医学微生物学实验报告
医学微生物学课程实习实验报告

医学微生物学课程实习实验报告一、实验目的通过本次实验,掌握医学微生物学的基本实验技能,了解细菌、病毒的形态结构及其生理特性,提高观察、分析问题和解决问题的能力。
二、实验原理医学微生物学是研究微生物在医学领域中的分布、分类、形态、生理、致病和免疫等方面的科学。
实验中,通过观察细菌、病毒的形态结构,研究其生理特性,从而为临床诊断和治疗提供理论依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:细菌、病毒样本,染色剂,培养基等。
2. 实验仪器:显微镜,培养箱,接种环,镊子,无菌棉拭子等。
四、实验步骤1. 细菌观察:(1)制备细菌涂片;(2)革兰染色;(3)显微镜观察,记录细菌形态、大小、排列等特征。
2. 病毒观察:(1)制备病毒样本涂片;(2)荧光染色;(3)显微镜观察,记录病毒形态、大小等特征。
3. 细菌生理特性研究:(1)接种细菌于不同培养基;(2)置于培养箱中培养;(3)观察细菌生长情况,记录菌落大小、形状、颜色等特征。
4. 病毒复制与感染实验:(1)接种病毒于细胞培养液;(2)观察细胞病变情况;(3)记录病毒复制、感染过程。
五、实验结果与分析1. 细菌观察结果:通过显微镜观察,发现细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。
革兰阳性菌呈紫色,菌体较大,排列紧密;革兰阴性菌呈红色,菌体较小,排列疏松。
2. 病毒观察结果:通过荧光染色,发现病毒呈圆形或椭圆形,大小约为100-300纳米。
病毒粒子结构清晰,荧光染色剂使其发出绿色荧光。
3. 细菌生理特性研究结果:细菌在不同培养基上的生长情况各异。
例如,大肠杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好,形成较大菌落,颜色为红色;金黄色葡萄球菌在血平板上生长良好,形成较小菌落,颜色为金黄色。
4. 病毒复制与感染实验结果:病毒接种于细胞培养液后,细胞出现病变现象,如细胞体积增大、细胞膜破裂等。
通过观察病毒复制、感染过程,可以了解病毒的生物学特性。
六、实验结论通过本次实验,掌握了医学微生物学的基本实验技能,对细菌、病毒的形态结构及其生理特性有了更深入的了解。
医学微生物实验报告

医学微生物实验报告医学微生物实验是医学生物学的重要组成部分。
通过对病原微生物的检测和分析,可以精确确认疾病的病因,从而提供治疗方案和预防措施。
本篇文章将从实验流程、结果分析和病例分析等方面介绍医学微生物实验报告的编写。
一、实验流程医学微生物实验的流程包括标本采集、处理、培养和鉴定等环节。
标本采集应注意无菌、标记和包装等规范,不同部位的标本需特别注意。
实验过程中的温度、pH值、氧气含量和时间等因素也需控制和记录。
实验处理包括分离、纯化和鉴定等步骤。
常规培养方法包括悬浮液培养、平板培养和深层培养。
鉴定方法包括血清学、生化学和分子生物学等多种技术手段。
鉴定结果需结合临床表现和病史等综合分析,从而确定病原微生物的种类和药敏性。
二、结果分析医学微生物实验结果包括培养、鉴定和药敏试验等内容。
培养结果应包括菌株特征、数量和生长条件等;鉴定结果应包括生理生化特征、抗原性和基因序列等;药敏试验结果应包括对多种抗菌药物的敏感性和耐药性等。
不同实验结果间需相互印证和综合比较,从而得出确切的诊断结论。
三、病例分析医学微生物实验报告需结合具体临床病例进行分析。
以某患者的血液标本检测为例,实验结果显示该菌株为革兰氏阴性杆菌,鉴定结果为肺炎克雷伯菌,药敏试验结果显示对头孢哌酮、阿奇霉素和氨基糖苷类抗生素等有效,但对青霉素等常用抗生素抵抗力较强。
结合患者的临床表现和病史,初步认为患者患有肺炎克雷伯菌感染,建议采用有效的抗菌药物进行治疗,并密切关注病情的变化。
四、注意事项医学微生物实验报告的编写需保证准确性、规范性和可读性。
需注意标本采集和处理的规范性,实验条件和流程的同质性,结果分析和诊断结论的科学性和客观性。
同时还需注意实验报告的格式和排版,尽可能减少语言上的歧义和模糊性。
综上所述,医学微生物实验报告是医学临床工作的重要组成部分,对于疾病的诊断和治疗具有关键性的作用。
医务人员需严格遵守实验操作规程,做好实验记录和结果分析,从而为患者提供更加精准有效的治疗方案。
