食品中氯霉素残留快速检测技术研究进展_张威
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
动物源性食品中氯霉素类药物残留的测定是一项重要的检测工作，这些药物残留的存在可能对人体健康产生一定的危害。
准确、快速地检测这些残留物的含量是非常必要的。
氯霉素类药物是一种广谱抗生素，常用于预防和治疗动物的感染病。
如果动物在屠宰前一段时间内使用了这些药物，残留物可能会在食品中存在。
对于人类来说，摄入这些残留物可能会引起过敏反应、中毒甚至诱发耐药菌株。
第一种是高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）。
该方法具有快速、准确、灵敏、选择性高等特点。
将样品进行提取，利用有机溶剂将残留物从食品中分离出来。
然后，使用HPLC将残留物进行分离，并通过串联质谱进行定性和定量分析。
该方法可以同时测定多种氯霉素类药物的残留，且可以达到非常低的检测限。
第二种是酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
该方法是通过抗体与药物残留物结合来进行检测的。
将样品中的残留物与标记有酶的抗体结合，在搅拌的条件下进行反应。
然后，通过酶标仪检测残留物与酶的结合程度，从而确定残留物的含量。
由于该方法操作简便、快速，且具有较高的灵敏度和选择性，因此广泛应用于动物源性食品中氯霉素类药物残留的测定中。
测定动物源性食品中氯霉素类药物残留的方法有很多种，每种方法都有其优缺点。
在具体实验中，需要根据实际需要选择合适的方法进行测定，以确保结果的准确性和可靠性。
氯霉素的不良反应及其残留检测方法研究进展
关键词 ： 霉素 ； 氯 副作 用 ； 留 ； 测 残 检
中 图分 类 号 ： ８ Ｑ １ 文献 标 识 码 ： Ａ 文章 编 号 ： ０ ７５ ３ （ ０ ０ ０ — ０ ０ ０ １ ０ —０ ８ ２ １ ） ４０ ９ — ６
氯霉 素 （ ｈｏ ａ ｈ ｎｃ ｌＣ ） 分 子式 为 Ｃ１ ｃ ｌｒｍｐ ｅ ｉ ， ＡＰ ， ｏ １
环境 构成严重危 害。 随着 国际社会 对氯霉 素残 留的高度 关注 ， 氯霉 素的检 测方 法得 到 了广泛的研 究 ， 最初 从 的利 用微 生物进行 定性检测 到 目前 的各 种先进 检 测技 术 的联 用， Ｌ — 如 Ｃ ＭＳ等 ， 氯霉 素 的检 测 限 、 密 度和 精 回收率等技 术都得到 了极 大提 高 。先进 的检 测技 术不仅 为人 体 的健 康提供 了安全 保 障 ， 同时 为我 国的食 品
摘 要 ： 氯霉素存在 严重 的毒 副作 用 ， 能抑制人 体骨 髓造血 功能 ， 引起 人 类的再 生障碍性 贫血 ， 粒状 白细
胞 缺 乏 症 ， 生 儿 、 产 儿 灰 色综 合 症 等 疾 病 。 低 浓度 的 药 物 残 留 还 会 诱 发 致 病 菌 的 耐 药 性 ， 人 类 健 康 和 新 早 对
Ｈ 。 。 Ｏ ，于 １ ４ 年 从 委 内 瑞 拉 链 霉 菌 Ｃ Ｎ ９７
（ ｔｅ ｔ ｃｓ ｅ ｅｕ ｌ ）的 培 养 滤 液 中 分 离 出 的 Ｓｒｐ ｏ ｅ ｎ ｚ ｅａ ｍｙ ｖ
白血病 。
１ ２ 灰 婴 综 合 症 ．
由于早产 儿及新 生儿 的肝 内酶系统 发育 尚不完 全 ， 萄糖醛 酸结 合 的 能力 较 差 ， 氯霉 素 的代 谢 、 葡 使 解 毒过程 受 限制 ； 应用 大 剂量 氯 霉 素后 血 药 浓度 异
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
氯霉素是一种广谱抗菌药，常用于治疗动物疾病。
过量使用氯霉素类药物可能导致残留物在动物源性食品中积累，对人体健康产生潜在风险。
准确测定动物源性食品中氯霉素类药物残留量成为保障公众健康的重要问题。
