masson染色结果分析教程文件
PH0622 Masson三色染色液(马松染色)使用手册
自备材料
1、固定液：选用甲醛升汞或甲醛盐溶液，亦可选购中性福尔马林试剂； 2、95%乙醇、无水乙醇等系列乙醇； 3、蒸馏水或去离子水；
使用方法
1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的试剂(A)染色 5～10min。 3、用酸性乙醇分化液分化、水洗。 4、用氨水溶液返蓝、水洗。 5、蒸馏水或者去离子水洗 1min。 6、丽春红品红染色液染色 5～10min。 7、用乙酸溶液洗 1min。 8、磷钼酸溶液洗 1～2min。 9、用乙酸溶液洗 1min。 10、直接放入苯胺蓝染色液中染色 1～2min。 11、乙酸溶液洗 1min。 12、95%乙醇快速脱水。 13、无水乙醇(Ⅰ) 5～10s。 14、无水乙醇(Ⅱ) 5～10s。 15、无水乙醇(Ⅲ) 5～10s。 2
1
试剂(F): 磷钼酸溶液 试剂(G): 苯胺蓝染色液 使用说明书
50ml 50ml
100ml 100ml 1份
RT 避光 RT 避光
主要成分
试剂(A): 主要由苏木素和氯化铁等组成。 试剂(B): 主要由乙醇、酸溶液等组成。 试剂(C): 主要由稀氨水等组成。 试剂(D): 主要由丽春红、品红等组成。 试剂(E): 主要由乙酸等组成。 试剂(F): 主要由磷钼酸等组成。 试剂(G): 主要由苯胺蓝、弱酸等组成。
Phygene Masson 三色染色试剂盒的特点： ①染色稳定； ②分化时间短，1～2s； ③色彩清晰鲜艳； ④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色； ⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
试剂存储
常温保存，有效期至少一年
试剂组分
试剂名称 试剂(A) :Weigert 铁苏木素染液 | A1:苏木素染液 试剂(A) :Weigert 铁苏木素染液 | A2:氯化铁溶液 规格：50ml 25ml 25ml 规格：100ml 50ml 50ml 保存 RT 避光 RT 避光
肾组织masson染色实验步骤
肾组织masson染色实验步骤一、实验前准备1.准备工作台和必要的实验用具。
2.准备好嵌入的组织切片。
3.将切片浸泡在脱水、透明化、蜡包埋、切片、脱蜡等溶液中进行处理。
二、固定和脱水1.将组织切片置于4的多聚甲醛中，固定时间约为24小时。
2.取出固定后的组织切片，先放入70的乙醇中脱水，随后放入95的乙醇中进行脱水处理。
三、透明化1.将脱水后的组织切片放入甲醇中透明化。
2.从甲醇转移到二甲苯中进行透明化处理。
四、蜡包埋1.将透明化后的组织切片置于液态石蜡中，进行蜡包埋处理。
2.在包埋前，确保石蜡的温度适中。
五、切片1.将包埋后的组织切片切割成4-6微米的薄切片，准备进行染色。
2.使用切片机进行切割，注意切片的厚度要一致。
六、脱蜡1.将薄切片放入脱蜡热盒中进行脱蜡处理。
2.确保脱蜡的时间和温度控制得当，以保证切片中的蜡全部被脱除。
七、染色1.准备好Masson染色试剂盒，按照说明书中的配方将试剂配置好。
2.将脱蜡后的切片浸泡在甲醇中5分钟，以去除残留的蜡质。
3.将切片放入伊红染液中浸泡5分钟，随后用蒸馏水洗净。
4.将切片放入酸性橙G染液中浸泡5分钟，随后用蒸馏水洗净。
5.将切片放入甲苯中进行脱水处理，然后覆盖玻片，施加封片剂，完成Masson染色。
八、镜检1.将染好色的切片放置在显微镜下进行观察。
2.检查切片中的细胞核、细胞质、胶原纤维等成分的染色情况。
九、结果分析1.根据观察结果，分析肾组织中的胶原纤维、细胞核、细胞质的染色情况。
2.对比正常组织和异常组织的染色情况，进行结果分析和总结。
十、实验总结1.总结本次实验的操作步骤和所得结果。
