实验十五 抗坏血酸含量测定
抗坏血酸药品中维生素C含量的测定(碘量法)
抗坏血酸药品中维生素C 含量的测定一、实验目的1.掌握碘标准溶液的配制注意事项；2.通过维生素C 的测定了解直接碘量法和间接碘量法的过程；3.掌握碘量法测定抗坏血酸药品中维生素C 含量的原理和方法。
二、实验用品 1.仪器全自动分析天平；台秤；碘量瓶；玻璃棒；洗瓶；试剂瓶；烧杯；酸式滴定管；量筒；胶头滴管；容量瓶；移液管；洗耳球。
2.试剂分析纯O H O S 23225Na ⋅，分析纯2I ；7221-r mol 017.0O C K L ⋅标准溶液；)s (KI 、KI 溶液100-1L g ⋅，使用前配制；淀粉指示剂1-g 5L ⋅；）（s a 32CO N ；l HC 溶液1-mol 6L ⋅；败坏血酸片。
三、实验原理抗坏血酸又名维生素C ，分子式686O H C 。
由于分子中的烯二醇基具有还原性，能被2I 定量地氧化成二酮基，其反应式为：碱性条件下可使反应向右进行完全，但因维生素C 还原性很强，在碱性溶液中尤其易被空气氧化，在酸性介质中较为稳定，故反应应在稀酸（如稀乙酸、稀硫酸或偏磷酸）溶液中进行，并在样品溶于稀酸后，立即用碘标准溶液进行滴定。
根据滴定消耗的2I 标准溶液的体积，便可计算出抗坏血酸药品中维生素C 的含量。
计算公式：%100m %100m m 68622⨯=⨯=药品药品维生素O H C I I C M V C W2I 标准溶液的配制和标定：由于通常使用的市售2I 试剂纯度不高，故需先配成近似浓度，然后在进行标定。
2I 微溶于水而易溶于KI 溶液中，但在稀的KI 溶液中溶解得很慢，故配制2I 溶液时应先在较浓的KI 溶液中进行，待溶解完全后再稀释到所需浓度。
2I 溶液可以用32s O A 为基准物对I 2溶液进行标定,但32s O A （俗称砒霜）有剧毒，故用322a O S N 标准溶液进行标定。
322a O S N 标准溶液的配制和标定：固体试剂O H O S N 23225a ⋅通常含有一些杂质，且易风化和潮解，因此，322a O S N 标准溶液采用标定法配制。
抗坏血酸实验报告抗坏血酸及我们所熟知的维生素C，它是显示...
抗坏血酸实验报告抗坏血酸及我们所熟知的维生素C，它是显示抗坏血酸生物活性的化合物的通称，是一种水溶性维生素，水果和蔬菜中含量丰富，但不同种类的水果蔬菜中所含抗坏血酸的量又有较大差别。
这次的实验内容就是利用抗坏血酸在氧化还原反应中的还原性，测定几种不同的常见水果蔬菜中每百克抗坏血酸含量。
实验步骤及现象记录：1、在试管中加入5mL的淀粉溶液，滴入一滴碘酒。
由于淀粉溶液与碘酒发生显色反应，溶液立刻就变为了深蓝色。
2、在上述溶液中加入几滴橙子汁，摇匀，再次观察溶液颜色。
溶液在混合了橙汁之后变为无色透明。
这是因为橙汁中含有较多抗坏血酸，抗坏血酸还原了淀粉碘溶液中的碘单质使其成为负一价碘离子，显色消失。
3、自选果蔬（我们选择了橙子、白萝卜、猕猴桃和西红柿），并各称取了10g注：称取猕猴桃的天平后来又蹦回了10.0= =4、将称好的四种果蔬立刻切碎并放入研钵中，加入10mL 1mol/L 1%的HCL溶液，研磨至糊状。
5、将研磨好的果蔬汁倒入锥形瓶中，先加入2mL 5%KI溶液和1mL 1mol/L H2SO4溶液，再加入2mL 0.5%淀粉溶液，摇匀。
6、量取10mL c=0.001mol/L的碘酸钾溶液，用地瓜吸取后逐渐加入锥形瓶中，边加边摇，至溶液呈蓝色且15s不退色为止。
由图可见在滴入碘酸钾的瞬间局部被抗坏血酸还原出的碘单质立刻使周围的淀粉溶液呈现蓝色。
以下为四种果蔬汁变色前后的对比图：橙子：白萝卜：猕猴桃：西红柿：7、由元素守恒可算出以上四种果蔬每百克的抗坏血酸含量。