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法有多种，包括色谱法、质谱法和免疫学法等。
高效液相色谱法（HPLC）被广泛应用于测定氯霉素类药物的残留量。
第一步：样品处理
将待测样品（如肉类、奶类等）称取适量，加入磷酸盐缓冲液中，进行均匀混合。
然后，使用离心机进行离心，将澄清的上层液体转移至新的离心管中。
第二步：萃取
将第一步得到的上层液体与乙酸乙酯混合，进行振荡和离心分离。
离心后，将乙酸乙酯层取出，并使用氮气吹干。
第三步：溶解
将第二步得到的干燥残留物用甲醇溶解，得到测试溶液。
第四步：色谱分析
将测试溶液通过HPLC进行分析。
选择适当的色谱柱和移动相，设置合适的流速和检测波长。
根据氯霉素类药物的特征峰进行定量分析。
根据已知浓度的标准品制备多个浓度的标准曲线，从而计算待测样品中氯霉素类药物的浓度。
第五步：结果判断
根据分析结果，判断待测样品中氯霉素类药物的残留量是否符合国家标准要求。
如果超过标准限量，则建议不使用该样品，以防止对人体健康造成潜在风险。
HPLC是一种常用于测定动物源性食品中氯霉素类药物残留量的方法。
通过样品处理、萃取、溶解和色谱分析等步骤，可以准确测定残留物的含量，并对公众健康提供保障。
食品中氯霉素类药物残留量检测方法研究进展
148FAXIAN JIAOYU 2018/07综合论坛 Zong He Lun Tan …………………………………………————————————————————————————摘要：氯霉素作为一种抗生素，因其能对各种微生物的感染起到一定的抑制作用，因此被广泛地应用到水产养殖业中，在此起到杀菌的作用，但同时，也不能忽略其对人体的危害。
目前我国虽已对食品中氯霉素的最高残留量进行了一定限定，但在当前市场竞争激烈的形势下，为了提高食品的产量，商家开始大规模地投入氯霉素的使用，导致食品中氯霉素的含量过高，残留在食品中的氯霉素已严重威胁到人体的生命安全。
本文通过对氯霉素特性的分析，围绕食品中氯霉素残留检测的方法，展开进一步探讨。
关键词：氯霉素；微生物检测方法；色谱法检测方法；免疫分析方法————————————————————————————氯霉素作为一种能抑制细菌感染疾病的抗生素，其在医疗上的作用是极大的，但同时它对人体的危害也是极为致命的。
其致命之处在于氯霉素能够在体内积累，当其积累到一定的量，就会爆发，从而对骨髓造血功能产生抑制作用，并导致贫血等状况的发生，在很大程度上严重地威胁了人类的生命安全。
对此，国家应该引起重视，加强对食品安全的监察，通过对食品中氯霉素残留物的检测，及时发现问题并解决问题。
一、微生物检测方法微生物学检测方法简单而快，且成本低廉，同时对多种抗生物的同时检测具有很大的优势，但因其的敏感程度及灵敏度较低，因此并不适合大规模地应用，仅适用于水产品养殖厂等产业的应用。
（一）氯霉素对某些特定的微生物具有抑制其感染的作用，通过其特性，可采用微生物学的方法来检测其是否残留在食品中。
以牛奶为样品，通过微生物法检测牛奶中氯霉素的残留是宋杰等创建的方法，此方法可通过快速检测试纸得到精准的数值。
（二）鳆发光杆菌的应用。
正是因为氯霉素可以抑制发光微生物的发光效应，因此用这一特性，对氯霉素在食品中的残留情况进行验证。
氯霉素残留的检测方法研究进展
氯霉素残留的检测方法研究进展摘要：氯霉素（CAP）是一种广谱、高效的抗生素，在水产养殖业中应用于各种疾病防治和细菌感染的治疗。
研究表明，残留氯霉素对人体有毒性副作用，严重者可致盲。
在现有检测方法的基础上，不断改进是时代的发展趋势。
从目前的研究和实际发展来看，发展更实用的检测方法是至关重要的。
电化学方法以其成本低、操作简单、速度快和灵敏度高的优点越来越受到人们的重视。
本文从动物源性食品中氯霉素的常规检测方法入手，在分析现有研究进展的基础上，探讨了传统检测方法的优缺点。
关键词：动物源性食品; 氯霉素; 检测方法；石墨烯复合材料：电化学检测0引言最近几年，肉类问题层出不穷，引起了世界公众对肉类产品安全的关注。
