土壤硝态氮的测定
土壤农化实验：土壤硝态氮测定
5.1 标准曲线的测定
分别取硝酸盐氮标准使0.0 ,0.5 ,1.0 ,2.0 , 3.0 ,4.0μg/ mL 置于50 mL 比色管中, 各管中加入 1.0 mL 1 mol的盐酸溶液,摇匀,用751 型紫外分光 光度计在220 nm和275 nm处,用1 cm2A275的计算方法求得校正吸光 度. 标准曲线的回归方程为y = 0.252 x -0.0001 , r = 0.9999 ( n = 5) .
5.2 土样的测定
吸取滤液1.0～50 mL (视NO3 - N 的浓度 而定) 置于50 mL比色管中, 用水准确稀释至 刻度, 加1.0 mL 1 mol的盐酸溶液, 测量吸光 度。
六、结果计算
C—NO3-N浓度（mg/kg) C0—标准曲线查得待测液质量浓度（μg/ml） 50—比色测定液总体积（ml) V—浸提液体积（ml）
W—烘干土样质量（g）
实验注意事项
1.硝酸根为阴离子，不为土壤胶体吸附，且 易溶于水，很容易在土壤内部移动，在土 壤剖面上下移动频繁，因此测定硝态氮时 应注意采样深度。即不仅要采集表层土壤， 而且要采集心土和底土。采样深度可达 40cm.60cm以至120cm。
土壤中硝态氮的测定
一、实验目的 1.了解紫外分光光度计的使用方法。 2.学习并掌握紫外分光光度法测定土壤中硝态氮的原
理及操作。 二、实验原理
利用硝酸根离子在220 nm处有较强的紫外吸收这一 特性,定量分析了土壤浸提液中的NO-3. 溶解的有机 物在220 nm和275 nm处均有吸收,而NO-3 在275 nm 处没有吸收,因此在275 nm波长处做另一测量,以校 正硝酸盐值. 最低检出浓度是01004 mg/ kg ,测定 上限为41000 mg/ kg ,适合高浓度土样浸提液的高 倍稀释.
土壤硝态氮和铵态氮的测定方法
一、原理：过滤后的样品经过一个开放的镀铜镉还原器通道后，硝酸根被还原成亚硝酸根，亚硝酸根通过磺胺处理后，与N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐偶联，形成深红色的偶氮染料，然后在550nm或者520nm比色分析。
二、样品处理土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。
过筛后的土样，取出5g土样放入离心管，加入25ml 氯化钾提取液（2moL/L），震荡2小时后进行离心（8000 g ，15min），静置后过滤，取上清液测定。
若不能及时测定，放入4℃冰箱保存。
三、试剂配制：试剂用水：蒸馏水或去离子水。
（1）显色试剂：（棕色玻璃瓶，避光保存）150ml水，加入25ml浓磷酸▲，冷却至室温后，加入10g磺胺，再加入0.5g N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶解。
用水定容至250ml。
加入浓缩探针清洗液（表面活性剂）。
（2）氯化铵-EDTA缓冲液（ammonium chloride-EDTA）：把85g氯化铵和0.1g 乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA-Na2）溶解于水，定容至1L。
用浓氨水▲调节PH至。
（3）硝化组件缓冲液：{用来清洗OTCR(镀铜镉还原器通道)}取100ml的氯化铵-EDTA缓冲液，稀释至1L。
调节PH至。
（4）2%硫酸铜：10g 五水硫酸铜（）溶于水，定容至500ml。
（5）5mol/L盐酸：小心慢慢加入浓盐酸▲于水中，冷却后定容至100ml。
（6）硝酸盐存储溶液(1g/L)：（溶液6个月内有效）7.218g硝酸钾溶于水，定容至1L，加入1ml氯仿▲（防腐剂）。
（7）比色管清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存,两个月内有效）取50ml比色管清洗液，加水定容至1L。
（8）进样针清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存，两个月内有效。
）取进样针清洗液，加水定容至1L。
四、测定方法：土壤硝态氮测定采用SmartChem全自动间断化学分析仪。
一、样品处理土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定（紫外分光光度法）（一）方法提要土壤浸出液中的N03-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高的吸光度，而浸出液中的其他物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。
将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-卜、HCO3-的干扰，NO2-一般含量极少，也很容易消除。
因此，紫外分光光度法直接测定N03-的含量。