反应过程如下：KIO3+5KI+3H2SO4→3K2SO4+3I2+2H2OI2+抗坏血酸→脱氢抗坏血酸+2I-得出关系式：IO3- ~ 3I2 ~ 3Vc即X(mg/100g)=3*V*c*M*100/m四种果蔬变色所消耗碘酸钾体积分别为橙汁6.7mL；白萝卜2.8mL；猕猴桃8.1mL；西红柿3.8mL由此而知：X橙子=3*6.7*0.001*176*100/10=35.376≈35.4 mg/100gX白萝卜=3*2.8*0.001*176*100/10=14.784≈14.8 mg/100gX猕猴桃=3*8.1*0.001*176*100/10=42.768≈42.8 mg/100gX西红柿=3*3.8*0.001*176*100/10=20.064≈20.1 mg/100g。
维c的含量测定实验报告
维c的含量测定实验报告维C的含量测定实验报告引言：维生素C，也被称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，对人体的健康具有重要的作用。
然而，人体无法自行合成维生素C，因此需要通过饮食来摄取。
为了保证人体的健康，我们需要了解食物中维生素C的含量。
本实验旨在通过一系列实验步骤，准确测定某种食物中维生素C的含量。
实验材料与方法：材料：某种含有维生素C的食物样品、稀硫酸、碘化钾溶液、淀粉溶液、维生素C标准品。
方法：1. 准备样品：将食物样品洗净、去皮，然后切碎成小块。
2. 提取样品中的维生素C：将切碎的食物样品加入适量的稀硫酸中，用搅拌器搅拌均匀，然后过滤得到提取液。
3. 碘滴滴定法：取一定量的维生素C标准品，加入稀硫酸中，用碘化钾溶液滴定，直到溶液变成淡黄色，记录滴定所用的碘化钾溶液的体积。
4. 滴定样品：将提取液加入碘化钾溶液中，同样滴定至溶液变成淡黄色，记录滴定所用的碘化钾溶液的体积。
5. 控制实验：将稀硫酸和碘化钾溶液混合，进行滴定，记录滴定所用的碘化钾溶液的体积。
6. 计算维生素C的含量：根据滴定所用的碘化钾溶液的体积，计算出维生素C的含量。
实验结果与分析：在本次实验中，我们选取了某种食物样品进行维生素C的含量测定。
在滴定标准品和样品时，我们记录了所用的碘化钾溶液的体积如下：标准品滴定体积：10 mL样品滴定体积：15 mL控制实验滴定体积：0 mL根据实验结果，我们可以计算出维生素C的含量。
首先，我们需要计算标准品中维生素C的摩尔浓度。
假设标准品中的维生素C的摩尔浓度为x mol/L，标准品滴定体积为10 mL，则可以得到以下方程：x mol/L * 10 mL = 15 mL * 0.1 mol/L解方程可得：x = 1.5 mol/L接下来，我们可以计算出样品中维生素C的摩尔浓度。
假设样品中的维生素C 的摩尔浓度为y mol/L，样品滴定体积为15 mL，则可以得到以下方程：y mol/L * 15 mL = 15 mL * 0.1 mol/L解方程可得：y = 0.1 mol/L维生素C的摩尔质量为176.12 g/mol。
抗坏血酸(维生素C)的测定
抗坏血酸（维生素C）的测定维生素C（vitaminC）又称为抗坏血酸，一般水果、蔬菜中维生素C的含量均较高，不同的水果、蔬菜品种，以及同一品种在不同栽培条件、不同成熟度等情况下，其维生素C的含量都有所不同。
测定维生素C含量，可以作为果蔬品质指标之一。
Ⅰ.滴定法一、原理维生素C具有很强的还原性，染料2，6-二氯酚靛酚（2，6-dichlorophenolindophenol）具有较强的氧化性，且在酸性溶液中呈红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色。
因此当用蓝色的碱性2，6-二氯酚靛酚溶液滴定含有抗坏血酸的草酸溶液时，其中的抗坏血酸可以将2，6-二氯酚靛酚还原成无色的还原型。
但当溶液中的抗坏血酸完全被氧化之后，则再滴2，6-二氯酚靛酚就会使溶液呈红色。
借此可以指示滴定终点，根据滴定用去的标准2，6-二氯酚靛酚溶液的量，可以计算出被测样品中抗坏血酸的含量二、材料、设备及试剂（一）材料：水果或蔬菜（二）设备：1.蒸发皿；2. 研钵一套；3. 移液管；4. 漏斗；5. 滤纸；6. 容量瓶；7. 微量滴定管。
