现代测试技术论文

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现代测试技术论文(2)

现代测试技术论文(2)

现代测试技术论文(2)现代测试技术论文篇二现代测试技术在珠宝鉴定中的应用摘要:珠宝作为一种特殊商品,本身的成分和真伪很难由消费者识别,再加上现代珠宝合成技术的突飞猛进的发展,更加导致了传统的珠宝鉴定方式的滞后以及不适用性。

因此,采用现代测试技术对珠宝进行科学、准确的坚定,以此来规范珠宝市场,维护消费者的合法权益,对于提高珠宝行业的信誉和形象,促进珠宝市场的健康可持续发展具有举足轻重的意义。

本文在阐述现代测试技术在珠宝鉴定中的重要性的基础上,进一步分析了红外光谱技术、紫外线光谱技术、可见光谱技术、荧光光谱技术和拉曼光谱技术在珠宝鉴定中的应用。

关键词:现代测试技术珠宝鉴定重要性应用引言随着人民生活水平的提高,消费模式也发生了巨大的变化。

物质消费在总消费中所占的比重越来越小,而精神消费和奢侈品消费所占的比重越来越大。

新的消费需求和消费趋势带动了奢侈品行业的迅速发展,珠宝行业在其中也受益匪浅。

面对珠宝行业这个巨大的商机,珠宝学者越来越将研究的重点放在珠宝鉴定的科学性、无损性和快捷性方面上,而珠宝商为了购入符合其要求的珠宝,也陆陆续续加入了珠宝鉴定的学习行列之中。

如何更加行之有效的进行珠宝鉴定,这是珠宝行业共同面临和需要探讨的话题。

一、现代测试技术实施的重要性随着计算机技术和软件技术革命的到来,电子测量仪器领域发生了翻天覆地的变化。

珠宝鉴定作为技术要求较高的工作,鉴定的手段仅仅靠折光仪和显微镜等传统技术手段不能获得充分的满足,转而求助于现代测试技术。

现代测试技术更加具有高、精、尖等特点,它相对于以往的折射仪和显微镜等传统的珠宝鉴定手段(参照表1),不仅能对诸如珍珠、翡翠、玛瑙和宝石等珠宝的光学性质测定出来,而且能对其他的物理性质很好的辨别出来。

而且现代测试技术的鉴定效率高、准确性高、可靠性强。

利用现代测试技术,可以对合成的人造珠宝玉石与天然形成的珠宝玉石进行准确区分,可以有效区分真正的宝石和假冒宝石,二者在内部的结构和成分构成等方面都截然不同。

现代测试技术论文 -

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现代测试技术论文 -X-射线单晶衍射法的原理及在测试技术中的应用-土木工程学院材料一班 080330110袁野摘要:X-射线衍射法的原理、优点及其在现代分析测试技术中的应用和重要意义。

关键词:XRD 布拉格方程物相分析点阵常数X射线衍射分析(X-ray diffraction,简称XRD),是利用晶体形成的X射线衍射,对物质进行内部原子在空间分布状况的结构分析方法。

将具有一定波长的X射线照射到结晶性物质上时,X射线因在结晶内遇到规则排列的原子或离子而发生散射,散射的X射线在某些方向上相位得到加强,从而显示与结晶结构相对应的特有的衍射现象。

X射线衍射方法具有不损伤样品、无污染、快捷、测量精度高、能得到有关晶体完整性的大量信息等优点。

1912年劳埃等人根据理论预见,并用实验证实了X射线与晶体相遇时能发生衍射现象,证明了X射线具有电磁波的性质,成为X射线衍射学的第一个里程碑。

当一束单色X射线入射到晶体时,由于晶体是由原子规则排列成的晶胞组成,这些规则排列的原子间距离与入射X射线波长有相同数量级,故由不同原子散射的X射线相互干涉,在某些特殊方向上产生强X射线衍射,衍射线在空间分布的方位和强度,与晶体结构密切相关。

