MTT法检测抗肿瘤活性

MTT法又称MTT比色法

MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。

其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。

二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。

在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。

它的特点是灵敏度高、经济。

由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水，需被溶解后才能检测。

这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也有损害。

配制方法：通常，此法中的MTT 浓度为5mg/ml。

因此，可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的基培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃避光保存即可。

在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。

注意事项：MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。

在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。

MTT一般最好现用现配，过滤后4℃避光保存两周内有效，或配制成5mg/ml保存在-20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。

我一般都把MTT粉分装在EP管里，用的时候现配，直接往培养板中加，没必要一下子配那么多,尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。

MTT有致癌性，用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌，MTT对菌很敏感；往96孔板加时不避光也没有关系，毕竟时间较短，或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉.配制MTT时用用PBS溶解,也有人用生理盐水配，60℃水浴助溶。

MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法,其检测原理

MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法，其检测原理MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法，其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。

二甲基亚砜能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490 nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。

在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等，它的特点是灵敏度高、经济。

学术术语来源---Bio-gide胶原膜体外复合培养犬骨髓间充质干细胞的软骨分化文章亮点：1 实验先采用全骨髓血培养法培养犬骨髓间充质干细胞，继而采用贴壁筛选纯化，方法简便，所获细胞数量及纯度满意，并在体外成功诱导分化出软骨细胞。

2 实验所采用的细胞支架材料为瑞士Geistlich公司生产Bio-gide胶原膜，这是一种由Ⅰ型和Ⅲ型胶原组成复合材料，分为致密层和疏松层，种子细胞接种在胶原膜的较为粗糙的疏松层，而光滑的致密层在体内实验中朝向关节腔，有利于骨髓间充质干细胞的黏附、生长及向软骨细胞的分化，三维立体培养有助于诱导生成的软骨细胞维持表型。

3 实验显示Bio-gide胶原膜与骨髓间充质干细胞复合培养有良好的生物相容性，但能否体内构建组织工程软骨组织，促进软骨细胞的生长，缺损的软骨组织得到完整的修复，尚待进一步研究。

关键词：生物材料；组织工程软骨材料；膜生物材料；骨髓间充质干细胞；Bio-gide胶原膜；组织工程；股骨头坏死；软骨缺损；种子细胞；国家科学自然基金摘要背景：应用组织工程方法修复股骨头坏死后的软骨损伤应解决的2个关键因素是种子细胞和支架材料。

目的：探讨Bio-gide胶原膜体外与犬骨髓间充质干细胞复合成软骨的可行性。

方法：采用全骨髓血离心法结合贴壁筛选法体外分离培养比格犬骨髓间充质干细胞，观察细胞形态学变化，以细胞表面抗原进行鉴定。

MTT法测定低分子姬松茸多糖体外抗肿瘤活性

水平相平行的原理，立了ＭＴＴ比色法测定细胞活性以来，建应用ＭＴ法对体外培养的肿瘤细胞活性及其药物干预后的Ｔ增殖变化进行检测，其快捷、以简便和少污染等特点受到人们
ＤｅｅｔｎｇｔｅａｉａｅｆｅｔｔｃｉｈｎｔｃｎｅｒｅｆｓｏｆＬＭＰＡＢＴＴｅｈｑｕｅｉｖｉｒＺＨＡＮＧｃｂｙＭｔｃｎｉｎｔｏＣｈｕｎ，１ａ１ｅ．．
（ｎｓｉｕｅＩｔｔｔ
ｏｄｃｎ，ｑｈｅｅｉａｉｅｓｔＱｉｉａ６０２ｃｉａｆｍｅｉｉｅＱｉｉａｒＭｄｅｌＵｎｖｒｉｙ，ｑｈｒ１１４ｈｎ）
肿瘤细胞增殖活性与其生长、润、发、移等生物学行为浸复转及预后密切相关，了提高疗效，讨肿瘤细胞对抗癌药物反为探应的敏感性已受到普遍重视，年来随着对肿瘤细胞周期］近调控认识的不断深入，些学者认为癌症是一类细胞周期疾有病。自１８９３年Ｍｏｍａｓｎ等依据细胞能量代谢与ＤＮＡ合成
ｓｇｎｉｉａｌｉｆｃｎｔｙ．
［ｙｗｒｓＡｇｒｕｌｚｉＭｕｒｌＰｌｓｃｈｒｅＡｎｉｅｐａｔＭＴＴｓａＫｅｏｄ］ａｉｓＢａｅｒｉｏｙａｃａｉｃｌｄｔｎｏｌｓｉｃａｓｙ