在水产养殖中，通常在饲料或饮用水中添加抗生素和兽药，残留的兽药会随食物链进入消费者体内，可能影响体内正常代谢、引发人体过敏反应、引起细菌耐药性、产生特殊毒性等，对个人和社会造成严重危害[1]。
氯霉素（CAP）是一种在水产养殖业中应用于各种疾病的预防和细菌感染的治疗的抗生素。
残留氯霉素对人体的毒性副作用不仅会损害人体造血系统，还会引起细菌耐药性的增加和机体菌群的失衡，严重时甚至会导致失明。
目前以后多种方法检测肉制品中的非食用物质。
1氯霉素检测常用方法1 .1色谱分析 ( chromatography and chromatographic analysis )高效液相色谱法（HPLC）采用高压注射器系统，以液体为流动相，将单个溶剂或混合溶剂、缓冲溶液和其他具有不同极性的流动相泵送至具有固定相的色谱柱。
1. 2 荧光探针技术( fluorescent probe technique)荧光探头使用荧光材料作为指示器，指示器被特定波长的光激发，以产生荧光并检测产生的荧光。
1. 3 免疫学技术( immunological technique)1. 3. 1 酶联免疫吸附法(ELISA)酶免疫测定的本质是将抗体与酶复合物结合，通过显色来检测它们。
食品中氯霉素类药物残留量检测方法研究进展
Ａｎ Ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｎ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｍ ｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｍ ｕｌｔｉｒｅｓｉｄｕｅ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌｓ ｉｎ Ｆｏｏｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ
Ｍ Ａ Ｙａｎｈｏｎｇ，ＬＩ Ｚｈｉｇａｎｇ，ＣＨＥＮ Ｃｈａｏ
（Ｃｈｉｎａ Ｍｅａｔ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００６８，Ｃｈｉｎａ）
Ｍ Ａ Ｙａｎｈｏｎｇ，ＬＩ Ｚｈｉｇａｎｇ，ＣＨＥＮ Ｃｈａｏ．Ａｎ ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｎ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｒｅｓｉｄｕｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ
ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌｓ ｉｎ ｆｏｏｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｊ］．Ｍｅａｔ Ｒｅｓｅａ ｒｃｈ，２０１６，３０（７）：３５—３８．（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｉｔ ｈ Ｅｎｇｌｉｓｈ ａｂｓｔ ｒａｃｔ）ＤＯＩ：１０．１５９２２／ ｊ．ｃｎｋｉ．ｒｌｙｊ．２０１６．０７．００８． ｈｔｔｐ：／／ｒｌｙｊ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
ｄｅｔｅｃｔ ｉｏｎ ｏｆ ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌｓ ｉｎ ｆｏｏｄｓ（ｅｓｐｅｃｉａ ｌｌｙ ａｎｉｍａｌ—ｄｅｒ ｉｖｅｄ ｆｏｏｄｓ）．