这就是X射线衍射的基本原理。

衍射线空间方位与晶体结构的关系可用布拉格方程表示:2dsinθ=nλ式中:λ是X射线的波长;θ是衍射角;d是结晶面间隔;n是整数。

波长λ可用已知的X射线衍射角测定,进而求得面间隔,即结晶内原子或离子的规则排列状态。

将求出的衍射X射线强度和面间隔与已知的表对照,即可确定试样结晶的物质结构,此即定性分析。

从衍射X射线强度的比较,可进行定量分析。

X射线分析的新发展,X射线分析由于设备和技术的普及已逐步变成晶体研究和材料测试的常规方法。

例如在如下领域,X射线都有着及其广泛的应用。

物相分析:晶体的X射线衍射图像实质上是晶体微观结构的一种精细复杂的变换,每种晶体的结构与其X射线衍射图之间都有着一一对应的关系,其特征X射线衍射图谱不会因为它种物质混聚在一起而产生变化,这就是X射线衍射物相分析方法的依据。

现代分析测试技术论文解析

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西安科技大学研究生考试试卷学号______ ________研究生姓名______ ________班级______ ________考试科目______ ________考试日期________ ______课程学时_______ _______开(闭)卷________ ______现代分析测试技术在煤热解催化剂制备中的应用摘要:现代分析测试技术在化工生产的研究中占据着重要的地位,本文主要讨论X射线荧光分析(XRF)、X射线衍射分析(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)在制备煤热解催化剂中的应用。

关键词:XRF、XRD、SEM、煤热解催化剂、应用Abstract: the modern analysis determination technique in the study of chemical production occupies the important position, this article focuses on the application of X-ray fluorescence analysis (XRF), X-ray diffraction analysis (XRD) and scanning electron microscope (SEM) in the preparation of the coal pyrolysis catalyst.Key words:XRF, XRD, SEM, the coal pyrolysis catalyst, application1、引言现代分析测试技术是化学、物理等多种学科交叉发展、前沿性应用以及合而为一的综合性科学研究手段,主要研究物质组成、状态和结构,也是其它学科获取相关化学信息的科学研究手段与途径,因此想要获得准确有效的实验数据就必须能够正确的运用各种分析测试手段,对化工类学生更是如此。

本次论文主要对煤热解催化剂制备过程中用到的分析测试技术手段进行论述。

现代电子测量技术论文

现代电子测量技术论文

现代电子测量技术论文新形势下,随着现代化科技的蓬勃发展,电子测量技术在实际生活中的发展及应用越来越受到人们的广泛关注和重视。

下面是精心推荐的现代电子测量技术论文,希望你能有所感触!【摘要】随着科技的日新月异,世界进入了信息爆炸时代,层出不穷的新设备新技术诞生,逐渐改变着人们的生活方式。

新的技术逐渐替代旧的技术,其中之一,便是电子测量技术。

【关键词】电子测量,发展,走向前言科技改变生活,随着改革开放的成功,我国人民的生活水平不断提高,越来越多的新技术新设备应用于我们的日常生活中,电子测量技术作为一种新兴技术,越来越广泛的应用到了我们的生活中,它的出现,能够精确测量许多之前很难检测的数据,为我们的各种工作,提供了安全保障,方便人民工作,现在,就让我们一同来认识一下电子测量技术的发展。

1电子测量技术发展随着电子测量技术的发展和成熟,电子测量技术慢慢从一种理念技术,逐渐走入生产实际中,在人类的生产生活中,具有越来越重要的地位和作用,它广泛应用于测量电能量、信号特性及其所受干扰、元件及电路参数等电学专业的测量。

