缓冲液的配制方法
常见缓冲液配制方法
常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂，主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内，有利于提高反应效率。
缓冲液有许多种，其配制方
法也多种多样。
下面将介绍常见缓冲液的配制方法，包括常用缓冲液的配
制方法，复合缓冲液的配制方法，以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。
二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。
比如，将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合，可以
得到一种磷酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液，可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合，以得
到其pH值为2.12的缓冲液。
2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。
比如，将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合，可以
得到一种碳酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液，可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。
3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。
常用缓冲液的配制方法
1N
40.00
碳酸钠Na2CO3
106.00
1N
53.00
磷酸氢二钠Na2HPO4.12H2O
358.20
1N
358.20
磷酸二氢钾KH2PO4
136.10
1/15M
9.08
重铬酸钾K2Cr2O7
294.20
0.1N
4.9035
碘化钾KI
166.00
0.5N
83.00
高锰酸钾KMO4
158.00
GR.
ACS.
PA.
XЦ.
CP.
PUSS.
Puriss.
ЦДA.
LR.
EP.
Ц.
p.
pure
用途
纯度最高,杂质含量最少的试剂。适用于最精确分析及研究工作
纯度较高，杂质含量较低。适用于精确的微量分析工作，为分析实验室广泛使用
质量略低于二级试剂，适用于一般的微量分析实验，包括要求不高的工业分析和快速分析
4.2
2.65
7.35
5.4
8.60
1.40
4.4
3.70
6.30
5.6
9.10
0.90
4.6
4.90
5.10
5.8
9.40
0.60
(三)巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃)
PH
0.04M巴比妥钠溶液ml
0.2N盐酸
(毫升)
PH
0.04M巴比妥钠溶液ml
0.2N盐酸
(毫升)
6.8
100
18.4
8.4
100
0.1N
3.16
醋酸钠NaC2H3O2
82.04
实验常用试剂缓冲液的配制方法
实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。
将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中，调节pH值至7.4，溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。
2、二氧化碳水。
将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液（NaHCO3，0.5mol/L）加入1L水中，经过气泡交换，可制得CO2水。
3、磷酸盐缓冲液。
将200mL磷酸盐溶液（K2HPO4，0.5mol/L）加入800mL水中，调节pH值至7.2，搅拌均匀，即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。
4、EDTA标准溶液。
将25.0g EDTA·4Na（C10H14N2O8Na2）加入
1000mL水中，热溶解，调节pH值至7.0，搅拌均匀，得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。
5、肌酐标准溶液。
将10.0g肌酐（C10H13N3O8)=14.2H2O）加入
1000mL的水中，搅拌，调节pH值至7.4，搅拌均匀，即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。
二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液（Na2HPO4）加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液（Ca(H2PO4)2）中，搅拌均匀，即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。
2、弱碱缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液（NaH2PO4）
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液（Ca(HCO3)2）中，搅拌均匀，即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。
