药理学-半数致死量(LD50)测定
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药物半数致死量(LD50)的测定
2
0.25
LD50= lg-1 [Xm-i(Σp-0.5)] =lg-1[2.3522-0.0457(3.375-0.5)]
序贯法
取10只小鼠编号、称重 从最大剂量开始给药(尼可刹米0.1ml/10g) ，
观察10min. 若死亡，则下一只小白鼠降低一级 剂量，若没死亡，则用高一级剂量，依次类推， 直至10只小白鼠全死. 记录结果 计算X·R、∑（X·R） 按公式计算尼可刹米的半数致死量
LD50(median lethal dose)：
药物引起半数实验动物死亡的剂量。
治疗指数(therapeutic index TI)：
LD50和ED50的比值，药物安全性指标。
安全范围(margin of safety)：
LD5/ED95的值或 LD5 ~ ED95之间的距离。
LD50 、ED50的意义
-⑧
0 1 1 2.535
LD50=lg-1( C/n ) = lg-1(30.675/11)
= (mg/kg)
注意事项
要对实验动物进行随机化分组 各组药物浓度不能搞错，给药剂量要准
确 注意选择正确的给药部位（腹腔注射），
进针的深浅要一致
实验后处理
列表显示实验数据 统计全班实验结果，计算出普鲁卡因和
实验设计书格式
题目（居中） 设计者（居中） 专业、班别（居中） 指导老师（居中） 1．实验目的 2．立题依据（包括参考文献） 3．实验方案
(1)实验材料 (2)实验分组 (3)观察指标 (4)实验方法与步骤 4．创新点 5．实验结果预测
实验设计书评分标准
1.设计内容为学生原创，有创新性 2.设计依据充分，阐述相关理论知
列表统计P值 按公式计算普鲁卡因的半数致死量 LD50＝lg-1 [Xm-i(Σp-0.5)]
实验普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
DJY
2
测定LD50的方法很多 本实验用的是简化机率单位法
y = a+bx
机 率 单 位 y
对数剂量x
DJY 3
药物的剂量与效应关系
死 亡 数 累 积 死 亡 率
剂量
累 积 死 亡 率 对数剂量
DJY
剂量 机 率 单 位 对数剂量
4
测定药物LD50的设计方法 1.预实验：摸索接近100%和0%死亡的剂量 2.按比例设5-7个剂量组（0.65~0.90） 3.随机分组，动物数不少于10只（小鼠） 4.实验条件均应相等
【注意事项】
1.动物应随机分组
2.各小组的动物标记要统一
3.剂量由小到大，注射量要准。
DJY
9
思考题
1.什么是LD50?
2.测定LD50的根据和意义何在?
DJY
10
【结果与统计】
对数剂量 动物数 死亡率 机率单位 死亡数 (mg/kg) (x) (n) (%) (y) 剂量 1 2 110.8 147.7 2.0445 2.1694
3 4
5
196.9 262.5
350.0
2.2942 2.4191
2.5441
y = a+bx
用直线回归法求 a, b, r
DJY 8
DJY
5
测定LD50的用药设计方法 同一浓度 不同浓度 不同剂量 同一剂量
DJY
6
【方法与步骤】
1.分组：随机分成5个剂量组，每组2只小白鼠。
2.给药：采用不同浓度,同一剂量的方法
0.20ml/10g,腹腔注射，涂上标记
3.观察：用药1小时后,观察小白鼠死亡情况,并记
录各组动物的鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
107853-药理学实验3盐酸利多卡因半数致死量_LD50的测定
小鼠注射量为0.2mL。
小鼠的腹腔注射方法
抓好后将小鼠保持头低位，臀部在高位
给药位置：下腹部，腹中线的左右两侧； 给药方法：先刺入皮下，再将针头以45度角 刺入腹腔内约1cm，切不可过深，注入药液。
4. 观察30min，统计各组小鼠的死亡数（停止呼吸），计
算各组的死亡率。
5.计算LD50