微藻硫酸酯化复合多糖的抗肿瘤及免疫调节活性研究的开题报告

微藻硫酸酯化复合多糖的抗肿瘤及免疫调节活性研究的开题报告一、研究背景肿瘤是一种严重威胁人类生命健康的疾病，传统的治疗手段如放疗、化疗等存在一定的局限性和副作用。

因此，寻找一种新的治疗肿瘤的方法变得非常重要。

目前，天然多糖被广泛应用于肿瘤治疗中，其具有良好的生物相容性和生物活性，在调节免疫功能、抗肿瘤、抗氧化等方面具有很强的潜力。

二、研究目的本研究旨在基于微藻硫酸酯化复合多糖的特点，探索其在抗肿瘤和免疫调节方面的活性，为其在肿瘤治疗方面的应用提供理论依据。

三、研究内容及方法1.制备微藻硫酸酯化复合多糖，并对其物理化学性质进行分析。

2.应用MTT法检测微藻硫酸酯化复合多糖的抗肿瘤活性，通过流式细胞仪检测其对细胞周期的影响及细胞的凋亡情况。

3.应用ELISA法检测微藻硫酸酯化复合多糖对小鼠脾细胞和巨噬细胞的免疫调节作用。

四、研究意义和预期结果本研究的预期结果是，通过对微藻硫酸酯化复合多糖的抗肿瘤和免疫调节活性的研究，可以为其在肿瘤治疗中的应用提供理论依据。

同时，本研究可为开发更安全、有效、低毒的抗肿瘤天然产物提供参考。

五、研究进度安排1.文献调研和研究方案设计：1周2.微藻硫酸酯化复合多糖的制备及性质分析：6周3.抗肿瘤活性研究：6周4.免疫调节活性研究：6周5.数据分析和论文写作：4周六、研究经费估算研究所需经费约为50000元，包括材料费、仪器折旧费、文献费、实验费等。

其中，实验费约占经费总额的70%。

七、研究成果及预期发表论文本研究的成果将发表在国内外重要医学期刊上，并申请专利。

同时，将编写研究报告和论文，向相关机构进行汇报。

MTT法检测蕲艾鞣酸体外抗肿瘤的活性

一
２，５二苯基四氮唑溴盐法（ＭＴＴ法）在体外检测不同浓度的蕲艾鞣酸对人肝癌细胞ＨｅｐＧ２的细胞毒性作用。在此基础上通过大孔树脂柱层
析对蕲艾总鞣酸正丁醇部位提取分离，得到５个不同极性的鞣酸馏分，并通过ＭＩＴ法比较不同极性的各提取物对肝癌细胞的抑制活性。结
ｔｒａｓｏｎｉｃｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｍｕｇｗｏｒｔ，ｕｓｉｎｇＭＴＴｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｅｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＣｈｉｎｅｓｅｍｕｇｗｏｒｔｔａｎｎｉｃａｃｉｄｏｎｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｍａｃｅｌｌｓＨｅｐＧ２．Ｏｎｔｈｉｓｂａｓｉｓ，ｎ—ｂｕｔｙｌａｌｃｏｈｏｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅｍｕｇｗｏｒｔｔｎｎａｉｃａｃｉｄＷａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄａｎｄｓｅｐａｒａｔｅｄｂｙｃｏｌｕｍｎｃｈｏｍａｒｔｏｇｒａｐｈｙｏｆｍａｃｏｐｒｏｏｕｒｓｒｅｓｉｎ，ｈａｄｉｆｖｅｄｉｆｅｅｎｒｔｐｏｌａｒｉｔｙｆａｃｒｔｉｏｎｓｏｆｔａｎｎｉｃａｃｉｄｉｎＣｈｉｎｅｓｅｍｕｇｗｏｒｔ，ｎｔａｉ —ｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｅａｂｏｖｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗａｓｄｅｔｅｍｉｒｎｅｄｂｙＭＴｒｓｓａａｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＣｈｉｎｅｓｅｍｕｇｗｏｒｔｔｎｎａｉｃａｃｉｄｉｎｈｉｂｉｔｅｄｐｒｏｌｉｆｅａｔｒｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｍａＨｅｐＧ２ｃｅｌｌｓｌｉｎｅ，ｉｎａｄｏｓｅｎｄａｔｉｍｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒ，ｗｉｔｈｃｅｒｔａｉｎｃｙｔｏｔｏｘｉｃ．

