莱克多巴胺(血清)
莱克多巴胺残留检测方法及其进展
莱克多巴胺残留检测方法及其进展王雪霞1，刘晓云2，彭运平2(1.广州万孚生物技术有限公司，广东广州 510663)（2.广州正冠生物科技有限公司，广东广州 510663)摘要：本文系统介绍了食品安全中莱克多巴胺测试的意义，并对比分析了酶联免疫方法、免疫层析方法、高效液相法、质谱法、毛细管电泳法、免疫传感器法、化学发光免疫分析法的特点及优劣，并对其发展方向进行了分析和展望。
关键词：莱克多巴胺；残留；检测文章篇号：1673-9078(2010)9-1009-1012Reviews of Detection Methods and Devolvement of RactopamineW ANG Xue-xia1, LIU Xiao-yun2, PENG Yun-ping2(1.Guangzhou Wondfo Biotech Co., Ltd, Guangzhou 510663, China)(2.Guangzhou Zhengguan Biotech Co., Ltd, Guangzhou 510663, China)Abstract: The detection methods of ractopamine were introduced in this article. The disadvantages and advantages of different test method for ractopamine were analyzed, including ELISA, GICA, HPLC, LC/MS, CE, CLIA and so on.Key words: ractopamine; residue; detection;动物源性食品中违禁药物（如β-激动剂、激素、抗生素和精神类药物等）的残留已成了困扰世界范围内食品卫生的难题[1]。
药物残留不仅影响我国畜禽产品的出口贸易，同时威胁着消费者的健康。
莱克多巴胺
莱克多巴胺盐酸莱克多巴胺英文名称：ractopamine原料名称：翻译成莱克多巴胺也有人翻译成雷托巴胺化学名称：1-（4-羟基苯基）-2[1-甲基-3-（4-羟基苯基）-丙氨基]-乙醇盐酸盐理化性质：可溶于水，微溶于丙酮，可溶于乙醇，PH 值：6～7，呈中性，熔点：159.8℃质量标准：最低含量99%（高压液相法）化学分子式：C18H23NO3Cl 分子量：337.83海关编码：2922.1100化学分类：苯基乙醇胺类用途：盐酸莱克多巴胺是一种医药原料，一种可用于治疗冲血性心力衰竭症的强心药。
还可以用于治疗肌肉萎缩症，增长肌肉，减少脂肪蓄积，并对胎儿和新生儿生长有益。
美国FDA在2000年批准，可以用于动物营养重新配剂，广泛地用于畜牧业和养殖业。
可以同时提高动物的日增重，提高饲料利用率，提高动物的蛋白质含量。
PAYLEAN（莱克多巴胺）对商品猪的影响和利用商品猪生产者的目的是高效率地生产出瘦肉率高质量好的猪肉以跟其他的动物产品竞争。
瘦肉胴体的定价系统导致了对瘦肉生长速度、胴体瘦肉率和饲料报酬的进一步选择。
健康、营养和设备管理策略的推行都是为了尽可能地提高瘦肉生长效率。
但是盐酸克伦特罗在全世界养猪业中的使用都是违法的，最近美国FDA批准的盐酸莱克多巴胺在猪中使用后，美国养猪户把使用前后是"黑夜与白天的差别"。
应承认盐酸莱克多巴胺能否在中国批准生产和使用需大量试验验证和相当一段时间。
以下叙述权当抛砖引玉！Paylean是一种饲料添加剂，是美国Elanco Lilly 公司的注册商标并被美国FDA于今年7月份批准生产仅在养猪生产中使用，它能进一步提高肌肉组织生长速度和效率。
它含有莱克多巴胺的盐酸盐，是提高肌肉蛋白生长和饲料效率的小分子。
Ractopamine是phenethanolamines 成员之一。
Paylean不是一种激素、类固醇、抗生素，也不是生物工程产物。
它已经被证实在150~240的最后90磅体重期间的饲料中添加4.5~18克/吨，已经被美国食品药物管理局广泛而反复评估了其有效性和安全性。