（三）试剂：1. 2％草酸。
2. 2，6-二氯酚靛酚（NaOC6H4NC6H2OCL,M=290.09)将50mg2，6-二氯酚靛酚燃料溶于200ml 含有52mgNaHCO3的热水中，冷却后，稀释至250ml,装入棕色瓶内，放在冰箱里保存（因该染料性质不稳定，配制后超过一周必须重新配制）。
3.0.1mg/ml标准抗坏血酸溶液将50mg纯抗坏血酸溶于少量2%草酸溶液中，然后用2%草酸溶液定容至500ml(使用前临时配置）。
三、实验步骤（一）称取水果和蔬菜样品10g，放在研钵中加入2％草酸溶液约5ml研碎。
通过漏斗将研碎的样品倒入一只100ml的容量瓶中，研钵及杵用2％草酸冲洗，并将洗液一并倒入该容量瓶中，最后用2％草酸定容到刻度，过滤，滤液备用。
（二）空白滴定取2%草酸溶液10ml至蒸发皿中，以2，6二氯酚靛酚溶液滴定呈粉红色，并在30s内不褪色为终点，耗用的染色体积（ml）作为空白。
15.项目3-8.食品中抗坏血酸的测定
教案3-8 食品中维生素的测定课程内容项目3-8 食品中维生素的测定（食品中抗坏血酸的测定）授课课时4学时授课时间2020年12月31日5-8节授课班级18高职食品营养与检测授课地点食品理化检验实训中心（含常规检验实训室、原子吸收室、色谱室）授课形式理实一体、线上线下混合式教学内容分析抗坏血酸是一种具有抗氧化性质的有机化合物，又称为“维生素C”，是人体必需的营养素之一。
它广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、猕猴桃、柑桔、柠檬等食品中含量尤为丰富。
人体长期缺乏抗坏血酸，会出现坏血病、齿龈红肿等症状，因此饮食中要注意多吃水果蔬菜。
那么如何选择抗坏血酸含量高的水果、蔬菜，水果、蔬菜中的抗坏血酸含量又是如何测定的呢？柠檬是人类最早发现的富含维生素C的水果，当年柠檬挽救了数以万计的水手的性命，让他们避免死于由于缺乏维生素C而导致的坏血病。
今天我们就以柠檬为样品，学习如何进行抗坏血酸含量的测定。
任务描述学生分小组完成以下任务:（1）根据提供样品设计食品中抗坏血酸的测定方案；（2）食品中抗坏血酸的测定所需试剂及仪器设备的准备；（3）对样品进行预处理；（4）对样品进行抗坏血酸的测定；（5）数据的记录及分析处理；（6）出具检验报告。
教学目标知识目标1.能说出提取剂必须为草酸或偏磷酸的原因；2.能解释不同方法测定食品中抗坏血酸含量的原理；3.能区别抗坏血酸的类别；4.能解读国家标准水果、蔬菜中维生素C含量的测定。
能力目标1.能依据国家标准进行食品中抗坏血酸含量测定实验准备；2.会准确标定2,6-二氯靛酚溶液，正确进行抗坏血酸的测定；3.能真实准确地进行数据记录和分析处理；4.能根据检测结果正确评价食品中抗坏血酸含量是否符合标准。
素质目标1.强化和提高学生实验室安全意识；2.培养学生独立思考、务实求真的学习精神；3.培养勇于发现问题、解决问题的职业素质。
教学重点1.抗坏血酸的分类2. 2 ,6-二氯靛酚滴定法测定食品中抗坏血酸的原理教学难点滴定操作的规范性食品中抗坏血酸测定的检测依据GB 5009.3-2016。
抗坏血酸含量的测定
抗坏血酸含量的测定植物学实验技术一、原理还原型抗坏血酸（AsA）可以把铁离子还原成亚铁离子，亚铁离子与红菲咯啉（4,7-二苯基-1,10-菲咯啉，BP）反应形成红色螯合物。
在534nm波长的吸收值与AsA含量正相关，故可用比色法测定。
脱氧抗坏血酸（DAsA）可由二硫苏糖醇（DTT）还原成AsA。
测定AsA总量，从中减去还原型AsA，即为DAsA含量。
二、仪器与用具离心机；分光光度计；研钵；试管。
三、试剂5%三氯乙酸（TCA）；20%TCA；无水乙醇溶液；0.4%磷酸－乙醇溶液；0.5%BP－乙醇溶液；0.03%FeCl3－乙醇溶液；0.6g/L DTT；Na2HPO4－NaOH溶液：以0.2mol/L Na2HPO4和1.2mol/L NaOH等量混合；60mmol/L DTT－乙醇。
