Waters液相色谱系统-PPT文档资料

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高效液相色谱1-PPT文档资料

A 涡流扩散项毛细管气相色谱中 A=0
B 纵向扩散项液相色谱中远小于气相色谱通常流速下B ≈ 0
C 传质阻力项 C = Cm(动态流动相) + Csm(静态..) + Cs(固定相)
对键合相，Cs=0
所以对液相色谱
H=A + B/u + Cmu + Csmu + Csu
对键合相液相色谱 H=A + Cmu + Csmu
通用型检测器
示差折光电导检测器等
第十八页，共71页。
第十九页，共71页。
第二十页，共71页。
1.5.5 附属系统
包括
脱气
梯度淋洗柱恒温自动进样馏分收集
数据处理等
第二十一页，共71页。
2. 基本理论，分离的控制
❖ 与GC一样，样品组分在固定相与流动相之间的吸附与分配平衡的差异产生分离，这是一个负熵过程。而同时存在的熵增过程--区带自发扩散使组分混合。
第三十二页，共71页。
❖ 处于同一组的溶剂，分离中有相似的选择性；而处于不同组的溶剂，其选择性差别较大
❖ 正相色谱中，固定相是极性的，所以增加极性参数P’，洗脱能力增加
❖ 反相色谱中，固定相是非极性的，所以增加极性参数P’，洗脱能力降低
第三十三页，共71页。
(4) 保留值与流动相组成
液固色谱中，k’对温度的变化不如气相色谱敏感，通常不考虑。因此，在流动相线速确定后，影响分离效果合分离时间的主要因素就是流动相组成。通过统计热力学的方法可以导出在二元流动相体系中组分容量因子k’与强溶剂的
❖ 柱管常用不锈钢金属管 ❖ 一般色谱柱长5～30cm，内径为2～5mm，
凝胶色谱柱内径3～12mm，制备柱内径较大，可达25mm以上。 ❖ 一般在分离前有一个预柱，预柱内填充物和分离柱尽可能完全一样

waters公司高压液相色谱仪精华学习资料

2000 WATERS CORPORATION。在美国印刷。保留所有权利。未经出版商的书面允许，不得以任何形式转载本书或其中的任何部分。
Breeze、 busLAC/E 和 SAT/IN 是 Waters Corporation 的商标， Millennium、 Symmetry 和 Waters 是 Waters Corporation 的注册商标。 Windows、Windows NT 和 Microsoft 是 Microsoft Corporation 的注册商标。 Oracle 是 Oracle Corporation 的注册商标。所有其它商标均归各自的所有者独有。
4
目录
4.4 4.5 索引
恢复项目 ........................................... 82 关闭 Breeze 系统 ................................... 85 ................................................... 86
目录
5
图表
1 2 1-1 1-2 1-3 1-4 1-5 1-6 1-7 1-8 1-9 2-1 2-2 2-3 2-4 2-5 2-6 2-7 2-8 2-9 2-10 2-11 2-12 2-13 2-14 2-15 安装 Breeze 硬件的建议读物 ...............................12 安装和使用 Breeze 软件的建议读物 .........................13 Breeze 系统启动流程图表 ..................................16 Breeze Diagnostic/Configuration Wizard ...................19 Breeze 软件的第一个屏幕 ..................................20 “Sample Queue”工作区 ....................................21 “Manage Breeze Projects”视图中的默认项目 ................22 “Manage Breeze”工作区 ...................................23 “How To”窗口 ............................................25 Breeze 主窗口的组成部分 ..................................26 采集栏（在空闲系统中） ...................................29 选择处理模式 .............................................34 “View Method”工作区的仪器参数 ...........................35 “Save Current Method”对话框 .............................37 “Purge Wizard”的首页 ....................................38 “Prime Pump”页 ..........................................39 “Purge Pump”页 ..........................................39 “Specify Single Inject Parameters”对话框 ................41 “Select Sample Set Method Type”页 .......................43 “Select Location of Standards”页 ........................44 “Specify Calibration Options”页 .........................44 “Describe Standard Bracket”页 ...........................45 “Enter Level Details”页 .................................46 “Describe Samples”页 ....................................47 色谱柱的 “Identification”页 .............................48 标准和样品的 “Identification”页 .........................48

