脂质体的研究现状及主要应用

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脂质体在基因治疗中的应用研究及进展

脂质体在基因治疗中的应用研究及进展

脂质体在基因治疗中的应用研究及进展脂质体在基因治疗中的应用研究及进展摘要:脂质体作为基因载体较病毒载体具有安全性高,免疫原性小,毒性小,容易制备等优点已成功应用于很多体外及动物体内实验,但由于其转染效率低,靶向性低等缺点使其发展受到了很大限制。

本文作者通过查阅大量文献回顾脂质体在基因治疗中的应用以及研究进展。

得出结论为目前脂质体在基因治疗中的研究热点在于提高脂质体的转染效率,在靶细胞和靶器官达到治疗浓度才能有更好的治疗效果。

关键词:脂质体;基因;转染;靶细胞;靶器官;治疗浓度引言:基因治疗是将外源基因导入靶细胞并使其有效表达,从而达到治疗的目的。

基因治疗的关键在于将目的基因导入到靶细胞或靶器官。

而基因一旦进入体内,就有可能被体循环以及胞浆中的核酸酶降解,失效。

为了使目的基因在起效前保持结构和功能的完整性,需利用基因载体对其进行保护。

因此,基因载体的研究、发展和应用对基因治疗的成功起到至关重要的作用。

理想的基因载体应具备可保护基因,使其不被体内核酸酶降解,本身以及降解产物无毒性,无免疫原性,能高效的特异性的传递基因,在体内外均稳定,易大规模生产等条件。

目前基因治疗的载体可分为病毒载体和非病毒载体两类[1]。

病毒载体因其存在免疫原性、细胞毒性、潜在致瘤性等安全问题,且其容纳的目的基因较小、制作成本高,因而使用受到一定限制。

非病毒载体具有免疫原性低,毒性低,可携带的较大目的基因,制备成本低等优点而被广泛应用,其中以脂质体的发展和应用最为广泛。

本文将就脂质体在基因治疗中的应用及研究做一简要综述。

1.脂质体的定义以及分类脂质体是磷脂依靠疏水缔合作用在水中自发形成的分子有序组合体,多表现为多层囊泡结构,每一层都为类脂双分子层,层间以及脂质体的内核为水相,而双分子膜为油相。

