抗生素的配制
抗生素的配制
常用抗生素溶液抗生素贮存液a 工作浓度浓度保存条件严紧型质粒松弛型质粒氨苄青霉素50mg/ml(溶于水) -20℃20μg/ml60μg/ml羧苄青霉素50mg/ml(溶于水) -20℃20μg/ml60μg/ml氯霉素34mg/ml(溶于乙醇) -20℃25μg/ml170μg/ml卡那霉素10mg/ml(溶于水) -20℃10μg/ml50μg/ml链霉素10mg/ml(溶于水) -20℃10μg/ml50μg/ml四环素b 5mg/ml(溶于乙醇) -20℃10μg/ml 50μg/mla：以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。
所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。
b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。
常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
多种抗生素皮试液配制方法
（0.6㎎）
头 孢
噻污纳
1.0g/支
NS
头孢噻污纳1.0g/支加生理盐水3.5ml：
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.4ml+生理盐水0.6ml
1㎎／ml
0.1ml
（0.1㎎）
头 孢Hale Waihona Puke 噻污纳1.5g/支
NS
头孢噻污纳1.5g/支加生理盐水5.2ml：
NS
将原液稀释到1ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
150U／ml
0.1ml
(15U)
普鲁卡因
0.25%
2.5㎎／ml
0.1ml
（ 0.25㎎）
细胞色素C
30㎎/支
NS
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
0.75㎎／ml
0.1ml
（0.075㎎）
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.4ml+生理盐水0.6ml
1.2㎎／ml
0.1ml
（0.12㎎）
头 孢
噻污纳
0.75g/支
NS
头孢噻污纳0.75g/支加生理盐水2.6ml：
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.4ml+生理盐水0.6ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.4ml+生理盐水0.6ml
0.96㎎／ml
各种抗生素的配制
抗生素溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过水膜滤器过滤除菌。
以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过有机膜滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生素容易均应保存于不透光的容器中。
乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤器过滤除菌；
使用浓度：L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH调节PH至后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。
抗生素的配制
抗生素的配制储存液工作浓度(mg/ml)保存条件严紧型质粒(ug/ml)松驰型质粒(ug/ml)氨苄青霉素50(溶于水) -20℃20 60羧苄青霉素50(溶于水) -20℃20 60氯霉素34(溶于乙醇) -20℃25 170卡那霉素10(溶于水) -20℃10 50链霉素10(溶于水) -20℃10 50四环素5(溶于甲醇) -20℃10 50常用抗生素溶液抗生素贮存液a工作浓度浓度保存条件严紧型质粒松弛型质粒氨苄青霉素50mg/ml(溶于水)-20℃20μg/ml60μg/ml羧苄青霉素50mg/ml(溶于水)-20℃20μg/ml60μg/ml氯霉素34mg/ml(溶于乙醇)-20℃25μg/ml170μg/ml卡那霉素10mg/ml(溶于水)-20℃10μg/ml50μg/ml链霉素10mg/ml(溶于水)-20℃10μg/ml50μg/ml四环素b5mg/ml(溶于乙醇)-20℃10μg/ml50μg/mlDocument number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UTa：以水为溶剂的抗生素贮存液通过μm滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。
所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。
b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。
常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
微生物实验常用抗生素浓度配制
微⽣物实验常⽤抗⽣素浓度配制微⽣物实验常⽤抗⽣素浓度配制----------四川⼤学⽣命学院-微⽣物代谢与⼯程重点实验室1、氨苄青霉素（[Amp]Ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。
2、羧苄青霉素（[Car]Carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素⼆钠盐于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。
3、甲氧西林（[Met]Methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml 终浓度与100ug/ml氨苄青霉素⼀起添加于⽣长培养基。
4、卡那霉素（[Kan]Kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。
5、氯霉素（[Cm]Chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素⾜量的⽆⽔⼄醇中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。
6、链霉素（[Str]Streptomycin）（50mg/ml）溶解500mg链霉素硫酸盐于⾜量的⽆⽔⼄醇中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。
7、萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以15ug/ml 的终浓度添加于⽣长培养基。
8、四环素（[Tet]Tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于⾜量的⽔中，或者将⽆碱的四环素溶于⽆⽔⼄醇，定容⾄10ml。
抗生素的配制
常用抗生素溶液抗生素贮存液a工作浓度浓度保存条件严紧型质粒松弛型质粒氨苄青霉素50mg/ml(溶于水)-20℃20μg/ml60μg/ml 羧苄青霉素50mg/ml(溶于水)-20℃20μg/ml60μg/ml 氯霉素34mg/ml(溶于乙醇)-20℃25μg/ml170μg/ml 卡那霉素10mg/ml(溶于水)-20℃10μg/ml50μg/ml 链霉素10mg/ml(溶于水)-20℃10μg/ml50μg/ml四环素b5mg/ml(溶于乙醇)-20℃10μg/ml50μg/mla：以水为溶剂的抗生素贮存液通过μm滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。
所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。
b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。