微生物细菌实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解细菌的基本形态结构。
2. 掌握细菌的分离、纯化和鉴定方法。
3. 学习细菌生理生化反应的检测原理和应用。
二、实验原理细菌是单细胞微生物,具有典型的原核细胞结构。
通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应,可以鉴定细菌的种类。
三、实验材料与仪器1. 材料:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等纯菌株。
2. 仪器:显微镜、接种环、培养皿、酒精灯、无菌水、生理盐水、革兰氏染色液、生理生化试剂等。
四、实验方法1. 细菌形态观察- 将细菌涂布在载玻片上,进行革兰氏染色。
- 使用显微镜观察细菌的形态、大小、染色性等特征。
2. 细菌分离与纯化- 将纯菌株接种于琼脂平板,进行划线分离。
- 观察菌落特征,挑选单菌落进行纯化。
3. 细菌生理生化反应检测- 进行糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、V-P试验等。
- 观察反应结果,判断细菌的生理生化特性。
五、实验结果与分析1. 细菌形态观察- 大肠杆菌:革兰氏阴性,呈杆状,两端钝圆。
- 金黄色葡萄球菌:革兰氏阳性,呈球形,呈葡萄串状排列。
- 肺炎克雷伯菌:革兰氏阴性,呈短杆状,两端钝圆。
2. 细菌分离与纯化- 划线分离后,观察到单菌落形成。
3. 细菌生理生化反应检测- 糖发酵试验:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖。
- 吲哚试验:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。
- 甲基红试验:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。
- V-P试验:金黄色葡萄球菌呈阳性,大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均呈阴性。
六、讨论与分析1. 通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应,可以初步鉴定细菌的种类。
2. 细菌的生理生化反应具有特异性,可用于细菌的鉴定和分类。
3. 在实际应用中,细菌的分离、纯化和鉴定是微生物学研究和临床诊断的重要环节。
七、实验结论1. 通过本次实验,我们掌握了细菌的基本形态结构、分离、纯化和鉴定方法。
2. 我们学会了利用生理生化反应进行细菌的鉴定和分类。
3. 本实验有助于提高我们对微生物学基本理论的认识和应用能力。
微生物实验报告(微生物形态观察、分布、灭菌消毒)

FOR PERSONAL USE ONLY IN STUDY AND RESEARCH; NOT FOR COMMERCIAL USE微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜(油镜)的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊结构5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点二、实验原理1. 普通光学显微镜(油镜)的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油,然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器,使油镜头浸没在油滴内,当油镜头几乎接触玻片时停止转动,以免碰撞玻片,用双眼观察目镜,同时调节细调节器,直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时,用右手持镜壁,左手托镜座,平端于胸前2.油镜用毕后,要立即用擦镜纸擦去香柏油;再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头;最后,用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去,以免损伤油镜头3.镜头擦净后,降低接物镜并将其转成八字形,罩好镜罩放入柜内4.做好使用记录3.微生物知识1.细菌按形态分类:球菌:球形(包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等)杆菌:杆状(包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等)螺旋菌:螺旋状(包括螺旋菌、弧菌等)2.细菌的基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3.细菌的特殊结构荚膜:如肺炎双球菌鞭毛:又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如:变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞:如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4.微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称,包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类:细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类:真菌、原生动物、显微藻类非细胞类:病毒、亚病毒5.真菌单细胞:圆形、芽生孢子。
如:酵母菌多细胞:菌丝及孢子、孢子出芽。
如:霉菌6.白假私酵母菌(白念)生物学性状:G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性:皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查:直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7.新型隐球菌生物学性状:圆形酵母型菌、外周有厚荚膜(比菌体大1-3倍)致病性:吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿;侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查:脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查;墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔:1支;大镊子:1支;火柴:1盒;蜡笔:1支;试管架:1个;酒精灯:1个;接种环:1支;Olympus显微镜:1台;显微镜使用记录本:1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1)球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌(子弹形)、脑膜炎双球菌(蚕豆形)、四联菌2)杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌(异染颗粒)、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3)螺形菌弧菌——霍乱弧菌;螺菌;螺杆菌——幽门螺杆菌;弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus);肺炎双球菌(pneumo coccus);脑膜炎球菌(meningococcus);破伤风杆菌(Clostridium Tantenus);霍乱弧菌(vibrio cholera);芽胞(spore);鞭毛(flagellum);荚膜(capsule);钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图,已交。
医学微生物学实验报告

医学微⽣物学实验报告微⽣物实验报告盐⽔或⾎清内,混合均匀。
四、结果与讨论(⼀)实验结果1.洗⼿前后对⽐:图1.1甲⼄洗⼿前后图1.2 丙丁洗⼿前后空⽓的细菌学检查结果(实验室内,暴露在⼿机下):图1.3 空⽓的细菌学检查结果CFU/m3 = 50000N÷AT=50000×13×(3.14×3.5cm2)×40/m3=1118/m3图2.1甲,⼄→脓汁标本→营养琼脂平板图3.1四种菌落在斜⾯培养基上⽣长情况右左向右依次为⾦黄,⽩⾊,紫⿊,粉红菌苔4.细菌的形态学检查:图4.1脓汁菌苔(左边为⾦黄⾊菌苔,右图为⽩⾊菌苔)图4.2粪便菌苔(左图为紫⿊⾊菌苔,右图为粉红菌苔)镜下观察:⽤普通平板,从浓汁标本中分离得到黄⾊、⽩⾊两种菌落,这两株细菌,显微镜油镜下均为G+球菌,排列不规则,呈葡萄串状,是典型的葡萄球菌。
结合菌落⾊素,这两株葡萄球菌可能是⾦黄⾊葡萄球菌和⽩⾊葡萄球菌。
⽤伊红美蓝平板,从粪便标本分离、获得紫⿊⾊和粉红⾊半透明两种菌落。
紫⿊⾊菌落可能是能分解乳糖的⾮致病菌⼤肠埃希菌。
粉红⾊菌落是不能分解乳糖的致病菌。
显微镜下,均为G-杆菌,散在排列,从形态上不能鉴别是什么细菌。
5、液体培养基接种图5.1液体培养基接种结果从左⾄右分别为:(①黄⾊细菌②⽩⾊细菌③紫⿊⾊细菌④粉红⾊细菌)6.细菌的⽣化试验等:(1)半固体穿刺接种法图6.1半固体穿刺图6.2糖发酵实验结果图.从左⾄右分别为:(①紫⿊→葡萄糖②紫⿊→乳糖③粉红→葡萄糖④粉红→乳糖)编号菌苔糖发酵管反应现象结果描述符号甲紫⿊①糖发酵管变黄⾊有⽓泡分解X糖产酸⼜产⽓⊕⼄紫⿊②糖发酵管变黄⾊有⽓泡分解X糖产酸⼜产⽓⊕丙粉红③糖发酵管变黄⾊⽆⽓泡分解X糖产酸不产⽓+ 丁粉红④糖发酵管仍紫⾊⽆⽓泡分解X糖不产酸不产⽓- +:产酸或阳性⊕:产酸产⽓ -:阴性紫⿊细菌微型发酵关内液体变黄,产⽣⽓泡,⽓泡的⾼度分别为10mm和17mm,说明紫⿊⾊菌苔既分解葡萄糖也分解乳糖,产酸产⽓;粉红细菌只分解葡萄糖,不产⽓,不分解乳糖。
医学微生物学设计性实验报告

医学微生物学设计性实验报告--检测肠道病毒的感染与传播实验题目:检测肠道病毒的感染与传播一、实验目的1.掌握肠道病毒的检测方法。
2.了解肠道病毒的传播途径。
3.探讨肠道病毒的感染规律。
二、实验原理1.肠道病毒是一类可引起人类急性胃肠炎的病毒,常见的有脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒和埃可病毒等。
这些病毒主要通过粪-口途径传播,也可通过污染水源、食物、海产品、食具等引起暴发流行。
2.肠道病毒的检测方法主要包括病毒分离培养、抗原检测和核酸检测等。
其中,病毒分离培养是诊断肠道病毒感染的金标准,但操作繁琐且耗时;抗原检测可快速诊断病毒感染,但灵敏度相对较低;核酸检测可准确检测病毒核酸,但需要一定的仪器设备和技术支持。
3.本实验采用核酸检测方法,通过对肠道病毒特异性核酸序列进行扩增,以确诊病毒感染。
三、实验步骤1.标本采集:收集急性胃肠炎患者的粪便、呕吐物和水样便等标本。
2.核酸提取:将标本中的核酸提取出来,可以采用商业化试剂盒或自行研发的方法。
3.引物设计:针对肠道病毒的特异性基因序列,设计引物。
4.聚合酶链式反应(PCR):将提取的核酸与引物进行PCR扩增,以检测肠道病毒的特异性核酸序列。
5.电泳分析:将PCR产物进行电泳,观察是否有特异性条带,以判断是否存在肠道病毒感染。
四、实验结果1.核酸提取结果:成功提取出肠道病毒的核酸。
2.PCR扩增结果:经过PCR扩增后,出现特异性条带,提示存在肠道病毒感染。
3.电泳分析结果:电泳结果显示,PCR产物出现明显特异性条带,证实存在肠道病毒感染。
五、实验结论本实验通过核酸检测方法成功检测出肠道病毒感染,表明该病毒感染在当地存在一定流行趋势。
针对肠道病毒的传播途径,应加强个人卫生习惯、注意饮食卫生和水源管理,以预防病毒感染的传播。
同时,应加强疫情监测和预警,及时采取防控措施,以控制疫情的扩散。
医学微生物实习报告

一、实习目的医学微生物学是研究微生物与人类健康和疾病之间相互关系的科学。
本次实习旨在通过实验操作和理论知识的学习,使学生了解医学微生物的基本知识,掌握微生物学实验技能,提高学生的实践能力和创新思维。
二、实习时间2021年X月X日至2021年X月X日三、实习地点XX医学院微生物实验室四、实习内容1. 微生物形态观察(1)观察细菌的形态:通过光学显微镜观察细菌的形态、大小、排列方式等特征。
(2)观察真菌的形态:通过光学显微镜观察真菌的菌丝、子实体等特征。
2. 微生物分离纯化(1)平板划线法:将混合培养的微生物在平板上划线分离,获得单菌落。
(2)稀释涂布平板法:将微生物进行梯度稀释,涂布于平板上,获得单菌落。
3. 微生物培养(1)细菌培养:观察细菌在不同培养基上的生长情况,如营养肉汤、琼脂平板等。
(2)真菌培养:观察真菌在不同培养基上的生长情况,如马铃薯葡萄糖琼脂平板等。
4. 微生物生化实验(1)糖发酵实验:观察细菌对糖的发酵情况,判断细菌的糖代谢类型。
(2)革兰氏染色实验:观察细菌的革兰氏染色结果,判断细菌的革兰氏分类。
5. 微生物耐药性实验(1)纸片扩散法:观察细菌对抗生素的敏感性,判断细菌的耐药性。
(2)最低抑菌浓度(MIC)测定:测定细菌对抗生素的最低抑菌浓度。
五、实习收获1. 提高了微生物学实验技能:通过实习,掌握了微生物形态观察、分离纯化、培养、生化实验和耐药性实验等基本技能。
2. 深化了对微生物学理论知识的理解:通过实验操作,加深了对微生物形态、生理、生化特性等理论知识的理解。
3. 培养了创新思维和实践能力:在实习过程中,通过独立思考、解决问题,培养了创新思维和实践能力。
4. 增强了团队协作意识:在实习过程中,与同学互相帮助、共同完成任务,增强了团队协作意识。
六、实习总结通过本次医学微生物实习,我深刻认识到微生物学在医学领域的重要性。
实习过程中,我不仅掌握了微生物学实验技能,还深化了对微生物学理论知识的理解。
医学微生物实验报告

医学微生物实验报告引言:微生物是一类以细胞为基本单位的生物体,包括细菌、真菌、病毒等,在医学领域具有重要的研究与应用价值。
本实验旨在通过对微生物的分离、鉴定及对其功能的评估,了解微生物在医学领域中的重要性。
实验方法:1. 细菌和真菌的分离与培养我们通过从患者样本中采集细菌和真菌,并将其接种于不同的培养基中。
培养基的选择根据不同的微生物需求进行,如营养琼脂平板、血琼脂平板、丙酮酸琼脂平板等。
然后将培养皿放置在适宜的温度和氧气条件下进行培养。
2. 微生物的鉴定与鉴定方法通过观察微生物的形态特征、生长特性以及进行生化试验等,我们可以对其进行初步鉴定。
进一步,可以使用分子生物学的方法,如PCR、测序等,对微生物进行准确的鉴定。
还可以利用培养物对微生物进行进一步的药敏试验,以确定其对不同抗生素的敏感性。
3. 微生物在医学中的应用微生物在医学中具有广泛的应用。
例如,在感染病的诊断中,微生物的鉴定对于选择合适的抗生素非常重要。
此外,微生物还可以应用于生物制药工业,如利用细菌生产抗生素、利用真菌生产泌尿生殖系统药物等。
微生物还可以应用于食品工业,如利用益生菌制造发酵食品。
实验结果:在我们的实验中,我们成功分离了多种不同的细菌和真菌。
通过观察它们的形态特征,我们发现它们具有不同的形状、颜色和大小。
通过进行生化试验,我们确定了它们的一些特性,如氧化酶、内切酶等。
在进一步的鉴定中,我们使用了PCR技术,并与数据库中的标准菌株进行比对,以确保鉴定的准确性。
讨论:微生物的鉴定对于诊断和治疗感染病非常重要。
通过对已知的微生物菌株进行鉴定,我们可以提前做出合适的治疗方案,从而避免病情的进一步恶化。
同时,对微生物的鉴定也有助于预防疾病的传播,提高公共卫生水平。
此外,在医学领域以外,微生物还有其他的应用价值。
例如,微生物在生物制药工业中的应用,可以大大提高抗生素等药物的生产效率,从而满足人们对于药物的需求。
微生物还可以应用于环境保护中,如通过微生物的降解能力来处理废水和废弃物,减少对环境的污染。
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微生物实验报告
盐水或血清内,混合均匀。
四、结果与讨论
(一)实验结果
1.洗手前后对比:
图1.1甲乙洗手前后图1.2 丙丁洗手前后
空气的细菌学检查结果(实验室内,暴露在手机下):
图1.3 空气的细菌学检查结果
CFU/m3 = 50000N÷AT=50000×13×(3.14×3.5cm2)×40/m3=1118/m3
2.细菌的分离培养结果:
(1 )脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落,菌落的色素是脂溶性的,是细菌本身的颜色。
菌落直径2mm左右、圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明。
(2 )粪便标本在伊红美蓝平板上,有紫黑色、淡粉红色两种菌落,菌落色素是水溶性的,不是细菌本身的颜色,紫黑色菌落具有金属光泽、大而隆起、不透明的菌落,菌落直径2〜3mm;粉红色菌落淡粉红色,半透明,直径1〜2mm.