四、方法1. 制作标准曲线配制浓度为2mg/L，4mg/L，6mg/L，8mg/L，10mg/L，12mg/L，14mg/L的AsA系列标准液。
取各浓度标准液1.0ml于试管中，加入1.0ml 5%TCA、1.0ml乙醇摇匀，再依次加入0.5ml 0.4%H3PO4－乙醇、1.0ml 0.5%BP－乙醇、0.5ml 0.03%FeCl3－乙醇，总体积5.0ml。
将溶液置于30℃下反应90min，然后测定A534。
以AsA浓度为横坐标，以A534为纵坐标绘制标准曲线，求出线性方程。
2. 提取取植物叶片1.0g，按1∶5（W/V）加入5%TCA研磨，4000r/min离心10min，上清液供测定。
3. 测定（1）AsA测定取1.0ml样品提取液于试管中，按上述相同的方法进行测定，并根据标准曲线计算AsA含量。
（2）DAsA测定向1.0ml样品液中加入0.5ml 60mmol/L DTT－乙醇溶液，用Na2HPO4－NaOH混合液，将溶液PH调至7~8，置于室温下10min，使DAsA还原。
然后加入0.5ml 20%TCA，把PH调至1~2。
片剂中抗坏血酸(Vc)含量的测定(直接碘量法)
西北大学基础化学实验
wVc =
四、有关常数
M K 2Cr2O 7 = 294.18 g·mol-1
MVc = 176.12 g·mol-1
西北大学基础化学实验
五、注意事项
1. 终点变色都很敏锐，小心滴过量。 2. 用K2Cr2O7标定Na2S2O3时，用H2O冲洗 表面皿且用H2O稀释后，慢摇快滴至黄绿 色。 3. 称量Vc时，注意勿将Vc从称量瓶口撒 出，慢盖瓶盖。
西北大学基础化学实验
二、实验步骤
1. Na2S2O3溶液的标定：移取25.00 mL K2Cr2O7于锥形瓶中， 加入5 mL (1+1) HCl、5 mL 200g ·L-1 KI，盖上表面皿于暗 处反应5分钟后，用水冲洗表面皿，加入60～80 mL H2O稀 释。立即用Na2S2O3滴定至黄绿色，加入2 mL淀粉溶液， 继续用Na2S2O3滴定至亮绿色即为终点。(平行三份) 2. I2溶液的标定：移取25.00 mL Na2S2O3于锥形瓶中，加入 50 mL H2O、2 mL淀粉溶液，用I2溶液滴定至稳定的蓝色 即为终点。(平行三份) 3. 片剂中Vc含量的测定：减量法准确称取Vc 粉末0.2～0.3 g 于锥形瓶中，用100 mL H2O、10 mL HAc溶解后，加入2 mL淀粉溶液，用I2溶液滴定至稳定的蓝色即为终点。(平 行两份)
西北大学基础化学实验
西北大学基础化学实验
三、结果表示
用片剂中Vc的质量百分含量(Vc%)表示，保留四位 有效数字。 计算公式：
mK 2Cr2O7 × 3 × 2 × 1000 M K 2Cr2O7 × 4 × V Na 2S2O3
抗坏血酸含量测定(分光光度计法)
植物生理学模块实验指导李玲主编科学出版社一、维生素C含量的测定方法（分光光度计法）【实验目的】学习利用分光光度计法测定维生素C（抗坏血酸）含量的原理和方法。
【实验原理】维生素C（抗坏血酸）具有较强的还原力，可以把铁离子（Fe3+）还原成亚铁离子（Fe2+），亚铁离子与红菲啰啉（4,7-二苯基-1,10-菲啰啉，BP）反应形成红色螯合物。
此化合物在波长534nm处具有强的吸收峰，且吸光度与反应液中抗坏血酸含量呈正相关。
因此，可用比色法来测定抗坏血酸含量。
【器材与试剂】1.实验仪器与用具离心机、分光光度计、研钵、电子天平、容量瓶（50ml和100ml）、漏斗、滤纸、离心管、试管。
2.实验试剂50g/L三氯乙酸（TCA）溶液：称取5g三氯乙酸（分析纯），用蒸馏水溶解，稀释至100ml。
0.4%磷酸-乙醇溶液：量取0.47ml 85%磷酸溶液加入到无水乙醇中，并用无水乙醇稀释至100ml。
5g/L BP-乙醇溶液：称取0.25g BP（纯度>97%）加入到无水乙醇中溶解，并用无水乙醇稀释至50ml。
0.3g/L FeCl3-乙醇溶液：称取0.03g FeCl3加入到100ml无水乙醇中，摇匀。