MTT使用讨论总结(附MTS测定方法)

本实验室也有人据此而仅采用眙盼蓝计数法测定细胞增殖程度，做药物对细胞株生长的影响时，我想细胞增殖程度应该是比较重要的指标，怎可马虎行事。

请高手指点迷津！bengbu_bli 用普通血球计数板计数增殖细胞的数量，只要检测的细胞样本数量不是非常大，只要能够数得过来，而且一般来讲，都是熟练者计数的话，应该是比MTT法要准确的多。

据了解，国外许多档次不低的杂志都是认可这种经典或传统计数细胞的方法的。

midas丁香园主任是的，只要idea巧妙有创意，而用于证明他们的方法都是次要的！diandian眙盼蓝、MTT确实不是一个好的方法，国外的许多杂志已不太使用，国内还认可的。

关键是整篇文章的思路和结构，好的idea是很重要的。

我的一个师姐的文章就被提出眙盼蓝、MTT的问题，但最后编委认为整篇文章的思路很好，也就不计较眙盼蓝、MTT的问题了。

实属兴运。

杂志Cancer Research Therapywm_ni丁香园主任国内由于实验条件的问题，应用H3的还是不多，而以MTT为主，以我的经验眙盼蓝计数法误差确实很大，所以不知道bengbu_bli的观点源自何处，另外如果有一个好的idea，如果不能用好的方法去证实，实在是一种遗憾，当然发不发还是要看编辑了。

MTT法原理、步骤以及注意事项

MTT法原理、步骤以及注意事项MTT原理MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。

是一种黄颜色的染料。

MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。

其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。

二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处（也有用570nm波长的，我目前用的都是570nm)测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。

在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。

它的特点是灵敏度高、经济。

缺点：由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水，需被溶解后才能检测。

这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲的有机溶剂对实验者也有损害。

MTT 溶液的配制方法通常，此法中的MTT 浓度为5mg/ml。

因此，可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml 的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃ 避光保存即可。

在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。

实验的时候我一般关闭超净台上的日光灯来避光，觉得这样比较好。

需要注意的是，MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。

在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT 吸光度最好在0-0.7范围内。

MTT一般最好现用现配，过滤后4℃避光保存两周内有效，或配制成5mg/ml 保存在-20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。

