亲子鉴定DNA提取标准操作规程
做亲子鉴定怎样收罗合格样本
做亲子鉴定如何采集合格样本DNA亲子鉴定所有人体有细胞核的细胞都可以用来进行鉴定。
其中最常用的样本是血痕，带毛囊的毛发，口腔粘膜细胞(口腔拭子)等，其它检材如精斑，混合斑，肌肉，牙齿，骨骼，甚至胎儿羊水等都可以采用。
采集口腔拭子注意事项：避免用手触及棉签，采集前可先用清水轻轻漱口。
您可在药店购买医用消毒棉签，每人至少需要提取4根棉签。
具体步骤：1、准备一张干净的白纸;2、取第一根棉签(手不要碰触脱脂棉部位)，伸进口腔，紧靠左侧脸颊内侧来回刮拭30次(不时旋转棉棒)，需充分接触口腔粘膜。
取出棉签，放在白纸上自然晾干2小时;3、取第二根棉签，在右侧口腔内侧来回刮拭30次，放在同一张白纸上，自然晾干2小时;4、将第三根棉签在左、右两侧各刮拭15次，放在同一张白纸上，同上自然晾干;5、做好标记，用白纸包好，放入信封中;6、重复上述步骤，提取另一人的口腔粘膜上皮细胞，用白纸包好后标记清楚，放入另一信封中。
注意：请不要将两人的棉签混淆!采集血痕注意事项：滴在医用纱布上的血痕需要阴干，不能加热或阳光照射!样本做好标记后，分别存放在纸制信封中。
准备事项：清洁双手，医用纱布，采血针(或大头针)，纸制信封。
具体步骤：1. 在药店购买医用消毒纱布和医用酒精，准备纸制信封和纸笔;2. 消毒采血部位后，用采血针刺指尖或耳垂等身体部位，(如果孩子较小可采脚后跟)挤压取5滴血，每滴血在纱布上散开后约小手指盖大小，如果5滴血斑滴在一起，要有1元硬币大小，血斑渗透2-3层纱布;如果使用干净的面巾纸采血痕，取5滴，每个血痕渗透三层纸面比黄豆略大亦可。
3. 将血纱布阴干，作好标记，如标记样本身份(父亲血、孩子血)，记录样本采集日期。
4. 注意将不同的样本单独放置，不能相互接触，可以放入不同的纸信封中，信封上标记清楚。
采集带毛囊的毛发注意：不要触及毛发的毛囊部位，就是您看到的毛发根部的白色物质!采集毛发时注意清洗双手。
保证样本与信封上标记的身份一致。
DNA提取实验耗材质检的标准操作程序
DNA提取实验耗材质检的标准操作程序
一、目的和范围
本标准操作程序适用于DNA提取实验耗材质检过程，旨在确保实验耗材的质量和稳定性，保证实验结果的准确性和可靠性。
二、主要步骤
1. 准备工作：
- 所需耗材：DNA提取试剂盒、离心管、显微离心管等。
- 检查实验耗材的包装是否完好，无污染和损坏。
2. 样品制备：
- 根据实验要求，选择适当的样品进行DNA提取。
- 样品应严格按照规定的操作程序进行采集和处理，避免污染和损害。
3. 耗材准备：
- 请先仔细阅读并按照实验耗材的使用说明书操作。
- 检查实验耗材的标签和标识是否与需要使用的样品和试剂相
匹配。
4. 实验操作：
- 按照实验耗材的使用说明书进行实验操作，严格按照操作步
骤和时间控制进行操作。
- 操作过程中应注意实验室的清洁和卫生，并避免交叉污染。
5. 结果记录：
- 按照实验要求和操作规范记录实验结果，并确保结果的准确
性和完整性。
三、注意事项
1. 在操作过程中应佩戴适当的个人防护装备，包括实验手套、
口罩等。
2. 严格遵守实验室的安全操作规范，确保个人和实验室的安全。
3. 实验耗材使用后，应按照实验室废弃物处理规定进行处理。
以上为DNA提取实验耗材质检的标准操作程序，希望能够对您的实验工作有所帮助。
如有任何疑问，请随时咨询。
DNA抽提的操作步骤
DNA抽提的操作步骤试剂准备：蛋白酶K、白细胞裂解液、苯酚、氯仿、无水乙醇、70%乙醇1.从冰箱取出冰冻的白细胞，将编号和姓名写在登记本上。
待白细胞融化后，向管内加入5ml白细胞裂解液和50ul蛋白酶K（20mg/ml）。
将管内液体摇匀，或者借助移液枪反复吹打混匀。
然后将管子放入60℃水浴锅内，过夜（可以根据孵育的时间长短适当调整温度）。
在水浴的过程中，每隔2-3小时将试管震荡摇匀一次。
2.把水浴锅内的试管取出，将其中的液体转移到15ml试管内（15ml的试管事先做好标记），并依次向试管内加入等体积（即5ml）的酚-氯仿，然后将盖子拧紧。