3、弱盐缓冲液。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液（Buffer）在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用，它可以维持溶液的稳定性，调节pH值，同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法：- 配制0.1 M Tris缓冲液（pH 7.4）：a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器，并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器，加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌，使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4，直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法：-配制10×PBS缓冲液：a.在1L去离子水中加入80gNaCl，2gKCl，14.4gNa2HPO4，2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液：a.取10×PBS缓冲液100mL，用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法：-配制50×TAE缓冲液：a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base，57.1 mL 0.5 M EDTA，100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液：a.取50×TAE缓冲液20mL，用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。
2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。
3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。
4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。
配制方法如下：- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。
5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。
以上是一些常见的缓冲溶液配制方法，具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。
在配制缓冲溶液时，一定要注意使用高纯度的试剂，并按照配制方法进行准确的实验操作。
缓冲溶液及其配制方法
缓冲溶液及其配制方法
以下是一些常见的缓冲溶液及其配制方法：
1.甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25mL，加酚酞
指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75mL，用水稀释至200mL，调节pH值至
3.25～3.30即可。
2.邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加
水900mL，搅拌使溶解，用氢氧化钠试液（必要时用稀盐酸）调节pH值至5.6，加水稀释至1000mL，混匀即可。
3.氨-氯化铵缓冲液(pH8.0)：取氯化铵1.07g，加水使溶解成
100mL，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0即可。
4.氨-氯化铵缓冲液(pH10.0)：取氯化铵
5.4g，加水20mL溶
解后，加浓氯溶液35mL，再加水稀释至100mL即可。
5.硼砂-碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)：取无水碳酸钠5.30g，
加水使溶解成1000mL；另取硼砂 1.91g，加水使溶解成100mL。
各种缓冲液的配制方法_
各种缓冲液的配制方法_
一、磷酸缓冲液的配制方法
1.准备：蒸馏水或纯净水、磷酸二铵，滴定级别不低于AR级；
2.计算配制用量：根据实验要求，计算出所需磷酸二铵的总量，用m1表示（单位：克）；
3.将磷酸二铵加入蒸馏水或纯净水中，用称取出适量的磷酸二铵，用m2表示（单位：克），加入搅拌槽中，充分搅拌均匀，然后加入剩余的磷酸二铵（m3=m1-m2，单位：克），继续搅拌；
4.检查温度：温度应大于室温；
5.检查pH值：用pH计测量溶液的pH值，调整到与实验要求相符的值；
6.搅拌均匀，过滤，储存，可使用或直接投放使用；
二、碳酸缓冲液的配制方法
1.准备：蒸馏水或纯净水、碳酸氢钠，滴定级别不低于AR级；
2.计算配制用量：根据实验要求，计算出所需碳酸氢钠的总量，用m1表示（单位：克）；
3.将碳酸氢钠加入蒸馏水或纯净水中，用称取出适量的碳酸氢钠，用m2表示（单位：克），加入搅拌槽中，充分搅拌均匀，然后加入剩余的碳酸氢钠（m3=m1-m2，单位：克），继续搅拌；
4.检查温度：温度应大于室温；
5.检查pH值：用pH计测量溶液的pH值。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液是一种用于调节溶液酸碱度（pH值）的溶液，它可以稳定溶液的pH值，满足实验的需要。
不同实验需要使用不同pH值的缓冲液，因此配制方法也会有所不同。
下面将介绍常见的几种缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液：磷酸盐缓冲液是最常用的一种缓冲液，在生物化学和分子生物学实验中广泛应用。
配制方法：-0.2M磷酸盐酸（pH2.5）：用稀磷酸（H3PO4）溶液调节酸度至所需pH值。
-0.2M磷酸盐盐（pH2.5）：用0.2M磷酸钠（Na2HPO4）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的磷酸盐缓冲液。
2.乙酸缓冲液：乙酸缓冲液常用于酶催化反应的研究和生物制剂的稳定。
配制方法：-0.1M乙酸酸（pH3.6）：用浓烧碱（CH3COOH）溶液调节酸度至所需pH值。
