炭疽患者标本采集原则
炭疽实验室检测技术
PCR检测引物的设计
炭疽芽孢杆菌的PCR 检测中引物的设计非常关键。 炭疽芽孢杆菌有两个毒力相关质粒pX01 和pX02。
pX01 分子量为110 MDa (185kb) ，携带cya 、 lef 和pag 基因，分别编码水肿因子( EF) 、致死 因子(L F) 和保护性抗原( PA) ； pX02 分子量为60 MDa(95kb)，携带capABC 和dep 基因，分别编码荚膜与参与其生物合成的 酶。
PCR检测引物序列
pagA F: 5' ATT TGC GGT AAC ACT TCA CT 3' pagA R: 5' AGA CCG TGA CAA TGA TGG AA 3' cap外F：5' CCT GGT TGT TCT TTT CGT TGC 3' cap外R：5' CGG ATT GTA TAT GGA GTG GG 3' cap内F：5' TTT CAC CAG CAC CCA CAT AG 3' cap内R：5' GGG ACA GGA ATG TTT GGA TC 3' rpoB 2F：5' CCA ACA GTA GAA ATG CC 3' rpoB 2R：5' AAT TTC ACC AGT TTC TGG ATC T 3'
一些进化研究学者推论,这几种细菌来源于同一个 祖先,为了适应不同的环境而产生分化,炭疽芽孢 杆菌成为温血动物的病原菌,蕈状芽孢杆菌是环境 中的正常菌,对人和动物没有致病能力;而蜡样芽 孢杆菌和苏云金芽孢杆菌处于以上两种菌之间,蜡 样芽孢杆菌是环境中的常见菌,偶尔也会使温血动 物感染;苏云金芽孢杆菌则成为昆虫的致病菌。
炭疽诊断标准(2018年版)
炭疽诊断1范围本标准规定了炭疽的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。
本标准适用于全国各级各类医疗机构及其医务人员对炭疽的诊断。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB19489《实验室生物安全通用要求》卫生部《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》卫生部《人间传染的病原微生物名录》3术语和定义炭疽anthrax是由炭疽芽胞杆菌引起的一种人兽共患急性传染病，主要为食草动物(牛、羊、马等)的传染病。
人主要通过接触患炭疽的动物或污染的动物制品、环境获得感染而患病。
主要表现为皮肤炭疽，少数为肺炭疽和肠炭疽，可以继发败血症及脑膜炎。
除皮肤炭疽病死率较低外，其他各型炭疽的病死率均较高。
4诊断依据4.1流行病学史4.1.1发病前14d以内，接触过疑似炭疽的病、死动物或其残骸；食用过疑似炭疽的病、死动物肉类或其制品；吸入可疑炭疽芽胞杆菌污染的粉尘；从事与毛皮等畜产品密切接触或与炭疽芽胞杆菌研究、使用相关的职业；在可能被炭疽芽胞污染的地区从事养殖、放牧、耕耘或挖掘等活动。
4.1.2生活在证实存在炭疽的地区内或在发病前14d内到达过该类地区。
4.2临床表现及分型4.2.1皮肤炭疽在手、前臂、面、颈等暴露部位的局部皮肤出现不明原因的斑疹、丘疹、水疱，周围组织肿胀及浸润，继而中央坏死形成溃疡性黑色焦痂，焦痂周围皮肤发红，肿胀，疼痛不显著，稍有痒感。
典型皮肤损害表现为具有黑痂的浅溃疡，周边有小水疱，附近组织较为广泛的非凹陷性水肿。