Ｋ ｅｙ ｗ ｏｒｄｓ：ｃｈｌｏｒａｍ ｐｈｅｎｉｃｏｌｓ；ｆｏｏｄ；ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍ ｅｔｈｏｄｓ
ＤＯＩ：１０．１５９２２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｒｌｙｊ．２０１６．０７．００８ 中 图分 类 号 ：ＴＳ２０１．６ 引文格式 ：
（ｆｌｏｒｆｅｎｉｃｏｌ，ＦＦ）等 。 毒 理 学 研 究表 明 ，氯 霉 素 可 抑 制骨 髓 细 胞 内线 粒 体
蛋 白质 的合 成 ，对 人 和 动 物 骨 髓 细 胞和 肝 细 胞 产 生 毒 性 作 用 ，能 引 起 再生 障碍 性 贫 血 ， 并伴 有 白细 胞 和 血 小板 减 少 现 象 ，新 生儿 、早 产 儿 灰 色 综合 症 等 ，还 会诱 发 致
氯霉素残留检测方法研究进展
氯霉素残留检测方法研究进展氯霉素残留对人体的危害极大，因此在国际上有关氯霉素的检测方法备受关注和研究。
起初是利用微生物进行定性检测，目前应用较多的是先进检测技术的联用，例如：UPLC-MS/MS，LC-MS等技术使氯霉素的检测限、精密度和回收率等方面都得到了极大提高。
标签：氯霉素；检测方法；研究进展目前有关氯霉素的检测方法有十几种，在这些现有检测方法中，公认的方法是色谱法和色谱-质谱联用法，但此技术仍需不断地改进。
在国内外对氯霉素残留量的检测方法仍在不断的研究中。
1 色谱法1.1 薄层色谱法莫金娜[1]等利用薄层色谱方法（TLC）检测化妆品中的氯霉素残留量。
该方法是先用乙醇溶剂提取，以硅胶制板为载体、在展开剂为三氯甲烷-甲烷（85：15）的薄层条件下鉴别化妆品中的氯霉素残留量。
从此实验得知，所检验的样品最小的检限度为1.0mg/g。
1.2 高效液相色谱-荧光检测法潘莹宇等[2]高效液相色谱-荧光检测方法（HPLC-FL）检测牛奶中氯霉素残留量。
氯霉素易与锌粉发生还原反应，将氯霉素与锌粉反应后的溶液在缓冲溶液（醋酸钠-醋酸）条件下可发生荧光衍生化反应，之后加入荧光胺丙酮溶液。
将待测品逐渐稀释后在一定的色谱条件下进行检测。
上述实验得出，氯霉素检测检出限为0.2μg/L。
运用此方法检测牛奶中氯霉素的残留量准确度高，灵敏度好，操作较简便等优点。
1.3 超高效液相色谱-串联质谱法彭麟等[3]利用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法检测黄鳝肌肉中氯霉素残留量。
此实验首先在黄鳝肌肉样品中加入无水硫酸钠和氯化钠溶液，用碱性乙酸乙酯提取两次。
合并两次提取液，在45℃水浴中氮吹至干。
之后用5%甲醇溶液复溶，再加正己烷除脂，将下层水相过0.22μm滤膜，进样检测。
上述实验得出氯霉素检测限为0.1μg/kg。
本实验使用的UPLC-MS/MS方法具有精密度高，重现性好等优点，同时可以在保证回收率的基础上有效地提高了检测效率。
氯霉素残留检验实验报告
一、实验目的本实验旨在通过胶体金免疫层析法对食品中的氯霉素残留进行快速、准确的检测，为食品安全监管提供技术支持。
二、实验原理氯霉素残留检验实验采用胶体金免疫层析法，该方法基于抗原抗体特异性结合的原理。
当氯霉素样品与标记有抗氯霉素单克隆抗体的胶体金颗粒混合时，如果样品中含有氯霉素，则氯霉素会与抗氯霉素单克隆抗体结合，形成抗原抗体复合物。
复合物在层析膜上通过毛细作用向前移动，与固定在层析膜上的抗氯霉素抗体结合，形成金标记的抗原抗体复合物，最终在层析膜上形成两条色带：控制线（C）和测试线（T）。
如果样品中氯霉素浓度超过检测限，则在测试线上形成明显的色带；如果样品中氯霉素浓度低于检测限，则测试线上无色带。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）氯霉素标准品（2）阴性对照样品（3）阳性对照样品（4）氯霉素残留样品（5）胶体金免疫层析试纸条（6）试剂：缓冲液、洗涤液、封闭液等2. 实验仪器：（1）电子天平（2）恒温培养箱（3）移液器（4）微量加样器（5）一次性无菌手套四、实验方法1. 样品处理（1）准确称取氯霉素残留样品0.1g，加入1ml缓冲液，涡旋混匀，室温下放置10min。