-0.1M乙酸盐（pH3.6）：用0.1M乙酸钠（CH3COONa）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的乙酸缓冲液。
3.碳酸氢盐缓冲液：碳酸氢盐缓冲液常用于生命科学实验中。
配制方法：-0.1M碳酸酸（pH6.0）：用稀碳酸（H2CO3）溶液调节酸度至所需pH 值。
-0.1M碳酸盐（pH6.0）：用0.1M碳酸氢钠（NaHCO3）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的碳酸氢盐缓冲液。
4. Tris缓冲液：Tris缓冲液是一种多用途的缓冲液，在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。
配制方法：- 0.1 M Tris酸（pH 8.0）：用三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液调节酸度至所需pH值。
- 0.1 M Tris盐（pH 8.0）：用0.1 M Tris盐溶液调节碱度至所需pH值。
- 混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的Tris缓冲液。
配制缓冲液时需要准备所需浓度的酸液和盐液，然后根据所需pH值逐渐调整酸度和碱度至目标值。
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核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加入57.1 ml的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度 890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2.加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0。
6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2.加入去离子水100 ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE)。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。
小心摇动锥形瓶。
使琼脂糖充分均匀熔化。
此操作重复数次，直至琼脂糖完全熔化。
必须注意，在微波炉中加热时间不宜过长，每次当溶液起泡沸腾时停止加热，否则会引起溶液过热暴沸，造成琼脂糖凝胶浓度不准，也会损坏微波炉。
熔化琼脂糖时，必须保证琼脂糖充分完全熔化，否则，会造成电泳图像模糊不清。
5.使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入溴乙锭溶液(终浓度0.5 µg/ml)。
并充分混匀。
注：溴乙锭是一种致癌物质。
使用含有溴乙锭的溶液时，请戴好手套。
6.将琼脂糖溶液倒入制胶模中，然后在适当位置处插上梳子。
凝胶厚度一般在3~5 min之间。
7.在室温下使胶凝固(大约30 min~1 h)，然后放置于电泳槽中进行电泳。
注：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存，一般可保存2~5天。
琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围6× Loading Buffer(DNA电泳用)组份浓度配制量 500 ml配制方法3.加入180 ml的甘油(Glycerol)后，使用2 N NaOH调节pH值至7.0。
4.用去离子水定容至500 ml后，室温保存。
10 × Loadlng Buffer(RNA电泳用)组份浓度配制置配制方法3.加入5 ml的甘油(Glycerol)后，充分混匀。
4.用DEPC处理水定容至10 ml后，室温保存。
四、核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法20×SSC组份浓度 3.0 M NaCl，0.3 M Na3citrate·2H2O(柠檬酸钠)配制量 1 L配制方法 1.3滴加14 N HCl，调节pH值至7.0后，加去离子水将溶液定容至1 L。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
20×SSPE Buffer组份浓度 3.0 M NaCl，0.2 M NaH2PO4，0.02 M EDTA配制量 1.L配制方法3.加NaOH 调节pH 值至7.4(约6.5 ml 的10 N NaOH)。
4.加去离子水将溶液定容至l L 。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
50 X Denhardt’S 溶液组份浓度 配制量500 ml 配制方法 1.称量下列试剂，置于500 ml 烧杯中。
2.加去离子水约400 ml ，充分搅拌溶解3.加去离子水将溶液定容至500 ml 。
4.用0.45µm 滤膜过滤后，分装成每份25 ml 。
5.-20℃保存。
0.5 M 磷酸盐Buffer组份浓度 0.5 M Na2HPO 4。
配制量 l L配制方法 1.称量134 g Na 2HPO 4·7H 2O 置于l L 烧杯中。
2.加入约800 ml 的去离子水充分搅拌溶解。
3.加入85%的H 3PO 4(浓磷酸)调节溶液pH 值至7.2。
4.加去离子水定容至1 L 。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
Salmon DNA (鲑鱼精DNA)组份浓度 10 mg/ml Salmon DNA配制量 约100 ml配制方法 1.称取鲑鱼精DNA 2 g 置于500 ml 烧杯中，加入约200 ml 的TE Buffer 。
2用磁力搅拌器室温搅拌2~4 h ，溶解后加入4 ml 的5 M NaCl ，使其终浓度为0.1 M 。
3.用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次。