除皮损外，患者多出现发热、头痛、关节痛、全身不适以及局部淋巴结和脾肿大等症状和体征。
少数严重病例，局部呈大片水肿和坏死。
4.2.2肠炭疽发热，腹胀，腹部剧烈疼痛，腹泻，通常为血样便或血水样便。
可有恶心、呕吐，呕吐物中可含血丝及胆汁。
可伴有消化道以外症状和体征。
炭疽感染防控相关试题(60+题)
炭疽感染防控相关试题（60+题）1.肠炭疽应于大叶性肺炎、肺鼠疫、钩端螺旋体病等鉴别。
［判断题］对错（正确答案）2.经消化道传播的肠炭疽传染病，有芽泡污染时，应使用2000mg∕L有效氯或2000mg∕L过氧乙酸消毒溶液喷雾消毒。
［判断题］对错（正确答案）3.炭疽人与人之间的传播较多。
［判断题］对错（正确答案）4.炭疽主要因食肉动物接触土生芽胞而感染所导致的疾病。
［判断题］对错（正确答案）5.病畜或死畜停留过得地面、墙面用5000mg∕L过氧乙酸或有效氯IoOOOmg/L消毒液［判断题］对（正确答案）错6.发现炭疽病人应立即向当地卫生部门报告，炭疽病人应就近隔离治疗。
［判断题］对（正确答案）错7.皮肤炭疽为因接触患炭疽牲畜的毛皮和肉类获得感染，皮肤裸露部位或伤口部位出现的斑丘疹、水疱、肿胀等。
［判断题］对（正确答案）错8.炭疽病人用过的治疗废弃物和有机垃圾应全部焚烧［判断题］对（正确答案）错9.皮肤炭疽严禁抚摸、挤压及手术切开，伤口用（）过氧化氢［单选题A.6%B.4%C.2%（正确答案）D.1%10.炭疽病用后的防护用品应浸泡消毒，消毒时间不少于几小时？［单选题］*A.0.5BJC.2（正确答案）D.4IL病人和病畜应隔离治疗,病人应隔离至创口愈合、痂皮脱落或症状消失。
分泌物和排泄物（）次阴性为止。
［单选题］*A.1B.2（正确答案）C.3D.412.肺炭疽例按照甲类传染病管理,应在诊断后（）小时内填写报告卡进行网络直报。
［单选题］*A.1B.2（正确答案）C.12D.1413.在施工、挖掘工事等过程中,如掘到疑为病死动物掩埋地时,应对暴露人员医学观察（）天。
［单选题］*A.7B.10C.12（正确答案）D.3014.含氯消毒剂消毒炭疽病的浓度最少为多少mg/L?［单选题］*A.250B.500C.1000D.2000（ιE确答案）15.肺炭疽是因暴露于芽泡或者吸入污染芽泡尘埃所致，急性起病，多在暴露后0天出现低热、疲劳和心前区压迫等症状。
炭疽防治方案
炭疽防治方案炭疽就是由炭疽杆菌引起得人兽共患得急性传染病、人类炭疽主要由患病或死亡得草食动物感染发病。
根据感染得部位不同,临床上可分为皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽,表现为皮肤坏死及特殊焦痂,周围组织水肿,纵膈及肺、脑膜、肠道得急性感染。
三型均可伴发败血症,病死率较高、一、病原学炭疽杆菌为致病菌中最大得革兰氏阳性杆菌,两端齐平,状如竹节,在动物体内常单个存在,或呈短链,无鞭毛,不能运动,有荚膜,人工培养或在外界环境中易产生芽胞,活体内则不能,因此死于炭疽病得尸体,不准解剖,应尽快焚烧或深埋。
本菌为需氧或兼性厌氧,最适生长温度为35℃,在普通培养基上易生长,菌落呈狮头状。
本菌有三种抗原成分,分别为保护性抗原、荚膜抗原与菌体抗原。
病原菌生长繁殖时分泌得炭疽毒素(外毒素)就是致病得主要因素。