（2）取1ml样品溶液，加入1ml洗涤液，涡旋混匀，室温下放置5min。
（3）重复步骤（2）两次。
2. 检测（1）取一条胶体金免疫层析试纸条，将样品加样孔浸入样品溶液中，室温下放置5min。
（2）取出试纸条，观察结果。
五、实验结果与分析1. 阳性对照实验阳性对照样品在测试线上形成明显的色带，说明试纸条的性能良好。
2. 阴性对照实验阴性对照样品在测试线上无色带，说明试纸条对阴性样品具有良好的检测效果。
3. 样品检测根据实验结果，氯霉素残留样品在测试线上形成明显的色带，说明样品中氯霉素残留量超过检测限。
六、实验结论本实验采用胶体金免疫层析法对食品中的氯霉素残留进行检测，结果表明该方法具有快速、简便、准确的特点，适用于食品中氯霉素残留的现场快速检测。
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食品中氯霉素残留快速检测技术研究进展张威，赵晓娟*，陈海光（仲恺农业工程学院轻工食品学院，广东广州510225）摘要：氯霉素类抗生素残留引起的食品安全问题已引起人们的普遍关注。
简述动物源性食品中氯霉素类抗生素残留状况，综述2004年以来氯霉素类抗生素残留常用检测技术的开发应用情况，重点介绍免疫速测、传感器等快速检测技术的最新研究进展及应用，最后对氯霉素类抗生素残留检测技术的发展趋势进行讨论。
关键词：食品安全；氯霉素；残留；快速检测Research Progress in Fast Detection Techniques of Chloramphenicol Residues in FoodZHANG Wei ，ZHAO Xiao-juan *，CHEN Hai-guang （College of Light Industry and Food Sciences ，Zhongkai University of Agriculture and Engineering ，Guangzhou510225，Guangdong ，China ）Abstract ：Food safety issues caused by the chloramphenicol （CAPs ）residues have brought about increasing concern.In this paper ，the conditions of CAPs residues of animal derived food are introduced.The development and application of detection techniques of CAPs residues was summarized since 2004.In particular ，the fast detection techniques ，such as immunity analysis methods and sensors ，are focused.Finally ，the development trend of detection techniques of CAPs residues is discussed.Key words ：food safety ；chloramphenicol ；residues ；fast detection基金项目：国家自然科学基金项目（21005091）；广东省教育厅科技创新项目（2012KJCX0068）；广州市食品安全检测技术重点实验室（[2011]233-44）作者简介：张威（1986—），男（汉），硕士研究生，研究方向：食品安全。
*通信作者：赵晓娟（1980—），女，副教授，博士。