这是一门新兴产业,具有高知识密集性、高技术性的特质。

无论是国内还是国际,都具有广泛的市场,特别是随着市场的不断成熟,电子测量技术可挖掘的空间将会越来越多。

电子测量技术并非是一项独立的科技,它包括了很多领域,比如微电子技术,光学,计算机技术等。

电子测量技术是一门综合性学科,随着各种技术的成熟和发展,它的通用性和可实际操作性越来越得到广大公司和用户的认可,数据的可信度越来越高。

随着材料,仪器等的不断提升,随着新的测试理论、测试方法、测试领域以及新的仪器结构不断涌现,在电子、电力、航空、航天、能源、交通、广播、电视、通信及其信息系统、微电子及电子元器件测试等方面已冲破了传统仪器的概念。

2电子测量技术的走向2.1电子测量技术的优势相对于传统的测量技术来说,随着电子测量技术的成熟与发展,它的优势是毋庸置疑的。

现代测试技术论文

现代测试技术论文

现代测试技术论文通信测试技术论文篇一现代光通信及测试技术发展动态摘要:光通信技术不仅波长比较短而且抗干扰能力强,是未来电信通信发展的主要方向。

本文简要的介绍了光通信技术的概念以及主要的分类,并叙述了它的发展史,并从光纤技术的发展、波分复用系统的发展两方面讲述了光通信及测试技术的发展动态。

关键字:光通信技术;概念;发展;光纤技术进入90年代,光通信开始大规模应用,从而引发了通信史上划时代的变革。

今天,光通信技术已经成熟,光纤通信更是各种通信网的主要传输方式,光纤通信在信息高速公路的建设中扮演着至关重要的角色,我国也逐渐将光纤通信放在了国家发展的战略地位。

现在越来越多的光缆铺设到了世界大陆、海底,从而使得全球通信变得非常简单快捷,不少地区甚至把光缆铺设到住宅,实现了光纤到办公室(FTTO)、光纤到家庭(FTTH)。

光纤通信技术之所以发展这样迅速,除了人们日益增长的信息传输和交换需要外,主要是由光纤通信本身所具有的优点决定的。

在最近几十年中光通信技术的主要成就在于传输量的逐年增长,而技术方面的进步主要表现在光器件、光协议网络等方面。

文中主要讲述了光通信技术在近几十年的发展和进步,以及光通信及测试技术在未来的发展前景。

一、光通信测试技术发展特征光通信是近几十年才发展起来的一种新型通信方式,而它的传输媒介是光波。

通信行业中无线电波通信的历史比较悠久,而光波和无线电波都属于电磁波,但相较于无线电波,光波有更多适合作为通信媒介的特性。

与无线电波相比,光波具有更高的频率和更短的波长,因此它的传输频带比无线电波要宽,而且通信容量大于无线电波,抗干扰能力也比无线电波要好。

随着通信测试领域技术的进步,通信设备的技术进步和发展也越来越快,传统意义上测试也发生了变化。

在模拟通信时代,可观测量一般都有确定的量值,人们在研究测试的过程中都需要去研究测量量值的准确度。

随着数字通信和数据通信的发展,现代通信领域的测量主要是通信软件的测试,这是一个全新的测试领域,它已经不存在什么准确度的问题,仅仅是一个对错与否的问题,即通信协议的一致性测试。

生活中的测试技术论文

生活中的测试技术论文

生活中的测试技术论文测试技术是人们借助于一定的装置,获取被测对象有相关信息的过程。

下面是小编为大家精心推荐的生活中的测试技术论文,希望能够对您有所帮助。

生活中的测试技术论文篇一浅谈游戏测试技术[摘要]近年来,游戏产业发展迅猛,游戏测试已成为游戏产品、游戏软件、游戏程序设计与开发不可或缺的环节。

主要介绍游戏测试的特点、游戏测试技术及游戏测试技巧等。

[关键词]游戏测试黑盒测试白盒测试中图分类号:TP3文献标识码:A文章编号:1671-7597(2009)1120042-01一、游戏测试技术简介随着计算机的普及和嵌入手机等移动设备的软件开发技术的发展,游戏成了最新的弄潮儿。

