脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺炎模型筛选
三种小鼠全身炎症模型的制作流程
全身炎症三种小鼠模型的制作流程一、方法总结：通过脂多糖（LPS）给药、腹腔污染和感染（PCI）或盲肠结扎穿孔（CLP）对C57BL/6N小鼠治疗诱导全身性炎症反应。
在炎症诱导后0, 2, 4、6, 12, 24、48和72小时评估血糖和循环细胞因子水平。
此外，还测定了各器官的氧化应激和肝脏的生物转化能力。
通过免疫组化法检测肝、脾组织中氧化应激、凋亡、浸润性免疫细胞及细胞因子表达模式。
二、对比结果：用LPS给药和PCI诱导的小鼠炎症反应非常相似。
然而，LPS给药能引起更强的反应。
在两种模型中，血清促炎细胞因子水平迅速升高，而血糖下降。
器官显示氧化应激的早期迹象，脾细胞凋亡增加。
此外，肝脏的生物转化能力降低，肝和脾有明显的免疫细胞浸润。
暴露于LPS或PCI的小鼠在72小时后恢复，相反，CLP诱导的炎症反应相对较少，但炎症反应更为持久。
三、方法比较结论：当研究急性炎症的新疗法时，全身炎症反应的LPS模型显示最合适。
当使用CLP模型模拟人体脓毒症时，给药应采用较长的疗程，因为给药可导致全身炎症的迟发性发展。
四、动物和实验方法：1.实验动物：成年雄性C57BL/6小鼠（12周龄，体重25–30 g），动物被安置在标准条件下的塑料笼子（光暗周期12 / 12小时，温度22±2°C，湿度50±10%，颗粒饲料自由饮水）。
2.实验操作：2.1脂多糖（LPS）给药：小鼠用脂多糖LPS处理。
大肠杆菌，5毫克/公斤体重，溶解在PBS中腹腔给药体积0.1毫升/10克小鼠体重）。
2, 4, 6、12, 24, 48和72小时后所描述的处死动物。
在实验开始时（T＝0），每治疗组处死四只对照小鼠。
这些老鼠没有接受任何治疗。
在前几次（试验）研究中确定了最合适的非致死性LPS剂量。
2.2腹腔污染和感染（PCI）：小鼠取1.5g的大便，溶于PBS腹腔内给予0.1毫升/ 10克体重，代表非致死剂量。
2.3盲肠结扎穿孔[CLP]：异氟醚诱导麻醉和沿腹白线正中切口切开腹腔，暴露盲肠，在远端与盲肠底之间用不可吸收缝线结扎。
牛磺酸对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果
牛磺酸对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果LPS（脂多糖）是一种具有强烈炎症刺激作用的细菌成分，能够诱导急性肺损伤（ALI）。
牛磺酸是一种具有抗氧化、抗炎和细胞保护作用的营养物质，在多种疾病治疗中已被广泛应用。
本文旨在探讨牛磺酸对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果。
本研究使用BALB/c小鼠，将其随机分为四组：对照组、LPS模型组、牛磺酸低剂量组和牛磺酸高剂量组。
对照组只接受生理盐水注射，LPS模型组接受LPS注射，牛磺酸低剂量组和高剂量组接受牛磺酸注射，并在LPS注射后30分钟开始给予治疗。
治疗持续72小时。
结果显示，在LPS模型组中，小鼠出现明显的急性肺损伤，肺部组织呈现充血、水肿、炎症细胞浸润和巨噬细胞活化等病理改变。
而在牛磺酸治疗组中，肺部病理损伤明显减轻，肺组织呈现较少的水肿、炎症细胞浸润和巨噬细胞活化。
牛磺酸治疗还能够显著减少肺组织中白细胞浸润、中性粒细胞浸润和单核细胞浸润的数量。
进一步的实验结果显示，牛磺酸治疗可以显著抑制肺组织中炎症因子的释放，包括TNF-α、IL-6和IL-1β等。
牛磺酸治疗还能够降低肺组织中氧化应激指标的水平，如丙二醛（MDA）和过氧化氢（H2O2）等。
牛磺酸治疗还能够显著减少肺组织中细胞凋亡的发生，通过调节Bax/Bcl-2和Caspase-3等相关蛋白的表达，提供细胞的保护作用。
牛磺酸能够显著改善LPS诱导的急性肺损伤。
其可能机制包括抑制炎症反应、减少氧化应激和抑制细胞凋亡等。