轻轻上下颠倒混匀（20次左右），然后离心3000rpm，15min。
离心时将离心机的温度调至室温，温度过低会导致有机溶剂凝固。
离心结束后，可以看到试管内的液体分为三层，上层为水相，中间为变性的蛋白质，下层为有机溶剂（酚氯仿）。
3.然后用钝口Tip吸出上层水相转移到干净的试管中（注意：将1ml的Tip尖端减去2-3mm即可得到钝口的Tip，在吸取上层水相的过程中要尽量避免混入蛋白相，动作要缓慢）多分几次转移），然后再加入等体积的酚氯仿，拧紧盖子，颠倒混匀，离心3000rpm，10min。
4.再次用钝口Tip把上层水相转移到干净的试管中，然后向试管内加入2倍体×2），拧紧盖子，缓慢颠倒，积的无水乙醇（无水乙醇的体积=V所吸出的上清的体积即可看到絮状的DNA沉淀析出。
（如果抽提的数量较少，可以将管子放到Cold Room，等数量多了再一起进行下面的操作）5.用黄色Tip把白色絮状的DNA沉淀挑出来，放到70%乙醇（预先准备0.5ml的小管子，加入400ul70%的无水乙醇，洗涤用）中洗涤，重复两次。
6.最后用黄色Tip将DNA沉淀挑出，将DNA连同枪头一同打到1.5mlEP管中。
敞开盖子，室温放置直到乙醇完全挥发，向EP管内加入400ulTE，用Tip头反复吹打，使DNA完全溶于TE，得到DNA溶液。
亲子鉴定DNA提取标准操作规程
DNA提取标准操作规程1. 目的：规范不同检材的DNA提取操作程序，确保DNA质量，保证STR分型结果准确性。
2. 原理：Chelex-100 是一种由苯乙烯、二乙烯苯共聚体组成的化学螯合树脂，含有成对的亚氨基二乙酸盐离子，可螯合多价离子，特别是对高价金属离子有很高的亲和力和螯合作用。
在低离子强度、碱性及煮沸的条件下，可以使细胞膜破裂，并使蛋白质变性，通过离心除去Chelex颗粒，使其结合的物质与DNA 分离。
磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞，从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面，而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。
反应一定时间之后，再在磁场作用下，使磁性颗粒与液体分开，回收颗粒（即磁珠-DNA 混合物），再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。
3. 操作者：具有法医物证检验资格的广西区妇幼司法鉴定所技术人员。
4. 标本：5％EDTA抗凝全血、8-10ml胎儿羊水、5％EDTA抗凝脐血、FTA纸血斑、口腔拭子、5-10根带毛囊的毛发、绒毛细胞。
5 试剂：5.1 试剂的厂家及规格：5.1.1 DNA抽提试剂 Chelex-100 伯乐公司（Bio-Rad Laboratories, Inc. CA U.S.A）。
5.1.2 DNA抽提试剂 Promega PP18或PP21 DNA System抽提试剂盒。
5.1.3 DNA抽提试剂口腔棉签制备基因组DNA试剂盒（G&T，U.S.A）5.1.4 无水乙醇分析纯5.1.5 异丙醇分析纯5.1.6 无菌的超纯水由实验室技术人员制备。
5.2 试剂的配制：5.2.1 5％Chelex-100的配制：称取5克粉状Chelex-100于试剂瓶中，加入灭过菌的超纯水至100ml。
5.2.2 灭菌超纯水的制备：用干净的试剂瓶装超纯水1升左右，经121℃灭菌30分。
6 仪器及设备：6.1 生物安全柜。
6.2 高速离心机。
6.3 超速冷冻离心机。
DNA提取步骤中文版
一DNA的抽提QIAGEN试剂盒。
1 标记1.5mlEP管吸取20ul蛋白酶K加入1.5mlEP管底部。
2 加入200ul血清至1.5mlEP管。
若血清不足200ul可加适量PBS补充。
余血清-20℃保存3 加200ul缓冲液AL至样品管震荡混匀15s。