2.对实验中可能存在的问题和改进方法进行总结和反思。
以上就是对肾组织Masson染色实验步骤的详细介绍，希望可以帮助到需要进行此项实验的科研工作者。
对于肾组织Masson染色实验步骤的详细介绍，实验中的每一步都至关重要，它们共同构成了一项完整的实验流程。
接下来，我们将对每一步进行更详细的讲解，以便读者更好地理解和掌握实验的操作技巧和要点。
Masson三色染色法--染色案例
Masson三色染色法
1.实验目的
MASSON染色观察病变的组织
2.实验材料
2.1石蜡切片
2.2仪器与试剂
2.2.1
（1）电热恒温干燥箱
（2）光学显微镜及拍照设备
（3）冰箱
（4）电子天平
（5）盖玻片
（6）染缸
2.2.2
（1）二甲苯
（2）无水乙醇
（3）Weigent氏苏木素液
（4）1％盐酸液
（5）立春红-品红溶液
（6）1％磷钼酸液
（7）1％淡绿液
（8）1％醋酸液
3.实验步骤：
操作方法：
(1)切片常规脱蜡至水，蒸馏水洗；
(2)Weigent氏苏木素液染核5-10分钟；
(3)自来水洗；
(4)1%盐酸酒精分化数秒（在显微镜下控制染色，除核为黑色，片中其他均混为白色）；
(5)自来水洗；
(6)丽春红—品红溶液5-10分钟
(7)清水水溶液洗；
(8)1%磷钼酸分化直到各种成分被染清晰10分钟（胶原纤维呈淡红色，肌纤维、纤维素呈鲜红色）；
(9)清水洗
(10)1%淡绿液染2—5分钟（或用2%苯胺蓝水溶液替代）
(11)1％醋酸水溶液处理2MIN
(12)常规脱水、透明、封片。
结果：胶原纤维绿色（或蓝色），肌肉、纤维素红色，红细胞橘黄色，核蓝黑色。
Human-肺癌-马松染色法
Human-肺-马松染色法
Human-软骨-马松染色法
Human-胰腺癌-马松染色法
武汉云克隆诊断试剂研究所。
masson染色步骤(临床医学研究中心总结)
试剂名：改良 Masson 三色染色液货号：G1345 品牌：索莱宝1、石蜡切片65℃烘烤1h（使组织更贴合玻片，并溶解石蜡。
如果是刚切好的切片，则烘烤2-3h），立即放入脱蜡剂中脱蜡；2、脱蜡：脱蜡剂Ⅰ（15min）、脱蜡剂Ⅱ（15min）水化：无水乙醇I（5min）、无水乙醇 II（5min）、95%乙醇I（5min）、95%乙醇II （5min）、85%乙醇（5min）、75%乙醇（5min）脱蜡处理，蒸馏水3min3、将 Bouin 液滴在组织上，于室温作用一晚或置入 37℃的温箱内 2h 进行媒染，然后流水冲洗至切片组织上的黄色消失。
4、天青石蓝染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。
5、Mayer 苏木素染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。
（显微镜下观察，细胞核呈现深蓝色，细胞质有蓝色）6、酸性乙醇分化液分化3-5s，流水冲洗 10min返蓝。
（细胞核呈现灰蓝色，细胞质应相对透明无色）7、丽春红品红染色液染 2-5min，稍水洗玻片上无染料即可。
（容易造成深红或紫红色，基本看不清细胞核。
建议先染色30s-1min，显微镜下观察，适当增加时间）8、磷钼酸溶液浸泡10min，倾去上液，切片不用水洗，直接滴入苯胺蓝染色液染 5-10min。
（如果丽春红染色过深，苯胺蓝也应该适当染久一些，最终应该是红蓝色分明，能明显分辨出胶原显微）9、弱酸溶液处理 2min。
10、透明：切片直接依次放入无水乙醇 I（5min）-无水乙醇 II（5min）- 脱蜡剂Ⅰ（5min）- 脱蜡剂Ⅱ（5min）。
然后用纸巾擦干玻片上残余脱蜡剂，或直接铺平玻片在通风橱内，干燥脱蜡剂。
使用中性树脂封片。
注：masson染色不像HE可以把颜色洗脱再重复步骤，建议使用同一批切片，先摸索染色时间。
Masson三色染色图示
Masson三色染色法
试剂
1.Bouin液
饱和苦味酸75ml，甲醛25ml，冰醋酸5ml.
