实验动物的固定方法
试验动物保定方法
一、实验动物的捉拿、固定及给药方法1.小白鼠：右手抓住鼠尾，放在台上或鼠笼盖铁丝网下，然后用左手拇指沿其背部向前抓住其颈部皮肤，并以左手的小指和掌部夹住其尾固定在手上。
另一抓法是只用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾尖，后用手掌及小指夹住其尾巴，再以拇指及食指捉住其颈部皮肤。
前一方法易学，另一方法稍难，但便于快速捉拿给药。
小鼠灌胃（PO）法：将小鼠固定后，右手持装有灌胃器的注射器，自口角外插入口腔，沿上颚插入食道。
如遇阻力，可将注射器拔出再插，以免穿破食道或误入气管，造成动物死亡。
灌胃容量一般为0.1～0.2ml/10g，不超过0.5ml/只。
小鼠皮下注射法：两人合作，一人一手抓住小白鼠头部皮肤，另一手抓住鼠尾。
另一人注射药物。
注射部位在背部皮下组织。
如一人操作时，左手抓鼠尾，让鼠爬在铁丝笼上，右手将抽好药液的注射器针头插入背部皮下组织。
如一人操作时，左手抓鼠尾，让鼠爬在铁丝笼上，右手将抽好的药液的注射器针头插入背部皮下将药注入。
注射量不超过0.5ml/只。
小鼠腹腔注射法：左手持鼠，右手持注射器从下腹左或右侧（避开膀胱）朝头部方向刺入，宜先刺入皮下，经2～3mm再刺入腹腔，此时针头与腹壁的角度约45度。
针尖插入不宜太深或太近上腹部，避免刺破内脏，注射量一般为0.1～0.25ml/只。
小鼠尾静脉注射法：将小鼠置于固定器内，使其尾巴露出，用70%酒精擦尾部，或将鼠尾浸入50℃热水中。
待尾部静脉扩张后，左手拉尾，右手进针。
注射容量不超过0.5ml/只。
2.兔：用手抓起它脊背近后颈处皮肤，抓的面积越大其持重点越分散。
如家兔肥大，应再以另一手托住它的臀部，将持重点承托于手上。
将兔作仰卧位，一手仍抓住颈部皮肤，另一手顺其腹部抚摸至膝关节，压住关节。
另一人用绳带捆绑四肢，使兔腹部向上，固定在兔手术台上。
头部则用兔头固定夹固定。
兔灌胃法：二人合作，一人固定家兔于两膝之间，一手固定兔头，使头部后仰，另一手将开口器插入兔口，并向后翻转数次，使兔舌伸直并压在开口器下面。
药理学实验
药理学实验精确操纵动物缉捕固定的方法，能够防止动物过度挣扎或受毁伤而阻碍实验不雅察后果，并可幸免实验者被咬伤，从而包管实验顺利进行。
下面介绍药理学实验课中常用的几种动物的缉捕固定方法。
1、小鼠小鼠性格温柔，一样可不能主动咬人，但抓取时动作也要轻缓。
抓取时先将小鼠放在粗拙物（如鼠笼）上面，用右手提起鼠尾，将小鼠轻轻向后拉，如许可使小鼠前肢抓住粗拙面不动，用左手拇指和食指捏住鼠头皮肤和双耳，其余三指和掌心夹住其背部皮肤及尾部，如许小鼠便可被完全固定在左手中（图1），现在右手可作打针或其它实验操作，也可将小鼠固定在特制的固定器中。
图1 小鼠的缉捕方法图2 大年夜鼠的缉捕方法2、大年夜鼠缉捕固定的方法全然上与小鼠雷同。
因为大年夜鼠比小鼠牙尖性猛，不易用突击的方法抓取，缉捕时较难一些，为防大年夜鼠在惊骇或激愤时咬伤手指，实验者应带上棉手套或帆布手套，先用右手将鼠尾提起，放在粗拙物上，向后轻拉鼠尾，使其不动，再用左手拇、食指捏住头颈部皮肤，其余三指和手掌固定鼠体，使其头、颈、腹呈一向线（图2），这时右手可作打针，若需进行手术，则应对大年夜鼠进行麻醉后固定于手术台上。
如需尾静脉取血或打针，可将大年夜鼠放入固定盒内或用小黑布袋装大年夜鼠，使其只露尾巴。
3、豚鼠豚鼠怯弱易惊，性格平和，不咬人，抓取幼小豚鼠时，只需用双手捧起来，对体型较大年夜或怀孕的豚鼠，先用手掌灵敏扣住鼠背，抓住其肩胛上方，以拇指和食指环握颈部，另一只手托住其臀部（图3）。
图3 豚鼠的缉捕方法4、家兔家兔比较驯服，一样可不能咬人，但脚爪较尖，应幸免抓伤。
抓取时轻轻将兔提起，另一手托其臀部，使其躯干的重量大年夜部分集中在该手上，然后按实验须要将兔固定成各类姿势（图4）。
留意抓兔时不要单提两耳，因为兔耳不克不及遭受全身重量，易造成苦楚悲伤而引起挣扎，是以单提兔耳，缉捕四肢，提抓腰部和背部差不多上不精确的抓法。
图4 家兔的缉捕与固定图5 蟾蜍的缉捕与固定5、青蛙和蟾蜍用左手握住动物，以食指和中指夹住一侧前肢，大年夜拇指压住另一前肢，用右手协助，将两后肢拉直，左手无名指和小指将其压住固定（图5）。
动物实验中的基本技术和方法
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小香猪
第四节 实验动物血液和尿液的采集
一． 动物血液的采集方法 实验动物血液的采集方法有很多。
