5脓毒症患者中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的水平及价值
细胞外游离组蛋白在脓毒症发生发展及治疗中的作用研究进展
细胞外游离组蛋白在脓毒症发生发展及治疗中的作用研究进展耿凡毅1，刘虹21 山西医科大学第一临床医学院，太原030000；2 山西医科大学第一医院重症医学科摘要：在脓毒症发生发展期间，中性粒细胞诱捕网（NETs）的形成及细胞凋亡坏死会导致组蛋白释放至细胞外，形成细胞外游离组蛋白（CFHs）。
CFHs从多个方面参与脓毒症的发生发展，CFHs具有一定抗菌效果、会破坏细胞膜产生细胞毒性、参与炎症反应、损伤内皮细胞、影响凝血功能，以此延长脓毒症的病程，加重病情。
CFHs作为脓毒症潜在治疗靶点也得到了很大的发展，出现了抑制CFHs的产生、降低循环中的CFHs的含量或降低CFHs细胞毒性等治疗方法，有望成为治疗脓毒症的新策略。
关键词：组蛋白；细胞外游离组蛋白；脓毒症；中性粒细胞；中性粒细胞诱捕网doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.33.021中图分类号：R515.3 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）33-0088-04脓毒症是一种重症监护室的常见临床综合征，是由于宿主对感染的反应失调而导致的危及生命的器官功能障碍［1］。
全球每年约有4 890万脓毒症患者，受不同地区医疗水平影响，全球死亡率约为52.8%［2］。
目前脓毒症的发病机制尚未完全明了，主要认为与病原微生物的清除障碍、炎症反应失衡、线粒体损伤、凝血功能障碍、氧化应激等有关，治疗仍以早期识别、抗感染、生命支持为主。
组蛋白在传统上被认为是真核生物细胞染色质与原核细胞中的碱性蛋白质和DNA共同组成核小体结构，是染色质的主要蛋白质成分。
但是近10年逐渐发现了细胞核外游离组蛋白（cell-free histones， CFHs）的存在，在脓毒症发生发展时，中性粒细胞通过形成中性粒细胞诱捕网（Neutrophil extracellular trap， Nets）来捕获病原体，其中CFHs是NETs的重要组成部分，而且细胞凋亡坏死导致核膜破裂也会释放组蛋白至细胞外形成CFHs。
中性粒细胞胞外诱捕网及其在肺部炎症性疾病中的作用研究进展
种杀菌方式，即中性粒细胞胞外诱捕网（ＮＥＴｓ）。ＮＥＴｓ 主要由组蛋白、ＤＮＡ 和弹性蛋白酶以及髓过氧化物酶
（ＭＰＯ）等酶类构成，其形成和降解受多种因素的影响，形成过程受多种信号通路的调控。ＮＥＴｓ 是把“双刃剑”，其
形成和降解失衡可影响疾病的最终转归。异常形成的ＮＥＴｓ 参与急性肺损伤／ 急性呼吸窘迫综合征、慢性阻塞性肺
及髓过氧化物酶（ＭＰＯ）等酶类构成，在机体抗感染 １ ＮＥＴｓ 的形成、降解与信号通路
防御过程中发挥至关重要的作用［１］。当机体受到 １． １ ＮＥＴｓ 的形成与降解 ＮＥＴｓ 的形成与降解过
病原微生物入侵时，ＮＥＴｓ 可以借助于其特殊的以 程复杂，目前仍未完全阐明。研究发现，诸多因素可
ＤＮＡ 为主体的纤维丝网状结构来快速、有效的捕获 以诱导中性粒细胞形成ＮＥＴｓ，如病原微生物（细菌、
病原体，限制炎症扩散，发挥强大的免疫防御等功 病毒等）、１２十四酸佛波酯１３乙酸盐（ＰＭＡ）、脂多
能［２］。最新研究发现，ＮＥＴｓ 与炎症相关性疾病、自 糖（ＬＰＳ）、白细胞介素８（ＩＬ８）、高迁移率族蛋白Ｂ１
身免疫性疾病、肿瘤等的发生发展过程密切相关，已 （ＨＭＧＢ１）等［６～８］。最新研究发现，血清淀粉样蛋白
ｕｌｉｎ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｄｕｒｉｎｇ ｃｏｒｎｅａｌ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｗｏｕｎｄ
［］ ， ， （）： ｈｅａｌｉｎｇ Ｊ ． Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ ２０１２ ５３ ４ ２４１４． ［ ］ ， ， ， ２５ Ｖａｌｌｉèｒｅｓ Ｎ Ｂａｒｒｅｔｔｅ Ｂ Ｗａｎｇ ＬＸ ｅｔ ａｌ． Ｂｅｔａｃｅｌｌｕｌｉｎ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ
［］ ， ， （ ）： ＴＧＦα Ｊ ． Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ２０１１ ４１２ １ １０９
中性粒细胞胞外诱捕网在肝移植术后并发症诊疗中的作用
· 综述·中性粒细胞胞外诱捕网在肝移植术后并发症诊疗中的作用刘彦尧 秦小琰 吴忠均【摘要】 肝移植术后并发症的防治对于维护移植肝功能，改善移植受者预后至关重要。
中性粒细胞胞外诱捕网（NET ）是由中性粒细胞激活后释放到胞外的一种以DNA 为骨架，多种组蛋白和颗粒蛋白构成的纤维网状结构，研究表明肝移植术后供肝内中性粒细胞激活和NET 的释放参与了包括缺血-再灌注损伤、急性排斥反应、急性肝衰竭和肝细胞癌复发在内的多种肝移植相关并发症的发生。
本文将重点探讨NET 对肝移植术后并发症的影响，详述NET 作为肝移植术后并发症防治潜在靶点的研究进展，以期为肝移植受者术后并发症的防治提供参考，提高临床肝移植疗效，改善肝移植受者预后。