磷脂结构上包括极性部分(称极性头部)和非极性部分(非极性尾部)。

在水相中,非极性疏水尾部因疏水作用力相互聚集在一起,并同时将极性的亲水头部暴露于水相中,形成稳定的结构[2]。

脂质体药品发展现状

脂质体药品发展现状

脂质体药品发展现状
近年来,脂质体药品在药物研发和临床应用领域取得了显著的发展。

脂质体是由磷脂、胆固醇和其他辅助成分组成的一种人工制备的纳米级药物递送系统。

它具有较小的颗粒大小、高药物稳定性和生物相容性等特点,因此被广泛用于改善药物的生物利用度、靶向递送和控释释放,以提高药物的治疗效果。

脂质体药物递送系统的发展主要分为以下几个方面。

首先,针对药物的生物利用度问题,脂质体可以通过包封药物分子,防止其在体内的早期代谢和降解,从而提高药物的口服生物利用度。

例如,脂质体包封的抗癌药物可以通过口服给药途径达到与静脉注射相当的治疗效果,降低了副作用和治疗费用。

其次,脂质体还可以通过改变药物的药代动力学参数,实现药物的缓释和延时作用。

脂质体内的药物可以缓慢释放,延长药物在体内的停留时间,从而减少剂量和给药次数,提高药物的疗效和依从性。

此外,脂质体还可以通过调节药物的分布和靶向递送,实现对疾病灶的精确治疗。

通过调整脂质体的表面性质和组分,可以将药物递送到特定的目标组织和细胞,减少对正常组织的不良影响。

已有的临床研究表明,利用脂质体作为载体的抗癌药物可以更好地靶向肿瘤组织,提高药物抗肿瘤活性。

值得一提的是,随着纳米技术的快速发展,一些新型的脂质体
药物递送系统也得到了广泛研究和应用。

例如,固体脂质体(SLN)和纳米脂质体(NLC)等新型载体的出现,进一步提高了药物的稳定性和负荷量。

综上所述,脂质体药物递送系统作为一种有效的药物递送策略,已在临床研究和应用中取得了重要进展。

随着对纳米技术的深入研究,我们相信脂质体药物将在未来发展中发挥更重要的作用,为药物研发和临床治疗带来新的突破。

脂质体在注射剂中的应用研究

脂质体在注射剂中的应用研究

脂质体在注射剂中的应用研究脂质体是由类脂质和多面体水包被形成的微囊,具有多种生物学功能,如提高药物生物利用度、延长药物血浆半衰期、改善药物的组织分布和增加药效等。

脂质体在药物输送系统中已被广泛研究和应用,尤其在注射剂中的应用备受关注。

1. 介绍脂质体和注射剂脂质体是一种微细颗粒,由一个或多个脂质组成的核心被一个或多个脂质层包围而成。

注射剂是将药物注射到人体内部的药物给药途径之一。

脂质体在注射剂中的应用,可以改善药物的稳定性、溶解性和活性。

2. 脂质体在注射剂中的制备方法脂质体的制备方法包括膜溶解法、乳化法、薄膜法、超声法等。

不同的制备方法对脂质体的性质和药物释放行为有不同的影响,因此选择合适的制备方法对于优化脂质体的性能至关重要。

3. 脂质体在注射剂中的药物输送机制脂质体在注射剂中被用作药物的载体,可以通过改善药物的溶解度、稳定性和渗透性等方式提高药物的体内利用率。

脂质体可以通过被吸收后在淋巴系统中释放、通过细胞内吞噬进行靶向传递等方式实现药物的输送。

4. 进展近年来,越来越多的研究表明脂质体在注射剂中的应用具有广阔的前景。

不仅可以提高药物的稳定性和生物利用度,还可以减少药物的剂量和毒性。

脂质体注射剂已经被用于抗癌药物、抗生素、激素类药物等领域,取得了良好的临床效果。

5. 脂质体在注射剂中的应用研究存在的问题和挑战尽管脂质体在注射剂中的应用研究取得了一定的进展,但仍然存在一些问题和挑战。

如脂质体的稳定性、生物相容性、药物的选择和适应症等都需要进一步的研究和探讨。

6. 未来发展趋势和展望随着科技的不断发展和创新,脂质体在注射剂中的应用将会有更广阔的发展前景。

未来可以通过结合纳米技术、基因工程技术等多种手段,优化脂质体的性质和药物的输送方式,为治疗各种疾病提供更好的解决方案。

7. 结论脂质体在注射剂中的应用研究已经取得了一定的进展,但仍然需要更多的研究来解决存在的问题和挑战。

相信通过科学家们的不懈努力和合作,脂质体注射剂将会成为未来药物输送系统中的重要组成部分,为人类的健康提供更好的保障。

脂质体研究进展.

脂质体研究进展.

脂质体研究进展脂质体是一种人工制备的磷脂类生化物质,属携有双层包膜的脂质小囊。

它作为药物的人工膜和赋形剂,可将治疗药剂准确地命中病变部位、组织和细胞。

脂质体包裹药物可用于肿瘤、免疫等方面的治疗。

关键词脂质体、膜、人工、赋形剂脂质体是一种人工制备的携有双层包膜的磷脂质小囊,可作为各类治疗药剂的人工膜和赋形剂。

通过各种给药途径,它可使所包裹的药物具有打靶作用,准确地击中病变部位、组织和细胞,从而增强药物的疗效。

1 脂质体的主用途主用途有:作为疫苗的包膜;作为NDA片段的输送赋形剂以治疗各种皮肤病;以含脂质体的药物治疗哮喘所致支气管缩窄;脂质体包裹的药物可用于缓解或预防手术后伤口粘连;这类药用化合物可应用于肿瘤治疗;此类药物在用于基因治疗时免用病毒载体;作为化妆品软膏可促进皮肤神经酰胺生长等。