快灵生物莱克多巴胺检测卡
快灵生物莱克多巴胺检测卡说明书
检测原理：
快灵生物莱克多巴胺检测卡基于胶体金免疫层析技术。
莱克多巴胺检测卡检测时，样品中的莱克多巴胺在流动过程中与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体与固相载体膜上的莱克多巴胺-BSA偶联物的结合，如果样品中的莱克多巴胺含量大于检测灵敏度，T线在规定时间内不显颜色，结果为阳性，反之，T线显红色色带，结果为阴性。
无论检测液中莱克多巴胺浓度高低，C线均显红色色带。
检测样品：尿液、动物组织、血清、饲料等。
灵敏度：尿液（3ppb、5ppb）、动物组织（5ppb）、饲料（20ppb）（灵敏度仅供参考，产品实际灵敏度优于所列）
检测时间：5分钟
特异性：使用莱克多巴胺检测卡检测100ug/ml盐酸克伦特罗、群勃龙醋酸酯、磺胺类、氯霉素类、大环内酯类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、氟喹诺酮类和四环素类等药物，结果均呈阴性。
产品用途：快灵莱克多巴胺检测卡基于竞争法胶体金免疫层析技术，用于快速筛查莱克多巴胺(瘦肉精)超标的样品。
结果解释：
阴性：C线显色，T线肉眼可见，无论颜色深浅均判为阴性。
阳性：C线显色，T线不显色，判为阳性。
无效：C线不显色，无论T线是否显色，该试纸均判为无效。
如何使用莱克多巴胺快速检测试剂盒
莱克多巴胺快速检测试剂盒说明书【原理】本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测猪尿和猪肝等样本中的莱克多巴胺，在微孔条上预包被上偶联抗原，利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行的，样本中的莱克多巴胺和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗莱克多巴胺抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样品中的莱克多巴胺含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出莱克多巴胺含量。
【试剂盒组份】1、酶标板：8孔/条，12条/板2、莱克多巴胺标准溶液(1ml/瓶)：0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb3、酶标记物…………………………………12ml4、抗体工作液………………………………7ml5、显色剂A …………………………………7 ml6、显色剂B …………………………………7 ml7、终止液…………………………………7 ml8、20倍浓缩洗液……………………………50ml9、使用说明书………………………………1 份10、封板膜：…………………………………1张11、封口袋：……………………………………1 个【试剂盒技术指标】试剂盒灵敏度：0.1ppb样本检测下限：尿样、血清……………………………………0.1ppb组织……………………………………0.1ppb饲料……………………………………10ppb交叉反应率：化合物名称%交叉反应性莱克多巴胺 (100)沙丁胺醇……………………………………<0.01克伦特罗……………………………………<0.01卡布特罗……………………………………<0.01回收率：尿样、血清……………………………95%±15%组织………………………………95%±15%饲料………………………………95%±15%批间、批内变异系数：CV≤10%【所需仪器和试剂】所需仪器：微孔酶标仪、氮气吹干装置、打印机、均质器、振荡器、离心机、恒温箱、天平（感量0.01g）、刻度移液管、微量移液器(单道20µl-200µl、100µl-1000µl、多道250µl)所需试剂：氢氧化钠、乙酸乙酯、浓HCl、磷酸二氢钾、乙腈、【样本前处理】样本处理前须知：（1）实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更换吸头。