LD50＝lg-1 [Xm－i(Σp－0.5)] ❖ Xm：最大剂量组剂量的对数值。 ❖ i：相邻两组给药剂量（D）对数值之差。 ❖ P：各组动物的死亡率，用小数表示。 ❖ ΣP：为各组动物死亡率的总和。
静脉给药，对中枢神经系统有兴奋和抑制双相作用。 ✓ 血药浓度较低时，出现镇痛和思睡、痛阈提高； ✓ 随着剂量加大，作用或毒性增强，出现肌肉震颤、惊厥昏
迷及呼吸抑制等中毒反应。
❖ LD50的测定方法有很多。如：加权机率单位法 (Bliss 氏法)、寇氏法（Karber氏法）等。
❖ Bliss 法要求剂量按等比级数排列，每组小鼠数相 等，剂量范围接近或等于0~100%死亡率之间，一 般分为5~8个剂量组。
❖ 我国卫生部规定，Bliss法是作为新药LD50测定评 定必须采用的方法。
【实验目的】 1.掌握药物的半数致死量测定方法和计算方法。 2.了解盐酸利多卡因给药后动物所产生的效应。
【实验材料】
❖ 实验动物：小白鼠（昆明种），体重18～22g， ♀♂各半。
❖ 实验器材：电子秤、注射器、小鼠笼。 ❖ 实验药品：盐酸利多卡因（20mg/mL）
C母
D 等容注射量
✓Cm=183.11mg/kg / 10ml/kg=18.311mg/ml
✓每组等比稀释液量=每组动物总重×用药量 =200g×0.1ml/10g=2ml
小鼠的腹腔注射方法
抓好后将小鼠保持头低位，臀部在高位
给药位置：下腹部，腹中线的左右两侧； 给药方法：先刺入皮下，再将针头以45度角 刺入腹腔内约1cm，切不可过深，注入药液。
4. 观察30min，统计各组小鼠的死亡数（停止呼吸），计
算各组的死亡率。
5.计算LD50
LD50＝lg-1 [Xm－i(Σp－0.5)] ❖ Xm：最大剂量组剂量的对数值。 ❖ i：相邻两组给药剂量（D）对数值之差。 ❖ P：各组动物的死亡率，用小数表示。 ❖ ΣP：为各组动物死亡率的总和。
静脉给药，对中枢神经系统有兴奋和抑制双相作用。 ✓ 血药浓度较低时，出现镇痛和思睡、痛阈提高； ✓ 随着剂量加大，作用或毒性增强，出现肌肉震颤、惊厥昏
迷及呼吸抑制等中毒反应。
❖ LD50的测定方法有很多。如：加权机率单位法 (Bliss 氏法)、寇氏法（Karber氏法）等。
❖ Bliss 法要求剂量按等比级数排列，每组小鼠数相 等，剂量范围接近或等于0~100%死亡率之间，一 般分为5~8个剂量组。
❖ 我国卫生部规定，Bliss法是作为新药LD50测定评 定必须采用的方法。
【实验目的】 1.掌握药物的半数致死量测定方法和计算方法。 2.了解盐酸利多卡因给药后动物所产生的效应。
【实验材料】
❖ 实验动物：小白鼠（昆明种），体重18～22g， ♀♂各半。
❖ 实验器材：电子秤、注射器、小鼠笼。 ❖ 实验药品：盐酸利多卡因（20mg/mL）
C母
D 等容注射量
✓Cm=183.11mg/kg / 10ml/kg=18.311mg/ml
✓每组等比稀释液量=每组动物总重×用药量 =200g×0.1ml/10g=2ml
药物半数致死量(LD50)的测定
药物半数致死量(LD50)的测定
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实验 药物半数致死量（LD50） 的测定——序贯法
实验目的
1. 掌握测定药物LD50的药理学意义、序贯法 的实验方法和计算方法；
2.熟悉盐酸普鲁卡因的毒性作用。
实验动物与实验器材
4. 实验结mg/kg C＝∑（R·logD）
R＝剂量组的动物只数
logD＝剂量D的对数值；
N＝实验动物总数＝∑R
注意事项
1. 对实验动物进行随机化分组； 2.各组药物浓度不能混淆； 3.给药剂量及部位要准确,进针的深浅一致；
1. 实验动物： 小白鼠（18-22g），雌雄各半 2.实验器材：
仪器：注射器、鼠笼、函数型计算器 药品：2％普鲁卡因、苦味酸溶液
实验步骤
1. 实验前按表3-6拟定实验的药物剂量，相邻两剂 量按等比安排。相邻两剂量对数差为0.046。
2.每实验组取取小鼠10只，雌雄各半，称重后用 苦味酸标记；
浓度
剂量D （mg/kg）
r＝ 0.046
2.22 ％
2％
1.8 ％
1.62 ％
1.45 ％
合计