并且随着玩家的品位的升高和对游戏稳定性、可玩性要求的升高,游戏测试开始成为大家关注的话题。

(一)游戏测试与软件测试的区别[1]游戏测试作为软件测试的一种特殊类型,除了具备软件测试基本特性,还具有它自身的一些特性:1.游戏情节的测试,主要指游戏世界中的任务系统的组成;2.游戏世界的平衡测试,主要表现在经济平衡,能力平衡(包含技能,属性等等),保证游戏世界竞争公平;3.游戏文化的测试,比如整个游戏世界的风格,是中国文化主导,还是日韩风格等等,大到游戏整体,小到NPC(游戏世界人物)对话,比如一个书生,他的对话就必须斯文,不可以用江湖语言等。

(二)游戏测试的重要性[2]游戏质量的好坏直接关系到开发商利润的高低,因此他们在游戏发行之前要求游戏必须满足一定的质量标准,而质量必须靠测试来保障,由于测试不到位而导致较大损失的例子比比皆是。

例如1994年秋天,迪斯尼公司发行了他们的第一部多媒体儿童游戏《狮子王》,然而同年12月26日,迪斯尼就接到大量因软件不能使用而投诉的电话。

事件发生的缘由就在于没有将软件在当时市场上众多的计算机模型上进行广范围的测试,而只是在迪斯尼程序员的少数几个系统上运行。

二、游戏测试技术游戏测试是游戏软件开发中的一个极为重要的组成部分,其所需要的时间一般要占去整个开发周期的1/3左右,测试贯穿于整个开发进程。

现代检测论文正文

现代检测论文正文

现代检测技术及应用和学习心得摘要:本文介绍了现代检测技术,现代检测技术的组成,各个组成部分的定义及特点,还介绍了现代检测技术的应用,最后介绍了我通过这门课的学习的学习心得及对现代检测技术的总结。

关键词:现代检测技术软测量虚拟仪器多传感器信息融合技术智能传感器现代检测应用现代检测的学习心得通过这学期的现代检测理论及技术的学习,让我对现代检测理论及技术有了一个全新的认识和理解。

检测最基本的作用是延伸、扩展、补充或代替人的视觉、听觉、触觉等器官的功能。

检测技术服务的领域非常广泛,在现代化工业生产过程、国防军事、环境保护等方面都有极大的应用。

可以说只要是自动化的就有检测技术。

检测技术是自动化和信息化的基础与前提。

而且我对现代检测技术充满兴趣并坚信现代检测技术的发展空间是重要性更大。

一、现代检测技术自动化技术的高速发展,仪器及检测技术已成为促进当代生产的主流环节,同时也是生产过程自动化和经营管理现代化的基础,没有性能好、精度高、质量可靠的仪器测试到各种有关的信息,要实现高水平的自动化就是一句空话。

