应用红外光谱研究生物大分子的结构
生物分子的红外光谱分析技术
生物分子的红外光谱分析技术生物分子是构成生物体内所有生命活动的分子基础，分析生物分子结构及组成对于生命科学的研究有着重要的意义。
在科学技术的不断发展中，红外光谱分析技术成为一种可靠的手段，其高精度、无需样品处理等特点，使其成为了生物分子分析领域的重要手段。
一、红外光谱分析技术的基本原理红外光谱是指红外辐射在物质中的反射、透射或能量损失时所产生的一种物质结构信息谱。
红外光谱分析技术就是通过红外光谱仪对样品进行测试，利用样品分子的振动与转动信号的敏感性，确定样品分子的结构、化学键以及它们的官能团组成等信息。
二、生物分子的红外光谱分析生物分子包括碳水化合物、脂类、蛋白质、核酸等大分子材料。
它们的分子结构多样，红外光谱分析技术应用于生物分子研究，主要针对以下几个方面：1. 碳水化合物红外光谱分析可测定化合物中的羟基、羰基、吡喃环等基团信息。
研究表明，甘露醇等简单糖类红外光谱的多个明显峰值可用于糖类之间的鉴别，为生物化学实验提供了一种无损检测的手段。
2. 脂类红外光谱可以检测脂（油脂、磷脂）中甲基、亚甲基、胆固醇等官能团的振动信息，对于鉴别不同类型、不同来源的脂类具有较高的可靠性。
3. 蛋白质蛋白质是生物分子中极其重要的一类物质，红外光谱可以帮助研究人员获得有关蛋白质水平的信息，以及有关蛋白质可能的构象和结构改变的信息，如蛋白质的螺旋结构和β折叠结构等。
4. 核酸红外光谱可研究核酸中磷酸根的振动，将各个成分区分开，同时可以检测到不同种类的氮碱基以及其环的振动。
三、红外光谱分析技术在生物学研究中的应用1. 研究蛋白质结构蛋白质的结构是决定其功能和性质的重要因素之一，红外光谱分析可以直接观察和研究具有天然结构和构象改变的蛋白质结构。
2. 鉴别蛋白质、核酸和多肽分子之间分子间相互作用的研究生物分子间具有丰富多样的相互作用。
红外光谱分析可用于研究蛋白质、核酸和多肽分子之间的相互作用，进一步理解蛋白质、核酸和多肽分子之间的交互作用机制。
光谱学在生物学中的应用
光谱学在生物学中的应用光谱学是一门研究物质对电磁辐射的吸收、散射和发射等光谱现象的科学，具有广泛的应用范围。
在生物学中，光谱学也得到了广泛的应用，特别是红外光谱、紫外光谱和荧光光谱等方面，为生物学的研究提供了很多有力的工具。
本文将从这三个方面介绍光谱学在生物学中的应用。
一、红外光谱在生物学中的应用红外光谱是分析物质的结构和组成的一种非常重要的手段，因为不同的化学键和化学官能团在红外光谱的吸收光谱带位于不同的波数区，从而可以通过对红外光谱的分析来确定物质的结构和组成。
在生物学中，红外光谱被广泛应用于分析生物大分子的结构和组成，如蛋白质、核酸、多糖等。
以蛋白质为例，由于它们中含有多种不同的氨基酸残基和化学键，因此蛋白质的红外光谱具有非常复杂的特征。
但是，通过与其他蛋白质的红外光谱进行对比，可以发现蛋白质的红外光谱具有一些普遍的特征，如亚胺I、亚胺II和α-螺旋结构等。
因此，通过对蛋白质红外光谱的分析，可以判断出蛋白质的结构和组成，从而进一步研究蛋白质的功能和生理机制。
二、紫外光谱在生物学中的应用紫外光谱是研究物质电子跃迁过程的一种手段，通常用于分析分子中的共轭体系和芳香环等。
在生物学中，紫外光谱主要用于分析生物大分子的结构和变性过程等。
以核酸为例，核酸的紫外光谱主要表现为由碱基吸收引起的特征峰，其中峰位在260nm处的是由于DNA链中的嘌呤和胸腺嘧啶残基吸收而产生的。
通过对DNA或RNA的紫外光谱进行分析，可以计算出它们的质量浓度和纯度等重要参数，从而保证了它们在分子生物学实验中的精确度和准确性。
另外，紫外光谱也可以用于研究蛋白质的变性过程。
当蛋白质发生变性时，由于蛋白质分子内部的强化学键和非共价相互作用被破坏，使得蛋白质分子变得更加不规则和无序，这会导致蛋白质的紫外光谱发生明显的变化。