待测液酸化后，分别在2l0nm和275mm处测定吸光度。
A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。
但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。
（二）适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。
（三）主要仪器设备1、紫外可见分光光度计。
2、石英比色皿。
3、往复式或旋转式振荡机，满足180 r．min-1±20r．min-1的振荡频率或达到相同效果。
4、塑料瓶：200mL。
（四）试剂1、H2SO4溶液(1：9)：取10mI浓硫酸缓缓加入90mL水中。
2、氯化钙浸提剂[c(CaCl2·6H20)=0.01mol·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCL2·6H20)溶于水中，稀释至l L。
3、硝态氮标准贮备液[p(N)=100 ug·mL-1]：称取0.7217g经105～110℃烘2h 的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1 L，存放于冰箱中。
4、硝态氮标准溶液[p (N)=10 ug·mL-1]：测定当天吸取10．00mL硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中，用水定容。
（五）操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50.0mI氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20～25℃振荡30min(振荡频率：180r·min-1±20r·min-1)，干过滤。
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020土壤硝态氮的测定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的NO3-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。
将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-、HCO3-的干扰。
NO2-一般含量极少，也很容易消除。
因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO3-的含量。
待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。
A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。
但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。
2、适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。
3、主要仪器设备紫外—可见分光光度计；石英比色皿；往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果；塑料瓶：200mL。
4、试剂溶液(1：9)：取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。
氯化钙浸提剂[c(CaCl2)=·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCl2·6H2O，化学纯)溶于水中，稀释至1L。
硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg·L-1]：准确称取0.7217g 经105~110℃烘2h的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。
硝态氮标准溶液[ρ(N)=10mg·L-1]：测定当天吸到硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。
5、操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃~25℃振荡30min(180r/min±20r/min)，干过滤。
土壤硝态氮的测定紫外分光光度法
土壤硝态氮的测定紫外分光光度法土壤硝态氮的测定紫外分光光度法1 范围本标准规定了运用紫外分光光度法测定土壤浸出液中硝态氮的原理、试剂、仪器、分析步骤、结果计算与表示、精密度、质量保证和控制等。
本标准适用于土壤中硝态氮的测定。