随着自动化程度要求的不断提高,测试技的作用越来越明显。

可以说,自动化的提高很大作用取决于现代测试技术的提高。

科学技术的发展历史表明,许多新的发现和突破都是以测试为基础的。

同时,其他领域科学技术的发展和进步又为现代检测技术试提供了新的方法和装备,促进了现代检测技术的发展。

现代检测技术包括智能传感器、虚拟仪器、多传感器信息融合技术、软测量技术。

1.1 智能传感器一种带有微处理器的,兼有信息检测、信号处理、信息记忆、逻辑思维与判断功能的传感器。

智能传感器是应自动测控系统发展的需要而产生的,是微型计算机技术与传感器技术相结合的结晶,也是传感器技术克服自身不足向前发展的必然趋势。

智能传感器的功能:1 具有逻辑判断、统计处理功能。

可对检测数据进行分析、统计和修正,还可对线性、非线性、温度、噪声、响应时间、交叉感应以及缓慢漂移等误差进行补偿,提高测量的准确度。

测量技术论文六篇

测量技术论文六篇

测量技术论文六篇测量技术论文范文1由于小功率信号计量校准技术特别成熟,测量方法和测量设备都特别完善,测量不确定度也很小。

相比小功率信号,大功率信号热效应显著、非线性特性显著,模型很难建立。

大功率部件稳定性差,离散性大,直接校准特别困难,因此如何把大功率信号不失真地转化为标准的小功率信号,利用已建立的小功率计量标准开展精确量传就成为关键问题。

首先,我们需要讨论和分析定向耦合器链路的温度特性、电性能特性。

3.1定向耦合器功率-温度特性试验我们利用功率计、定向耦合器、大功率负载、功率放大器、非接触温度测量仪等构建了一套简洁的功率-温度特性试验系统。

给系统加不同的功率,在此功率下稳定一段时间,监测定向耦合器输入端、耦合端、输出端和负载输入端附件的温度。

试验数据见表2。

从试验分析可以得出以下结论。

1)整个链路施加功率时,定向耦合器整体发热量很小,温升变化(21℃~26℃),温度变化很小;2)系统选用的27000(同轴)500W 定向耦合器,在常温下,链路承受功率小于50W时,链路上各监测点的温度都变化不大,在5min内都达到了温度平衡状态;3)链路功率大于50W时,链路上定向耦合器各监测点的温度变化不大,但负载检测点温度变化较大,需要15min才能达到热平衡;4)链路上热量主要集中在负载部位,负载的材料的热导率很高,导热效果很好,但对邻近的定向耦合器输出端口温度影响很小,因此定向耦合器的小功率和大功率状态下的温度比较稳定。

3.2定向耦合器电性能-温度特性试验依据定向耦合器功率-温度特性试验中,系统加不同功率功率后稳定的温度,我们利用矢量网络分析仪、定向耦合器、大功率负载、温箱等构建了一套简洁的电特性-温度特性试验系统,进行环境模拟试验,试验的温度箱设置温度根据上面的大功率试验猎取的链路温度来设定,试验温度变化间隔一般小于5℃,以猎取大功率计量校准链路温度变化对电参数特性的影响,测量耦合度和驻波比等性能来评估系统。

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凝胶色谱法基本原理及应用摘要:凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。

目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。

本文就凝胶色谱做一个整体性的介绍。

关键词:凝胶色谱法、分析技术、原理、应用Abstract:gel chromatography, which is known as gel permeation technology, is a quick and simple separation and analytical techniques developed in the early 1960s. It has simple equipment and simplified operation, and also it doesn’t require organic solvents and has high polymer material separation effect. It has been not only widely used by biochemistry, molecular biology, bioengineering, molecular immunology and medicine, but also used on a large scale industrial production. This paper will give a holistic introduction about gel chromatography.Key words: gel chromatography, analytical techniques, theory, application1.凝胶色谱介绍凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。

凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离油溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。

近年来,凝胶色谱也广泛用于分离小分子化合物。

化学结构不同但相对分子质量相近的物质,不可能通过凝胶色谱法达到完全的分离纯化的目的。

凝胶色谱主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对勿子质量分布测试。

目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。

2.凝胶色谱的分类根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。

2.1凝胶过滤色谱(GFC)GFC一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。

凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。

凝胶渗透色谱(GFC)是一种排阻色谱(SEC),依据尺寸分离分析物。

这项技术常用于聚合物的分析。

SEC首先是由Lathe和Ruthven 在1955年发明的[1]。

凝胶渗透色谱这个术语可追溯到Dow Chemical 公司的J.C. Moore ,他在1964年研究了这项技术并将专利柱授予Waters公司,随后Waters公司在1964年将这项技术实现商业化[2]。