常用抗生素？氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）？溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
？羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）？溶解羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
？甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）？溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
？卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）？溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
？氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）？溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
抗生素配制
溶液配制
2,4-D溶液（1mg/ml）: 0.1g粉末溶于少量1M NaOH中，加热溶解，ddH2O定容至100mL，保存在棕色瓶中。
1mg/ml）: 0.05g粉末溶于少量1M NaOH中，ddH2O定容至50mL，保存在棕色瓶中。
Carb羧苄（50mg/ml）: 1 g羧苄青霉素二钠盐溶于ddH2O，定容至20 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。
Amp氨苄(100mg/ml）：1 g氨苄青霉素钠盐溶于ddH2O，定容至10ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。
Kan卡那(100mg/mL)：5 g Kan溶于ddH2O，定容至50 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。
Rif（35mg/mL)：1 g Rif先溶于少量NaOH溶液，再用ddH2O定容至28.5 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。
Cefo头孢(100mg/mL)：5 g Cefo溶于ddH2O定容至50 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。
Timetin替卡西林二钠/克拉维酸钾（200mg/mL）: 5g粉末溶于25 mL ddH2O，过滤灭菌，-20℃保存。
Basta草铵膦（10mg/mL）：100 mg粉末溶于10 mL ddH2O，过滤灭菌，-20℃保存。
As乙酰他丁香酮（100 mM）：196.2 mg粉末溶于5 mL DMSO，用ddH2O定容至10 mL，过滤灭菌，-20℃保存。
常用抗生素配制方法
常用抗生素配制方法1. 青霉素配制方法* 材料：青霉素粉末、溶剂、注射用水、注射器、温度计* 步骤：1. 在无菌条件下，将青霉素粉末倒入干净的中。
2. 加入适量的溶剂，根据青霉素粉末的说明书确定比例。
3. 用注射器将注射用水逐渐加入溶剂中，同时搅拌均匀，直至完全溶解。
4. 使用温度计检查溶液的温度，确保温度适宜。
5. 将配制好的青霉素溶液用无菌滤器过滤，以去除杂质。
6. 将过滤后的溶液倒入无菌中，盖上盖子，密封保存。
2. 氨基糖苷类抗生素配制方法* 材料：氨基糖苷类抗生素粉末、溶剂、注射用水、注射器、温度计* 步骤：1. 在无菌条件下，将氨基糖苷类抗生素粉末倒入干净的中。
2. 加入适量的溶剂，根据氨基糖苷类抗生素粉末的说明书确定比例。
3. 用注射器将注射用水逐渐加入溶剂中，同时搅拌均匀，直至完全溶解。
4. 使用温度计检查溶液的温度，确保温度适宜。
5. 将配制好的氨基糖苷类抗生素溶液用无菌滤器过滤，以去除杂质。
6. 将过滤后的溶液倒入无菌中，盖上盖子，密封保存。
3. 头孢菌素类抗生素配制方法* 材料：头孢菌素类抗生素粉末、溶剂、注射用水、注射器、温度计* 步骤：1. 在无菌条件下，将头孢菌素类抗生素粉末倒入干净的中。
2. 加入适量的溶剂，根据头孢菌素类抗生素粉末的说明书确定比例。
3. 用注射器将注射用水逐渐加入溶剂中，同时搅拌均匀，直至完全溶解。
4. 使用温度计检查溶液的温度，确保温度适宜。
5. 将配制好的头孢菌素类抗生素溶液用无菌滤器过滤，以去除杂质。
6. 将过滤后的溶液倒入无菌中，盖上盖子，密封保存。
以上是常用抗生素的配制方法，需要在无菌环境下进行，确保配制过程中的卫生和安全。
请参照药品的说明书选择适当的溶剂和比例，并严格按照步骤操作，以确保配制出的抗生素溶液的质量和纯度。
配制好的抗生素溶液应及时使用或密封保存，避免污染和损失。
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抗生素????贮存液a????工作浓度
????浓度????保存条件????严紧型质粒????松弛型质粒
氨苄青霉素????50mg/ml(溶于水)????-20℃????20μg/ml????60μg/ml
羧苄青霉素????50mg/ml(溶于水)????-20℃????20μg/ml????60μg/ml
氯霉素????34mg/ml(溶于乙醇)????-20℃????25μg/ml????170μg/ml
卡那霉素????10mg/ml(溶于水)????-20℃????10μg/ml????50μg/ml
链霉素????10mg/ml(溶于水)????-20℃????10μg/ml????50μg/ml
四环素b????5mg/ml(溶于乙醇)????-20℃????10μg/ml????50μg/ml
a：以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。
所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。
b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。
常用抗生素?
氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）?
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
?
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）?
溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
?
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）?
溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
?
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）?
溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
?
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）?
溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
?
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）?
溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
?
萘啶酮酸（nalidixicacid）（5mg/ml）?
溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
?
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）?
溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
几种溶液的配制方法
1、PBS:
????取ZLI-9061PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH值应在7.2~7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL或NaOH调整。
2、TBS：
????2.1Tris缓冲液配方：（0.5M??pH7.6）
????????????Tris（三羟甲基氨基甲烷）????????60.57g
????????????1NHCL????????约420ml
????????????双蒸水????????加至1000ml
????Tris缓冲液配制方法：
????????先以少量双蒸水（300~500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）将pH调至7.6，最后双蒸水加至1000ml。
此液为储备液，4℃冰箱中保存。
????2.2TBS配方：
????????????Tris-HCI缓冲液（0.5M??pH7.6）????????100ml ????????????NaCI????????8.5~9g(0.15mol/L)
????????????双蒸水????????加至1000ml
????TBS配制方法：
????????先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl缓冲液，最后加双蒸水至1000ml，充分摇匀。
????3、枸橼酸盐缓冲液（Citratebuffer）：
????3.1储存液：
????A.0.1M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸（C6H8O7?H20）溶于1000ml蒸馏水中。
????B.0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠（C6H5Na3O7?2H20）溶于1000ml蒸馏水中。
????3.2工作液：
????取9mlA液和41mlB液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.0 0.1
?????
????4、胰酶（Trypsin）：
????4.1ZLI-9011胰蛋白酶消化液：
????常用浓度为0.125%，即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合（1:3稀释），则可直接滴加使用。
胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0.05%（1:10稀释）至0.25%（1:1稀释）。
????4.2ZLI-9010胰蛋白酶：
????取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml0.05%或0.1%pH7.8的无水氯化钙水溶液中，溶解即可。
????5、胃酶（Pepsin）：
4%胃蛋白酶，用0.1mol/LHCL配制。
（我公司备有ZLI-9013胃蛋白酶消化工作液，不需稀释直接滴加使用，欢迎选购）????6、DAB：
????6.1ZLI-9032/9033DABKit：
????使用前只需将试剂盒提供的A、B、C三种试剂各一滴加至1ml双蒸水中，即可获得
1mlDAB工作液，简单易用。
????6.1ZLI-9030DAB：
????6mgDAB溶于10mlTBS（0.05M??pH7.6），再加入0.1ml浓度为3％的H2O2，过滤掉沉淀物，即可。
7、AEC：
4mgAEC溶于1ml二甲基甲酰胺中，加入14ml浓度为0.1M的醋酸缓冲液（pH5.2），然后加入0.15ml3%H2O2，过滤掉沉淀物。
8、RIPA：
1×PBS，1%NP40，0.5sodiumdeoxycholate，0.1%SDS（此液体可长期保存）。
以下抑制剂以储存液方式保存，临用前加入RIPA中。
8.110mg/mlPMSF异丙醇溶液（用量为10?l/ml）
8.2Aprotinin（Sigma产品，用量为30?l/ml）
8.31000mMsodiumorthovanadate冷冻液
（用量为10?l/ml）
9、BlottoA：
常规使用1×PBS，5%milk，0.05%Tween20。
10、BlottoB：
与Phosphotyrosine抗体共用，1×PBS，1%milk，0.05%Tween20。
部分实验中milk可完全去除，但可能引起背景增高。
目的：配制500ml的50mg/ml氨苄青霉素贮存液。
实验用品的准备：足够量的2ml的EP管，滤头（内装有两层滤膜）、两个50ml的离心管、注射器，以上用品除注射器外都要进行高压灭菌；
注意：
（1）滤头灭菌前，安装滤膜时，不要旋得太紧，待灭菌后使用前于超净台上用力旋紧，以防漏液。
（2）EP管，滤头、两个50ml的离心管灭菌后要进行烘干。
抗生素溶液的配制：
（1）称取25g的氨苄青霉素粉末，倒入盛有200—300ml去离子水的烧杯中，最好在烧杯上面盖个东西（封口膜或者干净的滤纸），以防止粉末飘出，轻摇烧杯，可见氨苄青霉素粉末迅速溶解。
（2）待氨苄青霉素粉末溶解完，加去离子水至500ml，稍等几分钟让粉末完全溶解，以免过滤时堵塞滤膜。
氨苄青霉素溶液的过滤除菌及分装：
（1）取出旧报纸包裹的滤头，用力旋紧，备用。
（2）用注射器吸取配制好的溶液，然后把滤头安在注射器上，缓缓推动注射器活塞，把溶液经滤膜推至50ml的离心管中，直至把两个离心管都注满。
注意：动作用缓和，一只手拿着活塞，一只手拿着滤头，使滤出液出口正对着离心管，还要防止染菌。
（3）把50ml离心管中已除菌的氨苄青霉素溶液分装到2ml的EP管中。
（4）重复（2）、（3）直至把500ml溶液分装完毕。
（5）在EP管上做好标记，包括名称、日期等。
（6）把做好标记的盛有氨苄青霉素的EP管于-20℃保存。