（一） 按采血部位不同可分为： 眼部采血、耳部采血、心脏采血、大血管采
血及尾部采血等。
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（二）按采血使用的手段不同可分为： 鼠尾刺血、剪尾采血、眼眶静脉丛采血、
心脏采血、断头采血、颈静（动）脉采血、腹主 动（静）脉采血、耳缘剪口采血、耳静脉采血、 后肢外侧小隐静脉、前肢内侧皮下头静脉采血、 翼下采血等。
二、 尿液采集 （一）、 代谢笼采集 代谢笼的特点是能
将动物排泄的大小便分开，达到采集尿液的 目的。此法常用于大鼠、小鼠、豚鼠、兔等 中小型动物的尿液采集。 （二）、导尿法采集 在动物的尿道或输尿 管内插一根塑料导管采集尿液。此法适用于 兔、犬、猫等。
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二、尿液的采集 实验动物的尿液常用代谢笼采集，也可通过其他装置来采集。 （一）用代谢笼采集尿液 代谢笼用于收集实验动物自然排出的尿液，是一种特别设计的为采集实验动物各种排 泄物的密封式饲养笼，有的代谢笼除可收集尿液外，又可收集粪便和动物呼出的CO2 。 一般简单的代谢笼主要用来收集尿液。防在代谢笼内饲养的实验动物，可通过其特殊 装置收集尿液。 （二）导尿法收集尿液 施行导尿术，较适宜于犬、猴等大动物。一般不需要麻醉，导尿时将实验动物仰卧固 定，用甘油润滑导尿管。对雄性动物，操作员用一只手握住阴茎，另一只手将阴茎包 皮向下，暴露龟头，使尿道口张开，将导尿管缓慢插入，导尿管推进到尿道膜部时有 抵抗感，此时注意动作轻柔，继续向膀胱推进导尿管，即有尿液流出。雌性动物尿道 外口在阴道前庭，导尿时于阴道前庭腹侧将导尿管插入阴道外口，其后操作同雄性动 物导尿术。 用导尿法导尿可采集到没有污染的尿液。如果严格执行无菌操作，可收集到无菌尿液。 （
实验一 实验动物的抓取与固定及性别鉴定
急性试验中犬的固定方法：将已麻醉的犬嘴 上的绷带解绷，把犬放在实验台上，先固定头部 后固定四肢。
头部固定：用特制的犬头固定器。犬头固定 器为一圆铁圈，圈的中央横有两根铁条，上面的 一根略弯曲，与棒螺丝相连，下面一根平直。固 定时先将犬舌拉出，将犬嘴伸入铁圈，再将平直 铁条横贯在上、下颌间，然后向下旋转棒螺丝， 使弯形铁条压在犬的鼻梁上，将铁柄固定在试验 台的铁柱上。
（3）蛇 公蛇的尾巴较细长，母蛇较粗短。 轻压尾巴基部，公蛇的半生殖器會跑出來。
4 两栖动物
婚垫 雄蟾
雄蟾 雌蟾
5 鱼类 许多鱼从外形上不易区分其雌雄，但可通过
繁殖期的颜色不同及第二性征加以区分。 如麦穗鱼平时体侧呈灰黄色，到了生殖期雄
性变成暗黑。 雄性马口鱼一到生殖季节，体色变为红蓝条
子相间。
时破损。
白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。 一岁家兔红色与白色长度相等； 一岁以下，红多于白； 一岁以上，白多于红。
还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。 青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年 龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。 另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼 的为青年兔； 皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。
泽，眼神呆滞，行动迟缓。 年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行
动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。
同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠 一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要 求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。
4 家兔 家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄
鉴别的重要标志。 青年兔门齿洁白，短小，排列整齐； 老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有