本菌对外界得抵抗力、繁殖体与一般细菌相同,易被物理化学因素所杀灭,芽胞则抵抗力较强,室温干燥下能存活20余年,皮革内亦可活数年, 12０℃高压蒸气10分钟, 干热１４０℃3小时可杀灭芽胞、但芽胞对氧化作用消毒剂较敏感, １∶2 500碘液10分钟可杀灭、二、流行病学(一)传染源人类炭疽得传染源主要就是患病得食草动物如牛、马、羊、猪等。
患病动物血液、痰、分泌物、排泄物可使人直接或间接感染。
人与人得直接传染极少见、(二)传播途径１、经皮肤黏膜感染:常引起皮肤炭疽。
主要就是由于接触病畜得皮、毛、肉、土壤及未经消毒得毛制品而感染、2、经呼吸道传播,由吸入带炭疽杆菌芽胞得尘埃飞沫,可导致肺炭疽。
3、经消化道传播:由食用炭疽病死牲畜肉与被病原菌污染得食物与饮水,而导致肠炭疽、(三)流行特征本病在欧、亚、美、非及大洋洲都有发生。
凡有草食动物得地方,都有本病发生得可能,因此多见于农牧区。
炭疽全年均可发生,农牧区7～9月为发病高峰,工业型炭疽常无季节性、人群对炭疽普遍易感,无年龄、性别差异,但由于职业性接触得关系,青壮年男性发病率较高。
病后可获得较持久得免疫力。
炭疽标本采集及检测流程
炭疽标本采集及检测流程炭疽标本采集材料：防护服，口罩，手套，鞋套，碘酒，灭菌棉签，采血管，采血针，注射器，15ml和50ml无菌管，玻片，记号笔，采样记录单，感染性材料专用垃圾袋。
操作：采样时注意：最好采双份标本，一份用于检测，一份留做原始标本以供复检或复核。
原始标本应首先直接涂片或培养，必要时可增菌后再试验。
1. 血液标本：所有疑似病例，采取血液标本5-10ml（不加抗凝剂）。
2. 皮肤损害处标本：玻片直接在皮肤破损处压蘸，置于容器中；再用棉签采皮肤损害处渗出物，置无菌容器中（不加增菌肉汤）。
3. 粪便与呕吐物标本：有消化道症状的采粪便或呕吐物标本，注意选取其中混有血液的部分，置无菌容器中。
4. 痰与咽拭子标本：有呼吸道症状的收集痰液及咽拭子标本。
5. 脑脊液标本：表现脑膜刺激症状的病人，腰椎穿刺获取脑脊液。
6. 尸体标本的采取：可通过穿刺心脏获得血液或穿刺肝脏等实质性脏器获得组织标本。
7．有病死动物接触史可采病死动物标本或相关土壤等环境标本。
炭疽标本检测流程1. 涂片：所有病人标本，都应首先立即涂片，革兰氏染色，镜检。
发现大量两端平齐的革兰氏阳性大杆菌，即可定为临床诊断病例。
2. 细菌分离培养：全部标本均应进行细菌分离培养。
1）标本处理：皮肤渗出物、血液或脑脊液，直接涂布营养琼脂平板。
土壤等有污染或陈旧的标本，均首先制成悬液（土壤等标本经自然沉淀除去粗大沉淀物），10000转／分钟离心5分钟，弃去大部分上清液，留少量液体与沉淀物混匀，沸水浴加热15分钟后，取适量涂布平板。
2）挑选可疑菌落上述平板在37℃孵育12-24小时后，检查是否长出可疑的炭疽芽胞杆菌菌落。
炭疽芽胞杆菌菌落的形态为：灰白色、不透明、中等大小，常不规则，表面呈毛玻璃样。
3）炭疽芽胞杆菌鉴定将上述可疑菌落挑出，划线接种于平板之上，在划线区内一处滴一滴诊断用炭疽噬菌体，另一处贴一片青霉素纸片。
37℃孵育8-24小时后，在滴噬菌体处有透明噬菌斑，青霉素纸片周围有明显的抑菌环，便可判定接种物为炭疽芽胞杆菌。
炭疽检验技术
食草动物
经口 食入
发病、 死亡
食肉动物 偶尔感染
污染环境 形成芽胞
一、病原——炭疽杆菌（Bacillus anthracis）
革兰氏染色阳性； 长而直的大杆菌，菌体两端平直； 大小为1.0～1.