3种中药多糖抗肿瘤作用的研究

3种中药多糖抗肿瘤作用的研究马秀梓;孙润广;李佳媚;李哲涛;乔进京【摘要】实验采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法测定枸杞多糖、当归多糖和女贞子多糖对体外肿瘤细胞的增殖抑制作用．分别使用枸杞多糖、当归多糖和女贞子多糖作用于人白血病K562细胞，经不同浓度和不同时间作用后，采用MTT法测定3种多糖的体外抗肿瘤活性．结果显示：3种中药多糖都具有抗肿瘤活性，在一定范围内，随着多糖浓度的增加使得肿瘤细胞的抑制率增加，女贞子多糖在作用48h后对K562的抑瘤效果较枸杞多糖和当归多糖显著．%The MTT assay is used to study the inhibition rate of cell proliferation about Lycium barbarum Polysaccharide (LBP), Angelica Polysaccharide (APS). Ligustrum lucidum Polysaccharide(LLPS)act on tumor cells in vitro. Using the different dose and different effect time of LBP,APS.LLPS act on K562. Inhibition rate of cell proliferation were studied by MTT assay. The results indicate that three Chinese medicine polysaccharides could inhibit cancer cells. In a certain range, the inhibition of cell character depended on dose. LLPS in 48h owns the higher significant inhibitory effect of tumor on K562 than LBP and APS.【期刊名称】《陕西师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(040)006【总页数】4页(P77-80)【关键词】枸杞多糖;当归多糖;女贞子多糖;抗肿瘤【作者】马秀梓;孙润广;李佳媚;李哲涛;乔进京【作者单位】陕西师范大学物理学与信息技术学院,陕西西安710062;陕西师范大学物理学与信息技术学院,陕西西安710062;陕西师范大学物理学与信息技术学院,陕西西安710062;陕西师范大学物理学与信息技术学院,陕西西安710062;陕西师范大学物理学与信息技术学院,陕西西安710062【正文语种】中文【中图分类】R273中药多糖以其抗肿瘤活性、无毒副作用等优点备受关注.到目前为止，已发现100多种中药中的多糖化合物具有免疫促进作用，如香菇多糖、枸杞多糖、茯苓多糖、黄芪多糖等［1］.本实验的研究材料枸杞系落叶灌木，果实枸杞子味甘、性平，有滋肾补髓、养肝明目和祛风的作用，是传统滋补中药［2］.研究表明，枸杞多糖（Lycium barbarum Polysaccharide，LBP）可抑制人肝癌［3］、宫颈癌［4］和白血病［6］等多种肿瘤细胞的生长.女贞子是木犀科植物女贞子的干燥成熟果实，性味甘、微苦、凉，归肝、肾经，具有滋补肝肾、明目乌发等功能［6］.有研究表明女贞子多糖（Ligustrum lucidum Polysaccharide，LLPS）具有提高机体免疫能力，调节机体阴阳平衡的作用［7］.当归为伞形科植物当归的干燥根，味甘、辛、性温，有补血活血、调经止痛、通肠通便之效，用于血虚萎黄、眩晕心悸、月经不调、肠燥便秘等症状［8］，当归多糖（Angelica Polysaccharide，APS）能抑制肿瘤增殖，是诱导肿瘤细胞凋亡或分化的天然诱导剂［9－11］.四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法简单、快速，便于大规模进行药物敏感试验，人为误差较小而且较精确，没有放射性污染，广泛用于临床前抗癌药物筛选研究，并已开始用于肿瘤细胞的药物敏感性检测［12］.本文将枸杞多糖、当归多糖、女贞子多糖的体外抑瘤活性采用MTT方法进行分析研究，旨在为中药多糖的进一步有效抗癌提供理论和实验依据.枸杞多糖（LBP）、当归多糖（APS）、女贞子多糖（LLPS）以水提醇沉法提取制备.