因此，通过对蛋白质的紫外光谱进行监测，可以及时发现蛋白质变性的过程和情况。
三、荧光光谱在生物学中的应用荧光光谱是分析物质荧光特性的一种手段，具有高灵敏度和高选择性等优点。
红外吸收光谱的原理及应用
红外吸收光谱的原理及应用一、红外吸收光谱的原理红外吸收光谱（Infrared Absorption Spectroscopy）是一种常见的光谱分析技术，它利用物质分子对红外辐射的吸收特性进行分析和研究。
红外光谱的原理基于分子的振动和转动引起的能量变化。
在红外辐射的作用下，分子会吸收特定波长或频率的光，从而发生能级跃迁并产生吸收峰。
根据不同的吸收峰位置和强度，可以推断物质的结构、组成和化学环境等信息。
红外吸收光谱的原理主要包括以下几个方面： 1. 分子的振动和转动：分子在吸收红外辐射时，会发生振动和转动。
振动包括拉伸、弯曲和扭转等不同形式，每个分子都有特定的振动模式和频率，使其能够吸收不同波长的红外辐射。
2. 分子吸收特定波长的光：分子在特定波长范围内吸收红外辐射，产生吸收峰。
根据吸收峰的位置和强度，可以确定分子的化学键、官能团和分子结构等信息。
3. 光谱图的解读：通过测量物质对红外辐射的吸收情况，可以得到红外光谱图。
光谱图通常以波数为横轴，吸收峰强度为纵轴，常用峰位和峰形进行分析和判断。
二、红外吸收光谱的应用红外吸收光谱具有广泛的应用领域，主要包括以下几个方面：1. 化学分析红外光谱在化学分析中起着重要作用，可以用于鉴定和分析各种有机和无机化合物。
通过测量样品的红外光谱，可以获得化学键和官能团的信息，从而判断物质的结构和组成。
红外光谱被广泛应用于有机化学、药物分析、环境监测等领域。
2. 药物研发红外光谱在药物研发中具有重要的应用价值。
通过红外光谱分析药物的结构和成分，可以判断药物的稳定性、纯度和相态等性质。
红外光谱还可以用于药物的质量控制和检验，确保药物的安全有效。
3. 材料科学在材料科学领域，红外光谱可以用于材料的表征和分析。
不同材料的红外光谱具有独特的特征，可以用于识别和鉴别材料，评估材料的结构、质量和性能。
红外光谱被广泛应用于聚合物材料、无机材料、涂层材料等领域。
4. 生物医学研究红外光谱在生物医学研究中有着重要的应用。
生物大分子分析方法的研究与应用
生物大分子分析方法的研究与应用随着生命科学的不断发展，生物大分子分析方法成为了众多生命科学领域的研究热点。
生物大分子如蛋白质、核酸等是生命体系在结构、功能、调控等方面的关键分子，因此开发高灵敏度、高分辨率、高通量的分析方法成为了度量生物大分子的重要手段之一。
本文将介绍生物大分子分析方法的研究方向、原理及应用。
一、质谱技术质谱技术是一种分子质量分析技术。
其原理是将样品中的分子离子化，并在电场中将其加速和分离，再根据它们的质量-电荷比分离和检测。
近年来，高分辨液相色谱质谱（LC-MS）技术已成为生物大分子分析领域不可或缺的手段。
该技术可用于研究生物分子如蛋白质、小分子代谢产物及其翻译后修饰结构等方面。
其优点在于具有高分辨率、高灵敏度、高速度和非破坏性等特点，而且可以广泛地应用于蛋白质组学、代谢组学等研究领域。
二、核磁共振技术核磁共振技术是生物大分子分析和结构研究常用的技术之一。
核磁共振技术可以在分子内部的核磁共振信号来确定原子及其电子环的位置、化学键形式、键长和键角。
对于蛋白质、核酸等大分子结构的确定，核磁共振技术在蛋白质、核酸的结构解析及其相互作用分析中具有重要的作用。
但其技术复杂性高、数据处理困难以及分子量限度大是该技术普及的主要难点。
三、表面等离子体共振技术表面等离子体共振技术又称SPR，是利用金属薄膜表面的等离子增强效应，采用光学传感技术来研究生物大分子相互作用的方法。
SPR技术以高灵敏度且可定量和动态检测生物大分子相互作用为优势。