表3-6 小鼠半数致死量实验结果
LogD
实验结果
R
R·log D
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
2.347
2.301
2.255
2.209
2.163
3. 先取小鼠1只，腹腔注射第一个剂量即2.2％普鲁 卡因0.1ml/10g，若第一只小鼠用药后未出现死亡， 下一只动物则用高一剂量，如出现死亡，下一只 动物应用低一剂量。在表中记录时，动物死亡用 “＋”表示，未死亡用“－”表示。若在同一剂量中 连续出现“－”两次，则下一次实验结束，最后一 只动物不做实验，但在表格中占一个，用E表示。
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实验 药物半数致死量（LD50） 的测定——序贯法
实验目的
1. 掌握测定药物LD50的药理学意义、序贯法 的实验方法和计算方法；
2.熟悉盐酸普鲁卡因的毒性作用。
实验动物与实验器材
4. 实验结mg/kg C＝∑（R·logD）
R＝剂量组的动物只数
logD＝剂量D的对数值；
N＝实验动物总数＝∑R
注意事项
1. 对实验动物进行随机化分组； 2.各组药物浓度不能混淆； 3.给药剂量及部位要准确,进针的深浅一致；
1. 实验动物： 小白鼠（18-22g），雌雄各半 2.实验器材：
仪器：注射器、鼠笼、函数型计算器 药品：2％普鲁卡因、苦味酸溶液
实验步骤
1. 实验前按表3-6拟定实验的药物剂量，相邻两剂 量按等比安排。相邻两剂量对数差为0.046。
2.每实验组取取小鼠10只，雌雄各半，称重后用 苦味酸标记；
浓度
剂量D （mg/kg）
r＝ 0.046
2.22 ％
2％
1.8 ％
1.62 ％
1.45 ％
合计
表3-6 小鼠半数致死量实验结果
LogD
实验结果
R
R·log D
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
2.347
2.301
2.255
2.209
2.163
3. 先取小鼠1只，腹腔注射第一个剂量即2.2％普鲁 卡因0.1ml/10g，若第一只小鼠用药后未出现死亡， 下一只动物则用高一剂量，如出现死亡，下一只 动物应用低一剂量。在表中记录时，动物死亡用 “＋”表示，未死亡用“－”表示。若在同一剂量中 连续出现“－”两次，则下一次实验结束，最后一 只动物不做实验，但在表格中占一个，用E表示。
半数致死量的测定
寇氏法在实际工作中较常用，计算简便，结果 较准确。
【条件】 1.剂量必须按等比级数（剂量对数按等级数）分组。 2.各组动物数应相等。 3.“反应”应大致呈正态分布。最小剂量组的死亡率 （Pn）应为0%，最大剂量组的死亡率（Pm）应为 100%；如果Pn<20%或Pm>80%用校正公式计算； 如Pn>20%或Pm<80% 用此法计算结果不太准确。 3 Pm Pn 校正公式：lg LD50＝XK－d ( P 4 )
计算结果
铵碘消毒剂对建鲤的半数致死量在95%的置信 区间为：56.079ml/m3—61.572ml/m3。 即铵碘消毒剂使一半建鲤死亡的平均剂量最小 为56.079ml/m3最大为61.572ml/m3，做 出这一推断的置信度为95%。
计算结果
LD5099%的置信区间 Ig-1（lgLD50 2.58SlgLD50） =Ig-1（1.7688 2.58x0.0105）
特别注意
后一动物剂量上升或下降由由前一动物的死 亡或存活决定，从第一只改变算起到最后一 只止，最后的终止号也作为一次实验结果。 若最后一只动物死亡，下降一格画“x”， 以存活计数；若最后用一只动物存活，上升 一格画“x”，以死亡计数。
例题
为测定某试剂的安全性，用序贯法测定此试剂小 白鼠腹腔注射的LD50（mg/kg）,选用1月龄小 白鼠22只，给药的对数剂量应从估计最可能接 近LD50的剂量开始，本例从1.85开始，死亡记 为“+”号，存活记为“-”号。
Xk :最大对数剂量 d：相邻两组对数剂量之差，即相邻剂量比值的对数
也可以直接按照前面的校正公式计算
计算步骤
