，绘制吸收光谱。
确定峰值波长。
2．溶剂性质对紫外吸收光谱的影响(1)在3支5 mL带塞比色管中，各加入0.02 mL，丁酮，分别用去离子水、乙醇、氯仿稀释至刻度，摇匀。
用1 cm石英吸收池，以各自的溶剂为参比，在220～350 nm波长范围内测绘各溶液的吸收光谱。
比较它们的λmax的变化，并加以解释。
(2)在3支10 mL带塞比色管中，分别加入0.20 mL异亚丙基丙酮，并分别用水、氯仿、正己烷稀释至刻度，摇匀。
用1 cm石英吸收池，以相应的溶剂为参比，测绘各溶液在200～350 nm范围内的吸收光谱，比较各吸收光谱λmax的变化，并加以解释。
四、注意事项1．石英吸收池每换一种溶液或溶剂必须清洗干净，并用被测溶液或参比液荡洗三次。
2．本实验所用试剂均应为光谱纯或经提纯处理。
不同品种玫瑰花挥发油化学成分的GCMS分析
不同品种玫瑰花挥发油化学成分的GC-MS分析李明1孟俊2孙永超3李逢菊4（1，3，4．山东省济南卫生学校，济南 250022；2．山东济南结核病防治院济南 250000）内容摘要：玫瑰花是蔷薇科植物玫瑰的干燥花蕾。
具有行气活血、开窍化瘀、疏肝醒脾的功效。
本文利用GC-MS法对山东产玫瑰花药材进行了挥发油成分分析，结果所含挥发油的成分各不相同，既有共性也有个性。
十个不同品种、不同加工方法的玫瑰花样品所含挥发油的共有成分是：芳樟醇、香茅醇、3－甲基己烷、4,5－二甲基辛烷、2－甲基庚烷、二十烷、二十一烷、二十三烷。
以期为玫瑰花质量标准的制定、规范化栽培和合理利用提供科学依据。
关键词：玫瑰花；GC-MS；化学成分玫瑰花为蔷薇科植物玫瑰Rosa rugosa Thunb的干燥花蕾[1]，其主要化学成分有挥发油、鞣质、脂肪油、氨基酸等[2][3]，具有行气解郁、和血止痛的功效。
玫瑰花在我国栽培历史久远，具有极高的观赏价值和食用价值[4]。
玫瑰精油是从玫瑰花中提取出的珍贵工业原料，被誉为液体黄金，是黄金价值的1.5倍，利用玫瑰精油加工制作的玫瑰精油软胶囊富含丰富的维生素E以及多种微量元素，而且能够防止皮肤老化、平扶肌肤细纹，调节肌肤的平衡，调节女性内分泌等功效。
我国利用玫瑰花开发出来十几种新药、特药、中成药及美容美颜等产品，颇受消费者青睐，销量剧增，价格居高不下[5]。
并有文献报道玫瑰花在抗菌消炎、治疗爱滋病方面有较好的疗效[6]。
玫瑰花主产于山东、安徽、浙江、内蒙古等地。
山东为主产地之一，主要栽培于平阴、定陶、单县等地。
2005版药典对玫瑰花的质量标准收载的较少，并且在不少地区发现其混淆品现象。
我们曾对山东玫瑰花的生产栽培情况进行了调查研究[7]，在此基础上，“山东玫瑰花的质量标准及方法研究”和“山东玫瑰花的生药学研究”课题组又利用GC-MS法对山东产不同品种、加工方法的玫瑰花药材进行了挥发油成分分析。
为制定玫瑰花质量标准以及玫瑰花的产业化生产提供可靠的理论依据。
玫瑰色素的纯化及成分初步鉴定
葡萄糖 ５５
糖 鼠李糖
６４
色素水解糖 ５４
图２ Ｉ物质的紫外光谱图
由 图 ２ 可 知 ， Ι物 质 在 甲 醇 中 有 ２６０ｎｍ和 ３４５ｎｍ （肩）两个吸收峰， 可推知为黄酮醇类物质。在移动试 剂甲醇钠中有２５７ｎｍ、３５５ｎｍ、４１０ｎｍ （肩）３个吸收峰， ３６０－ ３５７＝３ｎｍ， 吸 收 峰 有 所 降 低 ， 可 认 为 有 ３－ ＯＨ。 在醋酸钠试剂中， 有２７５ｎｍ、３５２ｎｍ、４１０ｎｍ （肩）３个 吸收峰， ３５２－ ３４５＝７ｎｍ， 可推知存在７－ ＯＨ。
２．３ 玫瑰色素结构的初步鉴定 ２．３．１ 玫瑰色素中花色苷单体结构的鉴定 ２．３．１．１ Ａ４４０／Ａｍａｘ比 值 以Ｊ．Ｆｒａｎｃｉｓ［３－４］法 研 究 并 求 得 各 组 分 的 Ａ４４０／Ａｍａｘ比 值 。 ２．３．１．２ 糖组成的鉴定 将分离后的花色苷组分， 溶 于以３ｍｏｌ／Ｌ盐酸， 在沸水浴中回流水解６ｈ， 得到褐色 溶液， 用正戊醇萃取， 至水层无色。将水层浓缩后， 用薄层层析法鉴定糖组成［５－６］。对照为葡萄糖、鼠李糖。 ２．３．２ 玫瑰色素中黄酮类色素的结构鉴定
３．Ｘｉｎｇｊｉａ ｎｇ Ｉｎｓ ｐｅ ｃｔｉｏｎ Ｉｎｓ ｔｉｔｕｔｅ ， Ｕｒｕｍｑｉ ８３１１０２）
Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｍａｉｎ ｓ ｅｐａｒａｔｅｓ ｒｏｓ ｅ ｐｉｇｍｅｎｔ ｂｙ ｐａｐｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ａｎｄ ｓ ｔｕｄｉｅｓ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｉｎ ｒｏｓ ｅ． Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅｓ ｕｌｔｓ ｓ ｈｏｗ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ａｒｅ ｆｌａｖｏｎｅｓ ａｎｄ ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｓ ｉｎ ｒｏｓ ｅ． Ｔｈｅ ｍａｊｏｒ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｉｓ ｆｌａｖｏｎｏｌｓ ａｎｄ ｃｙａｎｉｓ ｉｎ－ ３－ ｇｌｕｃｏｓ ｉｄｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： ｒｏｓ ｅ ｐｉｇｍｅｎｔ； ｆｌａｖｏｎｅｓ ； ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｓ