淋巴细胞
淋巴细胞分离的原理
淋巴细胞分离的原理
淋巴细胞分离的原理主要是利用淋巴细胞在密度梯度离心中的沉降速率差异进行分离。
淋巴细胞是一种低密度细胞，其密度约为1.06 g/ml，而其他血液细胞如红细胞、粒细胞等的密度
均大于1.06 g/ml，因此可以通过离心来分离淋巴细胞。
具体操作步骤如下：
1. 采集血液样品，一般可采用外周血样品，例如静脉采血。
2. 转移血液样品至离心管中，离心管中需要加入离心介质，常用的有Ficoll或Percoll等。
3. 轻轻混合血液与离心介质，以确保均匀混合。
4. 放入离心机，进行离心。
离心过程中，血液样品会在离心介质形成的密度梯度中逐渐分层。
5. 离心结束后，离心管中会分为不同层次的组分。
上层为清澈的血浆层，中间为若干个白色或黄色的细胞层，其中最上面一个细胞层即为淋巴细胞层。
6. 使用移液器将淋巴细胞层吸取出来，转移至另一个离心管中。
7. 加入适当的洗涤缓冲液，如PBS，进行洗涤。
洗涤缓冲液
的作用是去除离心介质残留和其他杂质。
8. 离心再次沉淀淋巴细胞，并倒掉上清液。
9. 加入适量的培养液，使淋巴细胞得到适当的营养和环境，以维持其存活和生长。
通过以上步骤，可以将淋巴细胞从血液中分离出来，并得到较为纯净的淋巴细胞样本，便于后续实验和研究的进行。
淋巴细胞免疫反应的机制及调节
淋巴细胞免疫反应的机制及调节淋巴细胞免疫反应是人体免疫系统的重要组成部分，它能帮助我们抵御感染和疾病侵袭。
在免疫反应中，淋巴细胞起着尤为重要的作用，它们通过对抗入侵人体的病原体，保护我们的健康。
下面我们来了解一下淋巴细胞免疫反应的机制及调节。
一、淋巴细胞的类型及作用淋巴细胞是一类白细胞，是免疫系统的重要组成部分。
它们包括B淋巴细胞和T淋巴细胞。
B淋巴细胞主要在体液免疫中发挥作用，它们能分泌抗体来对抗病原体。
T淋巴细胞则在细胞免疫中扮演重要角色，它们能识别并消灭病原体或感染了病原体的细胞。
二、淋巴细胞的激活及免疫反应淋巴细胞的激活是免疫反应的关键步骤。
当病原体侵入人体时，它会被抗原呈递细胞捕获，然后呈递给淋巴结中的B淋巴细胞或T淋巴细胞。
抗原呈递细胞会通过MHC分子呈递病原体表位，激活淋巴细胞。
在这个过程中，淋巴细胞会快速分裂并分化成效应细胞，识别并灭杀病原体。
这是一种初次免疫反应，如果再次遇到相同的病原体，体内已经有特异性记忆淋巴细胞会迅速激活，促使免疫反应快速而有效地发挥作用。
三、免疫反应的自我调节机制淋巴细胞免疫反应虽然能够有效抵御病原体，但是在一些情况下，它也会引起过度反应，导致严重的免疫疾病。
为了避免这种情况的发生，免疫系统具有自我调节机制。
1.抑制性T淋巴细胞抑制性T淋巴细胞是免疫系统的调节者，它们通过释放抑制因子来减少和抑制免疫反应。
抑制性T淋巴细胞能够抵消效应T淋巴细胞的活动，避免免疫过度反应。
2.免疫抑制因子免疫抑制因子包括许多分子，如细胞因子、激素、化学因子等。
它们能够抑制免疫系统的活动，并减少炎症反应和免疫损伤。
3.共刺激分子共刺激分子是T淋巴细胞和抗原呈递细胞之间的信号分子，通过与T细胞表面受体结合来调节免疫反应。
共刺激分子包括活化分子、抑制分子等。
它们能够抑制或刺激T淋巴细胞活性，从而调节免疫反应。
四、结语淋巴细胞免疫反应是人体免疫系统中的重要组成部分，它能够帮助我们抵御许多感染和疾病。
淋巴细胞计数参考范围
淋巴细胞计数参考范围1.引言1.1 概述淋巴细胞计数是一种常规的临床检验项目，用于评估人体免疫功能的指标之一。
淋巴细胞是免疫系统中最重要的细胞类型之一，它们在人体的抗感染、抗肿瘤和免疫调节等方面发挥着重要的作用。
淋巴细胞计数的结果可以帮助医生了解患者的免疫状态，以及对某些特定疾病的诊断和治疗提供参考依据。