该技术逐渐在生命科学中广泛应用，应用于蛋白质相互作用、分子识别、药效学等领域。
四、电泳技术电泳技术是将带电分子在电场作用下运动和分离的技术。
电泳技术早期主要应用于核酸和蛋白质的分离和纯化。
随着对蛋白质组学研究和其在疾病中的功能和作用的认识不断深入，电泳技术又包括了二维凝胶电泳、毛细管电泳、同位素激光分析等技术。
其中，二维凝胶电泳是根据蛋白质分子的等电点和分子量在凝胶中进行聚焦和分离，其准确性可用于检测原位在疾病进程中的蛋白质表达差异。
红外光谱的概念原理和应用
红外光谱的概念原理和应用概念介绍红外光谱是一种用来研究物质结构和性质的重要手段。
它是利用物质分子固有振动、转动以及与辐射场相互作用而产生的红外吸收或散射现象进行分析的方法。
原理介绍红外光谱的原理基于物质分子的振动和转动。
当物质受到红外辐射时，物质分子将吸收部分红外光子的能量，使得分子内部的振动和转动状态发生变化。
这些能量变化表现为红外光谱上的吸收带或峰。
每种物质的红外光谱都是独特的，可以用来鉴定物质的成分和结构。
应用领域红外光谱在许多领域中得到广泛应用，包括：1.化学分析：红外光谱可以用于物质的定性和定量分析，如药物、化妆品、食品和环境样品的分析。
2.材料科学：红外光谱可以用于研究材料的组成和结构，如聚合物材料、无机材料和纳米材料等。
3.制药工业：红外光谱可以用于药物的质量控制和成分分析，以及药物的药代动力学研究。
4.环境监测：红外光谱可以用于分析环境样品中的污染物，如大气中的有机物和水中的有机溶解物。
5.生命科学：红外光谱可以用于生物大分子的结构分析，如蛋白质、核酸和多糖的红外光谱研究。
6.石油化工：红外光谱可以用于石油和石油化工产品的分析和质量控制。
红外光谱仪的类型红外光谱仪是进行红外光谱分析的关键仪器，常见的红外光谱仪包括：1.傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）：这种光谱仪利用傅里叶变换的原理将红外光谱信号转换为可见光信号，具有高分辨率和快速扫描的优点。
2.红外光谱仪（IR）：这种光谱仪利用红外辐射源和探测器对红外光谱信号进行检测，适用于常规的红外光谱分析。
3.偏振红外光谱仪：这种光谱仪利用偏振特性对红外光谱进行分析，可以提供更多样化的红外光谱信息。
红外光谱的优势和限制红外光谱具有以下优势：•非破坏性：红外光谱分析不需要对样品进行破坏性处理，可以保持样品的完整性。
•快速准确：红外光谱仪可以快速获取样品的光谱信息，有助于提高分析效率和准确性。
•高灵敏度：红外光谱可以检测到物质在低浓度下的存在，具有高灵敏度。
生物大分子的光谱学研究方法
生物大分子的光谱学研究方法生物大分子是构成生物体的基本单元，包括蛋白质、核酸、多糖等分子。
这些大分子的结构和功能对于生命的存在和维持至关重要。
光谱学是研究物质光学性质的科学，可以为生物大分子的表征和研究提供重要的手段。
本文将介绍几种常用的生物大分子光谱学研究方法。
一、红外光谱红外光谱是一种常见的分析生物大分子结构的方法。
生物大分子中的结构基团会吸收红外光谱区域的特定波长，从而形成独特的红外光谱图。
通过分析红外光谱图，可以确定生物大分子的结构信息，如蛋白质中的氨基酸成分、核酸中的碱基种类等。
红外光谱也可以被用于表征生物大分子的二级结构。
生物大分子的二级结构包括α-螺旋、β-折叠、无规卷曲等，不同的二级结构有不同的红外光谱特征。
通过红外光谱分析，可以确定生物大分子在不同条件下的二级结构变化，从而了解其结构和功能的相关信息。
二、紫外光谱紫外光谱是研究生物大分子的一种常见方法。
生物大分子中的芳香族氨基酸（如色氨酸、酪氨酸等）吸收的紫外光谱区域波长较短，而非芳香族氨基酸（如甘氨酸、丙氨酸等）的吸收波长较长。