4 56℃孵育10min。
5 稍微离心将EP管壁上的液体离心下去。
6 加200ul无水乙醇至样品管中震荡混匀15s稍微离心。
7 混合液转移至QIAamp螺旋住置于2ml收集管上小心勿沾湿边缘。
加样器垂直于螺旋住将混合液慢慢加至滤膜中间。
关盖标记8000rpm离心1min。
再将QIAamp螺旋住转移至一个清洁的2ml收集管内弃含滤液的收集管。
8 打开QIAamp 螺旋柱加入500ul缓冲液AW1勿沾湿边缘。
关盖8000rmp离心1min。
再将QIAamp柱转移至一个清洁的2ml收集管内弃含滤液的收集管。
9 打开QIAamp柱加入500ul缓冲液AW2勿沾湿边缘。
关盖全速12000rpm离心3min。
10 标记1.5ml离心管将QIAamp柱置于一个清洁的1.5mlEP管弃含滤液的收集管。
打开QIAamp柱加入50ul缓冲液AE。
室温孵育3min。
12000rpm离心1min。
继续下一步实验操作或-20℃保存。
二目的片段的扩增第一轮PCR 反应体系30ul要有一个阳性对照和一个阴性对照n个标本10×Buffer 3n ul dNTP200ul/ml 3n ul primer 上游引物0.3n ul 下游引物0.3n ul Taq酶0.5n ul H2O 20n ul 模板DNA 3 ul 反应条件94℃1min 94℃20sec 55℃20sec 72℃1min20sec 反应35个循环注意配体系时先配总反应体系混匀分装后再加标本一管一枪头。
防止污染。
配置体系要在超净台内操作。
4.第二轮PCR 反应体系50ul取第一轮PCR产物另加一空白管做阴性对照即有二个阴性对照若出现污染可以据此判断是那一轮PCR污染。
DNA亲子鉴定采样取样的方法步骤
DNA亲子鉴定采样取样的方法步骤DNA亲子鉴定检测的样本包括：血痕、口腔粘膜、带毛囊的毛发。
采样前60分钟不要进食，以免混入食物的DNA，也不要刷牙或大量饮水。
采样时应尽量按要求充分采集、风干(自然风干，非电吹风吹干或高温烘干)，防止样体采量不足或污染。
血痕采集用针轻刺皮肤表面（手指尖、耳垂、脚后跟以及身体表面任何部位），待血流出时，用准备好的纱布或则餐巾纸轻轻擦拭，在其表面留下3-4个如同黄豆大小的血印即可。
口腔粘膜采集从药店购买单头消毒棉签，每人三根。
拿起一根棉签伸进口腔在脸颊内侧的肌肉壁上来回刮，让棉头充分湿润，刮拭20下。
第二根在另一侧刮拭20下。
第三根左右各刮拭10下后拿出。
毛发采集准备好一张白纸。
从、睫毛、腋毛等处，拔下至少5根毛发（毛发末端用肉眼可见清晰的毛囊、动作要迅速，最好两根一起拔），用肉眼观察毛发根部是否带有一个半透明的胶囊状物体。
此般毛发至少需要五根。
其他样本采集其他样本比如羊水、骨骼、唾液、肌肉等。
羊水样本提取羊水样本必须去正规的医院，并在有丰富经验的注册妇产科医生的建议和帮助下提取。
以保正孕妇和胎儿的安全。
请医生抽取6毫升羊水样本，用塑料试管封装。
采集父亲、母亲双方的血痕、或则口腔棉签样本。
DNA亲子鉴定采样前的注意事项：采样前60分钟不要进食，以免混入食物的DNA，也不要刷牙或大量饮水。
哺乳期幼婴儿采样前应适量饮水，以防母乳混合污染，饮水后60分钟采样。
同时最好采集母亲样体，以便鉴定时参照，排除母体污染。
采样时请注意手不要触及棉签头，也勿大张嘴医院的化验单检验结果该如何分析？医学知识网()医学检验栏目告诉你/inspection/index.html说话，以免采样人的DNA通过表皮或唾液混入被采集人的DNA中。
最好戴干净的塑料手套和口罩。
并记住在为下一位样品提供者取样时更换手套。
采样时应尽量按要求充分采集、风干(自然风干，非电吹风吹干或高温烘干)，防止样体采量不足或污染。
DNA提取流程及注意事项
DNA提取流程及注意事项一、引言DNA提取是从生物样品中分离纯化DNA的过程，是进行许多分子生物学和遗传学研究的基础。