通常须要分离高聚物,可分析和纯化所需要的产品。

2.1.1凝胶过滤色谱的原理[3]凝胶色谱依据尺寸分离蛋白质、缩氨酸和低聚核苷酸。

分子通过多孔性珠床,较大程度或者较小程度地扩散到珠孔中。

较小的分子更多的扩散到珠孔中因而会较慢地通过床层,而较大的分子较少或者不通过珠孔因而更快地通过床层。

分子量和三维形状对保留度有贡献。

凝胶过滤色谱可用于分子尺寸的分析,混合物中组分的分离,或者用于脱盐或者高分子制备中缓冲液的交换。

Elgaili. A. Omer [4]认为GFC 和其它绝对分子量确定设备联用是目前快速而间接确定聚合物分子量和分子量分布的最有效技术。

他认为光散射检测器利用分子散射光的强度与分子量成正比,将折光检测器连结在光散射检测器之后,当每种馏分从GFC 柱中洗脱出来时可测定其分子量。

凝胶过滤色谱柱的操作如图1所示,固定相包含惰性粒子,惰性粒子中有可控尺寸的小孔。

显微镜检测发现粒子内部类似海绵。

在连续流动的溶剂的影响下,含有各种分子尺寸的溶质的溶液可通过柱子。

分子尺寸大于小孔的溶质分子不能通过凝胶小球,因此它们被限制在小球之间的空隙中。

柱体积就大大变小。

结果,比孔径大的分子洗脱很快。

对能进出凝胶小球的小分子来说有很大的空间。

它们通过柱层的路程延长。

中等尺寸的分子以介于大分子和小分子之间的速度通过柱子。

因此,一同溶质分子的洗脱顺序直接和分子大小相关[5]。

对任何能过凝胶分离的溶质来说,排除率介于0~100%,可用有效分布系数(Kav )来表示,有效分布系数和床层体积(Vt ), 空隙体积(Vo )和洗脱体积(Ve )有关。

其关系可用如下方程表示:e o av t oV V K V V -=- Vt 和Vo 在特定的色谱条件下的固定的。

因此随着特定溶质分子量的增加,Kav 也增加。

如果溶质的Kav 相差很大,分配规律就很有效果,否则就很不明显。

Kav 不仅不分配效果的重要参数,而且是测定蛋白质分子质量的基础。

对特定的凝胶类型来说,Kav 与lgMr (Mr 代表分子量)有线性关系,Kav=−blogMr+c ,其中b 和c 为常数。

我们也可以得到如下方程:Ve=−b′logMr+c′,其中b′和c′为常数。

首先,我们可以在凝胶柱中分离分子量以知的一同蛋白质分子,然后用相同的凝胶柱测定其它未知的蛋白质分子。

2.1.2凝胶过滤色谱的应用Scott M. Gordon [6]等人用高分辨率的凝胶过滤色谱分离正常人体血浆得到17种含磷脂的分子。

Rajesh Chaudhary[7]等人利用凝胶色谱促黄体激素进行提纯,得到了很好的效果。

2.2凝胶渗透色谱(GPC)凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。

2.2.1 凝胶渗透色谱法的原理凝胶是由胶体溶液凝结而成的固体物质,內部具有网状筛孔,利用球状凝胶內的筛孔,使分子流过填充凝胶的管柱时,大分子无法进入凝胶筛孔,而只流经凝胶及管柱间的孔隙,很快就可以流出管柱,较小的分子因为进入凝胶內的筛孔,故在管柱內的停留时间较长,由此区分大小不同的分子,亦可与已知大小的分子作比较而定出一分子的分子量。

一般状況下,凝胶不会吸附成份,所有欲分离物质都会被洗出,这是凝胶层析法与其它层析法不同的地方。

2.2.2 凝胶渗透色谱法的分类目前常用的凝胶包括3个主要类型:○1. PolydextranPolydextran的商品名称是Sephadex,它几乎不溶于溶剂中,亲水性强,能迅速在水和电解质溶液中膨胀,在碱性的环境中十分稳定,所以可以用碱去除凝胶上的污染物。