高效液相色谱系统ppt讲解

色谱柱
液相色谱柱是高效液相色谱仪的核心部分，是分析好坏、成败的关键
键合相色谱柱
• 键合相: – 反相: 70%; C18, 65%; C8, 15%; 苯基柱 <5%, – 正相: 20%; 硅胶、 -NH2、 -CN、-OH – 其它 (手性柱, 离子交换柱): 10%
• 反相色谱是目前应用得最为广泛的高效液相色谱方法。 • C18 和 C8 在反相色谱中应用得最为广泛。
LC-5510紫外-可见光检测器
功能特点： • 使用波长范围宽 • 波长精度高 • 噪声低漂移小 • 可用汞灯自动校正波长 • 采用LCD带背光的显示屏来显示波长的设
置参数和运行参数
LC-5510工作站
功能特点： • 具有色谱仪控制系统、数据采集和处理系
统； • 可进行波长程序控制 • 可对两台泵进行程序控制，进行梯度洗脱 • 功能健全，操作便捷
±1.0% ±1.0% ±2.0%
0.5% ±5.0%
0.5%
1.5%
±2.0
±1.0%
%
最高压力
4000 Psi 40 MPa 39.2 MPa 40.0 MPa 40MPa
进样器
• 隔膜进样 • 停留进样 • 阀进样 • 自动进样
进样器
• 对进样器的要求密封性好死体积小
重复性好保证中心进样进样时对色谱系统的压力、流量影响小
• 在线脱气机主要由真空泵、脱气膜管、传感器、控制电路、真空腔等组成
• 在线脱气机的主要目的是脱除流动相中的气泡
LC-5510高压输液泵
技术指标 • 工作压力：0～42MPa • 流量范围：0.01～5.0mL/min • 流量准确性：≤1％ • 流量精密度： ≤0.5％ • 压力脉动： ≤1％

waters-e高效液相色谱ppt课件

4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用甲醇水溶液冲洗。 5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水冲洗及
保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水极性太强且易长霉。。 6.开机时，流速和柱压要逐渐增加。 7.要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
流动相流出检测器可被送至废液瓶，或按需被收集。当流动相含有一个分开的化合物谱带，高效液相色谱可以收集含有纯
化的化合物的该洗脱组分，用于进一步分析。
注意高压管路和附件用来连接泵、进样器、色谱柱和检测器单元，形成流动相、样品和化合物分离谱带的通路。
高检将效测电器信液连号相接转计换色算为谱机色数谱如据图站，何在，工显高示效作屏液上相展色现谱出系来统。单元先记录电信号，再
液相色谱的基本流程图
流动相
进样阀泵
色谱柱
泵输液进样
分离
检测器
检测
AB C
DE
G
F
记录
液液相相流色色动谱谱相实：的验种所类各需及的部配基比分本，参示等数度-意-或亦梯图称度色谱条件
固定相：色谱柱类型及内径、长短流动相输送系统参数：流速检测器参数：紫外检测波长，灵敏度等温度控制进样量
四元梯度洗脱的溶剂输送动进样系统柱温箱液晶显示器内置的柱塞杆密封垫清洗系统溶剂瓶托盘键盘用户界面及软盘驱动器
打开电源至on位置，开机依次接通 2695 分离单元、检测
2器开、机计算机和打印机的电源。接通后，约 20s 仪器开始自
检，约 1min 后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化。
溶流【剂动M管相en理脱u/气系St确a统tu认s的所】有，准溶进备剂入管“路St都at充us满（溶1 剂），”按屏幕

《Waters液相》课件

Waters液相技术的优势
Waters液相技术以其高效、精确和可靠性而闻名，被广泛应用于医药、食品和环境分析领域。
2. 液相色谱法基础
液相色谱法的定义和原理
液相色谱法是一种分离和检测样品成分的化学分析技术，基于样品在液相中的分配和吸附行为。
液相色谱法的分类
液相色谱法按分离机理可分为吸附色谱、离子交换色谱、分子排阻色谱等多种类型。
Waters HPLC系列液相色谱仪器拥有多个型号，根据用户需求选择最适合的仪器。
Waters HPLC系列液相色谱仪器的常见问题及解决方法
常见问题包括峰形异常、峰分离不良等，我们提供一系列解决方法帮助用户解决实验中的挑战。
4. Waters液相色谱应用举例
Waters液相色谱应用于生物医药分析的案例分析
《Waters液相》PPT课件
这份PPT课件将带您深入了解Waters液相技术。从Waters公司简介到液相色谱法的基础知识，再到Waters液相色谱仪器的介绍和应用案例，我们将为您展示其优势和未来发展趋势。
1. Waters液相介绍
Waters公司简介
Waters是全球领先的科学仪器制造商，专注于液相色谱技术的研发和创新。
5. 结语
1 Waters液相色谱技术的未来发展趋势
2 推荐阅读和参考资料
展望Waters液相色谱技术的未来，包括更高分辨率、更高灵敏度和更多应用领域的拓展。
提供了一些相关的书籍、期刊和网站，供感兴趣的人进一步学习和了解Waters液相色谱技术。
注意
本Pቤተ መጻሕፍቲ ባይዱT仅供学习交流使用，不得用于商业用途。
通过具体案例展示Waters液相色谱在生物医药领域的应用，如药代动力学研究和蛋白质分析等。