【关键词】 肝移植；中性粒细胞胞外诱捕网；缺血-再灌注损伤；急性排斥反应；急性肝衰竭；肝细胞癌；肽基精氨酸脱亚胺酶4（PAD4）；髓过氧化物酶（MPO ）【中图分类号】 R617, R392.12 【文献标志码】 A 【文章编号】 1674-7445（2023）05-0015-09The role of neutrophil extracellular trap in the diagnosis and treatment of complications after liver transplantation Liu Yanyao *, Qin Xiaoyan, Wu Zhongjun. *Department of Hepatobiliary Surgery , the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University , Chongqing 400016, ChinaCorresponding author: Wu Zhongjun, Email: **************【Abstract 】 Prevention and treatment of complications after liver transplantation play a significant role in maintaining liver graft function and improving clinical prognosis of the recipients. Neutrophil extracellular trap (NET) are fibrous net-like structures composed of DNA as the skeleton and histones and granular proteins released by activated neutrophils. Studies have shown that the activation of neutrophils and the release of NET in donor liver after liver transplantation are involved in the incidence of multiple liver transplantation-related complications including ischemia-reperfusion injury, acute rejection, acute liver failure and recurrence of hepatocellular carcinoma, etc . In this article, the effect of NET on the complications after liver transplantation was mainly assessed, and research progress on NET as a potential target for the prevention and treatment of complications after liver transplantation was reviewed, aiming to provide reference for the prevention and treatment of complications after liver transplantation, enhance clinical efficacy of liver transplantation and improve clinical prognosis of the recipients.【Key words 】 Liver transplantation; Neutrophil extracellular trap; Ischemia-reperfusion injury; Acute rejection;Acute liver failure; Hepatocellular carcinoma; Peptide arginine deiminase 4 (PAD 4); Myeloperoxidase (MPO)DOI: 10.3969/j.issn.1674-7445.2023093基金项目：国家自然科学基金（82170666）；重庆医科大学附属第一医院博士后培育项目（CYYY-BSHPYXM-202303）作者单位： 400016 重庆，重庆医科大学附属第一医院肝胆外科（刘彦尧、吴忠均）；重庆医科大学附属儿童医院渝中院区普通创伤外科（秦小琰）作者简介：刘彦尧（ORCID ：0000-0002-2130-2716），博士研究生，住院医师，研究方向为肝移植、肝移植术后免疫损伤，Email ：*********************通信作者：吴忠均（ORCID ：0000-0002-1627-0633），博士研究生导师，主任医师，研究方向为肝移植、肝移植术后免疫损伤，Email: **************第 14 卷 第 5 期器官移植Vol. 14 No.5 2023 年 9 月Organ Transplantation Sep. 2023 肝移植是各种终末期肝病的唯一有效治疗手段[1]。
中性粒细胞胞外杀菌网络的研究