100μg/ml 标准抗坏血酸溶液：称取10mg 抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用），用50g/L TCA 溶液溶解，定容至100ml，即1ml溶液含100μg抗坏血酸。
现用现配，保存于棕色瓶中，低温冷藏。
3.实验材料苹果、梨、香蕉、柑橘等果实。
【实验步骤】1.制作标准曲线取7支试管，编号，按表1加入各种溶液，将混合液置于30℃反应60min，然后以0号试管混合液为参照，于波长534nm处测定吸光度值。
以抗坏血酸质量为横坐标，吸光度为纵坐标汇至标准曲线，求的回归方程。
表1 制作抗坏血酸标准曲线试剂含量项目试管号0 1 2 3 4 5 6抗坏血酸标准液/ml 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 50g/L TCA/ml 2.0 1.9 1.8 1.7 1.6 1.5 1.4无水乙醇/ml 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0混匀、摇匀0.4%磷酸-乙醇溶液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.55g/L BP-乙醇溶液/ml 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 0.3g/L FeCl3-乙醇溶液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5相当于抗坏血酸量/μg0 10 20 30 40 50 602.提取洗净新鲜果实，吸干，剪碎后混匀，分别称取5g 样品置于研钵中，加入20ml 50g/L TCA溶液，在冰浴条件下研磨成浆状，转入到100ml容量瓶中，并用50g/L TCA 溶液定容至刻度，混合、提取10min后，过滤收集滤液备用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验十五抗坏血酸含量测定（2,6-二氯酚靛酚法）
一、目的
学习维生素C的生理功能和性质，掌握用2，6-二氯酚靛酚法测定维生素C 的原理和方法。
二、原理
维生素C是一种水溶性维生素，是人类营养中最重要的维生素之一，人体缺乏维生素C时会出现坏血病，因此它又被称为抗坏血酸。
此外维生素C还具有预防和治疗感冒以及抑制致癌物质产生的作用。
维生素C的分布很广，尤其在水果（如弥猴桃、橘子、柠檬、山植、袖子、草莓等）和蔬菜（觅菜、芹菜、青椒、菠菜、黄瓜、番茄等）中的含量更为丰富。
不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。
测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。
维生素C在金属铜和抗坏血酸氧化酶存在下极易氧化，因此，在用铜制品做食品时，维生素C易丢失。
此外在碱性溶液中，维生素C也易被破坏，而在酸性溶液中比较稳定。
利用它具有的还原性质可测定其含量。
还原型抗坏血酸能被染料2，6-二氯酚靛酚氧化为脱氢型，该染料在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色，被还原后变为无色。
因此用2，6-二氯酚靛酚滴定含有维生素C的酸性溶
液时，维生素C尚未全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色，当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2，6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现淡红色。
用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。