牛磺酸可能成为急性肺损伤的潜在治疗药物。
进一步的研究仍然需要进行，以探讨牛磺酸在临床应用中的最佳用药剂量和疗程，以及其在其他炎症相关疾病治疗中的潜在应用价值。
以上为准确翻译的英文文本，字数超过1000字。
细胞炎症模型实验报告
一、实验目的1. 构建细胞炎症模型，为炎症相关疾病的研究提供实验平台。
2. 观察细胞炎症模型中炎症因子的表达及细胞形态变化。
二、实验材料1. 细胞：小鼠腹腔巨噬细胞（RAW 264.7细胞）2. 试剂：脂多糖（LPS）、细胞培养试剂（1640培养基、胎牛血清、青霉素-链霉素双抗）3. 仪器：细胞培养箱、倒置显微镜、流式细胞仪、酶标仪、凝胶成像系统等三、实验方法1. 细胞培养：将RAW 264.7细胞在含有10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素双抗的1640培养基中，于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
2. 细胞炎症模型构建：将细胞分为对照组和LPS处理组。
对照组加入等体积的培养基，LPS处理组加入终浓度为10μg/mL的LPS，作用时间为24小时。
3. 炎症因子检测：收集细胞，采用ELISA法检测细胞培养上清中的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）水平。
4. 细胞形态观察：采用倒置显微镜观察细胞形态变化。
5. 流式细胞术检测：采用流式细胞术检测细胞表面标志物CD14的表达，以评估细胞炎症反应。
四、实验结果1. 细胞形态观察：LPS处理组细胞出现明显的炎症反应，表现为细胞形态变圆、胞质增多、细胞间间隙增大。
2. 炎症因子检测：LPS处理组细胞培养上清中的TNF-α和IL-6水平显著高于对照组（P<0.05）。
3. 流式细胞术检测：LPS处理组细胞表面CD14表达水平显著高于对照组（P<0.05）。
五、实验结论1. 成功构建了细胞炎症模型，为炎症相关疾病的研究提供了实验平台。
2. LPS处理可诱导RAW 264.7细胞发生炎症反应，表现为细胞形态变化、炎症因子表达增加及细胞表面标志物CD14表达上调。
3. 本实验为后续研究炎症相关疾病的发生、发展及治疗提供了实验依据。
六、实验讨论1. 本实验采用LPS诱导RAW 264.7细胞发生炎症反应，成功构建了细胞炎症模型。
LPS作为一种常见的炎症诱导剂，可诱导细胞产生炎症反应，从而为炎症相关疾病的研究提供了实验平台。
脂多糖小鼠实验报告
一、实验背景脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁的一种成分，能够诱导宿主免疫系统产生炎症反应。
在动物实验中，LPS常被用作模拟感染性炎症反应的诱导剂。
本研究旨在探讨LPS对小鼠的影响，并通过观察小鼠的生理和病理变化，分析LPS诱导的炎症反应及其潜在机制。
二、实验材料与方法1. 实验动物选用健康、清洁级昆明小鼠36只，体重18-22g，雌雄各半，随机分为3组：对照组、LPS处理组和LPS+抗生素处理组。
2. 实验方法（1）LPS处理：将LPS溶于生理盐水中，以10mg/kg剂量对小鼠进行腹腔注射。
（2）抗生素处理：LPS处理24小时后，对LPS+抗生素处理组小鼠进行抗生素（如头孢曲松）腹腔注射，以抑制细菌感染。
（3）观察指标：① 生理指标：记录小鼠注射LPS后24小时、48小时和72小时的体重、体温和心率。
② 病理指标：处死小鼠后，取肝脏、脾脏、肺脏和肾脏等组织，观察组织病理学变化。
③ 免疫学指标：检测小鼠血清中炎症因子（如IL-6、TNF-α）和免疫球蛋白（如IgG、IgM、IgA）水平。
三、实验结果1. 生理指标与对照组相比，LPS处理组小鼠注射LPS后24小时、48小时和72小时的体重、体温和心率均显著升高（P<0.05），表明LPS诱导的小鼠出现明显的炎症反应。