二甲基亚砜（DMSO）为国产分析纯，实验用水均为三次蒸馏水，K562细胞陕西师范大学生命科学学院，RPMI1640培养基美国GIBCO公司，新生小牛血清杭州四季青生物工程有限公司，四甲基偶氮唑盐（MTT）美国Amresco公司. HH·CP－01W型二氧化碳细胞培养箱上海博迅实业有限公司医疗设备厂，TH4－200倒置显微镜日本奥林巴斯有限公司，DG5032型酶联免疫检测仪南京华东电子集团医疗设备有限公司，TDL80－2B小型离心机上海安亭科学仪器厂，CF16RX高速冷冻离心机日本日立公司.1.3.1 细胞培养 K562细胞培养于RPMI1640＋10%（体积分数）新生小牛血清和双抗（青、链霉素，100U／mL）的完全培养基中.在5%CO2、37℃培养箱及饱和水蒸气条件下常规培养及传代，使用对数期细胞进行实验［2］.1.3.2 细胞增殖实验（1）K562细胞的增殖实验：取对数生长期的K562细胞，调节细胞密度为1×105个／mL.分为空白组、对照组和实验组.每组设6个复孔.接种于96孔板，每孔加100μL细胞，空白组加等体积完全培养基.培养24h后，实验组分别加入 800、400、200、100、50、25μg／mL 的LBP100μL；空白组和对照组加同体积1640培养基.培养24h、48h、72h后加入 MTT（5mg／mL）20μL／孔，37℃孵育4h后离心弃上清.加DMSO 200μL／孔，避光振荡10min，使结晶物充分溶解，用酶联免疫检测仪在波长492nm处测量各孔的吸光度（OD 值），实验重复3次，计算细胞相对生长抑制率：（2）K562细胞的增殖实验：按（1）方法检测APS对K562细胞的生长抑制作用，浓度范围0～800μg／mL.按（1）方法检测LLPS对K562细胞的生长抑制作用，浓度范围0～800μg／mL.1.3.3 统计分析方法所得数据用统计软件SPSS进行F检验.LBP对K562细胞的增殖抑制作用结果见表1和图1，LBP对人白血病K562细胞有明显的抑制作用.在0～200μg／mL范围内，呈现时间－计量依赖方式抑制白血病细胞的生长（P＜0.05或P＜0.01）；在200～800μg／mL的范围内，随LBP质量浓度的增大，细胞生长抑制程度逐渐减小.APS对K562细胞的增殖抑制作用结果见图2和表2，APS对人白血病K562细胞有明显的抑制作用.在0～400μg／mL范围内，LBP质量浓度越大对细胞生长的抑制程度越大；在400～800μg／mL的范围内，随APS质量浓度的增大，细胞生长抑制程度逐渐减小（P＜0.05或P＜0.01）；随着作用时间的增长，APS对细胞的抑制效果依次是：抑制率48h＞抑制率24h＞抑制率72h（P＜0.05或P＜0.01）.LLPS对K562细胞的增殖抑制作用结果见图3和表3，LLPS对人白血病K562细胞有明显的抑制作用.LLPS质量浓度越大对细胞生长的抑制程度越大，呈现计量依赖方式抑制白血病细胞的生长（P＜0.05或P＜0.01）；随着作用时间的增长，LLPS对细胞的抑制效果依次是抑制率48h＞抑制率24h＞抑制率72h（P＜0.05或P＜0.01）.对于3种多糖作用于K562细胞的实验发现，LBP在0～200μg／mL浓度范围内，随浓度的增大细胞抑制率逐渐增大，随作用时间的延长细胞抑制率增大，抑制率72h＞抑制率48h＞抑制率24h；APS在0～400μg／mL浓度范围内，随浓度的增大细胞抑制率逐渐增大，作用48h时抑制率最大，抑制率48h＞抑制率24h＞抑制率72h；LLPS随浓度的增大一直呈计量依赖型抑制细胞生长，作用48h时抑制率最大，抑制率48h＞抑制率24h＞抑制率72h.LLPS对K562的抑制效果明显强于LBP和APS.单铁英研究表明肿瘤细胞都有其自身的生长规律，一般G0／G1期时间最长，故G0／G1期细胞比率最高，而G2／M期时间较短，处于G2／M期细胞比率最低.LBP作用的肿瘤细胞被阻止于G2／M期，更多的细胞损伤过重，超过了自身修复能力，难以通过G2期限制点而发生凋亡［16］.华自森研究APS对K562细胞的作用，流式细胞术显示处于细胞静止期（G0／G1期）的肿瘤的一般治疗手段就是放疗、手术和化疗，但放化疗的毒副作用及手术治疗的费用昂贵，使得肿瘤治疗效果并不理想［3，14］.因此，从具有滋补功效的中草药中开发具有抗肿瘤作用的活性成分已成为目前抗肿瘤研究的热点［18］.枸杞具有益气养血扶正之力，当归具有补血通经活络之气，女贞子具有滋阴降火解毒之效.