Sephadex依其吸水量有不同型号,如G-25、G-75、G-100或是G-200,G 后面的数字为凝胶吸水量再乘以10,以G-25为例,表示1克干燥的G-25凝胶可以吸水2.5 ml 。

○2. PolyacrylamidePolyacrylamide是一种合成凝胶,商品名Bio-Gel P,干粉颗粒状,在溶剂中自动溶成胶体,依胶的分离范围不同,分成Bio-Gel P-2至Bio-Gel P-300,P后面的数字乘以1000为最大过滤限度。

Polyacrylamide的化学性质不活泼,但它在极端的pH 下会被水解,水解后产生的COOH-具有离子交换的性质,因此pH 值应尽量控制在2-10之间。

○3. Agarose商品名Separose,属于天然凝胶,依凝胶中干胶的百分含量,分为Sepharose 2B,4B和6B。

Agarose gel 是一种大孔凝胶,主要用于像核酸或病毒这些分子量400,000以上的物质,因其颗粒软,在分离过程有时会阻塞管柱,造成流速减慢,又因其在摄氏50度以上会融化,故需于较低温的环境中进行层析。

Agarose 做成beads后不能再脱水干燥,所以要在湿态中保存。

2.2.3凝胶和管柱的选择凝胶的材质需为化学惰性,与分离物不能产生变性(denature)或是其它化学反应,最好具有能长期反复使用的稳定性,并可以在较大的pH和温度范围內使用。

由于凝胶上的离子交换基团会吸附带电荷的物质,产生离子交换的效果,所以凝胶上最好不具有离子交换的基团。

此外,凝胶要有一定的机械强度,在层析过程中才不会变形,增加机械强度也可使层析在较高压力的环境进行,缩短分离时间。

凝胶颗粒的粗细与分离效果有直接关系,颗粒细的分离效果好,但流速慢而费时,因此要依具实际的需要来选择。

对于分子量较小的物质,一般采用polydextran或polyacrylamide材质的凝胶,大分子物质则使用agarose。

以Sephadex为例,Sephadex G-50可用于区分分子量1,500~30,000之分子,而Sephadex G-75 凝胶可区分分子量3,000~70,000之分子,所以若要分离分子量10,000及20,000之分子,两种都适用。

如果要分离的分子大小相差很多,则可选用柱高:直径=5∶1~15∶1的管柱,且管柱体积要大于4~15倍的样品体积;如果要分离的物质之间分子量差异不大,则要选用柱高:直径=20∶1~100∶1的管柱,且管柱体积要大于25~100倍的样品体积。

2.2.4凝胶的处理商品凝胶一般是干燥的颗粒,使用前要先泡在欲使用的沖洗液中,使它充份膨胀,否则有引起凝胶柱破裂的危险。

热胀法是常用的前处理法,即把浸于沖洗液中的凝胶加热,让它膨胀并除去气泡,温度够高的话(加温至近沸腾)也可消毒杀菌。

凝胶处理过程不能剧烈搅拌,如此易使颗粒破裂,影响流速。

将凝胶裝入管柱的方法有很多种,实验室常用的方法是先在柱中加入约1/3 体积的沖洗液,边轻轻搅拌边将凝胶悬浮液倒入其中,等到底部沉积约1~2公分的凝胶后,打开下方出口让水流出,上面不断加入悬浮液,等到沉积到离顶部约3~5公分处停止,让3~5倍柱床体积的缓冲液流过层析柱。

若用polydextran 的凝胶,可放入有颜色的蛋白质(如cytochrome c)流过管柱,看看色带是否均匀下降,不均匀或出现气泡,凝胶均需倒出重新填裝。

冲洗缓冲液仅需留高于柱床2公分左右,多余的可用滴管吸去,再将出口打开使冲洗液流到距表面1~2公分,关闭出口,用滴管缓缓加入样品再打开出口,样品完全渗入凝胶內后,加入约4公分冲洗液,出口处接上收集瓶开始层析。

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