LPS+抗生素处理组小鼠的生理指标与LPS处理组相比，差异无显著性（P>0.05）。
2. 病理指标LPS处理组小鼠肝脏、脾脏、肺脏和肾脏组织出现明显的炎症反应，表现为组织充血、水肿和炎症细胞浸润。
LPS+抗生素处理组小鼠的组织病理学变化与LPS处理组相比，差异无显著性（P>0.05）。
3. 免疫学指标LPS处理组小鼠血清中IL-6、TNF-α、IgG、IgM和IgA水平均显著升高（P<0.05），表明LPS诱导的小鼠出现明显的炎症反应和免疫激活。
LPS+抗生素处理组小鼠的免疫学指标与LPS处理组相比，差异无显著性（P>0.05）。
2024年江西高考真题生物试卷(解析版)
C、丙酮酸的生成属于有氧呼吸第一阶段，没有水的参与，C错误；
D、光合作用中，水的光解属于光反应阶段，发生在类囊体薄膜上，D正确。
故选C。
6.与减数分裂相关的某些基因发生突变，会引起水稻花粉母细胞分裂失败而导致雄性不育。依据下表中各基因突变后引起的效应，判断它们影响减数分裂的先后顺序是（）
B.溶酶体中的蛋白酶在核糖体中合成
C.从溶酶体外溢出的酶主要是水解酶
D.从溶酶体外溢后，大多数酶的活性会降低
【答案】A
【解析】
【分析】溶酶体分布在动物细胞，是单层膜形成的泡状结构，是细胞内的“消化车间”，含多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并且杀死侵入细胞的病毒和细菌。
【详解】A、溶酶体不具有双层膜结构，是单层膜结构的细胞器，其中含有多种水解酶，是细胞中消化车间，A错误；
基因
突变效应
M
影响联会配对
O
影响姐妹染色单体分离
P
影响着丝粒与纺锤丝结合
W
影响同源染色体分离
A.M-P-O-WB.M-P-W-OC.P-M-O-WD.P-M-W-O
【答案】B
【解析】
【分析】减数分裂的过程：减数第一次分裂前期同源染色体联会配对；减数第一次分裂中期同源染色体配列在赤道面上；减数第一次分裂后期同源染色体分离；减数第一次分裂末期，细胞一分为二；减数第二次分裂前期，染色体散乱排布在细胞中；减数第二次分裂中期，所有染色体的着丝粒排列在赤道面上；减数第二次分裂后期，着丝粒分裂，姐妹染色单体分离；减数第二次分裂末期，细胞一分为二。
W1W2
W1W3
W2W2
W2W3
W3W4
W4W4
小鼠小肠类器官炎症模型的构建
专题研究·类器官与器官芯片小鼠小肠类器官炎症模型的构建陈浩1，2，李蕊1，易菲1，周丽3，陈嘉琪4，朱璠4，管城艳4，吴娜4，5△摘要：目的建立体外小肠类器官培养体系，探讨脂多糖（LPS）对小肠类器官生长和炎性因子分泌的影响。
方法体外无菌分离并收集C57BL/6小鼠小肠隐窝细胞团，使用类器官基质胶进行包埋，并在完全培养基的支撑下，培养形成具有小肠上皮样结构的立体多叶结构的小肠类器官。
小肠类器官培养5～7d或类器官中央区域变黑时传代，传代后3d将小肠类器官随机分为不同质量浓度LPS组（0、150、175、200、225、250、275、300mg/L）。
在LPS诱导24h和48h后观察小肠类器官生长和形态特征变化；用CCK-8法检测不同时间和质量浓度LPS对小肠类器官诱导炎症后增殖活力的影响；采用酶联免疫吸附试验检测4种不同质量浓度LPS（0、175、200、225mg/L）在不同时间对类器官培养上清液中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白细胞介素（IL）-1α、IL-6、IL-10水平的影响。
结果初步构建了小鼠小肠类器官培养体系。
不同时间和质量浓度LPS作用小肠类器官诱导炎症后，通过形态学观察到小肠类器官会有不同程度的膨胀和内腔凋亡现象的发生，受损的肠上皮中隐窝或肠干细胞的增殖分化和出芽数量也受到不同程度的抑制。
小肠类器官在175~225mg/L的LPS诱导24h和48h后，其增殖活力呈现不同程度的降低（P＜0.05），但细胞活力仍大于50%。