中性粒细胞胞外杀菌网络的研究作者：梁雅来源：《科技传播》2011年第09期摘要中性粒细胞又称为多形核白细胞（polymorphonuclear neutrophils, PMNs），是机体抵御微生物病原体入侵的第一道防线。
PMNs的灭菌方式主要分为呼吸爆发和形成胞外杀菌网络（neutrophil extracellular traps, NETs），后者的效率远远高于前者。
胞外杀菌网络由核酸物质和颗粒蛋白组成，在诱导因子刺激下形成网状结构，捕杀病原体，其内在杀菌机制成为近年PMNs杀菌功能的研究热点。
关键词中性粒细胞；胞外杀菌网络；杀菌机制中图分类号Q81 文献标识码A 文章编号 1674-6708（2011）42-0092-03Research on the Neutrophil Extracellular Traps of Polymorphonuclear NeutrophilsLIANG YaGuangdong Polytechnic Institute，Guangzhou 510091 Guangdong ProvinceAbstract Polymorphonuclear neutrophils （PMNs）are one of the first defenses against invading microbes. There are two ways for PMNs to kill bacteria, phagocytosis and neutrophil extracellular traps （NETs）, which is much more effective. NETs are composed of DNA and protein. After the stimulation of inducing factor, NETs appear and capture the pathogens. The mechanism of NETs becomes a current research focus in the field of PMNs.Keywords Polymorphonuclear neutrophils；neutrophil extracellular traps；bactericidal mechanism中性粒细胞，即分叶核白细胞（polymorphonuclear neutrophils，PMNs），胞内含呈弥散性分布的颗粒，它处于机体抵御化脓性细菌等微生物病原体入侵的第一线，在非特异性细胞免疫系统中起十分重要的作用[1，2]。
急性出血性凝血功能障碍诊治专家共识(2020)
急性出血性凝血功能障碍诊治专家共识（2020）背景急性出血性凝血功能障碍指血液凝结能力受到急性损害的病理生理状态。
出血是其最常见的临床表现，也可仅表现为凝血指标异常而无出血。
由于止血机制复杂，某些情况下可同时存在血栓形成。
血小板减少症、口服抗凝药、脓毒症、急性中毒、肝功能损害、严重创伤等都可以造成急性出血性凝血功能障碍，上述疾病常见于急诊和重症监护室(ICU)，常导致严重临床后果，需要临床医生及时做出正确诊断和实施适当的治疗。
一、常见病因和机制专家意见1 急性出血性凝血功能障碍在急诊和ICU较常见，需要及时明确诊断和分析病因。
1.1 血小板减少症血小板激活形成血小板栓子，是止血过程的启动步骤，各种原因引起的血小板减少症均有可能造成凝血功能障碍。
目前把血小板计数< 100×10^9/L定义为血小板减少。
造成血小板减少症的原因包括血液系统原发疾病、药物、毒物、感染、免疫、出血、机械性破坏、分布异常等。
当血小板计数< 50××10^9/L时出血风险将明显增加。
在急、危重症患者中，血小板减少的现象相当常见，有研究统计入住ICU 的患者在治疗过程中，有14% ～44% 出现了血小板减少。
1.2 口服抗凝药物导致的凝血功能障碍口服抗凝药物是急性凝血功能障碍的常见原因。
随着血栓栓塞性疾病发生率逐渐增高，口服抗凝药物的应用越来越广泛，一项欧洲研究显示当地9% 的急诊患者使用了口服抗凝药物。
常用口服抗凝药物包括维生素K 拮抗剂(vitamin K antagonist, VKA) 和直接口服抗凝药(direct oralanticoagulant, DOAC)。
VKA（如华法林）通过抑制维生素K 依赖的凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的合成发挥抗凝血作用；DOAC 主要包括Ⅱa因子抑制剂( 如达比加群) 和Ⅹa因子抑制剂( 利伐沙班、阿哌沙班)，通过直接抑制对应凝血因子活性发挥抗凝作用。
中性粒细胞胞外诱捕网在痛风性关节炎中的作用一枚硬币的两面
135痛风性关节炎(gouty arthritis, GA)是由单钠尿酸盐(monosodium urate, MSU)晶体沉积引发的炎症性疾病[1]。
当痛风性关节炎患者的尿酸浓度超过尿酸的溶解度达到过饱和状态时，MSU 晶体会在软骨、滑膜及周围组织沉积并刺激关节滑膜，发生一系列病理反应，从而引发关节处出现急性炎症[2]。
此时，血管内皮表面的黏附分子会捕获循环血中的中性粒细胞，渗出血管，定向迁移至关节腔的炎症部位，识别并对抗入侵宿主体内的病原体，发挥保护作用[3]。
近年研究发现，除了吞噬及脱颗粒作用外，中性粒细胞也可以通过形成中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)的方式消灭入侵的病原微生物[4]。