脂质体抗肿瘤药可准确击中靶器官胰腺[1],亦可用来治疗头颈部鳞癌[2]。

脂质体药物具有对体内硬肿瘤打靶的功能[3],用于治疗胃或结直肠癌的肝转移或人乳头状瘤病毒的感染[4,5]。

脂质体及其包裹的药物可在体内外渗,进入硬瘤组织[6]。

投给脂质体进行体内动力疗法时,可观察到大鼠RR1022肿瘤模型的荧光变化[7]。

这类药物可用于治疗艾滋病并发的Kaposi肉瘤[8]。

脂质体能促进药物输入人白血病细胞[9]。

脂质体复合物可用于人树突状细胞的基因转移和介导DNA接种[10,11]。

它还被用于对肺泡巨噬细胞的药物打靶和白喉毒素A基因的介导[12,13]。

有关脂质体药物使激活的单核细胞凋亡的问题曾展开过争论[14,15]。

据报道,以脂质体包裹HBsAg经淋巴结传送可获致免疫性[16]。

此外,脂质体还可用作加速伤口愈合药物的包膜及基因疗法的佐料。

2 所使用的药物和脂质体类型2.1抗肿瘤药剂2.1.1各类脂质体包裹阿霉素(ADR)Sadzuka等报道了聚乙烯甘醇阿霉素脂质体(PEC-LADR)的抗肿瘤活性和副作用[1]。