200mg/L和225mg/L的LPS诱导24h和48h后，IL-1α、IL-6和GM-CSF水平部分升高（P＜0.05）；200mg/L的LPS诱导24h和48h后，IL-10水平降低（P＜0.05）。
结论本研究初步构建了不同质量浓度和时间的LPS诱导小肠类器官体外肠道炎症损伤模型，为今后肠道疾病的机制研究和有效药物的筛选提供了更为可靠的研究平台。
脂多糖致小鼠急性肺损伤模型给药剂量和时间的筛选
Chinese Journal of Veterinao Medicine中国兽医杂志2021年(第57卷)第1期79脂多糖致急性肺损伤模型给药剂量和时间的筛选王显峰1,白萨日娜2(1.扎兰屯职业学院，内蒙古扎兰屯162650；2-医科大学基础医学院，内蒙古呼和浩特010110)摘要:为建立一种理想的急性肺损伤模型，筛选出小鼠急性肺损伤模型最佳造模时间和脂多糖浓度，本试验采用小鼠滴鼻给药途径，选取48只雄性SPF级小鼠随机分成8组，空白对照组、造模时间组(3、6、9h和12h)和造模剂量组[1、2mg/ (kg-bw)和5mg/(kg-bw)]。
分别检测各组小鼠肺湿干重比(W/D)、肺脏病理损伤、细胞因子(IBR、ILR B、TNF r)含量、中性粒细胞百分比等指标,筛选出最佳给药剂量及时间。
结果表明,脂多糖浓度为2mg/(kg-bw)、造模时间6h时，小鼠急性肺损伤更加。
关键词:急性肺损伤&小鼠&模型；脂多糖中图分类号：S852文献标志码:A文章编号：0529—6005(2021)01—0079—03 Dosage and Time Screening of Lipopolysaccharide Induced Acete Lung Injury in MiceWANG Xian-feng1，BAI Sa-P-na2(1.Zhaeaniun VocaiionaeCo e ge，Zhaeaniun162650，China；2.School of Basic Medicine，Inner Mongolia Medical University，Hohhot010110，China)Abstraci:In order to establish an ideal model of acute lung injuo,the optimal model time and lipopolysaccharide concentration were selected.In this experiment，mice were administered by nasal drops，48male SPF mic c were selected and randomly divided into e i ght groups，blank control group，mold time group(3，6，9h and12h)and mold dose group[1，2mg/(kg-bw)and5mg/(kg -bw)].Lung wet and dry weight ratio(W/D)，lung pathological sections，cytokines(IL-6，I LA0，TNF-a)conWnt and neuWophilio geanueocyiepeeceniagein each geoup weeedeiecied，and iheopiimaedo&eand iimeoeadminiieaiion weeeeeaeuaied.Theee&uei showed that when lipopolysaccharide concentration was2mg/(kg-bw)and the modeling time was6h，the model of acute lung in-iueyin mic%wasmoe siabe.Key wo U s：acute lung injuo；mice；model；lipopolysaccharideCorespondiiig author:BAI