5um×3～5um，致病菌中最大的； 无鞭毛，不能运动。
一、病原——炭疽杆菌（Bacillus anthracis）
炭疽病原检验程序
标本 处理（方法根据标本情况选择） 直接涂片、 革兰染色、 荚膜染色、 光镜检查 接种培养 （可用选择性培养基、血培养基） 37℃，16~48 h Ascoli试验 基因检测
可疑菌落（形态） 初检 培养性鉴定试验 深入鉴定
涂片、革兰 染色、荚膜 染色、 光镜检查
动 力 检 查
液 体 培 养
炭疽杆菌在病人、病畜体内 荚膜染色 多散在或呈2～3个短链排列， 在碳酸盐培养基中、 有荚膜（红色） 厌氧环境下生成荚膜。
一、病原——炭疽杆菌（Bacillus anthracis）
在活炭疽病畜体或死亡后未经 解剖的尸体内，不形成芽胞。 一旦体内炭疽杆菌暴露于空气 中，接触了游离氧，在一定温 度下(12--42℃)就会形成芽胞。 芽胞呈卵圆形或圆形，位于菌 体中央或稍偏向一端。
（一）炭疽病原学检查——
皮肤炭疽疫情啥症状内容分析
一、引言炭疽是一种由炭疽芽孢杆菌（Bacillus anthracis）引起的急性传染病，主要传染源为食草动物，如牛、羊、马等。
人类感染炭疽通常是通过接触病畜或其产品，以及食用未煮熟的病畜肉而引起的。
皮肤炭疽是炭疽的一种表现形式，占炭疽病例的95%以上。
本文将对皮肤炭疽的症状进行分析，并探讨相应的防控措施。
二、皮肤炭疽的症状1. 早期症状皮肤炭疽的早期症状通常在感染后1-2天内出现，具体表现为：（1）皮肤出现红色丘疹或斑疹，大小不一，质地坚硬。
（2）局部皮肤出现疼痛、肿胀、发热。
（3）患处可能出现水疱，水疱内容物为血性。
2. 进展期症状随着病情的发展，皮肤炭疽的症状会逐渐加重，具体表现为：（1）水疱破溃，形成溃疡，溃疡边缘隆起，底部呈黑色或暗红色。
（2）溃疡周围出现肿胀、疼痛，并伴有局部淋巴结肿大。
（3）部分患者可能出现全身症状，如发热、乏力、寒战、头痛、肌肉酸痛等。
3. 后期症状在皮肤炭疽的后期，患者可能会出现以下症状：（1）溃疡面积扩大，深部组织受累。
（2）病情严重者可能出现败血症、炭疽性脑膜炎等并发症。
（3）病情危重者可出现多器官功能衰竭，甚至死亡。
三、皮肤炭疽的防控措施1. 病例管理（1）隔离治疗：确诊为皮肤炭疽的患者应立即隔离治疗，避免交叉感染。
（2）消毒：对患者的居住环境、用物等进行彻底消毒。
（3）标本采集：采集患者血液、分泌物等标本，进行炭疽芽孢杆菌培养和鉴定。
2. 预防接种接种炭疽疫苗是预防皮肤炭疽的有效手段。
高危人群，如兽医、肉类加工人员等，应定期接种炭疽疫苗。
3. 食品安全（1）加强食品卫生监管，确保肉类产品安全。
（2）禁止销售、食用病畜肉。
（3）加强食品加工环节的卫生管理，防止炭疽芽孢杆菌污染。
4. 环境卫生（1）对病畜及其产品进行无害化处理。
（2）加强动物疫病监测，及时发现并控制炭疽疫情。
（3）加强环境卫生整治，消除炭疽芽孢杆菌的滋生环境。
四、总结皮肤炭疽是一种严重的人畜共患病，了解其症状和防控措施对于预防和控制疫情具有重要意义。
公卫执业医师考点：炭疽诊断标准及处理原则—附录A
公卫执业医师考点：炭疽诊断标准及处理原则—附录A公卫执业医师考点：炭疽诊断标准及处理原则—附录A炭疽细菌学检查A1 标本的采取A1.1 采取标本时必须遵循的两条原则A1.1.1 尽可能在抗生素治疗开始前采取标本。
A1.1.2 除必要时并在具备操作病毒细菌条件的实验室内，不得用解剖的方式获取标本。
所需的血液与组织标本，均应以穿刺方式取得。
A1.2 血液标本所有的疑似人类病例和病畜，都应采取血液标本，标本量至少应满足下列检查的需要：a)涂片进行显微镜检查;b)接种培养基进行细菌分离培养;c)分离血清检查抗体;d)常规血液检查。
A1.3 粪便与呕吐物标本表现消化道症状的可疑病人收集粪便或呕吐物标本，特别注意选取其中混有血液的部分，置无菌容器中。