脂质体组合可使ADR活性增强。

脂质体及其在生物医学中的应用

脂质体及其在生物医学中的应用

脂质体及其在生物医学中的应用脂质体是一种由不同的脂类和蛋白质所构成的微小粒子,具有包裹药物以及能被生物体所利用的优越性质。

这种微粒子可以做成各种形式,许多已经应用于生物医学领域中,具有广泛的应用前景。

脂质体的类型和结构脂质体的类型和结构多种多样。

它们可以根据其大小、形态、成分和制备方法的不同而被分类。

磷脂体和胆固醇是脂质体中最常见的成分。

磷脂体的两个疏水烃基团,一个定向向所定义的“内”区,另一定向向“外”区。

这种结构使脂质体的“头部”易溶于水,而“尾部”则很难,因此形成了一层双分子层结构。

脂质体的应用脂质体可以在很多不同的领域应用,其中医学领域显得尤为重要。

脂质体具有包裹和传递不同的化合物的能力,包括药物、DNA、siRNA以及其他生物活性分子等。

在药物传递方面,脂质体具有很高的价值。

由于药物可以在脂质体中稳定存放,因此可以提高药物在体内的生物利用度,降低药物对人体的有害效应,进而提高治疗效果。

现代生物医学领域的脂质体应用,已被运用到抗癌化疗、疫苗的传递、基因疗法、药物输送以及口服药剂等方面,极大地扩展了药物的运用范围,并提高药物的效果和安全性。

在抗癌化疗头痛领域,由于有很多药物对人体具有不同程度的毒性,因此传统的化疗剂量低,有时甚至无法达到有效治疗的程度。

脂质体的应用可以将药物包裹在其中,从而减轻毒性,促进有效药物的浓度,提高治疗的质量。

疫苗传递方面,脂质体将疫苗包裹在内,可以有效提高抗体反应和免疫应答,增强疫苗在人体内的效果,并减少不必要的注射次数。

脂质体在基因疗法方面应用广泛。

基因疗法是一种新的疗法,其中基因被用作治疗手段。

脂质体将带有基因药物的DNA包裹在内,将其输送到疾病区域,从而使其能够进入受损的细胞,并激活萎缩的基因。

这种方法对于目前无药可治的某些疾病来说,具有无法估值的潜力和热望。

脂质体的制备方法制备脂质体的方法有很多种,其中最常见的方法是薄膜辅助嵌入法和沉淀法。

通过薄膜辅助嵌入法可以制备多种类型的脂质体,该法的整体流程较为简单,主要由磷脂体和胆固醇组成。

脂质体载药系统的研究进展及应用

脂质体载药系统的研究进展及应用

脂质体载药系统的研究进展及应用随着生物技术的不断发展,医学界已经开始重视一种新型药物载体——脂质体。

脂质体是由磷脂、胆固醇和表面活性剂等成分组成的微粒,其粒径在20-500纳米之间。

它能够在体内稳定传递包括多肽类、核酸类、多种非水溶性药物及药物类固醇等在内的各种治疗剂。

本文就脂质体载药系统的研究进展及应用做出阐述。

一、脂质体的构成脂质体主要由磷脂、胆固醇及表面活性剂等成分构成,而表面活性剂又可分为阴离子型、阳离子型及非离子型三种。

脂质体的内核是由水性环境包围着的非水溶性药物。

脂质体的组成决定了它的药效学特性及应用价值。

二、脂质体的优点相较于传统的化学合成药物,脂质体载药系统具有多个独特的优点:1. 减少药物毒副作用传统药物治疗通常会出现毒副作用,而脂质体可减少药物在血液循环中的分布,从而减少药物与正常组织的接触,降低其毒副作用。