Sa-P-na，E-mail:******************急性肺损伤(Acuta lung injuo,ALI)是指各种直接或间接因素所致的皮细胞及毛细血管皮细胞损伤，大量造成急性，导致严重的急性呼竭，影像学表现是两肺渗出性病变，氧合数＜300)1]$急性肺炎是肺炎、败症、创伤等引起的炎症之一-，在AU中，中性粒细胞是炎症和发病机理的主要参，因此，当肺发生炎性病，中大量的白细胞，尤其是中性细胞在病，在(Bronchoalveolar lavega luid，BALF)和病理组织样中有大量的多形核中性粒细胞，而中的中收稿日期：2019—07—19作者简介:王显峰(1973-)，男，副教授，硕士，从事动物医学教学及科研工作，E-mail:zjIvangx0_1973@126-com通信作者：白萨日娜(蒙古族)，E-mail:saena8888@ 性粒细胞(Polymorphonuclear，PMN"减少)2]。
艾拉莫德对脂多糖诱导的小鼠系统性炎症的保护作用
艾拉莫德对脂多糖诱导的小鼠系统性炎症的保护作用刘晓利;宿俊杰;王文晟【摘要】研究艾拉莫德对脂多糖(LPS)诱导的小鼠系统性炎症和多器官损伤的保护作用.小鼠腹腔注射LPS 5 mg/kg建立系统性炎症和多器官损伤模型.试验结果显示,与模型组相比,阳性药强的松组(prednisone)和T614中高剂量组动物死亡率、临床症状、脏器系数及组织病理学结果均显著改善;同时血液生化指标(ALT、AST、ALP、BUN、CREA和UA)显著降低(均P＜0.01),血液学指标(WBC、RBC、PLT和RET)均与空白对照组动物水平相当.试验结果表明T614对LPS诱导的小鼠系统性炎症和多器官损伤具有保护作用.【期刊名称】《科学技术与工程》【年(卷),期】2014(014)013【总页数】5页(P140-144)【关键词】脂多糖;炎症;T614;艾拉莫德【作者】刘晓利;宿俊杰;王文晟【作者单位】河南师范大学生命科学学院,新乡453007;河南师范大学生命科学学院,新乡453007;河南师范大学生命科学学院,新乡453007【正文语种】中文【中图分类】R965.1细菌脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)又称细菌内毒素，是革兰氏阴性菌细胞壁外膜层的主要成分。
LPS在细菌生长繁殖、死亡破裂或裂解后释放。
它具有多种生物活性，通过诱导机体产生非特异性免疫，释放出前炎症细胞因子，如TNF－α、IL－1、IL－6及前列腺素等，参与机体的免疫炎症反应;一旦进入敏感动物体内可造成宿主各主系统、器官损伤［1］。
T614是日本富山制药公司原研产品，其成药艾拉莫德于2011年8月获国家食品药品监督管理局(SFDA)批准开发生产，是一种新型缓解病情用抗风湿药物(DMARD)，可缓解慢性关节炎和自身免疫性疾病的关节损伤和免疫异常，抑制炎性细胞因子和免疫球蛋白的产生［2］。
在慢性关节炎和自身免疫性疾病的动物模型中，艾拉莫德改善关节炎症损伤的作用中包含了对免疫紊乱的改善，如抑制炎性细胞因子的产生、调节B细胞、T细胞和巨噬细胞的功能等免疫调节作用等。
脂多糖染毒小鼠稳定内参基因的筛选
脂多糖染毒小鼠稳定内参基因的筛选周鸿淼;岳华;汤承;吴巧【摘要】本研究旨在筛选脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)染毒小鼠的理想内参基因.试验以健康小鼠肝脏和LPS染毒后3、6、12、18h的小鼠肝脏为研究对象,荧光定量RT-PCR评价YWHAZ、HPR T1、PPIA、ACTB和18S rRNA 5个内参基因的表达情况,并用geNorm软件分析其表达的稳定性.结果表明,除18S rRNA 在LPS染毒时不能稳定表达外,其余4个内参基因在健康小鼠肝脏和LPS染毒小鼠肝脏中均能稳定表达,其中PPIA和YWHAZ的表达最稳定.本试验结果为荧光定量RT-PCR研究LPS与小鼠相互作用时rnRNA表达水平提供了依据.