本文档将介绍一种常见的DNA 提取流程，并提供一些注意事项，以帮助您顺利完成实验并获得高质量的DNA。
二、DNA提取流程以下是DNA提取的一般流程：1. 样品准备：- 样品可以是血液、组织、细胞等，根据不同的样品选择合适的提取方法。
- 样品需要储存在合适的条件下，避免DNA降解。
2. 细胞破碎：- 细胞破碎是提取过程中的重要步骤，可通过机械破碎、化学裂解等方法使细胞膜破裂释放DNA。
- 注意避免DNA受到酶、RNase等的污染，使用无DNase的试剂和消毒工具。
3. DNA纯化：- 使用DNA纯化试剂盒等工具将提取的细胞溶解物中的杂质去除，得到纯净的DNA。
- 注意按照试剂盒说明书进行操作，避免DNA污染和丢失。
4. 测定DNA浓度和纯度：- 使用分光光度计或荧光染料测定DNA的浓度和纯度。
- 确保所提取的DNA浓度足够以满足后续实验需求，同时要保证DNA的纯度高，避免污染影响后续实验结果。
5. 存储DNA：- 将提取得到的纯化DNA储存于冰箱或液氮中，避免降解。
- 根据实验需求将DNA分装储存，并在标签上注明样品信息和储存日期。
三、注意事项在进行DNA提取的过程中，还需要注意以下问题：1. 实验室操作规范：- 实验室内应严格按照相关操作规程进行操作，保证实验环境的洁净和安全。
- 使用一次性手套、口罩等个人防护用品，并定期对实验室进行清洁消毒。
2. 样品处理：- 样品应尽早处理，避免长时间储存导致DNA降解。
- 正确储存样品，在提取前避免样品受到污染。
3. 避免污染：- 实验操作过程中需要保持实验台面、仪器器皿的清洁，避免污染样品。
- 避免与其他DNA样品、霉菌、细菌等可能带来DNA污染的物质接触。
4. 操作技巧：- 注意操作的细节，遵循实验步骤并记录相关数据和观察。
- 在操作过程中要耐心细致，并及时调整实验方案，以保证最终结果的准确性。
DNA测序实验室实验操作标准
DNA测序实验室实验操作标准一、实验前的准备工作1. 实验室环境- 确保实验室干净、整洁，无尘土和杂质。
- 保持实验室温度在18-22℃之间，湿度在40%-60%之间。
- 确保实验室通风良好，必要时开启排风系统。
2. 实验材料与试剂- 提前准备好所需的DNA样本、试剂、仪器设备等。
- 检查试剂的有效期，确保试剂未过期。
- 试剂应储存在适当的条件下，如冷藏或冷冻。
3. 实验仪器与设备- 检查仪器设备是否正常工作，如PCR仪、测序仪、离心机等。
- 确保仪器设备清洁，避免影响实验结果。
二、DNA提取与纯化1. DNA样本处理- 根据样本类型，选择合适的DNA提取方法，如酚-氯仿法、柱式提取法等。
- 严格按照提取试剂盒的说明书操作，确保提取效果。
2. DNA纯化- 采用乙醇沉淀或柱式纯化方法，去除杂质和残留的试剂。
- 注意操作过程中避免DNA降解，确保DNA的完整性。
三、PCR扩增1. 配置PCR反应体系- 根据实验需求，计算并配置PCR反应所需的试剂和模板DNA。
- 确保PCR反应体系中无DNA降解酶和其他杂质。
2. PCR扩增- 设置合理的PCR扩增程序，包括预变性、变性和延伸等阶段。
- 进行PCR扩增时，注意控制循环次数，避免非特异性扩增。
3. 电泳分析- 扩增结束后，取适量PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。
- 观察并记录电泳结果，判断扩增产物是否符合预期。
四、DNA测序1. 测序反应- 根据测序试剂盒的说明书，配置测序反应体系。
- 将PCR产物与测序试剂混合，进行测序反应。
2. 测序仪器操作- 按照测序仪器的操作手册，进行测序数据的收集。
- 注意测序过程中避免样本污染和仪器故障。
3. 测序数据分析- 使用适当的生物信息学工具，对测序数据进行分析。
- 注意识别和纠正测序错误，如插入、缺失和替换等。
五、实验记录与结果报告1. 记录实验数据- 详细记录实验过程中的各项参数，如试剂浓度、仪器型号等。
- 记录实验结果，包括PCR产物大小、测序峰图等。