2. 提高药物的生物利用度在脂质体的保护下,药物可以更有效地通过生物膜,使药物在体内吸收率更高,从而提高其生物利用度及半衰期。

3. 可以调控药物释放速率脂质体可实现以时间或环境刺激为输入变量的药物释放。

例如,当脂质体进入肿瘤细胞时,由于其较高的代谢活性,可以导致脂质体的磷脂组分极易丧失,从而使药物被释放出来。

4. 靶向性强通过在脂质体表面进行修饰或加入配体,使其具有针对性靶向,从而增强药物的疗效。

三、脂质体的应用随着药物输送技术的不断进步,脂质体已经被广泛地应用于医疗领域。

1. 解决药物难以溶解的问题脂质体能够增加药物在水相介质中的可溶性,使药物更容易分散在人体内,从而更容易被利用。

2. 肿瘤治疗脂质体可以被定向输送到肿瘤细胞,从而提高药物在肿瘤细胞中的含量,降低药物在正常细胞中的含量。

3. 脑部疾病治疗脂质体能够通过脑血管中的小孔径使药物输送到脑部,使得治疗目标更为明确且疗效更强。

4. 透皮吸收脂质体内的药物可以被输送至皮肤下层,更好地发挥其外用治疗效果。

四、脂质体的未来脂质体的综合使用必将带来预期的效果。

脂质体化学与物理性质的研究与应用

脂质体化学与物理性质的研究与应用

脂质体化学与物理性质的研究与应用在生物医学领域中,脂质体是一种常用的载体。

脂质体是由磷脂、胆固醇、脂肪酸等成分构成的微囊,这些成分通常可在生物体内被找到。

通过改变这些脂质结构和化学组成,可调控脂质体的物理化学性质,从而制备出粒径、稳定性、负电荷密度等不同特性的脂质体,开发出多种用于制药和疗法的应用。

提高药物生物利用度和更快的释放速度是常见的研究目标之一。

通过制备各种特性的脂质体,可以实现这些目标。

例如,THC与酸的添加可以改善脂质体的负电荷密度,高负荷药物的载体特性提高,能够提高微粒的负电荷密度,从而提高货物的载体特性、改善分散性改善药物的释放速度。

在某些情况下,使用硬脂酸和Cl的脂质体分子,可用于高负载的药物制备。

脂质体的大小及稳定性也是需要考虑的因素。

在生物体内,药物通常会被消耗,但它们也容易被肝脏代谢降解。

因此,制备出直径小于200nm的脂质体相对来说更容易被吞噬细胞摄取,这些微粒的稳定性更高,也更有希望被运输到特定的肿胀组织或部位。

此外,通过控制脂质体成分中的表面疏水基和覆盖层的含量,还可以达到更高的稳定性。

例如,進行溶解分析和计算机模拟,可以制备出不同的疏水基含量、覆盖层较少的脂质体,尽可能获得微粒的高稳定性。

除了医疗用途,脂质体在生物物理学、表面科学和功能材料科学中也有广泛的应用。

例如,制备具有高表面积和大孔隙的脂质体可以用于超级电容器、气体储存材料等实验研究。

此外,它们也可以高度负电,因此可以用于化妆品和个人护理产品,具有良好的黏附性能,并能保持相对的稳定性。

而运用不同的胶体化学方法,将利用嵌段共聚物改善脂质体的机械稳定性、光学性能或电学性质。

例如,在制备脂质体的过程中,添加巯基的链延长物和胆固醇的链可以有效地提高脂质体的力度和稳定性,而在固定它们时,还可以将这些分子化合物作为交联剂使用。

总之,控制脂质体的物理化学性质,可以有助于增强药物的生物利用度并提高药物的稳定性,也有助于生物物理学、表面科学和功能材料科学领域的实验研究。

脂质体的研究与应用

脂质体的研究与应用

脂质体的研究与应用摘要:脂质体是某些细胞质中的天然脂质小体有关脂质体的研究进展进行了检索、分析、整理和归纳,综述了脂质体的分类、制备方法及研究进展。

关键字:主动载药;被动载药;药物载体;前体脂质体;靶向给药脂质体(Liposomes)是由磷脂胆固醇等为膜材包合而成。

磷脂分散在水中时能形成多层微囊,且每层均为脂质双分子层,各层之间被水相隔开,这种微囊就是脂质体。

脂质体可分为单室脂质体、多室脂质体,含有表面活性剂的脂质体。

按性能脂质体可分为一般质体(包括上述单室脂质体、多室脂质体和多相脂质体等)特殊性能脂质体、热敏脂质体、PH敏感脂质体、超声波敏感脂质体、光敏脂质体和磁性脂质体等。

按电荷性,脂质体可分为中性脂质体、负电性脂质体、正电性脂质体。

脂质体作为药物载体在恶性肿瘤的靶向给药治疗方面极具潜力。

为克服脂质体作为载体的靶向分布不理想、稳定性较差的缺点,近年来开发了一些新型脂质体,如温度敏感型、PL敏感型、免疫、聚合膜脂质体。

前体脂质体概念的提出和研究,提供了克服脂质体不稳定的较好思路。

目前,制备脂质体的方法较多,常用的有薄膜法、反相蒸发法、溶剂注入法和复乳法等,这些方法一般称为被动载药法,而pH梯度法,硫酸铵梯度法一般被称为主动载药法。

1被动载药法脂质体常用制备方法主要有薄膜分散法、反相蒸发法、注入法、超声波分散等。

陈建明等[1]在制备含药脂质体时,首先将药物溶于水相或有机相中,然后按适宜的方法制备含药脂质体,该法适于脂溶性强的药物,所得脂质体具有较高包封率。

1 )薄膜分散法此法是最原始但又是迄今为止最基本和应用最广泛的脂质体的制备方法。

将磷脂和胆固醇等类脂及脂溶性药物溶于有机溶剂,然后将此溶液置于一大的圆底烧瓶中,再旋转减压蒸干,磷脂在烧瓶内壁上会形成一层很薄的膜,然后加入一定量的缓冲溶液,充分振荡烧瓶使脂质膜水化脱落,即可得到脂质体。

2)超声分散法将磷脂、胆固醇和待包封药物一起溶解于有机溶剂中,混合均匀后旋转蒸发去除有机溶剂,将剩下的溶液再经超声波处理,分离即得脂质体。

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脂质体及其医药应用化学01 马高建2010012222 摘要:脂质体是一种天然脂类化合物悬浮在水中形成的具有双层封闭结构的囊泡,目前可由人工合成的磷脂化合物来制备。

它作为一种高效的载体,近年来在医药、化妆品和基因工程领域等都有广泛应用,国内外在这方面进行了大量的研究,并取得了一些进展。

本文将对脂质体的研究现状和其在医药方面的应用做一下概括,并对脂质体的发展前景做一下展望。

关键词:脂质体、制备、医药、应用脂质体最初是1965年英国学者Banyhanm和Standish将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现的。

磷脂分散在水中自然形成多层囊泡,每层均为脂质双分子层,囊泡中央和各层之间被水隔开,双分子层厚度约4 nm,后来将这种具有类似生物膜结构的双分子小囊泡称为脂质体,又称人工膜。