2、求lgLD50的反对数LD50 3、求lgLD50的标准误SlgLD50 Pi(1 Pi) SlgLD50=d ni 4、求lgLD50的95%的置信区间 Ig-1（lgLD50 ± 1.96SlgLD50）
【条件】 1.剂量必须按等比级数（剂量对数按等级数）分组。 2.各组动物数应相等。 3.“反应”应大致呈正态分布。最小剂量组的死亡率 （Pn）应为0%，最大剂量组的死亡率（Pm）应为 100%；如果Pn<20%或Pm>80%用校正公式计算； 如Pn>20%或Pm<80% 用此法计算结果不太准确。 3 Pm Pn 校正公式：lg LD50＝XK－d ( P 4 )
计算结果
铵碘消毒剂对建鲤的半数致死量在95%的置信 区间为：56.079ml/m3—61.572ml/m3。 即铵碘消毒剂使一半建鲤死亡的平均剂量最小 为56.079ml/m3最大为61.572ml/m3，做 出这一推断的置信度为95%。
计算结果
LD5099%的置信区间 Ig-1（lgLD50 2.58SlgLD50） =Ig-1（1.7688 2.58x0.0105）
特别注意
后一动物剂量上升或下降由由前一动物的死 亡或存活决定，从第一只改变算起到最后一 只止，最后的终止号也作为一次实验结果。 若最后一只动物死亡，下降一格画“x”， 以存活计数；若最后用一只动物存活，上升 一格画“x”，以死亡计数。
例题
为测定某试剂的安全性，用序贯法测定此试剂小 白鼠腹腔注射的LD50（mg/kg）,选用1月龄小 白鼠22只，给药的对数剂量应从估计最可能接 近LD50的剂量开始，本例从1.85开始，死亡记 为“+”号，存活记为“-”号。
Xk :最大对数剂量 d：相邻两组对数剂量之差，即相邻剂量比值的对数
也可以直接按照前面的校正公式计算
计算步骤
2、求lgLD50的反对数LD50 3、求lgLD50的标准误SlgLD50 Pi(1 Pi) SlgLD50=d ni 4、求lgLD50的95%的置信区间 Ig-1（lgLD50 ± 1.96SlgLD50）
普鲁卡因半数致死量_LD50的测定
严格要求，不需要剂量组有0%和100%死亡率，是 目前公认最准确的测定方法。但本法计算繁琐， 故现多采用计算机程序计算。 • 改良寇试法简便而计算较为精确。
1.掌握药物的半数致死量测定的意义、方法、计算过程。 2.了解药物给药后动物所产生的毒性反应及其严重程 度。
• 实验动物：小白鼠50只，体重18～２２g，♀♂各 半。 • 实验器材：计算机、电子秤、注射器、小鼠笼。 • 实验药品：1%普鲁卡因，苦味酸溶液（标记）
根据物质的半致死剂量LD50值，美国科学院把毒性物 质危险划分为五个等级
①“0”：无毒性，LD50>15 g/kg； ②“1”：实际无毒性，5 g/kg<LD50<15 g/kg； ③“2”：轻度毒性，0.5 g/kg<LD50<5 g/kg； ④“3”：中度毒性，50 mg/kg<LD50<500 mg/kg； ⑤“4”：高度毒性，LD50<50 mg/kg
• 2.观察30min统计小鼠死亡数。
• 3. 用改良寇试法和bliss法计算普鲁卡因的LD50 和95%可信限。
抓好后将小鼠保持头低位
• 改良寇试法 • Bliss法
• 基本要求 • 1.反映情况符合或接近对数正态分析。 • 2.相邻两计量比值相等。 • 3.各组动物数相等或相近。 • 4.不要求死亡率包括0%和100%，但二者和最 好再80%~120%范围内。
4.钱之玉：药理学试验方法与指导
•
1、有时候读书是一种巧妙地避开思考 的方法 。20.1 2.1320. 12.13Sunday, December 13, 2020
•
2、阅读一切好书如同和过去最杰出的 人谈话 。07:2 1:1507: 21:1507 :2112/ 13/2020 7:21:15 AM
1.掌握药物的半数致死量测定的意义、方法、计算过程。 2.了解药物给药后动物所产生的毒性反应及其严重程 度。
• 实验动物：小白鼠50只，体重18～２２g，♀♂各 半。 • 实验器材：计算机、电子秤、注射器、小鼠笼。 • 实验药品：1%普鲁卡因，苦味酸溶液（标记）
根据物质的半致死剂量LD50值，美国科学院把毒性物 质危险划分为五个等级