2.Ⅰ液：1%比布列西猩红水溶液90ml，1%酸性复红水溶液10ml，冰醋酸1ml。
3.Ⅱ液：磷钼酸 2.5g，磷钨酸2.5g，蒸馏水100ml
4.Ⅲ液：苯胺蓝2.5g，冰醋酸2ml，蒸馏水100ml。
5.weigert铁苏木精液
A液
苏木精1g
90%乙醇100ml
B液
30%氯化铁4ml
蒸馏水100ml
纯盐酸1ml
A和B液需要分瓶存放，临用前A液和B液等量混合
6.1%冰醋酸水溶液冰醋酸1ml，蒸馏水100ml。
Masson三色染色步骤
染色步骤
1.石蜡切片常规脱蜡至水
2.Bouin液室温过夜或56℃1h
3.流水冲洗黄色消失
4.蒸馏水洗
5.Weigerrt铁苏木精染核10mins
6.盐酸酒精分化
7.流水冲洗10mins
8.蒸馏水洗
9.Ⅰ液2mins
10.蒸馏水洗
11.Ⅱ液15mins
12.Ⅲ液5mins
13.蒸馏水洗
14.1%冰醋酸浸洗5mins
15.常规脱水、透明、封固
结果
肌肉红色
胶原纤维蓝色
核黑色。
masson 染色肾组织的描述
masson 染色肾组织的描述摘要：一、引言二、Masson染色原理三、Masson染色在肾组织中的应用四、Masson染色的操作步骤五、Masson染色结果的解读六、Masson染色在肾组织研究中的优势与局限七、展望与总结正文：一、引言Masson染色是一种常用的组织化学染色方法，广泛应用于病理学、组织学等领域。
在肾组织研究中，Masson染色具有重要的意义。
本文将对Masson染色在肾组织中的应用进行详细介绍，并探讨其在肾组织研究中的优势与局限。
二、Masson染色原理Masson染色是一种双染色方法，主要通过两种染色剂对组织中的胶原纤维和肌纤维进行染色。
胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色。
这种染色方法能够清晰地显示肾组织的胶原纤维和肌纤维分布，有助于研究肾组织的结构与功能。
三、Masson染色在肾组织中的应用1.肾小球肾炎：Masson染色可以显示肾小球的纤维化程度，有助于判断肾小球肾炎的病理类型和病情严重程度。
2.肾间质纤维化：Masson染色可以清晰地显示肾间质的纤维化程度，有助于评估肾间质纤维化的程度和病变范围。
3.肾血管病变：Masson染色可以显示肾血管的胶原纤维分布，有助于研究肾血管病变的发生机制和病变特点。
4.肾肿瘤：Masson染色可以显示肾肿瘤周围的纤维组织，有助于判断肿瘤的侵袭性和转移风险。
四、Masson染色的操作步骤1.取材：切取新鲜肾组织块，固定于甲醛溶液中。
2.脱水：依次用乙醇、丙酮进行脱水处理。
3.透明：采用透明剂使组织透明。
4.染色：按照Masson染色试剂盒说明书进行操作，染色剂包括Masson 试剂、丽春红试剂等。
5.脱色：用分化液进行脱色处理。
6.冲洗：用清水冲洗组织切片。
7.透明：用透明剂透明处理。
8.封片：滴加封片剂，覆盖玻片，晾干。
五、Masson染色结果的解读1.胶原纤维：呈蓝色，分布于肾小球、肾小管、肾血管等部位。
2.肌纤维：呈红色，主要分布于肾小球和肾小管。
马松三色染色原理masson
备注
1 Bouin氏液是常用的混合固定液
配方： 苦味酸饱和液（1.22％）75ml 制，对皮肤及肌腱有软化作用。
福尔马林25ml
冰醋酸5ml
此液一般在临床用时配
2 苦味酸-酸性品红法
一Weigert氏铁苏木素液
甲液 苏木素
1g
无水酒精（或 95％酒精） 100ml
乙液 29％三氯化铁水溶液
4ml
蒸馏水
二 Van Gieson氏染液
A液:1%酸性品红水溶液 B液：苦味酸饱和水溶液（约1.2%） A、 B两夜分瓶盛放。临用前取A液1份，B液9份混合后使用 操作方法 1 组织固定于10%甲醛液，常规脱水包埋 2 切片脱蜡至水 3 用Weigert氏铁苏木素染液5~10分钟 4 流水稍洗 5 1%盐酸酒精迅速分化 6 流水冲洗数分钟 7 用Van Gieson氏染液染1~2分钟 8 倾去染液，直接用95%酒精分化和脱水（可放入温箱烤干后，直接透明封片） 9 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固 结果：肌纤维，胞质及红细胞黄色，胞核蓝褐色
95ml 用时，取甲、乙液等量混合即可应用。混合时应将乙液加人甲液内，染液呈紫黑色。铁苏木素不能象明矾苏 木素一样配制后可放置贮存备用，因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀，所以铁作媒染液时，必须与染 液分别配制和分别保存，染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素，它将胞核染成黑色。能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用，且不会被光线退 色，因此比钾矾苏木素染色较为持久。
临用前取a液1份b液9份混合后使用操作方法1组织固定于10甲醛液常规脱水包埋2切片脱蜡至水3用weigert氏铁苏木素染液510分钟4流水稍洗51盐酸酒精迅速分化6流水冲洗数分钟7用vangieson氏染液染12分钟8倾去染液直接用95酒精分化和脱水可放入温箱烤干后直接透明封片9无水酒精脱水二甲苯透明中性树胶封固结果肌纤维胞质及红细胞黄色胞核蓝褐色
masson染色实验步骤 概述及解释说明
masson染色实验步骤概述及解释说明1. 引言1.1 概述Masson染色实验是一种常用的组织学技术，用于观察和分析组织样本中胶原纤维、肌纤维以及其他重要成分的分布和形态。
