土壤硝态氮的测量-紫外法
实验7 土壤硝态氮的紫外分光光度法
实验土壤硝态氮的紫外分光光度法根层土壤中硝态氮的含量与植物生长发育有着密切的关系，其测定结果可为合理施肥，肥料规划和估产提供依据。
一.目的要求了解紫外/可见分光光度计的基本结构，掌握用波长选择消除干扰组分的测定技术，用校正因数法测定土壤硝态氮的含量。
二.方法原理用氯化钠溶液提取土壤硝态氮，于紫外分光光度计上分别测量其210和275纳米的吸光度，前者是硝酸根和以有机质为主的杂质的吸收值，后者是以有机质为主的杂质的吸收。
因为275纳米处硝酸根已无吸收，而有机质在275纳米处的吸收值是210纳米处的f倍，故可将A275校正为有机质在210纳米处的干扰吸收，从A210中减去，即得硝酸根在210纳米处得真实吸收值，再利用标准曲线法求得土壤中硝态氮得含量。
三.器皿与试剂1. 紫外、可见分光光度计和石英比色皿。
2. 50毫升容量瓶10个，100和250毫升锥形瓶各4个，漏斗4个，普通试管4支，50毫升胖肚吸管1支，5、10毫升和2毫升刻度吸管各一只，滴管2支。
3. 氯化钠溶液1mol/L: 称取氯化钠58.44克溶于400毫升水中，转入1升容量瓶中，稀释至刻度。
4. 硝态氮标准溶液100µg/ml: 称取于105℃烘制2小时得硝酸钾0.3609克溶于水，转移至500毫升容量瓶中，用水定容。
临用时再稀释至20µg/ml。
5. 硫酸溶液，10％（V/V）四.测定步骤1.待测液制备称取10.00克风干土样于250毫升锥形瓶中，加入50毫升1 mol/L的氯化钠溶液，加塞振荡30分钟，过滤于干净干燥的100毫升锥形瓶中，初液弃去。
同时做试剂空白。
2.标准曲线绘制与测定吸取20µg/ml硝态氮标准溶液0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00毫升分别置入50毫升容量瓶中，用水定容至刻度后，再加入2毫升10％硫酸溶液，摇匀。
浓度分别为0.00、0.20、0.40、0.80、1.20和1.60µg/ml。
土壤硝态氮测定--紫外风光光度计
土壤硝态氮的测定【方法原理】在波长220 nm 处，硝酸盐对紫外线光有强烈的吸收。
溶解的有机质在波长220 nm 及275 nm 处均有吸收，而硝酸盐在275 nm 处没有吸收，从而可以通过测定275 nm 处的吸光度对硝酸盐的吸光度进行校正，校正吸光度A= A220-2A275计算硝态氮的含量,工作范围为N 0.1～3 mg L-1。
【试剂】1）紫外分光光度计和石英比色皿2）容量瓶3）2mol/L KCl：4）【操作步骤】1、浸提：称取风干土样5.00g，放在250mL三角瓶中，加入2mol/L KCl 50mL，用振荡机振荡1h,悬液静置3～5 min放置澄清后，将悬液的上部清液用干滤纸过滤，澄清的滤液收集于干燥洁净的三角瓶中。
2、测定吸取滤液5～20mL（视NO3－—N浓度）置于50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，用1cm石英比色皿分别在220nm、275nm进行比色测定吸光度。
3、标准曲线的绘制分别取20 g/LNO3－—N标准液0、0.5、1、2、3、4、5mL于50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度,浓度分别为0 0.2 0.4 0.8 1.2 1.6g L-1用1cm石英比色皿分别在220nm、275nm进行比色测定吸光度。
硝酸盐标准曲线制定：称取0.7220g于105°C烘箱中干燥冷却后的KNO3于小烧杯中，加入二次蒸馏水溶解，定量转入1000ml容量瓶中，定容，摇匀，即为100u g/ml硝酸盐氮标准溶液。
移取该溶液20.00ml于100ml容量瓶，定容，摇匀，即为20ug/ml硝酸盐氮标准溶液。
分别取20ug/ml 硝酸盐氮标准溶液0、0.5、1、2、3、4、5mL于50ml容量瓶中，加入二次重蒸水，定容摇匀。
用1cm比色皿分别在220nm和275nm处测定吸光度。
用公式：A= A220 -2A275求的校正吸光度。
求此标准曲线方程。
按下式计算硝态氮：硝态氮(mg／kg)=C*V*D／m式中：C为从标准曲线查得的NO3-—N含量：V为比色测定液总体积(mL)；D为分取倍数；m为鲜土样质量(g)。
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的NO-，在紫外分光光度计波长210n m处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH、CO2-、HCO、NO-和有机质等外，吸光度均很小。
将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO2-、HCO的干扰。
NO■■—般含量极少，也很容易消除。
因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NQ「的含量。
待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。
阳。
是NQ-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NQ-在275nm处已无吸收。
但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A。
中减去，即得NQ-在210nm处的吸光度（△A）。
2、适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。
3、主要仪器设备紫外—可见分光光度计；石英比色皿；往复式或旋转式振荡机，满足180r/min ±20r/min 的振荡频率或达到相同效果；塑料瓶：200mL。
4、试剂溶液(1 : 9):取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。
氯化钙浸提剂[c(CaCI 2)=・L-1]:称取2.2g氯化钙(CaCI? 化学纯) 溶于水中，稀释至1L。
硝态氮标准贮备液[p (N)=100mg - L-1]:准确称取0.7217g经105〜110C烘2h的硝酸钾(KNQ，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。