莱克多巴胺单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定
工程学 院 重庆
４ ０ ５ ３广州 瑞森 生物科 技有 限公 司 广州 ５ ０ ３ ０ ００ １ ６ ３）
１ １ ３ 实 验 动 物 与细 胞 ： Ａ Ｂ Ｃ小 鼠（ Ｐ 级 ） 购 自 中 山 ． ． Ｂ Ｌ ／ ＳＦ ，
莱 克 多 巴胺 （ Ａ ＊盐 酸 （ ｃｏ ａ ｎ ｙ ｒｃ ｌ ｉｅ ， Ｒ Ｃ） Ｒａｔｐ ｍｉｅｈ ｄｏ ｈｏ ｄ ） ｒ ｛ １ ＊， Ｒ＊） １ （Ｒ ３ （ Ｒ＊， ｓ 一４羟 基 一ａ ［ ３一（ ３ ＊） 一［ ［ ４一羟 丙 基 ） 一 甲基丙 基 ］ 基 ］ 一１ 氨 甲基 ］ 甲醇 ・ 酸 ｝ 分 子 结 构 式 苯 盐 ，
外［ ， 盟 、 欧 日本 等 许 多 国 家 都 将 其 列 为 违 禁 药 物 ， 止 在 畜 禁
禽 生 产 上使 用 引。我 国农 业 部 ２ ０ ０ ２年 ３月农 牧 发 ［ ０ ２ １ ２ ０ ］
１ ３ 单 克 隆抗 体 的 制 备 ，
１ ３ １ 动 物 免 疫 ： Ｒ Ｃ—Ｂ Ａ 免疫 ９周 龄 Ｂ Ｌ ／ 小 鼠 ．． 以 Ａ Ｓ Ａ Ｂｃ
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Hale Waihona Puke 接 Ｅ ＩＡ法 测 定 血 清 抗 体 效 价 ， 效价 在 １ ～５左右 即可 用 ＬＳ 若 ０ 于细胞融合 。细胞融合前 ３ ～５ｄ进行超强免疫 ， 尾静脉和腹 腔 各 注 射 １ ０ ｇ 抗 原 ，０ 只 。 ０ 纯 ２ ０ｔ Ａ／ １ ３ ２ 细胞融合与培养 ： ．． 超强免疫 ４ｄ的小 鼠， 眶下窦采血 ， 分 离 血 清 。脱 颈 致 死 小 鼠 ， 菌 手 术 取 出 脾 脏 制 备 脾 细 胞 ， 无 与 Ｓ ２ ０细 胞 在 ５ ％ Ｐ Ｇ 作 用 下 进 行 细 胞 融 合 ￣ ， Ｐ／ ０ Ｅ １ 将 融合 后 的 细胞 悬 液 加 到 细 胞 培 养 板 上 ， ３ ℃ ， ％ Ｃ ２ 置 ７ ５ Ｏ 培 养 箱 中 以 Ｈ Ｔ、 Ａ ＨＴ培 养 基 选 择 培 养 。 １３ ３ 阳 性 杂 交 瘤 细 胞 的 筛 选 与 克 隆 ： 接 竞 争 Ｅ ＩＡ筛 ．． 间 ＬＳ 选 阳性 孔 （ ｊ将 包 被 抗 原 Ｒ Ｃ—ＶＯ 包 被 到 ９ １： ７ Ａ Ａ ６孔 酶 标 板
莱克多巴胺(Ractopamine)ELISA 检测试剂盒说明书
地址：北京市海淀区西北旺镇东北旺南路1号院东南1号房 电话：+86-10-82771310 82773503 82771993 827729271莱克多巴胺(Ractopamine)ELISA 检测试剂盒说明书本试剂盒可以在尿样、血清、饲料、组织等生物样品中酶免定性、定量检测莱克多巴胺的残留量。
提供的材料与试剂1、可拆96孔酶标板×1块 （包被有偶联抗原）2、标准液×6瓶：（1.5ml/瓶）0ppb ，0.3ppb ，0.9ppb ，2.7ppb ，8.1ppb ，24.3ppb3、高浓度标准品：（1.5ml/瓶） 100ppb4、抗体工作液 10ml ………………………绿色帽5、酶标二抗 7ml ………………………透明帽6、底物液 A 液 7ml ………………………白色帽7、底物液 B 液 7ml ……………………… 红色帽8、终 止 液 7ml ………………………黄色帽9、20×浓缩洗涤液 40ml ………………………透明帽 10、20×浓缩提取液 50ml ………………………蓝色帽一、概述莱克多巴胺（Ractopamine ）是一类结构和功能类似肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇胺类衍生物，属β-兴奋剂，是一种营养重分配剂，可加快畜禽生长速度，降低酮体脂肪含量，提高瘦肉率。