①“0”：无毒性，LD50>15 g/kg； ②“1”：实际无毒性，5 g/kg<LD50<15 g/kg； ③“2”：轻度毒性，0.5 g/kg<LD50<5 g/kg； ④“3”：中度毒性，50 mg/kg<LD50<500 mg/kg； ⑤“4”：高度毒性，LD50<50 mg/kg
• 2.观察30min统计小鼠死亡数。
• 3. 用改良寇试法和bliss法计算普鲁卡因的LD50 和95%可信限。
抓好后将小鼠保持头低位
• 改良寇试法 • Bliss法
• 基本要求 • 1.反映情况符合或接近对数正态分析。 • 2.相邻两计量比值相等。 • 3.各组动物数相等或相近。 • 4.不要求死亡率包括0%和100%，但二者和最 好再80%~120%范围内。
4.钱之玉：药理学试验方法与指导
•
1、有时候读书是一种巧妙地避开思考 的方法 。20.1 2.1320. 12.13Sunday, December 13, 2020
•
2、阅读一切好书如同和过去最杰出的 人谈话 。07:2 1:1507: 21:1507 :2112/ 13/2020 7:21:15 AM
药理学实验指导
药理学实验指导
实验一 半数致死量的测定
半数致死量（LD50）是药物、毒物及病原微生物等毒力水平的一个标志。它表示能使 全部实验对象死亡半数的剂量或浓度。由于生物间存在个体差异性，因此 LD50 需用一批 相当数量的实验对象进行实验方能测得，并且每种药物对不同实验对象的 LD50 值不同。
【实验目的】 1. 掌握半数致死量测定的基本方法和寇氏法的适用条件。 2. 熟悉动物的常用分组方法。 3. 了解寇氏法公式的推导过程。 【实验条件】 寇氏法（Kärbar 氏法） 测定 LD50 的方法有很多，如目测机率单位法、直线回归法、累计法、序贯法以及 Bliss 法等。其中 Bliss 法为最经典、最准确的方法，但需要用计算机和相应软件来完成。由 于寇氏法较常用，并有计算简便，结果较准确等特点，故专门介绍之。 【实验条件】 1. 剂量必须按等比级数（剂量对数按等差级数）分组。 2. 各组动物数应相等。 3. “反应”应大致呈正态分布。最小剂量组的死亡率（Pn）应为 0％，最大剂量组 的死亡率（Pm）应为 100％；如果 Pn < 20% 或 Pm > 80% 需用校正公式计算；如 Pn > 20% 或 Pm < 80% 则不能用此法计算。 【实验动物】 小白鼠 【实验药品】 不同浓度敌百虫、苦味酸 【实验器材】 鼠笼、动物天平、1ml 注射器、电子计算器 【实验步骤】 １．预备实验 ①摸索上下限：即用少量动物逐步摸索出使全部动物死亡的最小剂量（Dm）和一个 动物也不死亡的最大剂量(Dn)。方法是据经验或文献定出一个估计量， 观察 2～3 只动 物的死亡情况。如全死，则降低剂量；如全不死，则加大剂量再行摸索，直到找出 Pm = 100 % 和 Pn = 0% 的剂量，此两量分别为上下限。
⑷计算注意事项：①发令后开始计算；时间到，立即停止计算。 ②实验开始后，一定尽全力进行计算。③中间对计算结果不能修改，否则统计时按 错误计算。
实验一 半数致死量的测定
半数致死量（LD50）是药物、毒物及病原微生物等毒力水平的一个标志。它表示能使 全部实验对象死亡半数的剂量或浓度。由于生物间存在个体差异性，因此 LD50 需用一批 相当数量的实验对象进行实验方能测得，并且每种药物对不同实验对象的 LD50 值不同。
【实验目的】 1. 掌握半数致死量测定的基本方法和寇氏法的适用条件。 2. 熟悉动物的常用分组方法。 3. 了解寇氏法公式的推导过程。 【实验条件】 寇氏法（Kärbar 氏法） 测定 LD50 的方法有很多，如目测机率单位法、直线回归法、累计法、序贯法以及 Bliss 法等。其中 Bliss 法为最经典、最准确的方法，但需要用计算机和相应软件来完成。由 于寇氏法较常用，并有计算简便，结果较准确等特点，故专门介绍之。 【实验条件】 1. 剂量必须按等比级数（剂量对数按等差级数）分组。 2. 各组动物数应相等。 3. “反应”应大致呈正态分布。