正常的淋巴细胞计数范围是通过大量的人群研究得出的，它可以作为判断患者免疫功能是否正常的标准。
本文将对淋巴细胞计数的参考范围进行探讨，并分析一些可能影响淋巴细胞计数的因素。
同时，我们还将探讨淋巴细胞计数在临床应用中的前景，以及对某些疾病的诊断和治疗的潜在意义。
通过深入研究淋巴细胞计数的参考范围以及其临床应用前景，我们可以更好地了解免疫系统的重要性，并在临床实践中更好地运用这一指标，为患者的健康提供更加精准的评估和治疗方案。
淋巴细胞计数的研究和应用，无疑是当今医学领域中的一个热门课题，在未来将会有更多令人期待的突破和进展。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以根据需要来进行编写，可以包括以下内容：在本文中，我们将按照以下结构来展开讨论淋巴细胞计数的参考范围和其在临床应用中的前景。
首先，我们将在引言部分概述本文的主要内容和目的。
接着，在正文部分的第一部分，我们将详细介绍淋巴细胞计数的意义和作用，探讨其在免疫系统中的关键作用以及与疾病之间的关联。
我们将讨论淋巴细胞计数如何反映机体的免疫功能，并探讨其在临床诊断和治疗中的重要性。
在正文部分的第二部分，我们将探讨淋巴细胞计数的影响因素。
我们将介绍各种可能影响淋巴细胞计数的因素，包括年龄、性别、健康状况等。
我们将详细讨论这些因素如何对淋巴细胞计数产生影响，并分析它们对临床应用的潜在影响。
最后，在结论部分，我们将总结淋巴细胞计数的参考范围，并讨论其在临床应用中的前景。
我们将总结淋巴细胞计数的正常范围，并讨论异常计数可能意味着何种情况。
我们还将探讨淋巴细胞计数作为临床指标的潜在应用，包括其在疾病诊断、治疗监测和预后评估中的可能性。
淋巴细胞
T细胞发育的阳性选择
• 过程：胸腺细胞的TCR分子能与基质细胞的自身 MHC分子结合，这些细胞就得到刺激、存活、增 殖并继续分化，TCR不能与自身MHC分子结合的 胸腺细胞就在原处自行凋亡。 • 部位：胸腺皮质层。 • 意义：获得了MHC限制性（MHC restriction） ，即产生了能识别、结合MHC分子-外来抗原肽 复合物的T细胞，也产生了能与自身MHC-自身多 肽起反应的T细胞。
MHC-I →DP细胞表面CD8分子结合
导致CD4分子 表达关闭
CD4-CD8+细胞
MHC-II →DP细胞表面CD4分子结合
导致CD8分子 表达关闭
CD4+CD8-细胞
T细胞发育的阴性选择
• 过程：树突状细胞和巨噬细胞表达高水平的 MHC I和MHC II类抗原，并与自身抗原形成复 合物，SP细胞如能识别自身抗原肽-MHC复合 物并显示高亲合力的T细胞，即发生凋亡而导致 克隆清除，与MHC分子呈中、低亲合力及不能 识别自身抗原肽的T细胞克隆留下继续发育成熟 。 • 部位：胸腺髓质。 • 意义：通过阴性选择获得自身耐受性，即清除 自身反应性T细胞克隆。
淋巴细胞
• 第一节 淋巴细胞概述 • 第二节 T淋巴细胞 • 一 T淋巴细胞的发育 • 二 T淋巴细胞的表面分子及其作用 • 三 T淋巴细胞亚群 • 四 T淋巴细胞功能 • 第三节 B淋巴细胞 • 一 B淋巴细胞的发育 • 二 B淋巴细胞的表面分子及其作用 • 三 B淋巴细胞亚群 • 四 B淋巴细胞功能
T细胞的功能
• T细胞是淋巴细胞的主要组分，它具有多种 生物学功能，如直接杀伤靶细胞，辅助或 抑制B细胞产生抗体，对特异性抗原和促有 丝分裂原的应答反应以及产生细胞因子等 ，是身体中抵御疾病感染、肿瘤形成的英 勇斗士。
淋巴细胞 分离方法
淋巴细胞分离方法淋巴细胞是免疫系统中的一类重要细胞，它们在保护机体免受病原体和其他外部侵袭物的侵害中起着重要作用。
为了研究和理解淋巴细胞的功能和特性，需要从体内样本中分离出淋巴细胞。
本文将介绍几种分离淋巴细胞的常用方法。
1. 密度梯度离心法密度梯度离心法是最常用的分离淋巴细胞的方法之一。
该方法基于淋巴细胞与其他细胞（如红细胞和中性粒细胞）在离心过程中在不同密度梯度下沉降速度的不同。
一种常用的密度梯度离心介质是Ficoll-Hypaque，它是一种高渗透压溶液。
将全血或其他样本与Ficoll-Hypaque混合后离心，淋巴细胞会沉积在密度梯度下层，其他细胞则沉积在上层或底层。
通过取得下层液体，可分离得到富含淋巴细胞的悬浮液。
2. 黏附法黏附法是一种常用的非离心方法。
它基于淋巴细胞与塑料或玻璃表面的亲和性差异。
将样本与普通培养皿等容器接触，淋巴细胞会黏附在容器表面，而其他细胞则较少或不黏附。
在培养过程中，淋巴细胞会逐渐扩增，并可以通过洗涤等步骤分离得到。
3. 磁珠法磁珠法是一种利用磁性特性分离淋巴细胞的方法。
通过将淋巴细胞表面标记上磁珠特异抗体，使其与抗体携带的磁珠结合，然后通过磁场使磁珠和与其结合的淋巴细胞沉降在一侧，从而分离出淋巴细胞。
这种方法可以非常精确地分离出特定类型的淋巴细胞。
4. 细胞排序法细胞排序法是一种高级的分离淋巴细胞的方法，它基于流式细胞术或荧光激光共聚焦显微镜等技术。
这种方法通过在淋巴细胞表面标记上荧光染料或抗体，然后使用器械和设备进行精确的细胞分选。
这种方法可以快速准确地分离出不同类型的淋巴细胞，并可以进一步进行功能和表型分析。
尽管以上方法在分离淋巴细胞中非常有效，但每种方法都有其局限性。
例如，密度梯度离心法在操作过程中可能会对淋巴细胞产生一定的损伤；黏附法可能对特定类型的淋巴细胞选择性较差；磁珠法和细胞排序法则需要较为复杂的设备和技术。
因此，在具体选择方法时需要综合考虑研究的目的、操作难度和资源条件等因素。
淋巴细胞亚群结果判读
淋巴细胞亚群结果判读
淋巴细胞亚群结果是指血液中淋巴细胞的不同类型的百分比或
绝对数。
淋巴细胞亚群包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞等。
通过对这些细胞亚群的检测和分析，可以更好地了解免疫系统的功
能状态和疾病的发展情况。
对于淋巴细胞亚群结果的判读，需要综合考虑各个细胞亚群的
百分比或绝对数，并结合临床病史、症状以及其他相关检查结果进
行综合分析。
一般来说，正常情况下，T淋巴细胞占淋巴细胞总数
的70-85%，B淋巴细胞占5-15%，NK细胞占5-20%。
如果某个淋巴
细胞亚群的比例高于或低于正常范围，可能意味着免疫系统出现异常。
具体的判读结果还需要结合临床情况来分析，比如T淋巴细胞
亚群的异常增多可能与病毒感染、免疫功能异常、恶性肿瘤等有关；B淋巴细胞亚群的异常增多可能与慢性感染、自身免疫性疾病等有关；NK细胞亚群的异常增多可能与病毒感染、恶性肿瘤等有关。
总之，淋巴细胞亚群结果的判读需要综合分析，不能单一看待
某一个细胞亚群的异常情况，而是需要结合临床资料进行综合判断，最终由临床医生根据具体情况进行诊断和治疗。
淋巴细胞
B-1主要生物学功能： 1）接受碳水化合物抗原刺激，产生低亲和力IgM，
参与对多种细菌（尤其体腔中）的抗感染免疫； 2）产生低亲和力IgM类的生理性自身抗体，参与
对衰老、 蜕变自身细胞的清除； 3）通过产生IgM类自身抗体参与某些自身免疫病
的发生
2.B-2细胞
表面标志CD5出生后产生，定位于淋巴器官。 接受蛋白质抗原刺激，产生高亲和力抗体,有免疫记忆性。
（三 ）协同刺激分子 CD40表达于成熟的B细胞表面 B7（CD80/CD86） 表达于活化的B细胞表面