1988年,第一个脂质体包裹的药物在美国进行临床试验,现在用脂质体包裹的抗癌药、新疫苗、其他各种药品、化妆品、农药等也开始上市。

我国的脂质体研究始于上世纪70年代,经过近30年的研究,我国在脂质体的研究和应用方面取得了可喜的成果。

目前我国已有多个以脂质体作载体的新药剂型进入临床验证阶段。

当前脂质体的医药应用研究主要集中在模拟膜的研究、药品的可控释放和体内的靶向给药,此外还有如何在体外培养中将基因和其他物质向细胞内传递。

由于脂质体具有生物膜的特性和功能,它作为药物载体的研究已有多种,主要用于治疗癌症的药物,它可将包封的活性物质直接运输到所选择的细胞上,故有“生物导弹”之称。

1 脂质体及其分类脂质体(或称类脂小球、液晶微囊),是一种类似微型胶囊的新剂型,是将药物包封于类脂质双分子层形成的薄膜中间所制成的超微型球状载体剂型,其内部为水相的闭合囊泡。

由于其结构类似生物膜,故又称人工生物膜。

脂质体主要有双分子层组成,磷脂(卵磷脂、脑磷脂、豆磷脂)和胆固醇是形成双分子层的基础物质,再加入其他附加剂制备而成。

1.1 结构脂质体可以是单层的封闭双层结构,也可以是多层的封闭双层结构。

在显微镜下,脂质体的外形除了常见的球形、橄榄形外,还有长管状结构,直径可以从几百A到零点几毫米(mm),而且各种大小和形状的结构可以共存。

1.2 性质1.2.1 相变温度T c在加热情况下,脂质体的磷脂分子两条碳氢链从有序的凝胶排列变为无序的类流动状态,对于生物膜模拟这一点是非常重要的。

低于T c时,磷脂的碳氢链主要处于全反式构象,为“固体的”。

高于T c时,碳氢链的链运动和交叉构象增加,为“流动的”。

1.2.2 稳定性主要包括化学稳定性,指磷脂的水解,不饱和脂肪酸和使用的胆甾醇被氧化;大小的恒定性,由于聚集和融合使脂质体的大小发生变化;囊泡结构的保持;被包容物质的保存;生物体液对脂质体的完整性和渗透性的影响。

1.2.3 渗透性脂质体的渗透性是指它对水、离子、非电解质等的渗透能力,取决于脂质体的化学组成,T c和渗透物质的种类。

脂质体的渗透性对于作药品携带剂和靶向给药很重要。

1.3 分类1.3.1 脂质体根据结构不同,可以分为单室脂质体(球径≤25 µm)、多室脂质体(球径≤100 µm)、大孔径脂质体(球径约为0.13±0.06 µm,单层状)。

1.3.2 脂质体按性能可分为一般脂质体、热敏脂质体、磁性脂质体、微波敏脂质体、声振波敏脂质体、光敏脂质体、pH敏感脂质体、隐形脂质体、目标导向脂质体、阳离子脂质体等制剂。

1.4 作用机制(1)吸附是脂质体作用的开始,有温度、电荷依赖性,使脂质体吸附在培养细胞表面。

脂交换过程为脂质体与细胞先是吸附,然后在细胞表面蛋白质的介导下,特异交换脂类的极性顶部基团或非特异性的交换酰基链进入细胞;(2)内吞是脂质体主要作用机制,是非渗透载体穿过细胞最普遍形式;(3)融合脂质体膜和细胞膜成分相似可通过融合作用载药入细胞内。

2 脂质体的制备很多年前,人们在研究各种生物膜的过程中就发现,膜脂类的两亲分子都能在人为条件下形成球形的脂泡,即脂质体,如将磷脂酰胆碱悬浮于水介质中,通过声波作用即可得到大小均匀的闭合泡分散体系,这就是早起获得的脂质体。