欧盟已禁止将β-兴奋剂作为家禽的生长促进剂，我国在《禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录》中也有明文规定，但由于莱克多巴胺属于非处方药，且价格远低于克仑特罗，因此非法使用者有不断增多的趋势。
本试剂盒是应用ELISA 技术研发的新一代药物残留检测产品，操作时间仅需1.5小时，能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA ，在酶标板微孔条上预包被上偶联抗原，样本中残留的莱克多巴胺和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗莱克多巴胺抗体，加入酶标二抗后，用TMB 底物显色，样本吸光度值与其所含莱克多巴胺含量成负相关，通过标准曲线换算出相应的值，再乘以样品稀释倍数，即可得出样品中莱克多巴胺的残留量。
生物样本中莱克多巴胺检测方法的研究进展
生物样本中莱克多巴胺检测方法的研究进展王文珺;李阳;叶云锋;江海洋【摘要】莱克多巴胺(ractopamine,RAC)是一种常用的β-兴奋剂,近年来,人们发展了许多方法检测其在食用动物中的残留情况,以期达到对其使用的有效监控.作者在介绍RAC基本理化性质和作用机理的基础上,论述了国内外检测生物样本中RAC的分析方法,并对这些方法的优缺点进行了分析,进一步说明无论仪器分析方法还是免疫分析方法都有其固有的特性和优缺点,彼此是无法完全替代的,并在此基础上,对未来RAC分析方法的发展方向进行了展望.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2015(042)001【总页数】7页(P140-146)【关键词】莱克多巴胺;残留检测;仪器分析;免疫分析【作者】王文珺;李阳;叶云锋;江海洋【作者单位】北京维德维康生物技术有限公司,北京100095;中国农业大学动物医学院,北京100193;广西兽药监察所,南宁530001;中国农业大学动物医学院,北京100193【正文语种】中文【中图分类】S859.84莱克多巴胺（ractopamine，RAC）作为一种重要的β－兴奋剂，在动物源性食品中的残留已经引起人们极大的关注，各国对其残留的态度也存在差异。
但在中国及欧盟，RAC被严格禁止用于食用性动物中。
近年来，人们发展了各种方法来检测其在食用动物中的残留情况，这些检测方法包括仪器分析方法及免疫分析方法。
仪器分析方法因为需要价格昂贵的仪器及专业的技术操作能力，现在主要作为一种确证分析方法，而免疫分析方法，因其高通量、快速、价格低廉，已作为一种筛查方法被极大推广。
作者现就RAC及其残留检测方法的最新研究进展进行简要综述。
1 莱克多巴胺概述RAC（图1）是20世纪美国礼来公司开发的一种重要的β－兴奋剂，化学名称为N－［2－（4－羟基苯基）－2－羟基乙基］－1－甲基－3－（4－羟基苯基）丙氨，相对分子质量为337.8。
由于RAC 存在2个手性碳原子，因此其具有4种同分异构体，分别为RR 型、RS型、SR 型和SS 型，其生物活性大小依次为：RR＞RS＞SR＞SS［1－2］。
莱克多巴胺在肉牛体内残留消除规律研究
莱克多巴胺在肉牛体内残留消除规律研究莱克多巴胺在肉牛体内残留消除规律研究引言：现代畜牧业发展迅速，为了提高肉牛的生长速度和肉质品质，许多养殖户使用莱克多巴胺这种生长促进剂。
莱克多巴胺可以促进肌肉生长，提高肉牛的体重和肉质。
然而，在肉牛体内使用过量的莱克多巴胺会导致残留物的积累，对人类健康构成潜在风险。
因此，研究莱克多巴胺在肉牛体内残留物的消除规律对于确保肉食安全至关重要。
一、莱克多巴胺的消化和吸收进入肉牛体内后，莱克多巴胺首先被肠道吸收。
莱克多巴胺可以通过主动转运进入肠细胞，然后通过细胞膜的扩散进入肠道毛细血管。