本方法对土壤硝态氮的检出限为0.5 mg/kg，定量限为1 mg/kg。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法HJ 634 土壤氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定氯化钾溶液提取-分光光度法NY/T 52 土壤水分测定法NY/T 1377 土壤中pH值的测定3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
3.1吸光度 absorbance光线通过土壤浸出液前的入射光强度与该光线通过土壤浸出液后的透射光强度比值的以10为底的对数。
3.2f值 f value土壤浸出液中的有机物在220 nm波长处的吸光度和在275 nm 波长处的吸光度的比值。
4 原理利用土壤浸出液中硝酸根离子在220 nm波长附近有明显吸收且吸光度大小与硝酸根离子浓度成正比的特性，对硝态氮含量进行定量测定。
利用溶解的有机物在220 nm和275 nm波长处均有吸收，而硝酸根离子在275 nm波长处没有吸收的特性，测定土壤浸出液在275 nm处的吸光度，乘以一个校正因数（f 值）以消除有机质吸收220 nm波长而造成的干扰。
5 试剂除非另有规定，在分析中仅使用分析纯试剂，所用水应符合GB/T 6682中三级水的要求。
5.1 氯化钾浸提液[c(KCl)=1 mol/L]准确称取74.55 g氯化钾置于烧杯中，加入约400 mL水溶解。
溶解后转移到1000 mL容量瓶中定容，摇匀。
5.2 硝态氮标准储备液[ρ(N)=1000 mg/L]精确称取7.2182 g经110℃±5℃烘干2 h的硝酸钾置于烧杯中，加入约50 mL水溶解。
土壤硝态氮测定方法
土壤硝态氮测定方法一、测定原理测定原理硝酸根离子在220 nm处有强吸收,在275 nm处即无吸收，而主要干扰因子。
土壤有机质均有吸收，首先测定有机质在这二个吸光度之间的转化系数(即校正因数f)，然后以浸提液在275 nm处的吸光度(A275)的f倍代替有机质在220 nm处的吸光度值，将它从浸提液在220 nm处的吸光度(A220)中扣除，即得到硝态氮在220 nm处的校正吸光度，因此，这种方法也称紫外分光光度校正因数法。
二、操作步骤：取5.00 g土样，加入50 ml 2 mol/L KCI溶液，振荡1 h，悬液静置3~5 min 后过滤。
测定浸提液在220 nm和275 nm处吸光度A220和A275。
按照下式计算校正吸光度A：A= A220 -2A275三、标准曲线：分别取10 mg/L硝态氮标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 ml 于50 ml容量瓶中，加入二次重蒸水，定容摇匀。
用1cm比色皿分别在220 nm 和275 nm处测定吸光度。
A=A220 -2A275求的校正吸光度。
求此标准曲线方程。
四、试剂配制10 mg/L NO3-N：称取0.7220 g于105 ℃烘箱中干燥冷却后的KNO3于小烧杯中，加入二次蒸馏水溶解，定量转入1000 ml容量瓶中，定容，摇匀，即为100 mg/L硝态氮标准溶液。
移取该溶液10.00 ml于100 ml容量瓶，定容，摇匀，即为10 mg/L硝态氮标准溶液。
2 mol/L KCI: 称取二倍分子量的KCI（105℃烘2 h），双蒸馏水溶解，定容至1000 ml。
五、结果计算：硝态氮(mg/kg) = C*V*D/m式中：C为从标准曲线查得的NO3-—N含量：V为浸提剂体积(ml)，50；D为稀释倍数,无稀释为1；m为土样质量(g)。
土壤农化实验：土壤硝态氮测定
六、结果计算
C—NO3-N浓度（mg/kg) C0—标准曲线查得待测液质量浓度（μg/ml） 50—比色测定液总体积（ml) V—浸提液体积（ml）
W—烘干土样质量（g）
实验注意事项
1.硝酸根为阴离子，不为土壤胶体吸附，且 易溶于水，很容易在土壤内部移动，在土 壤剖面上下移动频繁，因此测定硝态氮时 应注意采样深度。即不仅要采集表层土壤， 而且要采集心土和底土。采样深度可达 40cm.60cm以至120cm。
三. 实验仪器
• 紫外分光光度计, 振荡器( 振次: 243 V/ min)；50 mL比色管, 恒温干燥箱.
四.实验试剂
1. CaSO4 (分析纯) , 2. 1 mol/ L的盐酸(优级纯) 溶液, 3. 100μg/ mL的硝酸盐氮标准贮备液, 4. 25μg/ mL的硝酸盐氮标准使用液.
2.土样经风干或烘干易引起NO3-N变化，故一 般都用新鲜土样测定。
土壤中硝态氮的测定
一、实验目的 1.了解紫外分光光度计的使用方法。 2.学习并掌握紫外分光光度法测定土壤中硝态氮的原
理及操作。 二、实验原理
利用硝酸根离子在220 nm处有较强的紫外吸收这一 特性,定量分析了土壤浸提液中的NO-3. 溶解的有机 物在220 nm和275 nm处均有吸收,而NO-3 在275 nm 处没有吸收,因此在275 nm波长处做另一测量,以校 正硝酸盐值. 最低检出浓度是01004 mg/ kg ,测定 上限为41000 mg/ kg ,适合高浓度土样浸提液的高 倍稀释.