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DNA提取标准操作规程1. 目的：规范不同检材的DNA提取操作程序，确保DNA质量，保证STR分型结果准确性。
2. 原理：Chelex-100 是一种由苯乙烯、二乙烯苯共聚体组成的化学螯合树脂，含有成对的亚氨基二乙酸盐离子，可螯合多价离子，特别是对高价金属离子有很高的亲和力和螯合作用。
在低离子强度、碱性及煮沸的条件下，可以使细胞膜破裂，并使蛋白质变性，通过离心除去Chelex颗粒，使其结合的物质与DNA 分离。
磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞，从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面，而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。
反应一定时间之后，再在磁场作用下，使磁性颗粒与液体分开，回收颗粒（即磁珠-DNA 混合物），再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。
3. 操作者：具有法医物证检验资格的广西区妇幼司法鉴定所技术人员。
4. 标本：5％EDTA抗凝全血、8-10ml胎儿羊水、5％EDTA抗凝脐血、FTA纸血斑、口腔拭子、5-10根带毛囊的毛发、绒毛细胞。
5 试剂：5.1 试剂的厂家及规格：5.1.1 DNA抽提试剂Chelex-100 伯乐公司（Bio-Rad Laboratories, Inc. CA U.S.A）。
5.1.2 DNA抽提试剂Promega PP18或PP21 DNA System抽提试剂盒。
5.1.3 DNA抽提试剂口腔棉签制备基因组DNA试剂盒（G&T，U.S.A）5.1.4 无水乙醇分析纯5.1.5 异丙醇分析纯5.1.6 无菌的超纯水由实验室技术人员制备。
5.2 试剂的配制：5.2.1 5％Chelex-100的配制：称取5克粉状Chelex-100于试剂瓶中，加入灭过菌的超纯水至100ml。
5.2.2 灭菌超纯水的制备：用干净的试剂瓶装超纯水1升左右，经121℃灭菌30分。
6 仪器及设备：6.1 生物安全柜。
6.2 高速离心机。
6.3 超速冷冻离心机。
6.4 移液器，单道微量移液器（0.5-10 ul单道）、单道微量移液器（10-100 ul单道）、单道微量移液器（100-1000 ul单道）、八道移液器（0.5-10 ul八道）和八道移液器（10-100 ul八道）。
6.5涡旋混匀器。
6.6半导体温控混匀器。
6.7超纯水制造系统。
7 操作程序：7.1 全血或脐血的DNA抽提（Chelex-100法）7.1.1填写“PCR-STR基因扩增实验记录表”。
7.1.2 按照PCR-STR基因扩增实验记录表顺序标记1.5ml EP管，加无菌超纯水980ul。
7.1.3核对血样，用移液器混匀，吸取1.5ul标本于EP 管中（-80℃存放超过一个月的血样取2-3.5ul）。
7.1.4颠倒混匀，12600rpm离心3.5min，弃上清，剩余沉淀约20ul。
7.1.5 加无菌超纯水980ul，颠倒混匀，12600rpm离心3.5min，弃上清，剩余沉淀约20ul。
7.1.6取混匀的5% Chelex-100溶液200 ul于EP管中（吸取时注意先摇匀5% Chelex-100），盖紧EP 管，振荡约15～20sec后，56℃孵浴0.5～2h。
7.1.7 孵浴结束后振荡约15～20sec，99℃孵浴8 min。
7.2羊水或绒毛A抽提（Chelex-100法）7.2.1填写“PCR-STR基因扩增实验记录表”。
7.2.2 按照PCR-STR基因扩增实验记录表顺序标记1.5ml EP管，加无菌超纯水700μl。
7.2.3核对标本，用移液器混匀，吸取300μl于EP 管中。
7.2.4颠倒混匀，12600rpm离心3.5min，弃上清，剩余沉淀约20ul。