吸收后的莱克多巴胺将通过血液循环分布到肌肉和其他组织中，进一步影响肉牛的生长和发育。
二、莱克多巴胺在肉牛体内的代谢和残留物形成一部分吸收的莱克多巴胺会进入肝脏经由肝代谢酶进行代谢。
莱克多巴胺的代谢主要发生在肝脏和肾脏中。
在肝脏中，莱克多巴胺通过氧化、还原和甲基化等反应转化为代谢产物。
这些代谢产物可能具有不同的生物学活性，并对肉牛体内残留物的消除产生影响。
同时，肾脏也是莱克多巴胺代谢的重要器官，其中一部分莱克多巴胺被排出体外，一部分被转化为代谢产物。
三、莱克多巴胺在肉牛体内的残留消除规律对于莱克多巴胺的残留消除规律，主要通过药物动力学研究来进行。
药物动力学研究了莱克多巴胺在肉牛体内的吸收、分布、代谢和排泄等过程。
通过分析莱克多巴胺残留物在不同组织和器官中的浓度变化，可以了解其在肉牛体内的消除动力学。
研究结果表明，莱克多巴胺在体内的残留物消除主要通过肾脏排泄和代谢转化完成。
尿液是排泄莱克多巴胺的主要途径，莱克多巴胺及其代谢产物在尿液中的浓度较高。
此外，部分莱克多巴胺残留物也会通过粪便排泄。
研究发现，莱克多巴胺在肉牛体内的半衰期为几个小时至一天左右，即在此时间内，莱克多巴胺残留物的浓度会减少一半。
然后，莱克多巴胺在体内逐渐被代谢和排泄，最终被完全消除。
结论：莱克多巴胺在肉牛体内的残留消除主要通过肾脏排泄和代谢转化完成。
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莱克多巴胺（瘦肉精）快速检测卡
——胶体金法(血清)
一、简介
“瘦肉精”快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的“瘦肉精”在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和硝酸纤维素膜（NC膜）检测线上“瘦肉精”-蛋白偶联物的结合。
如果样本“瘦肉精”含量≥3ppb/ml，检测线不显颜色，结果为阳性。
反之，检测线显红色，结果为阴性。
本产品是检测莱克多巴胺（瘦肉精）的快速筛选试剂，整个检测过程只需5-10分钟，适用于尿液样品的检测。
二、试剂组成
1、莱克多巴胺免疫胶体金快速检测卡（50份/盒）；
2、一次性塑料吸管（1个/袋）；
3、干燥剂（1片/袋）；
4、使用说明书（1张/盒）。
三、标本收集
用干燥、洁净的离心管或适当容器采集血清。
如果不立即检测，可将血清冷冻保存；血清在2-8℃冷藏可保存24小时，要注意避免腐败造成失效或污染。
如果血清出现沉淀或浑浊物，请离心后再检测。
四、操作步骤
1、在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡
和待检样本溶液恢复至室温。
2、撕开装有莱克多巴胺检测卡的包装袋，小心取出检测卡，水平放置于实验台上。
3、用塑料吸管吸2-3滴血清样本加入样本孔中。
4、5-8分钟内观察结果，10分钟后结果无效。
五、结果判定
1、阳性结果：出现一条红色质控线（C）。
2、阴性结果：出现质控线（C）和反应线（T）两条红线。
3、无效结果：无红线出现，表明检测结果无效，需重新实验。
六、注意事项
1、检测卡在保质期内一次性使用。
4℃冰箱中保存的检测卡检测前应平衡至室温后再开袋使用，
否则会影响检测结果。
2、谨防检测卡受潮，铝箔包装袋受损或检测卡受潮后。
检测卡不能使用。
3、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面，检测时避免
阳光直射。
4、塑料吸管不可混用，以免交叉污染；
5、出现阳性结果，应用本卡复查并作阳性对照实验，必要时送实验室进一步定量。
6、铝箔包装袋中的小包是干燥剂，不可误服。
7、自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。
七、保存条件及有效期
4-30℃阴凉、干燥、避光保存，有效期为18个月。