6 猴的抓取与固定 （1）抓取方法 从笼内抓取猴时，饲养人员应以右手持短柄
第二章 动物实验的基本操作与技术
第二章动物实验的基本操作与技术动物实验方法是多种多样的，在医学的各个领域内都有其不同的应用，其中一些基本方法都是共同性的，如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等，不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法，因此，动物实验基本方法，已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。
第一节实验动物的抓取固定方法一、小鼠抓取固定方法小鼠温顺，一般不会咬人，抓取时先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤（见图2-1之一），将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可（图2-1之二）。
有经验者可直接用左手小指钩起鼠尾，迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。
这种在手中固定方式，能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。
如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时，则需将小鼠作一定形式的固定，解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位（必要时先行麻醉），再用大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。
尾静脉注射时，可用小鼠尾静脉注射架固定（图2-2），先根据动物大小选择好合适的固定架，并打开鼠筒盖，手提鼠尾巴，让动物头对准鼠筒口并送入筒内，调节鼠筒长短合适后，露出尾巴，固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。
图2-1 小鼠的抓取固定方法图2-2 小鼠尾静脉注射方法二、大鼠的抓取固定方法大鼠的抓取方法基本同小鼠，只不过大鼠比小鼠牙尖性猛，不易用袭击方式抓取，否则会被咬伤手指。
抓取时为避免咬伤，可带上帆布手套。
如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃时，同样可采用左手固定法，只是用拇指和食指捏住鼠耳，余下三指紧捏鼠背皮肤，置于左掌心中，这样右手即可进行各种实验操作。
也可伸开左手之虎口，敏捷地从后一把抓住。
若做手术或解剖等，则需事先麻醉或处死，然后用细棉线绳活结缚腿，背卧位绑在大鼠固定板上；尾静脉注射时的固定同小鼠（只需将固定架改为大鼠固定盒）。
实验动物的抓取和固定
实验动物的抓取和固定实验动物的抓取和固定在进行实验时，为了不损伤动物的健康，不影响观察指标，并防止被动物咬伤，首先要限制动物的活动，使动物处于安静状态，工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。
抓取动物前，必须对各种动物的一般习性有所了解。
操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴，不能恐吓动物，同时，要爱惜动物，使动物少受痛苦。
一、小鼠小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。
通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。
在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。
如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。
二、大鼠大鼠的门齿很长，在抓取方法不当而受到惊吓或激怒时易将操作者手指咬伤,所以,不要突然袭击式地去抓它，取用时应轻轻抓住其尾巴后提起，置于实验台上，用玻璃钟罩扣住或置于大鼠固定盒内，这样即可进行尾静脉取血或注射。
如要作腹腔注射或灌胃等操作时，实验者应戴上棉纱手套(有经验者也可不戴)，右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，以防尾巴尖端皮肤脱落，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手中，右手即可进行操作。