(3)从四张平板画线的结果上来看,四张均有不足,得不到特别典型的菌落。
第一二张脓汁的营养琼脂平板,前面两区涂抹太密集,而板的其他部位未充分利用,得不到十分明显的菌落。
第三粪便的平板涂布时,用力过大划破平板,而第四张粪便的平板第一区太稀疏,未充分利用平板,故在培养后未见到数量较少的粉红菌落,原因是初次划线时,力度与划线的密度均未能很好地掌握,动作不熟练,不能连续划线。
图2.1甲,乙→脓汁标本→营养琼脂平板
图2.2丙,丁→粪便标本→伊红美蓝平板
3.细菌的纯培养:
在斜面培养基上得到四种菌体的纯培养标本,从普通平板上挑取的金黄色或白色菌落接种的斜面,菌苔的颜色,还是原来菌落的颜色,金黄色或白色。
从伊红美蓝平板上挑取的紫黑色或粉红色菌落接种的斜面,菌苔已经没有原来菌落的颜色。
菌苔灰白色、表面湿润、光滑、前者不透明,后者透明。
图3.1四种菌落在斜面培养基上生长情况
右左向右依次为金黄,白色,紫黑,粉红菌苔
4.细菌的形态学检查:
图4.1脓汁菌苔(左边为金黄色菌苔,右图为白色菌苔)
图4.2粪便菌苔(左图为紫黑色菌苔,右图为粉红菌苔)
镜下观察:
用普通平板,从浓汁标本中分离得到黄色、白色两种菌落,这两株细菌,显微镜油镜下均为G+球菌,排列不规则,呈葡萄串状,是典型的葡萄球菌。
结合菌落色素,这两株葡萄球菌可能是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。
用伊红美蓝平板,从粪便标本分离、获得紫黑色和粉红色半透明两种菌落。
紫黑色菌落可能是能分解乳糖的非致病菌大肠埃希菌。
粉红色菌落是不能分解乳糖的致病菌。
显微镜下,均为G-杆菌,散在排列,从形态上不能鉴别是什么细菌。
5、液体培养基接种
图5.1液体培养基接种结果从左至右分别为:(①黄色细菌②白色细菌③紫黑色细菌④粉红色细菌)
6.细菌的生化试验等:
(1)半固体穿刺接种法
图6.1半固体穿刺
图6.2糖发酵实验结果图.从左至右分别为:(①紫黑→葡萄糖②紫黑→乳糖③粉红→葡萄糖④粉红→乳糖)
编号菌苔糖发
酵管
反应现象结果描述符
号
甲紫黑①糖发酵管变黄色有气泡分解X糖产酸又产气⊕乙紫黑②糖发酵管变黄色有气泡分解X糖产酸又产气⊕丙粉红③糖发酵管变黄色无气泡分解X糖产酸不产气+ 丁粉红④糖发酵管仍紫色无气泡分解X糖不产酸不产气- +:产酸或阳性⊕:产酸产气 -:阴性
紫黑细菌微型发酵关内液体变黄,产生气泡,气泡的高度分别为10mm和17mm,说明紫黑色菌苔既分解葡萄糖也分解乳糖,产酸产气;粉红细菌只分解葡萄糖,不产气,不分解乳糖。
(3)抗菌素敏感试验结果:
图6.3抗菌素敏感试验结果
表3各菌抑菌圈直径(mm)表
菌苔青霉素头孢曲松庆大霉素
金黄色 35 42 32
白色 28 21 34
紫黑— 30 27
粉红— 35 30
表4.药敏试验结果分析
青霉素头孢曲松庆大霉素金黄色 + + +
白色±± +
紫黑 - + +
粉红 - + +
-:耐药±:中度敏感 +:敏感
金黄细菌对青霉素敏感,对头孢曲松敏感,对庆大毒素敏感
白色细菌对青霉素中度敏感,对头孢曲松中度敏感,对庆大毒素敏感
紫黑细菌对青霉素耐药,对头孢曲松敏感,对庆大毒素敏感
粉红细菌对青霉素耐药,对头孢曲松敏感,对庆大毒素敏感
(4)血浆凝固酶实验结果:
图6.4白色(左)与金黄色(右)菌苔
1、白色菌苔不发生凝块,容易涂抹。
呈均匀乳白状态。
2、黄色菌苔能产生血浆凝固酶,可使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,附着于菌体表面,形成凝块,涂抹不开。
说明黄色细菌为致病菌。
7.细菌的血清学试验结果:
图6.5粉红菌苔(右)凝集结果(左侧为对照)
1、由实验结果图可看到,生理盐水一端不出现凝集,福氏志贺菌诊断血清一端菌液浑浊,少量絮状,为阳性。