硝态氮标准溶液[p (N)=10mg - L-1]:测定当天吸到硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。
5、操作步骤称取10.00g 土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20 °C ~25 C振荡30min(180r/min ±20r/min) ，干过滤。
吸取待测液于50mL三角瓶中，加：9 H2SQ溶液酸化，摇匀。
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定（紫外分光光度法）（一）方法提要土壤浸出液中的N03-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高的吸光度，而浸出液中的其他物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。
将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-卜、HCO3-的干扰，NO2-一般含量极少，也很容易消除。
因此，紫外分光光度法直接测定N03-的含量。
待测液酸化后，分别在2l0nm和275mm处测定吸光度。
A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。
但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。
（二）适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。
（三）主要仪器设备1、紫外可见分光光度计。
2、石英比色皿。
3、往复式或旋转式振荡机，满足180 r．min-1±20r．min-1的振荡频率或达到相同效果。
4、塑料瓶：200mL。
（四）试剂1、H2SO4溶液(1：9)：取10mI浓硫酸缓缓加入90mL水中。
2、氯化钙浸提剂[c(CaCl2·6H20)=0.01mol·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCL2·6H20)溶于水中，稀释至l L。
3、硝态氮标准贮备液[p(N)=100 ug·mL-1]：称取0.7217g经105～110℃烘2h 的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1 L，存放于冰箱中。
4、硝态氮标准溶液[p (N)=10 ug·mL-1]：测定当天吸取10．00mL硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中，用水定容。
（五）操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50.0mI氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20～25℃振荡30min(振荡频率：180r·min-1±20r·min-1)，干过滤。
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020土壤硝态氮的测定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的NO3-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。
将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-、HCO3-的干扰。
NO2-一般含量极少，也很容易消除。
因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO3-的含量。
待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。
A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。
但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。
2、适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。
3、主要仪器设备紫外—可见分光光度计；石英比色皿；往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果；塑料瓶：200mL。
4、试剂溶液(1：9)：取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。
氯化钙浸提剂[c(CaCl2)=·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCl2·6H2O，化学纯)溶于水中，稀释至1L。
硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg·L-1]：准确称取0.7217g 经105~110℃烘2h的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。
硝态氮标准溶液[ρ(N)=10mg·L-1]：测定当天吸到硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。
5、操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃~25℃振荡30min(180r/min±20r/min)，干过滤。
土壤农化实验：土壤硝态氮测定
土壤中硝态氮的测定
一、实验目的 1.了解紫外分光光度计的使用方法。 2.学习并掌握紫外分光光度法测定土壤中硝态氮的原
理及操作。 二、实验原理
利用硝酸根离子在220 nm处有较强的紫外吸收这一 特性,定量分析了土壤浸提液中的NO-3. 溶解的有机 物在220 nm和275 nm处均有吸收,而NO-3 在275 nm 处没有吸收,因此在275 nm波长处做另一测量,以校 正硝酸盐值. 最低检出浓度是01004 mg/ kg ,测定 上限为41000 mg/ kg ,适合高浓度土样浸提液的高 倍稀释.