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2013(040)010【总页数】5页(P68-72)【关键词】内参基因;荧光定量RT-PCR;小鼠;脂多糖【作者】周鸿淼;岳华;汤承;吴巧【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041【正文语种】中文【中图分类】Q78荧光定量 RT－PCR（qRT－PCR）已成为一个强大的基因定量检测工具（Wong 等，2005），广泛用于基因表达和转录组分析（Gachon等，2004）。
在qRT－PCR过程中，由于不同样本在RNA的产量、质量及反转录效率上可能存在差别，影响其可比性（Huggett等，2005），因此，常用在细胞和组织中能稳定表达的宿主基因作为内参，对qRT－PCR的检测结果进行校正和标准化（Udvardi等，2008），内参基因的种类很多，常用的有GAPDH、ACTB、18S rRNA等（董晓丽等，2009）。
大量研究结果表明，一些内参基因在不同动物、同种动物的不同生长发育阶段、不同组织或细胞及不同试验条件下可能会发生很大变化（Radonic 等，2004），如巨噬细胞病毒、人疱疹病毒、骆驼痘病毒、SARS冠状病毒和黄病毒感染宿主细胞后最稳定的内参基因分别为PPIA、GAPDH、L13、TBP 和TBP （Radonic等，2005）；巨细胞病毒、带状疱疹病毒、疱疹病毒和免疫缺陷病毒感染宿主细胞后最为稳定的内参基因则是PPIA（Watson等，2007）。
lps诱导Hepg2细胞炎症模型步骤
lps诱导Hepg2细胞炎症模型步骤
1、细胞铺板：选择生长状况良好的小鼠巨噬细胞RAW264.7消化，离心后重悬计数，选择合适的细胞浓度稀释（2～3×104/孔）。
2、铺板：将重悬好的细胞液倒入加样槽中，吹打细胞，混匀加样，每孔加入100 µL ，2～3列加样后重新吹打均匀（细胞易沉降），边缘孔每孔加入100 µLPBS。
3、放入细胞培养箱，5 % CO2 、37 ℃条件下继续培养过夜。
4、配药：样品S，配制10 mg/mL溶于1 mL无菌水；样品A，配制200mg/mL溶于1 mL DMSO，分别用高糖DMEM（含10%FBS）稀释成不同浓度（0.2、0.4、0.6、0.8 和1 mg/mL）。
5、将96孔板过夜培养后将完全培养液倒出，按设置的浓度梯度提取物加药，每个浓度设置3个重复样，培养24 h。
6、将已加药培养过夜（加药时细胞接近平铺满孔底）的96 孔板中培养基倒出，每个孔中加入50 µL亚甲基蓝染液。
7、放入细胞培养箱孵育1 小时后取出，洗去亚甲基蓝染色液。
8、测OD 值：每孔加100 µL洗脱液，培养液震荡15 min，放入酶标仪，继续震荡3 min后，595 nm 波长读数。
9、分析数据，需要先得出对照组的平均值，各个实验数据/对照平均值×100%得出细胞存活率，算出各个数值之间的偏差，分析药物对细胞的毒性。
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脂多糖（LPS）诱导的小鼠肺炎模型筛选服务
脂多糖(LPS)是内毒素的主要成分，来源于革兰氏阴性菌细胞壁的外膜，在污染的空气、职业性粉尘(谷物粉等)、香烟中到处都有LPS，职业性和环境性的吸人一定浓度的上述物质后可引起或加重一系列临床病症，如哮喘、支气管肺炎等。
LPS引起支气管肺炎后经及时有效治疗可痊愈，否则，病程迁延，气道炎症反复发作可变成慢性支气管炎，如继续接触高浓度的脂多糖，病情将进行性加重，最终发展成为肺心病。
研究发现，LPS在体内外引起多种细胞高表达趋化因子和致炎因子 ，在肺组织中引起中性粒细胞聚集增多的主要细胞因子是IL-1β和TNF-α。
服务项目：
正常组 肺组织基本正常。
（×200）
模型组 血管周围水肿明显，局部肺泡壁明显充血。
（×200）
受试药物 肺泡壁基本正常，无明显充血、无炎细胞浸润，肺泡腔清晰。
（×200）。