五. 操作步骤
土壤浸提液制备 标准曲线 比色测定
5.1 土壤浸提液制备
称取10.0 g充分拌匀的湿土,分别置于250 mL 具塞三角瓶称取 和已恒重的烧杯中(烧杯中土样经烘干、 恒加重10以0.0测m定101 L其三含次湿蒸量馏)水,在,于三振角荡瓶器内上加振0荡.2 1g5CmaSinO,4放, 置30 min后00 ,倾出上清液,用中速或慢速无氮定量滤 纸过滤，澄g充 清的滤液收集在三角瓶中。
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定酚二磺酸比色法１ 原理 用饱和CaSO 4·2H 2O 溶液浸提后，取一份浸出液在微碱性条件下蒸干，残渣用酚二磺酸试剂溶解，此时NO 3－既与试剂生成硝基酚二磺酸：C 6H 3OH （HSO 3）2＋HNO 3=C 6H 2OH （HSO 3）2NO 2＋H 2O 2，4-酚二磺酸 6-硝基酚-2，4-二磺酸此反应必须在无水的条件下才能迅速完成，产物在酸性介质中无色，碱化后为稳定的黄色盐溶液，可在400～425 nm 处有最大吸收峰，用分光光度计比色测定。
本法中Cl -为主要干扰物，但在15mg ·L -1以下无影响，大于此范围可用AgSO 4 消除（按0.1mg AgSO 4可沉淀22.7mgCl -）。
２ 仪器设备分光光度计；水浴锅；蒸发皿，震荡机；三角瓶；容量瓶等。
３ 试剂３.１CaSO 4·2H 2O （分析纯、粉状） ３.２Ca ＣO ３（分析纯、粉状）３.３酚二磺酸试剂：25.0ｇ白色苯酚于500ml 三角瓶，加225ml 浓硫酸，混匀，瓶口松松的加塞，于沸水浴加热６小时。
试剂冷却后可能会有结晶，用时需重新加热溶解，但不可加水。
必须贮于玻塞棕色瓶中，严防吸潮。
３.４NO ３－－Ｎ标准溶液：取0.1805ｇ120℃烘干2ｈ的KNO ３溶解并定容于250ml ，此为100mg ·L -1，取此液20ml ，定容于200ml ，为10mg ·L -1标准液。
３.５其它试剂：１：１NH ４OH ；AgSO 4；MgCO ３ ４ 操作步骤４.１提取：称取新鲜土样50克于500ml 三角瓶，加250ml 饱和硫酸钙（或风干土样５ｇ，加30ml 饱和硫酸钙），加塞，于震荡机上震荡１０分钟，（24℃，150r ·min －１），澄清10分钟后，过滤，将最初的２～３ｍｌ滤液弃去。
同时做空白。
４.２吸取滤液10ｍｌ于蒸发皿中，加0.05gCa ＣO ３，水浴加热，蒸干后不要继续加热。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
土壤硝态氮的测定
A 紫外分光光度法
1、方法提要
土壤浸出液中的NO-，在紫外分光光度计波长210n m处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH、CO2-、HCO、NO-和有机质等外，吸光度均很小。
将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO2-、HCO的干扰。
NO■■—般含量极少，也很容易消除。
因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NQ「的含量。
待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。
阳。
是NQ-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因
为NQ-在275nm处已无吸收。
但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A。
中减去，即得NQ-在210nm处的吸光度（△A）。
2、适用范围
本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。
3、主要仪器设备
紫外—可见分光光度计；
石英比色皿；
往复式或旋转式振荡机，满足180r/min ±20r/min 的振荡频率或达到相同效果；
塑料瓶：200mL。
4、试剂
溶液(1 : 9):取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。