NETs 由于吞噬刺激从中性粒细胞释放的胞外DNA 纤维，帮助嗜中性粒细胞固定并诱捕细菌、真菌或病毒，从而更有效地消除这些病原体[5]。
Brinkmann 等人[6]率先发现NETs ，他们通过免疫荧光及DNA 染料染色的方法对NETs 的组成进行分析后得出，该结构是由染色质和蛋白颗粒组成的、能捕获并杀死微生物的胞外网状结构。
MSU 晶体诱发中性粒细胞NETs 产生，后者反过来吞噬捕获MSU 晶体，并通过镶嵌在NETs 上的弹性蛋白酶、髓过氧化物酶、组织蛋白酶G 等酶类的杀菌作用，发挥其抗菌作用，防止炎症扩散[7]。
鉴于中性粒细胞NETs 在GA 中发挥的重要作用，本文将对GA 的发生、发展及炎症消散过程进行概述，重点讨论中性粒细胞NETs 在GA 中所起到的双重作用，并对GA 中参与中性粒细胞NETs 形成的相关信号通路进行简述。
*国家自然科学基金项目(31972901、31671234、31571430)†通信作者，研究方向：免疫学与骨代谢调控。
E-mail:******************.cndoi:10.3969/j.issn.0253-9608.2021.02.008中性粒细胞胞外诱捕网在痛风性关节炎中的作用：一枚硬币的两面*王雪霖①，曹秀梅②，闫建设①†①上海大学 生命科学学院，上海 200444；②上海交通大学 医学院，上海市免疫学研究所，上海 200025摘要 痛风性关节炎(gouty arthritis, GA)是一种由大量单钠尿酸盐(monosodium urate, MSU)沉积所导致的急性炎症。
中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)与结直肠癌的研究进展
中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)与结直肠癌的研究进展发布时间：2023-03-10T01:11:26.371Z 来源：《中国医学人文》2022年5月5期作者：李扬何其勇程卓鑫李加成洪治国[导读] 中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是中性粒细胞形成的一种网状结构，其中含有DNA和蛋白质。
NETs既在先天免疫反应中发挥着作用，还参与了自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮，以及其他非感染性病理过程，如血管炎、血栓形成、糖尿病、动脉粥样硬化、凝血障碍和癌症。
同时相关研究发现NETs参与了结直肠癌的进展和转移。
本文将主要关注NETs对结直肠癌的影响进行综述，为寻找治疗结直肠癌的潜在靶点提供参考。
李扬，何其勇[通讯作者]，程卓鑫，李加成，洪治国佳木斯大学附属第一医院佳木斯市（154002）【摘要】中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是中性粒细胞形成的一种网状结构，其中含有DNA和蛋白质。
NETs既在先天免疫反应中发挥着作用，还参与了自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮，以及其他非感染性病理过程，如血管炎、血栓形成、糖尿病、动脉粥样硬化、凝血障碍和癌症。
同时相关研究发现NETs参与了结直肠癌的进展和转移。
本文将主要关注NETs对结直肠癌的影响进行综述，为寻找治疗结直肠癌的潜在靶点提供参考。
【关键词】中性粒细胞外诱捕网；结直肠癌；结直肠癌（CRC）在消化系统中是最常见的恶性肿瘤，在恶性肿瘤的病死率中已达第三位，是我国的发病率第一的恶性肿瘤。
中性粒细胞外诱捕网(NETs)是一种复杂的网状结构，能够捕获真菌、细菌、原生动物和病毒等。
一些研究调查了NETs在肿瘤中的作用，报告显示它们参与了癌症的免疫编辑、进展、转移扩散和癌症相关血栓形成。
NETs可以发挥抗肿瘤或促肿瘤活性。
NETs的一些成分如髓过氧化物酶(MPO)、蛋白酶和组蛋白可以杀死肿瘤并抑制肿瘤的生长和转移。
然而NETs蛋白酶还可以降解细胞外基质，促进癌细胞外渗和转移[1]。
中性粒细胞胞外诱捕网的形成及其在生殖相关疾病中的作用
DOI:10.12280/gjszjk.20200457乔国栋，王永红△【摘要】中性粒细胞活化后可形成中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps，NETs），参与人体内诸多疾病的病理生理过程，但其具体的发病机制尚未阐明。
目前研究表明，NADPH氧化酶等细胞因子在其形成过程中发挥重要作用，并通过蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosine kinase，PTK）和磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol3-kinase，PI3K）等细胞信号通路对NETs的形成过程进行调节，有助于探讨NETs在子痫前期等生殖相关疾病中的作用。
综述NETs的形成及其相关作用机制的研究进展。