Waters高效液相色谱维护与保养ppt课件

通过进标样建立一个校正曲线（一般是6针标样）。校正曲线的横坐标是标样的浓度（含量），纵坐标是峰面积；校正曲线就相当于： Y=aX+b的公式。校正曲线建立好后样品的峰面积带入方程就可以得到相应的浓度（含量）。
.
10
第二部分HPLC的组成
输液系统泵以及流动相
进样系统进样阀
分离系统 -色谱柱
.
4
术语
• 8、色谱峰：色谱柱流出组分通过检测器时产生的响应信号的微分曲线。
• 9、峰底：峰的起点与终点间的直线
• 10、峰高：在峰的两侧拐点处所作切线与峰底相交两点之间的距离。 11、半峰宽（W1/2）：通过峰高的中点做平行与峰底的直线，与其峰两侧相交两点间的距离。 12、峰面积（A）：峰与峰底间的面积，又称作响应值。
• 13、拖尾峰：后沿较前沿平缓的不对称峰。
• 14、前伸峰：前沿较后沿平缓的不对称峰
.
5
术语
• 15、死时间（t0）:不被固定相滞留的组分，从进样到出峰最大之所需的时间
• 16、保留时间（tR）：组分从进样到出峰最大之所需的时间。
• 17、死体积（V0）：不被固定相滞留的组分，从进样到出峰最大之所需的流动相的体积
.
2
第一部分术语
• 1、液相色谱法：就是用液体作为流动相的色谱法。
• 2、固定相：在色谱法中，静止不动的一相（固体或液体）称为固定相
• 3、流动相：能运动的一相（一般是气体或液体）称为流动相
• 4、色谱图：色谱柱流出物通过检测器时所
产生的响应信号对时间的曲线图。纵坐标
为信号强度（通常我们所说的样品浓度），
.
8
第一部分术语
22、面积归一法：将所有峰的面积总和定为1，测量各峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积，计算各峰面积占总峰面积的百分率。是包含水分在内的一个计算结果。

Waters2695使用维护PPT参考幻灯片

2020/3/24
5
系统前处理
• 脱方“气M（enDue/gSatasstuges”r键）进:按入面“板Sta右tu下s （1）”界面，移动光标至 “Degassger→Mode”,按Enter选择“On”,打开在线脱气。
• 灌S“Dea注ialgW柱”，a塞sh显密）示封:在“清D主ia洗屏gn泵o幕s（t下iePs，r”im屏按e幕：，按“Prime Seal Wash”屏幕，按 “Start”直接清洗溶剂流出泵杆密封圈冲洗废液管，依次按 “Halt→Close”。
• 在外检测器参数设定：在“Instrument Method Editor”界面选择 “Single”或“Dual”，并设定所需波长，其他默认。
2020/3/24
10
建立项目、编辑仪器方法和方法组
• 泵参数设定： *Flow界页面：在“Pressure Limits”中填入压力界限值（通常为040000Psi)，在“Pump Mode”中选择洗脱模式Isocratic或Gradient，选择等梯度洗脱时应设置流速、四个通道的比例，通道比例之和为 100；选择梯度洗脱会弹出一个表格框，需设置时间程序、流速、梯度洗脱曲线及四通道的比例关系。 *Temperature页面：设置柱温箱和样品室温度及温度范围或上限（温度上限要比柱温设置稍高，否则仪器会自动报警）。 *Events页面：在“Enable Events”前选“√”，“time”不得设为零，一般设为0.02，“Event”选择“Switch”、“Function”选择“Pulse”（半自动设备必填，全自动设备可不填）。
• 湿“M灌en注u/（StaWtuest”P键rim进e入）“：St按atu面s（板1右）下”界方面，在“Composition”页面中选择将用到的溶剂通道改为“100%”，按液晶屏幕右下角 “Direct Function”键，移动光标选择“Wet Prime”，点击“OK”。流速及时间可使用默认值，也可自行设定（如： 5ml/min,3ml/min）,设定完成点击“OK” 即可。将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次（也可各通道选25%进行灌注）。