最小剂量组的死亡率（Pn）应为 0％，最大剂量组 的死亡率（Pm）应为 100％；如果 Pn < 20% 或 Pm > 80% 需用校正公式计算；如 Pn > 20% 或 Pm < 80% 则不能用此法计算。 【实验动物】 小白鼠 【实验药品】 不同浓度敌百虫、苦味酸 【实验器材】 鼠笼、动物天平、1ml 注射器、电子计算器 【实验步骤】 １．预备实验 ①摸索上下限：即用少量动物逐步摸索出使全部动物死亡的最小剂量（Dm）和一个 动物也不死亡的最大剂量(Dn)。方法是据经验或文献定出一个估计量， 观察 2～3 只动 物的死亡情况。如全死，则降低剂量；如全不死，则加大剂量再行摸索，直到找出 Pm = 100 % 和 Pn = 0% 的剂量，此两量分别为上下限。
⑷计算注意事项：①发令后开始计算；时间到，立即停止计算。 ②实验开始后，一定尽全力进行计算。③中间对计算结果不能修改，否则统计时按 错误计算。
药物半数致死量_LD50的测定
药物半数致死量(LD50)的测定
【实验目的】
了解药物半数致死量测定的原理，方法，计算过
程及意义。
【实验原理】
• 半数致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能够
引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂量
的对数值表示。属于质反应，数据通过计数阳性反应的个
数来表示。
• 测定LD50意义
(1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优 TI=LD50/ED50 劣的重要参数 (2)评价药物安全性---治疗指数 (3)申报新药过程中必须提供的药理学资料
• LD50的测定方法有很多。如：目测机率单位法、
加权机率单位法(Bliss 法)、寇氏法、序贯法等。
• Bliss 法是目前推荐使用的方法。此法对剂量分
生全身性毒性反应，主要表现为中枢神经系统先兴奋后抑
制，初期表现为眩晕、烦躁不安、肌肉震颤，进而发展为
神经错乱、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。患者可因呼吸衰竭 而死亡。
【实验材料】 • 实验动物：小白鼠，体重18～２２g，实验 前禁食12h,不禁水。 • 实验器材：电子秤、注射器。 • 实验药品：盐酸普鲁卡因
（Procaine hydrochloride）
【实验步骤】
• 预实验 1．探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡
的最小剂量及0%死亡的最大剂量。此即上下限剂量（Dm，
Dn）。 2．确定组数、计算各组剂量：
r=1.17
• 组数（n）：4组
• 按公式求公比r:
Dm r n 1 Dn
• 按公比求各组剂量： D1=Dn=124 mg/ml， D2=D1×r=145 mg/ml D3=D2×r=171 mg/ml， D4=D3×r=Dm=200 mg/ml
【实验目的】
了解药物半数致死量测定的原理，方法，计算过
程及意义。
【实验原理】
• 半数致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能够
引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂量
的对数值表示。属于质反应，数据通过计数阳性反应的个
数来表示。
• 测定LD50意义
(1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优 TI=LD50/ED50 劣的重要参数 (2)评价药物安全性---治疗指数 (3)申报新药过程中必须提供的药理学资料
• LD50的测定方法有很多。如：目测机率单位法、
加权机率单位法(Bliss 法)、寇氏法、序贯法等。
• Bliss 法是目前推荐使用的方法。此法对剂量分
生全身性毒性反应，主要表现为中枢神经系统先兴奋后抑
制，初期表现为眩晕、烦躁不安、肌肉震颤，进而发展为