7.2.5 加无菌超纯水1000ul，颠倒混匀，12600rpm离心3.5min，弃上清，剩余沉淀约20ul。
7.2.6取混匀的5% Chelex-100溶液200 ul于EP管中（吸取时注意先摇匀5% Chelex-100），盖紧EP 管，振荡约15～20sec后，56℃孵浴0.5～2h。
7.2.7 孵浴结束后振荡约15～20sec，99℃孵浴8 min。
7.2.8 孵浴结束后趁热振荡约15～20sec，12600rpm离心3.5min，上清即为DNA溶液。
7.3 毛发的DNA抽提（Chelex-100法）7.3.1填写“PCR-STR基因扩增实验记录表”。
7.3.2 按照PCR-STR基因扩增实验记录表顺序标记1.5ml EP管，加无菌超纯水980ul。
7.3.3核对血样，用移液器混匀，吸取1.5ul全血于EP 管中（-80℃存放超过一个月的血样取2-3.5ul）。
7.3.4颠倒混匀，12600rpm离心3.5min，弃上清，剩余沉淀约20ul。
7.3.5 加无菌超纯水980ul，颠倒混匀，12600rpm离心3.5min，弃上清，剩余沉淀约20ul。
7.3.6取混匀的5% Chelex-100溶液200 ul于EP管中（吸取时注意先摇匀5% Chelex-100），盖紧EP 管，振荡约15～20sec后，56℃孵浴0.5～2h。
7.3.7 孵浴结束后振荡约15～20sec，99℃孵浴8 min。
7.3.8 孵浴结束后趁热振荡约15～20sec，12600rpm离心3.5min，上清即为DNA溶液。
7.4 血斑的DNA抽提（磁珠法）7.4.1填写“PCR-STR基因扩增实验记录表”。
7.4.2 按照PCR-STR基因扩增实验记录表顺序标记1.5ml EP管，核对样本，7.4.3剪取合适大小的样品（2-3mm2）放置EP管中。
7.4.4加入Lysis Buffer 150ul盖紧盖子70℃孵育30min。
7.4.5室温下，12000rpm离心2min，吸取上清至一新1.5ml离心管中。
7.4.6将漩涡震荡10s，将resin混匀，取7ul resin加入到样品中。
7.4.7高速漩涡震荡样品/Lysis Buffer/resin混合液3秒钟，室温孵育5min，并且每孵育1min震荡3秒。
7.4.8高速漩涡震荡2秒，将离心管放置磁力架，resin与溶液分开（注1）。
7.4.9小心吸弃溶液不要碰到聚集成块的resin（注2）7.4.10加100ul 准备好的Lysis Buffer洗涤，将离心管移出磁力架，高速漩涡震荡2秒。
7.4.11将磁力架再次置于磁力架，将Lysis Buffer吸弃干净。
7.4.12加入100ul准备好的1X Wash Buffer，移出磁力架，高速漩涡震荡2秒立即放回磁力架，吸弃Wash Buffer，连续洗涤3次，最后1次洗涤将Wash Buffer移除干净。
7.4.13将离心管盖子打开，室温下干燥5-20min。
7.4.14加100ul Elution Buffer，盖上盖子漩涡震荡2秒，65℃孵育5min。
7.4.15孵育后，漩涡震荡2秒后再次放入磁力架。
小心吸取DNA溶解液至一新离心管中，保存（注3）。
注1：如果resin不能形成明显的一团与溶液分开，则重新震荡迅速放置磁力架上。
注2：如枪头不小心吸到resin，则轻轻打回再次分离。
注3：DNA可以4℃短期保存或-20、-70℃长期保存。
7.5 口腔拭子的DNA抽提（试剂盒）7.5.1填写“PCR-STR基因扩增实验记录表”。
7.5.2 按照PCR-STR基因扩增实验记录表顺序标记1.5ml EP管。
7.5.3核对标本，将棉签头部（约1.5厘米长）剪短，置于标记好的EP管中。
加入600微升SW A溶液，使棉签浸泡在溶液中。
7.5.4盖紧EP管盖子置振荡器剧烈震荡20秒，使黏附在棉签上的口腔细胞脱落到液体中。
震荡后会出现很多气泡。
7.5.5 60℃温浴10分钟，充分裂解。