有研究表明，临床上女贞子常与其他中药配伍，用于治疗肿瘤及改善化疗后的白细胞减少等症状［19］.本实验通过MTT法对LBP、APS、LLPS作用后的K562进行了研究，发现这3种多糖对肿瘤细胞均表现出较强的抑制活性，这为今后多种中药多糖在保健或药物方面的开发提供一定的参考价值.3种中药多糖联合作用于同类细胞的作用机制及有效成分的筛选还有待于进一步研究.【相关文献】［1］吴晓忠，罗素琴，刘乐乐，等.中药多糖抗肿瘤作用的研究进展［J］.内蒙古医学院学报，2009，31（1）：81-83.［2］刘锡建，肖稳发，曹俭，等.枸杞多糖的研究进展［J］.上海工程技术大学学报，2008，22（4）：299-302.［3］黄霞，肖丙秀，赵军伟，等.枸杞多糖对人肝癌 HepG2生长的影响及其分子机制［J］.中草药，2010，41（9）：1501-1503.［4］梁淑轩，马二红，许成燕，等.枸杞多糖的硒化及其对人宫颈癌细胞的抑制作用［J］.食品科学，2010，31（9）：243-246.［5］崔涛，李梅君，赵艳春.枸杞多糖对K562白血病细胞抑制作用及凋亡的研究［J］.锦州医学院学报，2006，27（1）：30-34.［6］李璘，邱荣丽，程革，等.女贞子多糖抗肿瘤作用研究［J］.中国药理学通报，2008，24（12）：1619-1622.［7］阮红，吕志良.女贞子多糖免疫调节作用研究［J］.中国中药杂志，1999，24（11）：691-693.［8］韦玮，龚晓苏，张铁军，等.当归多糖类成分及其药理作用研究进展［J］.药物评价研究，2009，32（2）：130-134.K562细胞数量增加，增殖活跃的细胞数量减少，表明APS能阻止K562细胞由 G0／G1 向S，G2＋M 移行［9］.卢晓沅对LLPS的抗肿瘤研究表明可能的机理是对G0G1期细胞起细胞毒作用，在G2M期抑制细胞增殖［17］.本实验研究发现，在一定的浓度下，APS和LLPS在作用48h后细胞的抑制率最大，而LBP在作用72h后细胞的抑制率最大，这可能与3种中药多糖关于细胞周期的抗癌机制有关.［9］华自森，王建伟，宋姝丹，等.当归多糖对K562白血病细胞JAK2，STAT3表达和活化的影响［J］.解剖杂志学，2009，32（1）：8-11.［10］曾炜炜，钱江潮，周海霞，等.当归多糖诱导K562白血病细胞凋亡的实验研究［J］.现代中西医结合杂志，2007，16（2）：165-167.［11］宋姝丹，王建伟，王亚平，等.当归多糖对K562细胞增殖抑制及定向红系细胞分化的实验研究［J］.重庆医科大学学报，2008，33（1）：1-5.［12］司徒镇强.细胞培养［M］.北京：世界图书出版公司，2007：1-362.［13］齐浩，艾霞.AFM观察稳恒磁场对细胞表面精细结构的影响［J］.电子显微学报，2009，28（2）：150-156.［14］郝玉栓，袁征，单铁英，等.枸杞多糖对实验性食管癌大鼠食管癌细胞的生长抑制作用［J］.职业与健康，2010，26（22）：2601-2602.［15］蒋艳，姜孝新.枸杞多糖对肝癌Hca-F荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及研究［J］.肿瘤药学，2011，1（4）：391-394.［16］单铁英，赵如同，杨书良，等.枸杞多糖对人肝癌细胞Bel-7402的抑制作用及凋亡的研究［J］.时珍国医国药，2010，21（8）：1928-1929.［17］卢晓沅，陈志良，王春霞.女贞子化学成分及其药理作用研究概况［J］.中药材，2006，29（6）：625-629.［18］黄文书，杨海燕，武运，等.枸杞多糖的提取及体外抗肿瘤作用的研究［J］.中国食品与营养，2008（5）：38-40.［19］万年青.贞灵饮对肿瘤化疗患者生活质量及免疫功能的影响［J］.浙江中医杂志，2007，42（5）：292-293.［20］吕金超，宋慧，苏玲，等.4种真菌粗多糖提问抗肿瘤作用研究［J］.安徽农业科学，2010，38（13）：7170-7161.［21］朱彩平，张声华，肖军霞.枸杞多糖诱导人宫颈癌 Hela细胞凋亡的形态学研究［J］.食品科学，2010，31（19）：329-334.［22］崔晓燕，罗琼，杨明亮，等.枸杞多糖对人宫颈癌细胞生长及细胞凋亡影响［J］.中国公共卫生，2006，22（12）：1411-1412.［23］季宇彬.中药多糖的化学与药理［M］.北京：人民卫生出版社，2005. ［24］徐小平，李新民.中药方剂药理学［M］.北京：军事医学科学出版社，2010.。