该实验技术通过特定的染料，能够使不同组织成分显色，并进一步提供了对组织结构和功能的深入认识。
Masson 染色方法已广泛应用于肿瘤学、病理学、解剖学等领域。
1.2 文章结构本文将从引言、Masson染色实验步骤、实验结果与解释、应用与意义以及结论等几个方面进行详细阐述。
1.3 目的本文的目的是为读者介绍Masson染色实验的基本步骤，并对其结果进行解释说明。
同时，还将探讨该实验在各个领域中的应用情况以及潜在意义和价值。
这些内容将有助于读者更全面地了解Masson染色技术，并为其在相关研究工作中提供参考和指导。
期待它们有望增加我们对组织样本中胶原纤维·肌肉纤维及其他关键成分的认识时请加填具体2. Masson染色实验步骤：2.1 实验前准备：在进行Masson染色实验之前，需要做好以下准备工作：1. 资料收集：先了解Masson染色的原理和目的，研究相关文献，了解该实验在什么情况下适用以及可以得到哪些信息。
2. 材料购买：准备所需的材料，包括Masson染色试剂盒、显微镜玻片和载玻片等。
3. 设备检查：确保显微镜、组织切片机和染色设备等实验设备正常运行并进行必要的校准或维护。
4. 实验环境准备：为了保证实验结果的准确性，要确保实验室环境清洁、无尘，并控制好温度和湿度。
5. 安全措施：遵循实验室安全规定，佩戴个人防护装备，如手套、眼镜和口罩等。
2.2 组织样本制备：在进行Masson染色实验前，需要对组织样本进行制备处理。
具体步骤如下：1. 组织获取：从动物或人体中采集需要研究的组织样本，可以是器官或组织结构。
2. 组织固定：将采集到的组织样本放入适当的组织固定剂中（如福尔马林），使得组织结构保持完整并防止腐败。
3. 组织包埋：将固定后的组织样本进行包埋处理，通常是将其浸泡在液态石蜡中，然后冷却使其凝固。
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Masson三色染色液说明书
【产品名称】
Masson三色染色液
【包装规格】
货号：DC0032
套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒
【预期用途】
主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】
Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
1、Weigert铁苏木素A液苏木素
2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁
3、酸性乙醇分化液乙醇
4、蓝化液
碳酸盐
5、丽春红品红染色液丽春红、品红
6、乙酸溶液乙酸
7、磷钼酸溶液磷钼酸
苯胺蓝
8、苯胺蓝染色液
【储存条件及有效期】
5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】
1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋；
2、切片常规脱蜡至水；
3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗；
4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟；
5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟；
6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗；
7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片；
8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)；
9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)；
10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)；
11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水数次后，二甲苯透明，中性树胶封固。
【检验结果的解释】
胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色，肌纤维、纤维素和红细胞呈红色，细胞核呈蓝黑色。
【检验方法的局限性】
仅限于病理组织内容物染色观察。
【注意事项】
1、酸性乙醇分化液分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
2、如蓝化液使用量较大，可自行配制Scott促蓝液或0.1～1%碳酸锂水溶液予以替代。
3、磷钼酸处理时最好在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可，分化时间根据染色深浅而定。
4、部分组织脱水时容易造成脱色过度，应注意肉眼控制。
5、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
6、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
7、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。