7.5.6温浴结束，待冷却到室温后用镊子夹住棉签头，在试管壁上挤压出所吸附的液体后废弃棉签头。
镊子用酒精纸巾擦干净后可直接用于其他样品。
根据不同种类棉签，这时试管中液体体积大约在400到450微升之间。
7.5.7 加入150微升试剂SWB，颠倒混匀数次，透明溶液变成白色浑浊液。
7.5.8 以每分钟13000转离心10分钟，用加样器吸取透明上清液置于另外一干净的EP管。
溶液体积大约在540到600微升之间，会观察到溶液出现浑浊现象。
吸样时注意必须保留管底30到40微升沉淀物，内含细胞残渣和蛋白质沉淀。
7.5.9 在以上取得的溶液中加入400微升异丙醇，颠倒混匀30次使DNA充分沉淀。
这时肉眼看不见丝状DNA沉淀。
7.5.10 以每分钟13000转离心15分钟，小心吸弃上清液，不要接触试管底DNA沉淀。
7.5.11 加入500微升75%乙醇，以每分钟13000离心5分钟。
尽量吸弃上清液。
然后打开EP管盖置室温5分钟，使残留乙醇挥发干净。
7.5.12 加入100微升TE缓冲液。
置室温过夜或65℃小时，使DNA充分溶解。
4℃保存备用，-20℃或-80℃长期保存。
8. 防护8.1 实验过程中须穿上专用的实验服，带帽子和口罩，带一次性的PE手套或无粉橡胶手套。
如果手套破损、刺破、或失去其屏障功能，则应尽快更换。
8.2 实验操作必须在生物安全柜中进行。
8.3 如果不小心被血样溅到皮肤，立即用75％的乙醇擦拭消毒，然后用自来水冲干净。
溅到眼睛，立即用洗眼器清洗。
8.4每天工作前和工作后对实验室进行常规消毒并做好记录：每天工作前生物安全柜和空气用紫外线照射30分钟以上，工作结束后空气用紫外线照射60分钟以上。
8.5衣物污染时，尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理。
发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理。
发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况，确定消毒的程序。
9. 注意事项9.1在实验完毕后实验台面及桌面，实验垃圾放到指定位置，由清洁人员拿走处理。
9.2 在实验完毕后，按实验室清洁消毒程序进行清洁、消毒工作，并填写实验消毒登记表。
9.3在实验工作结束后或取下手套后应立即洗手。
在离开实验室之前应脱下所有的个人防护装备。
9.4 在离开实验室之前应关掉所有仪器的电源并拔下插头（生物安全柜除外）。
10. 参考文献：1)杨本海,刘永忠. Chelex-100一步法快速提取外周血DNA.皖南医学院学报,1999 ,18 (1): 9-10.2).陈辉,刘永波,等.有机酚法和Chelex - 100 法提取不同组织微量DNA 效果比较.郑州大学学报(医学版).2004,6(39):988-991.3).步嵘,王耀平,等.以Chelex 100 为介质抽提DNA.中华病理学杂志.1999 , 5 (28) :379-380.4). Walsh PS , Metzger DA , Higuchi R. Chelex-100 as a Mediumfor simple extraction of DNA for PCR-Based typing fromforensic material . Biotechniques 1991 ,10 :5062513.5). Sepp R , Szabo I , Uda H , et al . Rapid techniques for DNA extraction from routinely processed archival tissue for use in PCR. J Clin Pathol , 1994 ,47 :3182323.11. 本SOP的变动程序：本标准操作程序如须修改或项目增删，须经论证合理并实验验证后，由研究所所长审核签署同意后颁布执行。