通过监测生物大分子在紫外光谱下的吸收，可以确定其中芳香族氨基酸的含量和位置信息。
除此之外，紫外光谱还可以被用于研究生物大分子的构象变化。
生物大分子的构象变化如热变性、酸碱变化等，或许会表现为紫外光谱上的峰位和峰形的变化。
通过分析这些变化，可以了解生物大分子的构象变化信息。
三、荧光光谱荧光光谱是研究生物大分子结构和功能的常用方法，因为许多生物大分子在荧光标记后可以发生强烈的荧光信号。
荧光信号的产生机制复杂，可能与分子内的生物分子结构、空间排列和分子间相互作用等方面有关。
通过荧光光谱研究，可以探查蛋白质、核酸、脂肪酸等生物大分子的结构和功能。
例如，通过荧光标记和荧光光谱分析，可以了解特定蛋白质和核酸的折叠和解折叠过程、介导信号传递的分子机制等。
四、拉曼光谱拉曼光谱是近年来广泛用于生物大分子研究的一种光谱学方法。
红外线分析与生物大分子结构的解析
红外线分析与生物大分子结构的解析红外线(FTIR)技术是一种分析生物大分子结构的有力工具。
它可以对样品中的分子振动信息进行分析，帮助揭示其化学组成、结构和功能。
本文探讨红外线分析技术在生物大分子结构解析中的应用，介绍其原理、实验操作及应用案例。
一、红外线分析原理在红外线分析中，光学仪器通过检测样品中分子间的振动运动产生的振动光谱图，以获得有关分子的结构和化学组成信息。
在光谱图中，不同的振动成分对应着不同的峰，这些峰的位置、强度和宽度直接反映出样品中分子的组成和构造。
具体来说，红外线分析基于分子中化学键的振动诱导红外线的吸收和散射，这种吸收和散射与其振动状态及化学结构有关。
对于生物大分子而言，主要检测的是它们中化学键的振动。
这些振动可以按照其所属化学键类型分为不同的区域，如C-H、N-H、C=O、N-H等。
二、红外线分析实验操作红外线分析需要使用一种特殊的仪器，称为红外光谱仪。
实验时，需要将样品置于样品室中，并通过仪器探测样品发出的红外辐射信号。
红外辐射的强度和波长变化可以被光谱仪直接感知并记录下来。
与其他生化方法相比，红外线分析具有操作简便、分析速度快、结果准确等优点。
同时，其在样品制备上的要求也较低，只需要对准备的样品进行干燥和压片处理即可。
在实际实验操作中，为了获得更精确的红外线光谱，需要对样品进行一些处理。
比如，对于多孔材料，需要将其进行研磨或压片使之变得更加均匀，以获得更有代表性的光谱信息。
三、红外线分析在生物大分子结构解析中的应用由于红外线分析具有操作简便、速度快、结果准确等优点，因此在生物科学研究、新药开发和临床医学应用中得到了广泛应用。
下面是其应用案例：1. 蛋白质结构研究在蛋白质结构研究中，红外线分析可以对蛋白质中的氨基酸序列、二级结构和三级结构进行分析。
举个例子，红外线分析可以帮助测定蛋白质中α-螺旋、β-折叠等不同二级结构成分的比例。
同时，它还可以用于检测蛋白质的变性或折叠状态，为相关疾病的研究提供帮助。
红外光谱技术在化学分析中的应用
红外光谱技术在化学分析中的应用红外光谱技术作为一种常用的化学分析工具，在科学研究和工业生产中得到广泛应用。
它能够通过检测物质中的化学键振动和分子的转动来辨识和鉴定样品的化学成分，具有快速、准确和非破坏性的特点。
本文将介绍红外光谱技术在化学分析中的应用。
首先，红外光谱技术在有机化学领域具有重要地位。
有机化合物通常由碳、氢、氧、氮等元素组成，并且含有各种各样的官能团。
红外光谱仪可以通过监测不同官能团的振动，来识别和定量有机化合物。
例如，醛酮化合物的C=O伸缩振动通常出现在1710-1760 cm^-1范围内，而羧酸的C=O伸缩振动则在1700-1740 cm^-1范围内。
这些特征性吸收峰可以帮助化学家确定未知样品的化学结构和组成，进而推断其性质和用途。
其次，红外光谱技术在材料科学中也有广泛应用。
材料科学研究主要关注材料的组成、结构和性能之间的关系。