以A校= A220-2A275的计算方法求得校正吸光 度. 标准曲线的回归方程为y = 0.252 x -0.0001 , r = 0.9999 ( n = 5) .
5.2 土样的测定
吸取滤液1.0～50 mL (视NO3 - N 的浓度 而定) 置于50 mL比色管中, 用水准确稀释至 刻度, 加1.0 mL 1 mol的盐酸溶液, 测量吸光 度。
五. 操作步骤
土壤浸提液制备 标准曲线 比色测定
5.1 土壤浸提液制备
称取10.0 g充分拌匀的湿土,分别置于250 mL 具塞三角瓶称取 和已恒重的烧杯中(烧杯中土样经烘干、 恒加重10以0.0测m定101 L其三含次湿蒸量馏)水,在,于三振角荡瓶器内上加振0荡.2 1g5CmaSinO,4放, 置30 min后00 ,倾出上清液,用中速或慢速无氮定量滤 纸过滤，澄g充 清的滤液收集在三角瓶中。
三. 实验仪器
• 紫外分光光度计, 振荡器( 振次: 243 V/ min)；50 mL比色管, 恒温干燥箱.
四.实验试剂
1. CaSO4 (分析纯) , 2. 1 mol/ L的盐酸(优级纯) 溶液, 3. 100μg/ mL的硝酸盐氮标准贮备液, 4. 25μg/ mL的硝酸盐氮标准使用液.
土壤硝态氮的测定紫外分光光度法
土壤硝态氮的测定紫外分光光度法土壤硝态氮的测定紫外分光光度法1 范围本标准规定了运用紫外分光光度法测定土壤浸出液中硝态氮的原理、试剂、仪器、分析步骤、结果计算与表示、精密度、质量保证和控制等。
本标准适用于土壤中硝态氮的测定。
本方法对土壤硝态氮的检出限为0.5 mg/kg，定量限为1 mg/kg。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法HJ 634 土壤氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定氯化钾溶液提取-分光光度法NY/T 52 土壤水分测定法NY/T 1377 土壤中pH值的测定3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
3.1吸光度 absorbance光线通过土壤浸出液前的入射光强度与该光线通过土壤浸出液后的透射光强度比值的以10为底的对数。
3.2f值 f value土壤浸出液中的有机物在220 nm波长处的吸光度和在275 nm 波长处的吸光度的比值。
4 原理利用土壤浸出液中硝酸根离子在220 nm波长附近有明显吸收且吸光度大小与硝酸根离子浓度成正比的特性，对硝态氮含量进行定量测定。
利用溶解的有机物在220 nm和275 nm波长处均有吸收，而硝酸根离子在275 nm波长处没有吸收的特性，测定土壤浸出液在275 nm处的吸光度，乘以一个校正因数（f 值）以消除有机质吸收220 nm波长而造成的干扰。
5 试剂除非另有规定，在分析中仅使用分析纯试剂，所用水应符合GB/T 6682中三级水的要求。
5.1 氯化钾浸提液[c(KCl)=1 mol/L]准确称取74.55 g氯化钾置于烧杯中，加入约400 mL水溶解。
溶解后转移到1000 mL容量瓶中定容，摇匀。
5.2 硝态氮标准储备液[ρ(N)=1000 mg/L]精确称取7.2182 g经110℃±5℃烘干2 h的硝酸钾置于烧杯中，加入约50 mL水溶解。
DB12_T512-2014土壤样品中硝态氮的测定方法
ICS 65.020.01B 10DB12/T土壤样品中硝态氮的测定方法Determination of soil nitrate nitrogen天津市质量技术监督局 发布前 言本标准按照GB/T 1.1-2009起草。
本标准由天津市农业科学院提出。
本标准起草单位：天津市农业资源与环境研究所。
本标准主要准起草人：程文娟、潘洁、肖辉。