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微量进样（如作氨基酸分析）需在4ml样品瓶内加小内瓶（选一种）及弹簧：
015199 小瓶（Glass Conical Inserts，250L） 072704 小瓶（250L），比上一种的死体积更小 072708 弹簧（Compression Springs）
常用的配件（一）
075215 TEE 三通
Waters液相色谱系统
基本配置
配套一：最简单系统
部件号部件名称数量
207000 515 泵 081110 2487双通道可调波长紫外检测器
096146 起动工具包 086344 NovaPak 碳18柱 054100 746 积分仪
* 选件，可以不要 ** 可配其他种类数据处机
1 1
可取代梯度混合器（051518），但效果不好。
085102 溶剂过滤装置，带滤膜及真空泵
如不想要真空泵，用：085124
026865 水溶性样品过滤装置（带膜）
单配膜：水溶性样品过滤膜（026872）
026870
脂溶性样品过滤装置（带膜）
单配膜：脂溶性样品过滤膜（026874）
常用的配件（二）
用于Rheodyne 7725的进样针：
081110 2487双通道可调波长紫外检测器
1
042990 Millennium 32 色谱管理系统 1 Add On Kit（单系统）需要另配计算机
Millennium32 对计算机的要求
带软驱（1.44M）及光驱（8倍以上），鼠标及键盘的计算um II 233 以上
1* 1 1 **
025248 Rheodyne 7725进样器（组件） 1
配套二：简单梯度系统
部件号部件名称数量
062710 600 泵
1
024838 Rheodyne 7725 进样器（600用） 1 081110 2487双通道可调波长紫外检测器 096146 起动工具包 1 1*
086344 NovaPak 碳18柱
054100 746 积分仪
* 选件，可以不要 ** 可配其他种类数据处理机
1
1 **
配套三：高压梯度系统
部件号部件名称数量
207000 515 泵 051518 梯度混合器
081110 2487双通道可调波长紫外检测器 086344 Nova-Pak 碳18柱 1
2695 + 柱塞杆清洗 2695 + 柱塞杆清洗 2695 + 柱塞杆清洗 2695 + 柱塞杆清洗 2695 + 柱塞杆清洗 2695XE 270880 + 柱温箱 271009 + 脱气机 270886 + 柱温箱 +脱气机 271013 + 进样器控温 270008 270012
配套六：650蛋白提纯系统
10l-(033380)，50l-(033382)，100l-(033383) 250l-(033384)，500l-(033385) 5l-(096223)，10l-(007041)，20l-(096224) 50l-(096225)，100l-(096226) 025248 -（独立式，一般用于515泵）带启动装置，预装20l定量环，独立支架，5l/50l/200l定量环各一个，25l进样针一只 024838 -（600泵用）带启动装置，预装20l定量环， 600泵面板，5l/50l/200l定量环各一个，25l进样针一只
432及464等检测器配在配套三及四需加 SAT/IN（P/N=WAT201915）
2996（光电二级管矩阵检测器，PDA）可加在任何配套中，但是需要配置 Millennium32 用低反压色谱柱时（如离子色谱、GPC）需要配高灵敏度噪声滤除器（P/N=025200），但是：515及2690除外
内存要求：
对于Windows NT 操作系统，128M 或以上对于Windows 2000 操作系统，128M 或以上
显示卡及荧光屏要求：
分辨率1024 768（至少 800 600），256色
硬盘要求：
10G以上
配套一至四：配其他检测器
配2414时可直接加在上述所有配套中，但是在配套一及二中（要共用数据处理系统） 432，464及2475等检测器可直接配在配套一及二中（共用数据处理系统）
用于Rheodyne 7725的定量环：
注 - Rheodyne 7725的基本配置
常用的配件（三）
1升溶剂瓶 - 032750
柱塞杆清洗装置
100l泵头用：031870 225l泵头用：030852 （510、600用）
配套五：Alliance系统
包括溶剂及样品管理（即泵及自动进样器）系统，只需加检测器及数据处理。注意其他选件需根据不同的部件号一次配齐，不能单独配部件号
配套一至四：配自动进样器
717plus自动进样器可以直接取代7725i进样器。
717plus标准配置中：有4ml样品盘、样品瓶。
P/N 55872 P/N 55858 P/N 55886
标准配置：不锈钢、1600µL体积，还可选配：
PEEK Std Vol. Tubing Kit、620 µL PEEK Low Vol. Tubing Kit、400 µL S.S. Low Vol. Tubing Kit、620µL
2 1
1
025248 Rheodyne 7725 进样器（组件） 1
042990 Millennium 32 色谱管理系统 1 Add-On Kit（单系统）需要另配计算机 201914 PCM（泵控制器） 1
配套四：低压梯度系统
部件号部件名称数量
062710 600 泵
1
024838 Rheodyne 7725 进样器（600用） 1 086344 Nova-Pak 碳18柱 1
M650非金属蛋白提纯系统 2487双通道可调波长紫外检测器 088352 081110 040307 725000126 725000142 081157 081158
650的自选部件：
SE120 双笔记录仪 Waters馏份收集器 II 馏份收集器的切换阀（可选件） 2487惰性池 2487半制备池（作制备时用）离子交换柱（HR：DEAE/SP/Q/CM）凝胶柱（分子量不同）