通过红外光谱技术，可以对材料中的化学键进行表征，了解材料结构和成分的变化。
例如，红外光谱可以用于研究聚合物材料中的有机官能团，如酯、醚等。
聚合物的分子结构和官能团的存在与否，对材料的性能和应用有重要影响。
红外光谱还可以用于分析无机材料，如金属氧化物、矿物和陶瓷材料等。
通过对这些材料的红外光谱进行分析，可以研究其晶体结构、配位环境和表面性质等，为材料设计和开发提供指导。
另外，红外光谱技术在生物医学研究中也发挥着重要作用。
生物体内的分子和化合物具有丰富的红外光谱信息，通过对生物样品的红外光谱分析，可以研究生物大分子的结构和功能，并且可以用于诊断和疾病监测。
例如，红外光谱可以用于研究蛋白质结构和构象的变化，揭示其生物活性和功能机制。
此外，红外光谱还可以用于检测和鉴定生物体内的代谢产物，为疾病诊断提供参考依据。
例如，通过红外光谱可以鉴定尿液中的各种代谢产物，帮助医生诊断尿液中的疾病，如尿路感染和肾脏疾病等。
总之，红外光谱技术在化学分析中具有广泛的应用前景。
它在有机化学、材料科学和生物医学研究中发挥着重要作用，可以用于鉴定化学物质的结构和成分，研究材料的性质和功能，以及诊断生物样品中的疾病。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
应用红外光谱研究生物大分子的结构谢孟峡刘媛北京师范大学分析测试中心，北京100875，xiemx@一、蛋白质二级结构的测定蛋白质的空间结构主要有四级，其结构层次示意图见图1。
稳定蛋白质三维结构的主要作用力有五种，分别是盐键、氢键、疏水作用、范德华力和二硫键。
这些都是共价键相互作用，其中对于二级结构，最重要的作用力是蛋白质分子中的氢键。
图1 蛋白质结构层次示意图其中：Q为四级结构，T/α为由结构域组成的三级结构或亚基，D/T为结构域或三级结构，sS为超二级结构，S为二级结构，A为组成一级结构的氨基酸在所有已测定的蛋白质中，都有广泛的二级结构存在。
蛋白质的二级结构形式主要包括α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲四种。
这些二级结构中将螺旋看成蛋白质复杂构像的基础，β－折叠是蛋白质中又一种普遍存在的规则构像单元。
无论是α－螺旋还是β－折叠都存在着许多氢键，致使规则的二级结构都具有相当的刚性，如果一段肽链中没有氢键或其他相互作用，那么各个残基之间就有更大的自由度，转角就是典型的介于此两种情况之间的一种二级结构，是一种部分规则的构像（见图2）。
此外还有一些肽段相对于前面的三种二级结构是无规则，它们有更大的任意性，可是这些肽段的构像又不是完全任意的，因为每种蛋白质肽链中存在的这一类型空间构像几乎是相同的，所以蛋白质中无规卷曲也是具有其特定构像的。
α－螺旋平行和反平行β－折叠β－转角图2、蛋白质典型二级结构示意图蛋白质二级结构特征与氢键的形成方式紧密相关，无论α-螺旋、β-折叠、β-转角或其它构象，都有其特定的氢键结构，而这种氢键结构的差异能够在对于氢键敏感的红外光谱中得到反映，主要表现为谱带峰位及半峰宽的变化。
这使我们有可能利用峰位不同的谱带来识别不同的二级结构及其组成情况。
图3 人血清白蛋白（HSA）在重水中的红外吸收谱在蛋白质的红外光谱中，无论是酰氨I带还是酰氨III带，都由代表了不同二级结构的谱峰重叠而成。
可以通过曲线拟合将重叠在一起的谱峰分开。
曲线拟合的一般步骤是，首先对得到的蛋白质相应的谱带进行基线校正，然后采用二阶导数和傅立叶去卷积确定了子峰数目和各子峰位置，通过调整各子峰的高度及半峰宽得到满意的曲线拟合谱图，最后根据拟合谱峰的峰面积定量计算不同二级结构的含量。
对于各子峰的归属我们也已经做了较多的研究【】。