2014年4月首次发布。
土壤样品中硝态氮的测定方法1 范围本标准规定了采用紫外分光光度比色法测定土壤硝态氮的检测方法。
本标准适用于天津市范围内农田土壤硝态氮的测定。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改稿）适用于本文件。
GB/T 601-2002 化学试剂 标准滴定溶液的制备GB/T 603-2002 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T 6682-2008 分析实验用水规格和实验方法NY/T 1121.1-2006 土壤检测 第1部分：土壤样品的采集、处理和贮存3 测定方法3.1 方法和原理利用土壤溶液中溶解的有机物在220nm和275nm处均有吸收，而硝酸根离子在220nm波长处有吸收，在275nm处没有吸收，通过两次比色测定，进而定量测定出硝酸盐氮含量。
3.2 试剂和材料本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时均指分析纯试剂和GB/T 6682-2008中规定的二级水；所述溶液如未指明溶剂均系水溶液。
试验中所需标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时均按GB/T 601、GB/T 603的规定制备。
3.2.1 氯化钠提取液：c（NaCl）=1mol/L，称取58.44g氯化钠溶于水中，定容至1000mL。
3.2.2 活性炭（不含NO3-）。
3.2.3 硫酸溶液（10%）：1份98% 硫酸（ρ=1.84g/mL）加9份水混合，摇匀,冷却。
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土壤硝态氮的测量-紫外法
2018-1-17
本方法适于测定以1-2M KCl及各种浓度氯化钙、氯化钠、硫酸钠等提取的土壤硝态氮，标液用提取液配制。
要求土壤提取液没有可见的颜色，土壤有机质含量小于5%， 测定范围为1-10ppmNO3-N（溶液浓度）。
不能用乙酸铵、碳酸氢钠等在紫外区有强烈吸收的提取剂；测定硝态氮时，如果提取液氯离子、碳酸盐离子、氢氧根离子等较多，需要酸化处理：取2-3ml标液、滤液于塑料试管中，加1:5（硫酸：水）0.5ml，除去紫外去有吸收的CO2、OH-等的干扰。
如果需要在测定中不包含亚硝态氮，可在测定时加入氨基磺酸（FW.97.09）至其浓度达到0.5-0.8%，以掩蔽亚硝态氮的紫外吸收。
硝态氮的紫外吸收有较为明显的温度效应，样品冷冻后有明显的沉淀效应，需要使样品和标液在同一温度下平衡到室温，充分混匀再测定。
2 提取：称取鲜土10-12g（约10g干土，或者根据用户要求设定水土比，是否测定含水量等），加50ml 1M KCl提取液，25℃震荡30分钟，过滤，检查滤液颜色，没有明显可见颜色样品可进行紫外测定，对有颜色液体，要怀疑其测定精度，提高提取液KCl浓度有利于减少有机质干扰，对样品和标液加适量活性炭可减少颜色干扰。
3、500ppm NO3-N：将 1.8045 g 硝酸钾 (KNO3，F.W. 101.018)溶解到 400 mL水中,定容500 mL。
避光保存。
标准曲线：以500ppm NO3-N 标液按下配制于50ml 容量瓶中，以1M KCl提取液定容。
吸取标液ml 浓度mg/L
0 0
0.1 1
0.3 3
0.5 5
0.75 7.5
4、 测定：在标液与提取液温度接近条件下，以空白调整紫外可见分光光度计基线，测定标液和样品OD220、OD275.
5、计算：以各标液OD220-OD275*2.23与标液浓度做标准曲线，计算未知浓度,*50ml/5g为土壤硝态氮含量（mg/kg）。