神经错乱、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。患者可因呼吸衰竭 而死亡。
【实验材料】 • 实验动物：小白鼠，体重18～２２g，实验 前禁食12h,不禁水。 • 实验器材：电子秤、注射器。 • 实验药品：盐酸普鲁卡因
（Procaine hydrochloride）
【实验步骤】
• 预实验 1．探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡
的最小剂量及0%死亡的最大剂量。此即上下限剂量（Dm，
Dn）。 2．确定组数、计算各组剂量：
r=1.17
• 组数（n）：4组
• 按公式求公比r:
Dm r n 1 Dn
• 按公比求各组剂量： D1=Dn=124 mg/ml， D2=D1×r=145 mg/ml D3=D2×r=171 mg/ml， D4=D3×r=Dm=200 mg/ml
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2020/7/28
半数致死量(LD50)
特点：1、是药物的剂量反应曲线上最敏感的 一点。
死亡率
50%
剂量
LD50
2、 测量简单，准确性高，误差小，易重复。
2020/7/28
实验目的
测定药物的LD50 了解常用的测定和计算方法
2020/7/28
实验方法
改良寇氏法 可直接用实验动物的死亡率进行计算，方法简 单，计算简便。
2 一组小鼠编号1-25，另一组小鼠编号26-50。 标签上排写编号，下排写体重，体重取整数。
3 根据Excell软件取随机数字,排序随机数字。 4 按随机数字取小鼠于另一鼠笼20/7/28
实验结果
解磷定LD50的实验结果
组别
1# 2# 3# 4# 5#
小白鼠 浓度
(只) （mg/ml）
10
1.5％
10
1.2％
10
0.96％
10
0.77％
10
0.61％
剂量 (mg/kg)
300 240 192 154 123
对数剂量
2.48 2.38 2.28 2.18 2.08
动物死亡数 死亡率
(只)
(％)
注：动物死亡数只统计给药后2小时内的死亡数
2020/7/28
3
1.5％
300
3
2#
3
0.75％
150
1
3#
3
0.375％
75
0
4#
3
0.188％ 35.5
0
2020/7/28
实验步骤
小鼠50只，称重，随即分为5组
1＃组10只
腹腔注射 1.5%的解 磷定溶液
0.2ml/10g
2＃组10只
腹腔注射 1.2%的解 磷定溶液
0.2ml/10g
3＃组10只
腹腔注射 0.96%解 磷定溶液
序贯法 用的动物少，比较节省，但是时间较长。
Bliss法 又称简化几率单位法，是公认最佳方法，但是 步骤繁杂。
2020/7/28
实验材料
1ml注射器 电子称 解磷定 普通级昆明小白鼠
2020/7/28
预实验
组别
小白鼠 浓度
剂量 动物死亡数
(只) （g/ml） (mg/kg)
(只)
1#
结果处理
1、如果最小剂量组的死亡率为0，最大剂量组的死亡 率为100％时，则
LD50=lg-1[Xm-i (∑P-0.5)]
2、如果最小剂量组的死亡率大于0而小于30％，或最大剂
量组的死亡率小于100％而大于70％，则
LD50=lg-1[Xm-i
(∑P-
3-Pm-Pn)] 4
注： Xm为最大剂量组的剂量对数， i 为相邻两组对数剂量之差值 （大剂量组减去小剂量组）， Pm为最大剂量组的死亡率，P为各组 死亡率， n为每组动物数。
发展过程以及造成的损害是否可逆。 2 作为将新药从动物实验过渡到临
床应用的参考，是新药报批的必要要求。 3 为长期毒性实验选定靶器官提供
依据。
2020/7/28
半数致死量(Lethal Dose50)
定义：某一药物使实验动物总体死亡一半所 需的药物剂量。
目的：是药物急性毒性试验的一部分，衡量 某一药物急性毒性的大小，用于计算药物的 治 疗指数，以初步评估药物的安全性。 治疗指数=LD50/ED50 目前用于临床的药物，其治疗指数的值多 在10 以上。
2020/7/28
注意事项
每一实验组使用的解磷定溶液的浓度不 同,不能混用.注射器不能混用.