食品研究与开发F ood Research And Development2014年2月第35卷第4期DOI ：10.3969/j.issn.1005-6521.2014.04.030氯霉素类抗生素（Chloramphenicols ，CAPs ），是一类包括氯霉素（Chloramphenicol ，CAP ）以及一系列氯霉素衍生物的广谱高效抗菌性药物。
1947年，Ehrlich 等[1]首次从委内瑞拉链霉菌（Streptomyces venezuela ）中分离得到CAP 。
1948年，CAP 的结构被确定并成为第一种完全由人工合成的抗生素[2]。
目前，我国常见的药用氯霉素类抗生素有氯霉素、甲砜霉素（Thiampheni －col ）和氟甲砜霉素（Florfenicol ）等。
该类抗生素主要通过转换抗生素自身和改变微生物代谢机制[3]对多种病原菌起到较强抑制作用，因而广泛用于动物各种细菌性传染疾病的治疗，对各类家禽、家畜、水产品及蜂蜜制品各种传染性疾病的控制和治疗起重要作用[4]。
医学研究表明，肉、蛋和奶等动物源性食品中的CAPs 残留对人体有严重的副作用，长期微量摄入会使一些致病菌产生耐药性，并且引起机体正常菌群失调，使人们容易感染各种疾病。
此外，CAPs 对人的骨髓细胞、肝细胞具有毒性作用，尤其是会引起与计量和疗程无关的不可逆再生障碍性贫血[5]。
因此，许多国家已出台了关于氯霉素类药物禁用的相关法律法规和政策。
例如，欧美仅允许氯霉素用于非食用动物；我国农业部2002年发布《食品动物禁用的兽药及其他化合物清单》，规定禁止在所有动物源性食品中使用氯霉素。
但由于CAPs 价格低廉、抑菌效果好，目前仍被少数厂家违规使用，既对人类的健康造成极大威胁，也大大挫伤了人们对食品安全的信心。
食品安全事件的频发和保障食品安全涉及到很多层面，但是无疑分析检测技术是保障食品安全的重要技术支撑，从监督层面对保证食品质量安全、保障人民身体健康等方面起到积极的促进作用。
氯霉素类抗生素残留的检测技术主要有微生物检测技术、色谱检测技术、光谱分析技术和免疫速测法等快速检测技术。
专题论述1131微生物检测技术微生物法的测定方式可分为两种：一种是基于抗生素对微生物生长的抑制作用[6]；另一种是由于发光微生物对氯霉素敏感而引起生化特性的变化，如氯霉素对鳆发光杆菌具有抑光作用，通过检测鳆发光杆菌发光强度的变化可以检测氯霉素的含量[7-8]。
微生物法经济简便、容易操作，可用于多种抗生素类药物的测定。
但其敏感性和特异性低，不适合大批量样品的快速检测，而且由于其结果会出现假阳性，容易引起误判。
2色谱检测技术近年来，各种仪器联用等分析新方法的不断涌现，赋予色谱检测技术更加优良的分离分析能力。
色谱检测技术已广泛用于各类食品中CAPs残留的测定。
我国现行标准GB/T22338-2008规定了动物源性食品中氯霉素类残留量的气相色谱-质谱（GC-MS）[9]和液相色谱-质谱/质谱（LC-MS-MS）[10]测定方法，适用于水产品、畜禽产品和畜禽副产品中氯霉素、氟甲砜霉素和甲霉素残留的定性确证和定量测定[11]。
此外，其他色谱检测技术，如超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS-MS）用于禽畜肉[12]、蜂蜜[13]、牛奶[14]、奶粉[15]和多种动物源性食品[16]中氯霉素的分析检测；高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱法（HPLC-ESI-TRAP-MS）用于乳品中氯霉素类药物残留的测定[17]；气相色谱电子捕获法（GC-ECD）检测肌肉组织中的氯霉素残留[18]等。
色谱检测技术具有灵敏度高、准确可靠等特点，但是样品前处理操作复杂、专业性强、成本较高，不适合进行大批量样品的快速筛选检测。
3光谱分析技术光谱分析技术是利用物质的特征光谱进行定性、定量和结构分析的技术。