到目前为止,在脂质体制备方面已研究出多种方法,比较常用的有以下几种:逆向蒸发法、类脂薄膜水化法、冻融法、冻干再水化法、钙诱导融合法、乙醇注入法、超声波法和表面活性剂增溶法等。

脂质体的制备方法可分为三大类:(1)物理分散法;(2)两相分散法;(3)表面活性剂增溶法。

2.1 物理分散法物理分散法的基本原理是将类脂材料干燥成薄膜,然后加入水溶性介质分散、膨胀、水合(即以手摇法为基础),然后再进一步处理。

这些方法的优点是制作简单,工艺不复杂,但包覆率都较低。

2.1.1 薄膜法类脂材料溶解在有机溶剂中,然后在旋转蒸发仪上真空蒸除溶剂,加入缓冲液,再加些小玻璃球以帮助分散,这样就形成了一个乳白色的分散液。

2.1.2 非手摇法在类脂膜形成后,首先将湿的氮气流通过薄膜15分钟,然后再加水膨胀、水合并慢慢搅拌形成脂质体。

此法可提高其包覆率。

2.1.3 超声波法超声波法可分为两种:水浴超声波和探针超声波。

探针超声波一般是将探针进入到分散液中,它只花几分钟就能完成。

现在更常用的是水浴超声波,它的优点是免除了可能的金属污染,重复性较好,但较为费时,均匀性也不是很好。

2.1.4 法兰白加压法此法是用非常高的压力将大的类脂球通过一个膜,将MLV经过1400大气压的法兰西压力筒一次,约60%左右的颗粒直径达25~50 nm,而通过四次后,约94%的脂质体直径达到了31.5~52.5 nm。