数据处理的方法
2020/7/28
思考题
什么叫LD50？测定的意义和根据是什么？ 试讨论改良寇氏法和Bliss法测定 LD50的
根据和优缺点
2020/7/28
半数致死量(LD50)的测定
药理教研室
药物毒性试验
定义：给予一定剂量的药物后，观察动物的 中毒症状与死亡率。
分类： 1 急性（一般72h） 2 亚急性（1-3月） 3 慢性（﹥3月） 4 特殊毒性（如遗传毒性，生殖毒性）
试验。
2020/7/28
药物毒性试验
目的： 1 揭示药物的毒性强度、选择性、
0.2ml/10g
4＃组10只
腹腔注射 0.77%解 磷定溶液
0.2ml/10g
5＃组10只
腹腔注射 0.61%解 磷定溶液
0.2ml/10g
2020/7/28
记录给药后2小时内各组小鼠死亡数
随机分组操作步骤
1 两个大组，每个组随意取25只小鼠分别称重 标记，依次放入不锈钢鼠笼中,将标签贴于鼠 笼上。
半数致死量(LD50)
特点：1、是药物的剂量反应曲线上最敏感的 一点。
死亡率
50%
剂量
LD50
2、 测量简单，准确性高，误差小，易重复。
2020/7/28
实验目的
测定药物的LD50 了解常用的测定和计算方法
2020/7/28
实验方法
改良寇氏法 可直接用实验动物的死亡率进行计算，方法简 单，计算简便。
2 一组小鼠编号1-25，另一组小鼠编号26-50。 标签上排写编号，下排写体重，体重取整数。
3 根据Excell软件取随机数字,排序随机数字。 4 按随机数字取小鼠于另一鼠笼20/7/28
实验结果
解磷定LD50的实验结果
组别
1# 2# 3# 4# 5#
小白鼠 浓度
(只) （mg/ml）
10
1.5％
10
1.2％
10
0.96％
10
0.77％
10
0.61％
剂量 (mg/kg)
300 240 192 154 123
对数剂量
2.48 2.38 2.28 2.18 2.08
动物死亡数 死亡率
(只)
(％)
注：动物死亡数只统计给药后2小时内的死亡数
2020/7/28
3
1.5％
300
3
2#
3
0.75％
150
1
3#
3
0.375％
75
0
4#
3
0.188％ 35.5
0
2020/7/28
实验步骤
小鼠50只，称重，随即分为5组
1＃组10只
腹腔注射 1.5%的解 磷定溶液
0.2ml/10g
2＃组10只
腹腔注射 1.2%的解 磷定溶液
0.2ml/10g
3＃组10只
腹腔注射 0.96%解 磷定溶液
序贯法 用的动物少，比较节省，但是时间较长。
Bliss法 又称简化几率单位法，是公认最佳方法，但是 步骤繁杂。
2020/7/28
实验材料
1ml注射器 电子称 解磷定 普通级昆明小白鼠
2020/7/28
预实验
组别
小白鼠 浓度
剂量 动物死亡数
(只) （g/ml） (mg/kg)
(只)
1#
结果处理
1、如果最小剂量组的死亡率为0，最大剂量组的死亡 率为100％时，则
LD50=lg-1[Xm-i (∑P-0.5)]
2、如果最小剂量组的死亡率大于0而小于30％，或最大剂
量组的死亡率小于100％而大于70％，则
LD50=lg-1[Xm-i
(∑P-
3-Pm-Pn)] 4
注： Xm为最大剂量组的剂量对数， i 为相邻两组对数剂量之差值 （大剂量组减去小剂量组）， Pm为最大剂量组的死亡率，P为各组 死亡率， n为每组动物数。
发展过程以及造成的损害是否可逆。 2 作为将新药从动物实验过渡到临
床应用的参考，是新药报批的必要要求。 3 为长期毒性实验选定靶器官提供
依据。
2020/7/28
半数致死量(Lethal Dose50)
定义：某一药物使实验动物总体死亡一半所 需的药物剂量。
目的：是药物急性毒性试验的一部分，衡量 某一药物急性毒性的大小，用于计算药物的 治 疗指数，以初步评估药物的安全性。 治疗指数=LD50/ED50 目前用于临床的药物，其治疗指数的值多 在10 以上。
2020/7/28
注意事项
每一实验组使用的解磷定溶液的浓度不 同,不能混用.注射器不能混用.
数据处理的方法
2020/7/28
思考题
什么叫LD50？测定的意义和根据是什么？ 试讨论改良寇氏法和Bliss法测定 LD50的
根据和优缺点
2020/7/28
半数致死量(LD50)的测定
药理教研室
药物毒性试验
定义：给予一定剂量的药物后，观察动物的 中毒症状与死亡率。
分类： 1 急性（一般72h） 2 亚急性（1-3月） 3 慢性（﹥3月） 4 特殊毒性（如遗传毒性，生殖毒性）
试验。
2020/7/28
药物毒性试验
目的： 1 揭示药物的毒性强度、选择性、
0.2ml/10g
4＃组10只
腹腔注射 0.77%解 磷定溶液
0.2ml/10g
5＃组10只
腹腔注射 0.61%解 磷定溶液
0.2ml/10g
2020/7/28
记录给药后2小时内各组小鼠死亡数
随机分组操作步骤
1 两个大组，每个组随意取25只小鼠分别称重 标记，依次放入不锈钢鼠笼中,将标签贴于鼠 笼上。