氯化钙浸提剂[c(CaCI 2)=・L-1]:称取2.2g氯化钙(CaCI? 化学纯) 溶于水中，稀释至1L。
硝态氮标准贮备液[p (N)=100mg - L-1]:准确称取0.7217g经105〜110C烘2h的硝酸钾(KNQ，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。
硝态氮标准溶液[p (N)=10mg - L-1]:测定当天吸到硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。
5、操作步骤
称取10.00g 土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20 °C ~25 C振荡30min(180r/min ±20r/min) ，干过滤。
吸取待测液于50mL三角瓶中，加：9 H2SQ溶液酸化，摇匀。
用滴管将此液装入1cm光径的石英比色槽中，分别在210nm和275nm 处测
读吸光值(A210和A275)，以酸化的浸提剂调节仪器零点。
以NQ 「
的吸光值( △A) 通过标准曲线求得测定液中硝态氮含量。
空白测定除不
加试样外，其余均同样品测定。
NQ-的吸光值(△A)可由下式求得：
△A= A 210- A 275 X R
式中R 为校正因数，是土壤浸出液中杂质( 主要是有机质) 在
210nm和275nm处的吸光度的比值。
其确定方法为：
A210是波长210nm处浸出液中NQ-的吸收值(A210硝)与杂质(主要是有机质)的吸收值(A210杂)的总和，即A210= A 210 硝+ A210 杂，得出A210 杂= A 210-
A 210硝。
选取部分土样用酚二磺酸法测得NQ3 —N 的含量后，
根据土液比和紫外法的工作曲线，即可计算各浸出液应有的 值，即可得出A 210杂。
A 275是浸出液中杂质(主要是有机质)在275nm 处的吸收值(因为 NO -在
该波长处已无吸收)，它比A 210杂小R 倍，即A 210杂=R ・A 275,得 出校正因数R=A io 杂/ A 2750
各不同区域可根据多个土壤测定 R 值的统计平均值，作为其他
土壤测试NQ - — N 的校正因数，其可靠性依从于被测土壤的多少， 测定的土壤越多，可靠性越大。
标准曲线的绘制：分别吸取10mg ・L -1NQ 「一N 标准溶液0 ......... ,
用氯化钙浸提剂定容至 50mL 即为0 ............... L 的标准系列溶液。
各 取于50mL 三角瓶中，分别加 1mL1: 9 H 2SQ 溶液摇匀后测 阳。
，计 算A 210对NQ - — N 浓度的回归方程，或者绘制工作曲线。
6、计算结果
土壤硝态氮， mg- kg -1= (N)VD
式中：p (N)—查标准曲线或求回归方程而得测定液中
NQ - — N 的质量浓度，mg- L -1;
V —浸提剂体积，mL(50mL);
D —浸出液稀释倍数，或不稀释则
D=1; m —土壤质量，g 。
7、注释
⑴土壤硝态氮含量一般用新鲜样品测定， 氮反映无机氮含量，则可用风干样品测定。
⑵一般土壤中 NQ -含量很低，不会干扰
A 210 硝 如需以硝态氮加铵态
NQ -的测定。
如果NQ -
含量高时，可用氨基磺酸消除(HNO2+NH2SO3H=N2+H2SO4+H2O) ，它在
210nm处无吸收，不干扰NQ-测定。
⑶浸出液的盐浓度较高，操作时最好用滴管吸取注入槽中，尽量避免溶液溢出槽外，污染槽外壁，影响其透光性。
⑷大批样品测定时，可先测完各液(包括浸出液和标准系列溶
液)的A210值，再测A275值，以避免逐次改变波长所产生的仪器误差。
⑸如需同时测定土壤NH+—N,可选用2 mol • L-1KCI或1
mol • L-1NaCI溶液制备待测液。
但2 mol • L-1 KCI溶液本身在210nm 处吸光度较高，因此同时测定土壤NH+—N和NO「一N时，可选用吸光度较小的1 mol • L-1NaCI溶液为浸提剂。
⑹如果吸光度很高(A > 1时)，可从比色槽中吸出一半待测液，再加一半水稀释，重新测读吸光度，如此稀释直至吸光度小于。
再按稀释倍数，用氯化钙浸提剂将浸出液准确稀释测定。
⑺根据北京和河北石灰性15 个土壤样品的测定结果，校正因
素(R)的平均值为，不同土类的R值略有差异，各地可根据主要土
壤情况进行校验，求出当地土壤的R值。