三、家兔家兔比较驯服，不会咬人，但脚爪较尖，应避免家兔在挣扎时抓伤皮肤。
常用的抓取方法是先轻轻打开笼门，勿使其受惊，随后手伸入笼内，从头前阻拦它跑动。
然后一只手抓住兔的颈部皮毛，将兔提起，用另一只手托其臀，或用手抓住背部皮肤提起来，放在实验台上，即可进行采血、注射等操作。
因家兔耳大，故人们常误认为抓其耳可以提起，或有人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。
在实验工作中常用兔耳作采血、静脉注射等用，所以家兔的两耳应尽量保持不受损伤。
家兔的固定方法有盒式固定和台式固定。
一、实验动物抓取与固定的原则[精品]
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一、实验动物抓取与固定的原则1．爱护动物的原则，避免抓取时对动物造成疼痛、不适、不安及其他应急反应。
2．选择最适合实验动物的固定方法的原则。
3．危险情况下，操作人员安全优先原则。
4．大胆、尽早固定的原则。
二、小鼠抓取与固定的操作程序1．用手抓取与固定的操作程序(1)用右手拇指和食指抓住尾部中央捏起来；(2)用手固定时把捏起来的小鼠放在笼子盖上，在动物向前挣的一瞬间，用左手的拇指和食指抓住颈背部到背中央的皮肤以固定其头部；(3)翻转抓住颈背部的左手，右手拉住小白鼠尾部再用左手的小指压住尾根部使小鼠整个呈一条直线。
2．固定器固定的操作程序(1)在无麻醉的情况下首先根据上述方法用左手将小鼠固定；(2)用乙醚麻醉时，可用长20～30CM的线绳分别捆住动物的四肢；(3)准备一个15～20cm的方木板，边缘楔入5个钉子；(4)把捆住四肢的线绳固定到固定台的钉子上固定，并且在头部上颚切齿的地方牵一根线绳以达到完全固定；(5)尾静脉给药时，可用专用的小鼠固定用容器，把小鼠放在里面只露出尾巴，再进行静脉注射。
3．特殊实验时的固定操作程序(1)进行手术或心脏采血时，应先行麻醉再操作；(2)进行解剖实验时，则必须先行无痛处死后再进行。
三、大鼠和沙鼠的抓取与固定操作程序1．用手抓取与固定的操作程序(1)左手食指按住动物的颈背部，拇指及其余3指放在胁部，食指和中指挟住左前肢，分开两前肢抓取动物，再用右手按住后肢固定。
(2)对受试动物进行给药时，用左手的拇指和食指抓住颈背部皮肤．其余3指抓住背部皮肤，小指和无名指挟住尾部牢牢固定。
(3)注意：4～5周龄以内的大鼠同小鼠一样抓住尾部提起来。
周龄较大的大鼠尾部皮肤因为容易被剥脱所以用左手从背部中央到胸部捏起来抓住。
2．固定器固定：同小鼠固定程序四、小鼠、大鼠和沙鼠性别鉴定的操作程序1．按照大鼠、小鼠和沙鼠的抓取与固定操作程序抓取动物；2．反转以上被抓取的动物，观察其外生殖器（阴蒂或阴茎）与肛门之间的距离；3．仔鼠性别判定以外生殖器（阴蒂或阴茎）与肛门之间的距离间隔短的是雌性，长的是雄性。
动物实验基本操作
动物实验基本操作一、实验动物的抓取与固定。
（一）小鼠。
1. 抓取。
- 用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙表面上。
当小鼠向前挣扎时，用左手的拇指和食指迅速捏住小鼠两耳后颈背部皮肤，无名指和小指夹住小鼠尾巴根部，将小鼠固定成头部略向上的姿势。
- 原因：捏住尾巴提起小鼠可以避免小鼠咬伤操作人员，将其放在粗糙表面上是利用小鼠的本能反应（向前挣扎），便于后续准确抓取其颈背部皮肤。
而固定成头部略向上的姿势有利于进行诸如灌胃、注射等操作，并且能防止小鼠咬伤操作人员脸部等部位。
2. 固定。
- 如需进一步固定，可将小鼠放在特制的小鼠固定器内，将其身体和四肢固定好。
也可以将小鼠固定在泡沫板上，用大头针固定其四肢（这种方法常用于解剖实验）。
- 原因：使用固定器可以确保小鼠在实验过程中保持稳定，减少因挣扎而影响实验操作的准确性，同时也能保障操作人员的安全。
对于解剖实验，在泡沫板上用大头针固定四肢可以充分暴露小鼠的身体结构，便于进行精细的解剖操作。
（二）大鼠。
1. 抓取。
- 先用右手抓住大鼠尾巴中部，将大鼠提起，放在粗糙平面上。
然后用左手戴防护手套（大鼠体型较大且可能会激烈挣扎，容易咬伤操作人员），从大鼠背部绕到其胸前，拇指和食指捏住大鼠两耳后颈背部皮肤，其余手指握住大鼠身体，将其提起固定。
- 原因：与小鼠抓取类似，先抓住尾巴提起是为了初步控制大鼠，放在粗糙平面上利用其向前挣扎的本能便于后续抓取。