酰氨I带中，α-螺旋：1652 cm-1 (H2O); 1650 cm-1 (D2O); 1656 cm-1 , 1658 cm-1 ；非标准α-螺旋（310－Helix）：1660 cm-1；β-折叠：1635 cm-1，1625 cm-1，1620 cm-1 ；反平行β-折叠：1693 cm-1 (H2O); 1675 cm-1 (D2O); 但1675 cm-1 的强度只有低波数的1/10.β-转角：1660 cm-1 ～1700 cm-1无规结构：1657 cm-1 (H2O); 1643 cm-1 (D2O)。
酰氨III带中，α-螺旋：1330~1290 cm-1；β-折叠：1250~1220 cm-1；β-转角：1295~1265 cm-1；无规结构：1270～1245 cm-1；【高等学校化学学报2003】图4 蛋白质酰氨I带合酰氨III带拟合结果目前蛋白质的两个谱带分析其二级结构都有一点的局限性，如酰氨I带虽然谱峰归属比较成熟，但是受水汽干扰很严重；而酰氨III带虽然不受水汽干扰，而且不同二级结构在这里的吸收更加特征，但是由于其信号较弱一直以来也没有得到广泛的应用。
我们首先提出了将酰氨I带和III带结合起来定量分析蛋白质二级结构的相对含量的方法，该方法可以扬长避短，更加准确的分析蛋白质二级结构。
二、药物与蛋白质相互作用的研究药物在人体内的分布是由蛋白质控制的，它们由人血清白蛋白储存、携带到达目标组织。
药物与蛋白质相互作用强度可以用来对药物进行筛选。
因此研究药物与蛋白作用机理具有十分重要的意义，可以对药物分子的设计提供理论依据。
多酚类药物主要包括脂肪多酚有机化合物、多酚苯乙烯酸系列化合物、多酚苯甲酸系列化合物、单宁酸和黄酮类药物。
多酚有机酸包括脂肪酸和芳香酸，其中芳香酸有可大致分为苯乙烯酸系列和苯甲酸系列。
目前研究药物与蛋白质相互作用的方法主要有荧光光谱、紫外光谱、平衡透析法以及红外和拉曼光谱法等等。
利用红外光谱法可以分析蛋白与药物作用前后二级结构的变化。
利用差谱技术观察药物与蛋白质作用前后红外光谱的变化，推测药物与蛋白质作用的主要基团，蛋白质中氨基酸残基侧链吸收峰的信息，如Tyr, 1515cm-1，His, 1105 cm-1等。
同时可以结合其它方法对结合机理、结合部位进行推测。
以人血清白蛋白（HSA）和苯乙烯酸系列有机酸的相互作用为例，通过红外光谱分析计算可得到蛋白质与药物作用前后二级结构的变化。
结果见表1。
其中CI为肉桂酸；CO为香豆酸；CA为咖啡酸。
表1 HAS与苯乙烯酸系列有机酸作用后二级结构的变化HAS与氯原酸（CLA）和阿魏酸（FA）相互作用后α-螺旋分别减少7％和5％；β-转角分别增加约4％和3％；无规结构约增加3％。
结合荧光光谱测得二者与HAS的结合位点数均为1，结合强度分别为氯原酸4.37 ⅹ104∙M-1，阿魏酸2.23 ⅹ104∙M-1。
蛋白质与药物作用前后其酰氨I带和III带的拟合谱图见图5图5 HAS与药物作用前后酰氨I带和III带谱图拟合结果人血清白蛋白与另外三个不同结构有机酸，芥子酸（SA）、没食子酸（GA）和莽草酸（SI），相互作用研究后发现，HSA与实验中最大浓度的芥子酸作用后α-螺旋和β-折叠分别减少了6.2%和2.0%，β-转角和无规结构分别增加了5.0%和3.2%；芥子酸在HSA上有两个结合位点，表观结合强度分别为2.5×103 L∙Mol-1和4.9×108 L∙Mol-1。
与没食子酸作用后α-螺旋和β-折叠分别减少了5.2%和1.5%，β-转角和无规结构分别增加了5.4%和1.3%；一个结合位点，K A 为1.1×104 L∙Mol-1。
这三种有机酸的结构见图6。
图6 a芥子酸，b没食子酸，c 莽草酸水解单宁酸（PGG）与蛋白质的相互作用同样可以应用红外光谱进行研究，结合酰氨I带和III带结果发现，与药物作用后蛋白质结构变得松散。