2.1.5 微乳化法利用高压留经过精确规限的细微通道,流体立即被加速至极高速度,并在特定的专利反应室内产生强大的剪切。

冲击及空化作用,形成预期的精细密集、极为均一的脂质体。

此法重复性好,能大规模生产;颗粒均匀,稳定性好;包覆率高。

2.1.6 预脂质体法此法是通过减少水的量增加干燥类脂的表面积而发展起来的。

将类脂干燥到一个多孔的支持体上,然后在搅拌下加入少量水以润湿被粉末包覆的干燥类脂,当支持体溶解后,就形成了一个MLV悬浮液。

一般这个过程是一点一点加水,带水蒸发后再加剩余的水,最后形成一个干燥的类脂(预脂质体)。

此法很有商业价值,因为在做成后,可将其密封起来,以避免氧化后变质,在用之前再加水溶解或加载活性成分。

2.2 两相分散法这个方法的基本原理是将类脂溶于无机溶剂中,然后这个油相与水相接触,同时胶黏剂蒸发,以变成脂质体。

2.2.1 乙醇注入法将类脂的乙醇溶液通过一个细的针头迅速注入到水溶性介质中,形成脂质体,它的直径约25 nm。

其主要缺点是包覆率低,溶剂乙醇很难除去。

2.2.2 乙醚注入法将类脂的乙醚溶液通过一个细的针头慢慢注入到升温的水溶性介质中,形成脂质体。

此法的优点是方法较温和、包覆率高且被氧化的可能性小,但是速度慢,不适合大量制备。

2.2.3 逆向蒸发法此法是先将类脂溶于乙醚中,然后加水溶性介质以形成油包水乳液,真空下蒸发溶剂,得到了脂质体胶。

该法包覆率高,一般在40%左右可形成大的单层球,颗粒也较均匀、稳定。

2.3 表面活性剂增溶法为防止表面活性剂、类脂和蛋白质混合胶束的形成,直到膜悬浮液澄清时表面活性剂才可加入。

当表面活性剂浓度降低后,原来的类脂和蛋白质就形成了空心球的结构。

2.3.1 熔融-匀质法这是目前制备SLN最经典的方法,将熔融的三月硅酸甘油酯、大豆磷脂和Poloxamer 188在高于70 ℃下高压匀质,冷却后得到。

2.3.2 冷却-匀质法将药物与脂质混合熔融,冷却后与液氮或干冰一起研磨至50pm以下,然后和表面活性剂溶液在低于脂质熔点5~10 ℃下高压匀质。

2.3.3 微乳法此法不适用有机溶剂,在熔融的硬脂酸、二十二烷酸、硬脂酸枸橼酸甘油酯中分别加入磷脂、辅助乳化剂(去氧牛黄胆酸)和热水,得到澄清的微乳。

再将热微乳倒入25倍体积的冰水中迅速冷却,最后超过滤出去辅助乳化剂,可以得到小于90 nm的超细硬脂酸甘油酯(SLN)。

在通常情况下,粒径随乳化剂用量增加而降低。

3 脂质体的检测3.1 颗粒度分布的测定取少量脂质体,用去离子水稀释200倍,以动态激光散射粒度测定仪测定粒度及其分布,每个样品重复运行5次取其平均值。

3.2 脂质体的显微形态结构鉴定3.2.1 负染法取脂质体液少许以1%磷钨酸染色后,涂碳的铜网在蜡片上制样,用电子显微镜以2万倍观察并拍片。

3.2.2 冰冻蚀刻法取脂质体少许,在-150 ℃冷冻后转入-120 ℃冷冻台上,抽真空,用冷刀断裂,再将其转入-100 ℃真空度为1.333×10-6 KPa的柱中刻蚀,以碳—铂复型,清洗后捞至铜网上,以2万倍电镜拍片,均为脂双层的冻裂光滑之表面蚀刻迹象。

3.3 包封率的测定用超速离心法将脂质体分为两部分,然后分别测定离心上清液和沉淀的紫外吸收,各以空白脂质体作为对照,按下式计算包封率:包封率(%)=离心沉淀的A265/(离心沉淀A265+离心上清A265)×100%4 脂质体的医药应用4.1 药物载体由于脂质体形成时,各片层之间含有水相,水溶性药物可包裹在水相内,脂溶性药物则嵌合于脂质双分子层中。

根据脂质体的这一结构特点,将一些毒副作用大,稳定性差的药物制成脂质体,可达到降低毒性,增加药效的作用。

脂质体在水相和脂相均能适应,与细胞亲和力强,可增加药物对细胞膜的通透性并可改变药物的动力学性质和组织分布。

脂质体种类繁多,组成和大小不同,表面电荷也不同,对分子又有渗透性,靶向给药就是将药品通过鞋带系统理想的绕过身体正常部位,靶向体内需要治疗的患病区。

如果将药物分子包结在脂质体中,外面再接上免疫蛋白等抗体,就有可能导向抗原实现靶向给药。

4.1.1 抗肿瘤药物的载体脂质体作为抗肿瘤药物载体具有增加与肿瘤细胞的亲和力、克服耐药性、增加药物被癌细胞的摄入量、降低药物剂量、提高疗效、降低毒副作用的特点。

有与肿瘤细胞中含有比正常细胞较高浓度的磷酸酶及酰胺酶,因此如将抗药物包制成脂质体,不仅由于酶解使药物容易释出,而且亦可促使药物在肿瘤细胞部位特异的蓄积。

由于脂质体或已吞噬载有脂质体药物的巨噬细胞不断释放药物,从而延长了药物在血液中保持有效治疗作用浓度的时间。

4.1.2 抗寄生虫药物的载体由于脂质体的天然靶向性,静脉注射后,可迅速被网状内皮细胞所摄食,利用这一特点可以用含药物脂质体治疗内皮系统疾病如利什曼病和疟疾等疾病。

4.1.3 抗菌药物的载体利用脂质体与生物细胞膜亲和力强的特性,将抗生素包裹在脂质体内可提高抗菌效果。

结合是一种常见疾病,结核杆菌主要寄生在正常细胞中,有一定耐药性,若将抗结核药物包入脂质体中,脂质体可将药物带入细胞内,杀死结核菌疗效很好。

4.1.4 激素类药物的载体抗甾醇类激素包入脂质体后具有很大的优越性,首先浓集于炎症部位便于细胞吞噬,其次被包的离散药物与血浆蛋白作用,一旦到达炎症部位,就可以内吞融合释放药物在较低剂量下发挥疗效。

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