戴防护手套是因为大鼠的咬合力较强，为了防止操作人员受伤。
2. 固定。
- 可将大鼠放入大鼠固定器中固定。
对于需要进行手术等操作的大鼠，也可将其麻醉后固定在手术台上，用绑带固定其四肢。
- 原因：固定器和手术台固定都能保证大鼠在实验过程中保持稳定，使实验操作能够顺利进行，尤其是在进行需要精细操作的手术时，稳定的固定是确保手术成功的关键因素之一。
二、实验动物的给药操作。
（一）口服给药。
1. 灌胃法（以小鼠为例）- 准备好灌胃针（一般为特制的金属针具）和相应的药物溶液。
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目录
1.目的 (2)
2.范围 (2)
3.引言、定义和缩略语 (2)
4.程序 (2)
4.1大鼠的捉持 (2)
4.2小鼠的捉持 (3)
4.3豚鼠的捉持 (3)
4.4兔的捉持 (3)
4.5犬的捉持 (4)
5.登记和归档 (5)
5.1登记 (5)
5.2归档 (5)
6.职责 (5)
7.培训 (5)
1. 目的
本条SOP的目的是建立并规范实验动物的捉持及固定方法，使操作程序标准化。
2. 范围
本条SOP适用于所有参加动物试验的操作人员。
3. 引言、定义和缩略语
实验动物的捉持分为：大鼠的捉持、小鼠的捉持、豚鼠的捉持、兔的捉持、犬的捉持。
4. 程序
4.1大鼠的捉持
1)包身法：操作者一只手提鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙表面上，向后
方轻拉鼠尾，使大鼠前肢固定在粗糙表面上，另一只手用拇指和另外4指从动物背部分别绕到动物的两侧腋下，将大鼠抓起（熟练者可不提鼠尾，直接将其抓住）。
2)提尾法：操作者用单手拇指和食指抓住动物尾根部提起。
（图1）
图1 提尾法图2 固头法
3)固头法：操作者用单手拇指和食指抓住大鼠颈背部皮毛，使其头部固
定。
（图2）
4)注意事项：不宜快速或突然抓取动物。
对于有症状的大鼠，抓取时注
意避开其伤痛部位，避免增加动物痛苦。
4.2小鼠的捉持
1)双手法：操作者一只手提鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙表面上，向后
方轻拉鼠尾，使小鼠前肢固定在粗糙表面上（图4）。
迅速用另一只手的拇指和食指捏其双耳间颈背部皮肤，无名指、小指及掌心夹其背部皮肤和尾部，便可将小鼠牢固捉持（图3）（图5）。
图3小鼠双手捉持法图4小鼠单手捉持法图5 小鼠单手捉持法
2)单手法：小鼠置于笼盖上，先用食指和拇指抓住鼠尾后，手掌尺侧和
小指夹住鼠尾，然后拇指与食指捏住颈部皮肤（图5）
3)提尾法：用单手拇指和食指捉持尾根部。
此法适用于从小群体中或单
一个体中操作小鼠。
4)固头法：操作者一只手拇指和食指抓住动物尾部，另一只手拇指和食
指抓住动物颈背部皮毛，使动物头部被固定。
4.3豚鼠的捉持
豚鼠性情温和，不易咬人，用手轻轻握住身体即可抓起（图6）。
图6 豚鼠的捉持
4.4兔的捉持
操作者一只手抓住兔颈背部皮肤，将兔轻轻提起，另一只手托住臀部，
使兔呈蹲坐姿势（图7）。
切不可用手握持双耳提起兔子。
图7 兔的捉持
4.5犬的捉持
4.5.1器械固定法1
固定架组成：不锈钢支架、固定带、附件（滴流架、托盘）。
将固定架滑轮固定好后将犬放入支架中，将犬的头伸入头部固定器后调整头部固定器的位置，将头部固定；将前肢用固定带固定在前部支架上；后肢从支架的孔隙中自然穿出，用固定带将犬的躯干固定。
根据犬的大小调整支架，使犬处于比较舒适的位置。
此固定架可应用于采血、生理、给药等多项操作。
操作结束将固定带解开把犬从固定架中取出后将固定架清洗干净。
4.5.2器械固定法2
固定架组成：不锈钢支架、固定兜布。
将犬放入固定兜中，四肢从支架的固定兜中四肢的孔隙中自然穿出，使头部和身躯保留在固定兜中。
必要时，不锈钢支架下有犬的四肢固定铰链，可用于同时固定犬的四肢。
使犬拘束在固定兜中能够配合试验操作。
此固定架可应用于采血、生理、给药等多项操作。
操作结束将固定带解开把犬从固定架中取出后将固定架清洗干净。
4.5.3人工固定法1
操作者采取从犬后背部用双腿环抱住犬，手固定住犬的前肢或后肢，使犬拘束保持直立体位。
4.5.5人工固定法2
操作者将犬抱起，同时双手分别固定住犬的前后肢。
使犬在操作者怀中
呈直立状态，便于试验操作。
5. 登记和归档
5.1 登记
无。
5.2归档
无。
6. 职责
操作者职责：
•阅读本条SOP。
7. 培训
操作者：
•阅读本条SOP。