研究者分别使用可见光谱[19]、紫外光谱[20]及近红外光谱[21]对动物源性食品中的氯霉素残留进行了检测，结果表明，光谱分析技术具有成本低、操作简便的优点。
但该法的选择性较低，而且近红外光谱法需要结合化学计量学技术进行数据解析，专业性强。
4快速检测技术快速检测技术通常具有灵敏快速、简便经济、适用于大批量样品快速筛选检测的特点，可以及时、快速地监控食品的安全状况，在食品和药物分析、临床诊断、环境保护等领域有着广泛的应用前景[22-23]。
4.1免疫速测分析技术免疫速测分析技术是基于抗原抗体特异性反应建立起来的快速检测技术[24]。
其中，酶联免疫吸附法是目前应用最为广泛的免疫分析方法之一。
近年来，毛细管电泳免疫等新免疫分析技术的加入为免疫快速检测提供了更广阔的发展空间。
4.1.1酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法（ELISA）是一种以酶作为标记物的免疫分析方法。
ELISA主要有夹心法、间接法和竞争法等测定方法。
其中，夹心法和间接法主要用于测定抗体和大分子抗原，适用于临床诊断；竞争法主要用于测定小分子抗原，尤其适用于食品安全分析。
程冰[25]选用竞争性酶联免疫吸附法分析了家禽可食组织器官中氯霉素的残留分布情况。
郝俊虎等[26]用ELISA方法测定鸡组织中氯霉素的检出限为0.02ng/mL，样品中不同浓度的氯霉素标准品回收率均达84.8%以上。
Tajik等[27]采用ELISA和HPLC等方法测定鸡肝、鸡肾和肌肉组织内的氯霉素残留，结果表明ELISA法的检测结果与HPLC的检测结果基本一致。
杨艳艳等[28]在建立氯霉素单克隆抗体（CAP mAb）杂交瘤细胞株和阻断ELISA方法的基础上，研制出CAP残留快速检测试剂盒（CAP-kit），并对其性能进行了测定。
此外，目前市场上已出现一些商品化的试剂盒产品[29-30]，可以直接用于生产实践，适用于大规模氯霉素的残留筛选检测。
4.1.2胶体金免疫层析法胶体金免疫层析法（GICA）是基于免疫层析技术和胶体金标记技术建立起来的免疫分析方法。
以胶体金作为着色物，应用于抗原抗体特异性免疫反应。
免疫胶体金试纸法将特异的抗体交联到试纸条上，试纸条上有控制线和显示结果的测试线，样品中抗原与抗体结合后，胶体金可使该区域显示一定的颜色，通过与控制线颜色的对比实现快速检测。
杨挺等[31]应用杂交瘤技术制备了抗氯霉素单克隆抗体，并根据竞争式胶体金免疫层析试验原理，研制了氯霉素检测免疫试纸条。
研究结果表明，该单克隆抗体对氯霉素的亲合性好、特异性高；该金标试纸条适用于动物源性食品中氯霉素残留的快速检测，对虾肉、蜂蜜样品的最低检出限为1.5μg/kg；对鲜奶的最低检出限为3μg/kg，检测时间只需5min~8min。
王玮[32]利用胶体金标记快速检测技术对氯霉素兽药残留快速检测方法进行了系统的研究。
通过优化各项实验指标，建立了渗滤式（Flow-through）和层析式（Lateralflow）两种金标记免疫竞争快速筛选方法。
以氯霉素与固相膜上的氯霉素-卵清蛋白（CAP-OVA）偶联物（即包被抗原）竞争结合专题论述张威，等：食品中氯霉素残留快速检测技术研究进展114金标记抗氯霉素多克隆抗体的方法，通过胶体金显色达到快速检测样品中氯霉素残留的目的。
4.1.3化学发光免疫分析法化学发光免疫分析法（CLISA ）是一种有效的微量和痕量分析法，检测时间较ELISA 短、灵敏度高、检出限低。
高彬文等[33]采用CLISA 法检测鱼和虾肌肉中的氯霉素残留，检出限为5.8×10-4μg/kg ，比传统的ELISA 方法更加灵敏快速、方便经济、不需要复杂的样品前处理过程。
马玲等[34]采用一步式CLISA 检测氯霉素残留，与常规两步式CLISA 的检测效果相近，且耗时短，更符合快速检测的要求。
4.1.4荧光免疫检测法免疫荧光检测法（TRFIA ）是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。