说明粉红菌为福氏志贺菌。
8.结论:
肠道杆菌科各菌属生化反应鉴别表
(二)实验综合讨论
1.分析:
(1)、用普通平板,从脓汁标本中分离得到黄色、白色两种菌落,油镜下均为G+球菌,排列不规则,呈葡萄串状,是典型的葡萄球菌。
结合菌落色素,这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。
致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶,可使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,附着于菌体表面,形成凝块。
通过血浆凝固酶实验,金黄色葡萄球菌实验结果阳性,为致病菌。
用伊红美蓝平板,从粪便标本中分离出紫黑色具有金属光泽和粉红色半透明菌落,显微镜下均为G-杆菌,散在排列。
紫黑色金属光泽的产生是因为乳糖被分解产酸,酸使伊红美和蓝紫结合,产生紫黑金属光泽菌落。
紫黑色菌落是能分解乳糖的大肠埃希菌。
致病菌不能分解乳糖,菌落呈现伊红的颜色。
粉红色菌落是不能分解乳糖的致病菌。
从形态上不能鉴别是什么细菌。
经糖发酵试验(紫黑色菌落菌种分解葡萄糖和乳糖,产酸产气;粉红色菌落菌种只能分解葡萄糖,产酸不产气)半固体动力试验(紫黑色菌落菌种半固体动力试验结果阳性,有鞭毛;粉红色菌落菌种半固体动力试验结果阴性,无鞭毛)。
对照常见肠道感染细菌主要生化反应特征,判定它们分别是大肠埃希菌和福氏志贺菌。
通过血清学实验,粉红色菌落菌种与福氏志贺菌诊断血清发生凝集反应,进一步确定其为福氏志贺菌。
综上所述,紫黑色的细菌为大肠埃希菌,粉红色的为福氏志贺菌。
2.实验的不足之处:
我们的实验在操作上也产生了许多错误和不足。
(1)在对脓汁标本黄色细菌(金黄色葡萄球菌)进行斜面培养时,在斜面上呈现出柠檬黄色而非金黄色的菌落,经分析认为有一下两种可能:①选取平板上的菌落时,挑到的菌落并非单一细菌的菌落;②接种到斜面培养基时,接种环挑选菌落后在空气中暴露过久污染导致。
这体现出了微生物实验操作中严格无菌操作的重要性;
(2)平板划线时力道太重且接种环持握过直导致在平板上留下划痕,往后需多次平板划线使动作熟练;
(3)液体培养基实验中,本组粉红菌落的液体培养基较澄清,结果表明粉红细菌可能接种失败;
(4)本次抑菌圈实验中,对抑菌圈的大小造成影响的因素主要是涂布在平板上菌落的密集程度,生长的菌落呈密集或半密集为宜。
由于四个平板分别由不同的人用接种环涂布完成,会产生较大的误差。
如图6.3中,金黄色细菌与白色细菌的菌落密集程度存在明显的差异,因此影响抑菌圈的大小产生误差。
用镊子夹无菌棉花(或用无菌棉签)进行涂布,能够获得较好地涂布效果。
其次,手动测量存在的问题有:①重现性差,准确性不够:同一培养皿,不同的人测量结果有差异;②当抑菌圈呈卵原形、边缘模糊或出现双层圈时,边界确定的人为误差大;
3.注意事项:
在培养基配制好后,我们需要检查培养基是否合格。
接种环使用前后必须灼烧灭菌:接种环使用前,长期暴露于空气中,会带有许多
空气中的杂菌,不灼烧灭菌则会导致实验过程中杂菌污染;使用后接种环上带有实验中的相关细菌,若不及时灼烧灭菌会导致前一菌种对后一菌种造成污染,且实验细菌接触外界污染实验室内的相关物品,同学们接触后很可能带来疾病的危险。
平板储存待用或做细菌培养时,需要倒置:防止平板水分蒸发丢失;防止冷凝水滴于平板表面,影响单菌落形成;冷凝水中可能含有杂菌,如果滴入平板表面,会影响实验结果。
用革兰氏染色法染色过程中要严格控制四种染料染色的时间(大约一分钟),其中涂片与脱色是关键步骤,如果脱色过度,有可能会使革兰氏阳性菌呈假阴性,如果脱色不够,有可能使革兰氏阴性菌呈假阳性。
流水冲洗时注意水流大小与速度适宜均匀。