与PGG作用后，蛋白质的α-螺旋结构降低了约8％，β-转角和无规结构分别增加了约6％和4％，数据结果见表2。
荧光结果显示随着PGG浓度的增加，它在HSA上有两个个结合位点。
表观结合强度分别为1.66×104L∙mol-1和8.98×108L∙mol-1。
人血清白蛋白（HSA）分子是一个含有585个氨基酸残基的单链多肽链，形成9个回折，其间以二硫键相连。
通常可以将HAS分子划分为三个结构域（I、II、III），每个域又包含两个子域（IA、IB、IIA……）。
HAS分子中有两个主要的活性位点，site I位于IIA子域，主要可以和电荷位于分子中央的较大的杂环阴离子结合；site II位于IIIA子域，主要可以结合负电荷位于一端的长链脂肪羧酸。
上文中谈到的几种有机酸结合位置研究发现，CI、CO、CA、FA和GA在HAS上只有一个结合位点，它可能结合在site I的IIA亚域，而CLA结合在IIIA亚域。
SA和PGG低浓度时在HAS上有一个结合位点，但是在高浓度时出现了第二个结合位点。
应该分别结合在IIA和IIIA亚域。
第一个位点的结合使蛋白质结构发生了变化，激活了第二个结合位点。
表2 与水解单宁酸作用前后HAS的二级结构变化C PGG/C HSA Amide α-helix (%) β-sheet (%) β-turn (%) Coil (%)I 54.3±0.423.1±0.416.4±0.3 6.3±0.1 III 54.1±0.323.5±0.316.2±0.1 6.2±0.20.01I 54.1±0.223.2±0.216.1±0.1 6.5±0.1 III 53.4±0.2 23.5±0.216.5±0.2 6.6±0.30.1I 51.1±0.122.5±0.317.9±0.28.4±0.3 III 50.7±0.522.8±0.118.3±0.48.2±0.11I 45.8±0.421.7±0.422.3±0.410.2±0.3 III 46.4±0.321.5±0.221.5±0.210.6±0.42I 45.5±0.223.0±0.219.8±0.311.6±0.2 III 45.6±0.322.0±0.320.8±0.211.7±0.33I 45.0±0.522.9±0.120.2±0.311.9±0.2 III 45.4±0.322.7±0.420.4±0.211.4±0.1苯乙烯酸、苯甲酸和单宁酸等与蛋白质都有特征性的结合，而莽草酸基本上不与蛋白质结合。
莽草酸分子不具有芳香性，其它几种药物都具有芳香性。
从药物结构分析药物与蛋白的结合机理，可知－COO-1，苯环、酚羟基在结合过程中起到了重要作用。
人血清白蛋白分子中的活性位点Site I 和Site II 结合腔的内壁主要由疏水性氨基酸残基组成，而腔的入口处是带正电荷的碱性氨基酸。
药物分子中的－COO－与腔口带正电荷的碱性氨基酸Arg257、Arg222、Lys199、His242、Arg218和Lys195发生静电吸引，靠近结合腔。
苯环与腔中的疏水性残基，如Leu219、Phe223、Leu234、Leu238、Leu260、Ala261等发生疏水性相互作用。
酚羟基与腔体中的Trp214、Glu292、Phe 211等氢键给予体形成氢键。
酚羟基与主肽链的C=O、N-H等基团之间形成氢键，破坏了主链原有的氢键网络，使蛋白质的二级结构发生变化。
主要体现在α-螺旋结构的降低，转角结构增加，使蛋白质的亲水性增加，荧光发射峰红移。
PGG与HSA间的强相互作用也是由其分子结构决定的（其分子结构见图7）。
PGG分子体积大酚羟数多，非常有利于药物分子和蛋白质之间的结合，特别是多个酚羟基与蛋白质主链及侧链氨基酸之间的氢键作用，使PGG可以牢固的结合在蛋白质上，同时也使维持蛋白质空间结构的力体系发生了改变，导致其结构发生较大变化。