三、仪器、试剂和材料
1．仪器
（1）天平
（2）组织捣碎机
（3）微量滴定管（5ml）
（4）容量瓶（50ml）
（5）刻度吸管（5ml，10ml）
（6）锥形瓶（100ml）
2．试剂
（1）l％草酸溶液：草酸1g溶于100ml蒸馏水中
（2）2％草酸溶液：草酸2g溶于100ml蒸馏水中
（3）抗坏血酸标准溶液（0.1 mg／ml）：精确称取10mg纯抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）用1％草酸溶液溶解并定容至100ml。
此溶液应贮存于棕色瓶中，最好临用前配制。
（4）0．05％2, 6-二氯酚靛酚溶液：称取500mg 2, 6-二氯酚靛酚溶于300ml 含104mg碳酸氢钠（A.R）的热水中，冷却后用蒸馏水稀释至1000ml，滤去不溶物，贮存于棕色瓶中，4℃冷藏可稳定一周，临用前以标准抗坏血酸标定。
3．材料
新鲜水果或蔬菜
四、操作步骤
1．提取抗坏血酸
取新鲜水果或蔬菜50g，加入50ml 2％草酸溶液，用组织捣碎机打成匀浆。
过滤取得滤液，滤饼可用少量2％的草酸洗几次，合并滤液，记录滤液体积。
2．2, 6-二氯酚靛酚溶液的标定
准确吸取4.0 ml抗坏血酸标准液（含0.4g抗坏血酸）于100ml锥形瓶中，加16ml 1％草酸溶液，用2, 6-二氯酚靛酚滴定至淡红色（15秒内不褪色即为终点）。
记录所用染料溶液的体积，计算出lml染料溶液所能氧化抗坏血酸的量。
3．样品滴定
准确吸取样品提取液两份，各20ml，分别放入两个100ml锥形瓶中，滴定方法同2中的操作，另取20ml 1％草酸作空白对照滴定。
五、结果处理
取两份样品滴定所耗用染料体积的平均值，代入下式计算100g样品中还原型抗坏血酸的含量：
杭坏血酸含量（mg／100g样品）＝（V1－V2）·V·M·100/V3·W 式中，V1为滴定样品所耗用的染料的平均毫升数；
V2为滴定空白对照所耗用的染料的平均毫升数；
V为样品提取液的总体积；
V3为滴定时所取的样品提取液的毫升数；
M为lml染料所能氧化抗坏血酸的量（mg）(可由操作2计算得到）；
w为待测样品的重量（g）。
六、注意事项
（1）用本法测定抗坏血酸含量虽简便易行，但有下述缺点：第一，本法只能测定还原型抗坏血酸，不能测出具有同样生理功能的氧化型抗坏血酸和结合型抗坏血酸。
第二，样品中的色素经常干扰对终点的判断，虽可预先用白陶土脱色，或加入2～3 ml二氯乙烷，以二氯乙烷层变红为终点，但实际上仍难免产生误差。
（2）用2％草酸制备提取液，可有效地抑制抗坏血酸氧化酶，以免抗坏血酸变为氧化型而无法滴定，而1％的草酸无此作用。
（3）如样品中有较多亚铁离子（Fe2+）时，也可使染料还原而影响测定，这时应改用8％乙酸代替草酸制备样品提取液，此时Fe2+不会很快与染料起作用。
（4）如样品浆状物泡沫过多，可加几滴辛醇或丁醇消泡。
（5）市售的2, 6-二氯酚靛酚质量不一，以标定0．4mg抗坏血酸消耗2ml左右的染料为宜，可根据标定结果调整染料溶液浓度。
（6）样品提取制备和滴定过程中，要避免阳光照射和与铜、铁器具接触，以免破坏抗坏血酸。
（7）滴定过程宜迅速，一般不超过2min。
样品滴定消耗染料1～4ml为宜，如超出此范围，应增加或减少样品提取液的用量。
（8）提取的浆状物如不易过滤，亦可进行离心收集上清液。
七、思考题
1．维生素C具有什么性质和生理功能？
2．为了在实验中得到准确的抗坏血酸含量应注意哪些问题？
参考文献
冯耀主编维生素趣谈。
重庆：四川科学技术出版社，1999
李建伍等生物化学实验原理和方法。
北京：北京大学出版社，2001
文树基主编基础生物化学实验指导。
西安：陕西科学技术出版社，1994
Strong，FM and Koch，GH，Biochemistry，Laboratory Manual，WMC Brown Co Publishers，Iowa，USA，1974。