二、BL的亚群
B cell precursor
Mature B cell
B
B
Plasma cell
B2cells
B
Distinct B cell precursor
IgG CD5
B
IgM - no other isotypes
（四）协同刺激分子
TL完全的活化需要两 种信号的协同作用。
存在于APC和TL表面 的协同刺激分子相互作用 形成协同刺激信号，以扩 大适应性免疫应答的免疫 效应。
1、CD28：
相应配体是B7分子。与配体B7结合后产生活 化信号。
2、CTLA-4（CD152）：细胞毒性TL（相关）抗原4 胞浆区含免疫
Th 细 胞 的 功 能
2、细胞毒性TL
（ cytotoxic T lymphocyte， Tc或CTL）
特异性介导靶细胞裂解或凋亡 释放穿孔素，致靶细胞裂解、死亡； 释放颗粒酶，借助穿孔素的孔道进入靶细胞，靶细胞凋亡； 高表达FasL，通过Fas/FasL途径导致细胞凋亡。
3、调节性TL （regulatory T cell， Tr）
淋巴细胞减少分级标准
淋巴细胞减少分级标准
淋巴细胞减少是指淋巴细胞在白细胞总数中的比例低于正常值。
根据白细胞总数，淋巴细胞计数和淋巴细胞比例，淋巴细胞减少可以分为以下三个级别：
1.轻度淋巴细胞减少：淋巴细胞比例低于正常值下限，但仍在20-30%之间，白细胞总数正常或轻度减少。
2.中度淋巴细胞减少：淋巴细胞比例低于正常值下限的20%，白细胞总数明显减少。
3.重度淋巴细胞减少：淋巴细胞比例低于正常值下限的20%，同时白细胞总数非常低，可能伴随有严重的免疫缺陷和感染。
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第一节 B细胞表面标志
• BCR:
即B细胞抗原受体，是嵌入细胞膜的膜 免疫球蛋白（mIg），是B细胞的特征性标 记。 功能是特异性识别不同的抗原分子，使 B细胞活化并分化为浆细胞，从而产生抗体， 发挥体液免疫功能。
B细胞表面受体
• BCR: • CKR：参与调节B细胞的活化，分化 • CR ：（补体受体）促进B细胞活化
学习要求
• 掌握B细胞的重要表面分子及其作用；B细
胞的功能 • 熟悉B细胞的辅助受体及亚群概况 • 了解B细胞补体受体及其他膜分子
复习题
• B细胞的主要表面分子有哪些？ • B细胞的亚群有哪些？ • B细胞的功能是什么？
第二节
B 细胞的亚群
B2
出生后 骨髓 产生 单特异性 无
B1B细 性质 • 周围淋巴器官中的
胞具有异质性 初次产生时间 胎儿期 • 可依据CD5是否表达分 更新方式 为B1和B2两亚群自我 二者区别如表 更新 特异性 多反应性 是否有CD5表达 有
第三节
B 淋巴细胞的功能
• 产生抗体 • 抗原提成 • 免疫调节
第九章 B淋巴细胞
概 述
• 发育：由哺乳动物的骨髓或禽类的法
式囊中的淋巴样前体细胞分化 成熟而来。
• 分布：定居于巴结或脾脏的红髓
• 数量：外周血中占淋巴细胞总数的
10 ％ ～ 15％。
• 功能：分泌抗体,抗原提呈,免疫调节. • 特征性标记：BCR • 分类: 根据B细胞表面是否表达CD5
分子，可将 人B细胞分为B1 (CD5 +)和B2(CD5－)两类。
•
CR1（C3b受体） CR2（ C3d受体） Fc受体：IgG 的Fc受体 FcγR IgE的 Fc 受体FcεR
• 丝裂原受体：可与各种丝裂原结合使B细胞被激
活并增殖分为为浆细胞，可用于检测B细胞的功 能状态。PWM，LPS
B细胞表面标志
2. B细胞表面抗原 • MHC抗原: MHC－I分子 MHC-II分子，可促进B细胞活化和Ag 递呈 • CD抗原