【关键词】胞外诱捕网；NADP；蛋白酪氨酸激酶类；p38丝裂原活化蛋白激酶类；丝裂原活化蛋白激酶1；先兆子痫；中性粒细胞胞外诱捕网Neutrophil Extracellular Traps and Related Reproductive Diseases QIAO Guo-dong,WANG Yong-hong.Department of Obstetrics and Gynecology,The Second Hospital of Shanxi Medical University,Taiyuan030001,ChinaCorresponding author:WANG Yong-hong,E-mail:**********************【Abstract】Neutrophil extracellular traps(NETs)can be formed after the activation of neutrophils,whichparticipate in the pathophysiological process of many diseases including related reproductive diseases.However,the specific pathogenesis has not been clarified.At present,studies have shown that the nicotinamide adeninedinucleotide phosphate(NADPH)oxidase and other cytokines play an important role in the formation process ofNETs,and that many signaling pathways,such as protein tyrosine kinase(PTK)and phosphatidylinositol3-kinase(PI3K),regulate the formation of NETs.Many reproductive diseases such as preeclampsia could be furtherexplained by NETs.In this paper,we will review the formation of NETs and the related mechanisms.【Keywords】Extracellular traps；NADP；Protein-tyrosine kinases；p38mitogen-activated protein kinases；Mitogen-activated protein kinase1；Pre-eclampsia；Neutrophil extracellular traps（ＪＩｎｔＲｅｐｒｏｄＨｅａｌｔｈ蛐ＦａｍＰｌａｎ，2021，40：260-264）·综述·基金项目：山西省面上自然基金项目（201901D111367）；山西省卫健委科研计划课题（2019050）；山西医科大学校级博士启动基金项目（BS201713）作者单位：030001太原，山西医科大学第二医院妇产科通信作者：王永红，E-mail：**********************△审校者中性粒细胞一旦发现异物或内源性威胁，就会采取一系列措施，包括吞噬和产生活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）等，确保消除危害。
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脓毒症患者中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的水平及价值
张芳晓章志丹马晓春
目的中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps，NETs）是由中性粒细胞核内组分释放到细胞外形成的一种网状纤维结构，可由多种病原体或药物刺激中性粒细胞产生，具有限制病原体扩散，分泌杀菌蛋白等多种作用。
因此，中性粒细胞胞外诱捕网可能成为评价脓毒症严重程度的生物学标志物，以及减轻脓毒症的潜在治疗靶点。
本研究主要通过检测脓毒症患者血清中性粒细胞胞外诱捕网水平判断其对早期诊断脓毒症的价值。
方法采用前瞻性观察性研究2014年11月至2015年3月中国医科大学附属第一医院重症医学可收治的术后患者43例及健康受试者17例，根据1991年美国胸科医师学会（ACCP）和重症医学会（SCCM）制定的脓毒症诊断标准，将患者分为术后非脓毒症组20例及脓毒症组23例。
入ICU1h经外周静脉采血3ml，37℃条件下，3000转/分速率离心15分钟。
离心后取上清100ul，加入picogreen荧光染料100ul，避光孵育5分钟后应用荧光酶标仪检测样品荧光值，再根据标准曲线计算样品cf-DNA/NETs的浓度。
分析血清中NETs的浓度与患者是否诊断脓毒症，白细胞数量，中性粒细胞数量，APACHEII及SOFA评分的关系。
结果脓毒症组血清NETs水平（6.15±2.638）较非脓毒症组（3.68±0.726）明显升高（P=0.004），非脓毒症组较健康受试者组无明显差异（P>0.05）。
脓毒症组外周血白细胞及中性粒细胞数量较非脓毒症组无明显差异。
脓毒症患者NETs水平与外周血白细胞及中性粒细胞数量无相关性，与APACHEII及SOFA评分无相关性。
结论脓毒症患者血清NETs水平升高，与白细胞及中性粒细胞数量无明显关系，手术等因素不影响血清NETs水平。
而NETs单纯作为早期脓毒症生物学指标，不能评估患者整体器官受损严重程度。
血清NETs水平的测定操作简便，与白细胞或中性粒细胞数量相比可以更好的诊断脓毒症的发生。