A1.4 痰与咳碟标本表现为呼吸道症状的可疑病人应收集其痰液标本，无痰液者，应取供细菌分离培养用的培养基，打开平皿盖置病人口鼻10cm处;令病人对平皿咳嗽，然后迅速盖上平皿。
A1.5 脑脊液标本表现脑膜刺激症状的病人，腰椎穿刺获取脑脊液，标本量参照A1.2的要求。
A1.6 尸体标本食草动物死于炭疽时，通常会从口、鼻、肛门等腔道开口流出血液，这种血液应是首先采取的标本。
如果血液已渗入土壤，则应收集混有血液的土壤作为标本。
没有血液流出，或已不可能获取血液标本时，可通过穿刺心脏获得血液或穿刺肝脏等实质性脏器获得组织标本。
A1.7 肉类标本如果怀疑罹患炭疽的家畜已被宰杀，或对商品肉类进行常规检查时，可剪取小块肉类标本。
如有可能，特别应剪取肝脏、脾脏等富含血液以及含淋巴组织的.标本。
A1.8 毛皮或其他可疑污染物品标本剪取小块毛皮或其他可疑物品，剪碎置无菌试管内，加适量无菌生理盐水浸泡。
A1.9 水标本检查水体污染时，用广口瓶收集水样。
如须取深层水样时，将带盖广口瓶伸入水中，然后将用绳系住的瓶盖提起。
A1.10 土壤标本在牲畜死亡或宰杀的地点，应取土壤标本以供检查。
A2 显微镜检查所有来自病人、病畜或尸体的标本，都应首先进行显微镜检查。
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炭疽患者标本采集原则
一、炭疽概述
炭疽是由炭疽杆菌引起的一种急性传染病，主要通过接触或吸入受污染的炭疽杆菌引起的孢子而感染。
炭疽病菌广泛存在于土壤、草地等自然环境中，因此与土壤接触的职业人员、农民等群体易患炭疽病。
二、标本采集原则
1. 标本采集时间
对于疑似炭疽患者，应尽早采集标本以进行实验室检测。
最佳采集时间是在疾病早期出现症状的第一天内，因为此时病原体在体内的数量较多，便于检测。
2. 标本类型
炭疽的标本采集主要包括皮肤疱疹、溃疡、脓液、血液、呼吸道分泌物等。
对于皮肤上的疱疹或溃疡，可以用消毒棉签轻轻刮取患处分泌物。
对于脓液，应使用无菌容器收集。
对于血液和呼吸道分泌物，应采用相应的采集管进行采集。
3. 标本采集方法
皮肤疱疹或溃疡的采集方法是用消毒棉签轻轻刮取患处分泌物，并放入无菌容器中。
在采集血液时，应选择无菌的采血针和抗凝剂，按照惯常的采血程序进行采集。
对于呼吸道分泌物的采集，一般采
用痰液或咽拭子的方式，将采集的标本放入无菌容器中。
4. 标本保存与运输
采集完标本后，应立即送往实验室进行检测。
在运输过程中，应避免高温和低温环境，以免影响病原体的活性。
标本应放置在密封的容器中，并在外部标记上标明病人的相关信息和采集时间。
5. 个人防护措施
在采集炭疽标本时，医务人员应佩戴防护口罩、手套、隔离衣等个人防护装备，以降低感染的风险。
采集完标本后，应立即将防护装备进行正确的处理和消毒。
6. 实验室检测
炭疽标本的实验室检测主要包括细菌培养、PCR检测、血清学检测等。
采集的标本应送往合格的实验室进行检测，以确保结果的准确性和可靠性。
三、注意事项
1. 在采集标本时，应注意避免污染其他物品或人员，避免交叉感染的发生。
2. 采集标本的过程中，应注意个人防护，避免直接接触患者的体液或分泌物。
3. 采集标本的容器应是无菌的，并在外部进行正确标记，以避免混淆。
4. 采集标本后，应及时送往实验室进行检测，以便及时作出诊断和治疗方案。
5. 在标本采集和处理过程中，应遵循相关的医疗废物处理规范，以确保安全和环保。
总结：炭疽患者标本采集是确诊炭疽病的重要步骤，采集的标本应尽早进行实验室检测。
在采集过程中，应注意个人防护和标本的保存与运输，以确保检测结果的准确性和可靠性。
同时，还应遵循相应的标本采集原则和注意事项，以确保采集过程的安全和有效。
炭疽是一种严重的传染病，及早采集标本并进行实验室检测，可以帮助医生及时作出诊断和制定相应的治疗方案，提高治愈率和生存率。