4.回收水相溶液后，使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次，以 切断DNA 。
5.加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。
6.离心回收DNA 后，溶解于100 ml 的去离子水中。
测定溶液的OD 260值。
7.计算溶液的DNA 浓度后，稀释DNA 溶液至10 mg/ml 。
8.煮沸10min 后，分装成小份(1 ml/份)。
-20℃保存。
9.使用前在沸水浴中加热5min 后，迅速冰浴冷却。
DNA 变性缓冲液组份浓度 1.5 M NaCl ，0.5 M NaOH配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保存。
预杂交液/杂交液 (DNA 杂交用)组份浓度配制置 100 ml配制方法 1.称量下列试剂，置于200 ml 烧杯中。
2.充分混匀后，使用0.45 µm 滤膜滤去杂质后使用。
预杂交液/杂交液(RNA 杂交用)组份浓度配制量 100 mL配制方法 1.称量下列试剂，置于200 ml 烧杯中。
2.充分混匀后，使用0.45µm 滤膜滤去杂质后使用。
膜转移缓冲液(Western 杂交用)组份浓度 39 mM Glycine ，48 mM Tris ，0.037%(W/V)SDS ，20%(V/V)甲醇 配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定溶至800 ml 后，加入200 ml 的甲醇。
4.室温保存。
TBST Buffer(Western 杂交膜清洗液)组份浓度 20 mM Tris-HCl ，150 mM NaCl ，0.05%(V/V)Tween 20配制量 1 L配制方法3.加入0.5 ml Tween 20后充分混匀。
4.加去离子水将溶液定容至l L 后，4℃保存。
封闭缓冲液(Western 杂交用)组份浓度 5%(W/V)脱脂奶粉/TBST Buffer配制量 100 ml配制方法 1.称5 g 脱脂奶粉加入到100 ml TBST Buffer 中，充分搅拌溶解。
2.4℃保存待用(本封闭液应该现配现用)。
五、实验室常用培养基的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)组份浓度 100 mg/ml Ampicillin配制量 50 ml配制方法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1 ml/份)后，-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)组份浓度 24 mg/mL IPTG配制量 50 mL配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌。
4小份分装(1 ml，份)后，-20℃保存。
X-Gal (20 mg/ml)组份浓度 20 mg/ml X-Gal配制量 50 ml配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺)，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3.小份分装(1 ml/份)后，-20℃避光保存。
LB培养基组份浓度 1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨)，0.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物)，1%(W/V)NaCl配制量 1 L配制方法3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1)，调节pH值至7.0。
4.加去离子水将培养基定容至1 L。
5高温高压灭菌后，4。
C保存。
LB/Amp培养基组份浓度配制量配制方法3.滴加5 N NaOH(约0.2 mL)。
调节pH 值至7.0。
4.加去离子水将培养基定容至1 L 。
5.高温高压灭菌后，冷却至室温。
6.加入1 ml Ampicillin(100 mg/ml)后均匀混合。
7.4℃保存。
TB 培养基组份浓度配制量 1.L配制方法 1.配制磷酸盐缓；中液(0.17 M KH 2PO4，0.72 M K 2HPO 4)100 ml 。
溶解2.31 g KH 2PO 4和l2.54 g K 2HPO 4于90 ml 的去离子水中，搅拌溶解 后，加去离子水定容至100 ml ，高温高压灭菌。
4.加去离子水将培养基定容至1 L 后，高温高压灭菌。
5.待溶液冷却至60℃以下时，；加入100 ml 的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
6.4℃保存。
TB/Amp培养基组份浓度配制量配制方法 1.配制磷酸盐缓冲液(0.17 M KH2PO4，0.72 M K2HPO4)100 ml。
溶解2.31 g KH2PO4,和12.54g K2HPO4于90 ml的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100 ml，高温高压灭菌。
4.加去离子水将培养基定容至l L后，高温高压灭菌。
5.待溶液冷却至60℃以下时，加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
6.均匀混合后4℃保存。
SOB培养基组份浓度配制量配制方法 1.配制250 mM KCl溶液。
在90 ml的去离子水中溶解l.86 g KCl后，定容至100 ml。
2.配制2 M MgCl2溶液。
在90 ml去离子水中溶解19 g MgCl2后，定容至100 ml，高温高压灭菌。
5.量取10 m1 250 mM KCl溶液，加入到烧杯中。
6.滴加5 N NaOH溶液(约0.2 m1)，调节pH值至7.0。
7.加入去离子水将培养基定容至l L。