脂代谢相关检测
实验步骤4
脂代谢相关基因siRNA沉默的实验步骤第一部分：siRNA转染条件的优化及靶点筛选。
写文章所需要的数据：1. 三对siRNA序列；2. 转染效率及图片；3. 对mRNA的抑制率及图片（非常重要）4. 对蛋白质的抑制率及图片（非常重要）实验步骤：1. 准备工作（1）培养瓶、玻璃吸管和枪头消毒；分装培养液、青霉素-链霉素和胰酶的管子消毒及分装；PBS配置及消毒。
（2）培养液分装100ml/瓶，使用100ml玻璃瓶分装；青霉素-链霉素分装1ml/管，使用冻存管分装；胰酶分装1ml/管，使用冻存管分装。
（3）培养液的配置，每100ml细胞培养液（美国Hyclone）中加入10ml血清（成都哈里生物）和1ml青霉素（10000U/mL）-链霉素（10000ug/mL）（美国Hyclone）。
2. HepG2细胞复苏（1）从液氮罐中取出冻存管，塞入一次性手套（保护以免进水），直接浸入37℃温水浴中，并不时摇动使其尽快融化。
（2）冰晶完全溶解后，取出冻存管。
在超净工作台上打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到10ml离心管并滴加10倍以上的培养液，混匀。
（3）800rpm离心5min。
（4）弃去上清液，加入培养液重悬细胞，接种装有新鲜培养液的培养瓶，接种量以1:1进行复苏（1冻存管分为1培养瓶进行培养）。
（5）37℃、5%CO2培养箱（Thermo）中静置培养。
（6）次日更换培养液一次，除去残留的二甲亚砜，继续培养。
（7）根据情况传代三次后即可进行实验。
3. 转染条件的优化（1）HepG2细胞的胰酶消化。
弃去培养液，加入PBS洗去残存的培养液和死亡细胞，洗三次。
加入适量的0.25%胰酶溶液（Hyclone），以刚好能盖住瓶底细胞层为宜，一般0.5-1ml。
在显微镜下观察消化过程，细胞间出现细小空隙时，去掉胰酶溶液。
轻轻拍打瓶底，如果细胞全部漂浮于液体中，立即加入含有血清的培养液终止消化，并用吸管反复吹打分散细胞；如果部分细胞消化还不充分，仍贴于壁上，可放入37℃培养箱中继续消化30-60秒后再轻轻拍打，直到全部细胞漂浮于液体中。
2024代谢相关(非酒精性)脂肪性肝病防治指南(全文)
2024代谢相关（非酒精性）脂肪性肝病防治指南（全文）《代谢相关（非酒精性）脂肪性肝病防治指南（2024年版）》是对《非酒精性脂肪性肝病防治指南（2018更新版）》进行的修订，主要针对代谢相关脂肪性肝病的筛查和监测、诊断和评估、治疗和随访等临床问题提出了指导性建议。
指南推荐意见一览推荐意见1：代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）是我国最常见的慢性进展性肝病，应该加强筛查和防治（B，1）。
推荐意见2：肥胖、2型糖尿病（T2DM）、代谢综合征（MetS）组分、过量饮酒、无症状性转氨酶增高等高风险人群应该筛查脂肪肝和纤维化（B，1）。
推荐意见3：MAFLD 患者应该筛查并监测肝纤维化（B，1）。
推荐意见4：合并进展期纤维化的MAFLD 患者应该筛查肝细胞癌（ HCC），明确诊断肝硬化时还应筛查食管静脉曲张和肝脏失代偿事件（B，1）。
推荐意见5：MAFLD 患者应该筛查并监测MetS 组分和T2DM（B，1）。
推荐意见6：MAFLD 患者应该筛查慢性肾脏病（CKD）和亚临床动脉硬化，并评估心血管病（CVD）风险（B，1）。
推荐意见7：MAFLD 患者应该坚持参加基于年龄分层的各种常见恶性肿瘤的筛查（C，1）推荐意见8：诊断MAFLD 基于以下 3 个标准：（1）影像学诊断脂肪肝和/ 或肝活检发现≥5% 肝细胞大泡性脂肪变性；（2）存在 1 项及以上MetS 组分；（3）排除过量饮酒、营养不良、肝豆状核变性等可能导致脂肪肝的其他原因（B，1）。
推荐意见9：酒精性肝病（ALD）和其他原因脂肪肝患者有肥胖和/或T2DM、MetS 时需要考虑合并MAFLD（C，1）。
推荐意见10：MAFLD 可以与慢性病毒性肝炎等其他类型肝病合并存在（B，1）。
推荐意见11：超声显像是影像学诊断脂肪肝以及筛查和监测HCC 的首选方法（B，1）。
推荐意见12：瞬时弹性成像检测的受控衰减参数/超声衰减参数（ CAP/ UAP）和肝硬度值（LSM）可以用于慢性肝病患者脂肪肝和肝纤维化的无创诊断与评估（B，1）。
《脂代谢相关检测》课件
目 录
• 脂代谢相关检测概述 • 血脂检测 • 脂肪肝检测 • 肥胖检测 • 其他脂代谢相关检测
01
脂代谢相关检测概述
脂代谢检测的定义与重测方法，对血液、尿液 等样本中的脂类物质进行定量和定性分析，以评估个体的脂 类代谢状况。
密度脂蛋白，当其浓度过高时，可逐渐沉积在血管壁上，形成动脉粥样硬化斑块，引发血管疾病。 • 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）：高密度脂蛋白是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，可减少动脉粥样硬化的发生。
血脂检测的方法与步骤
01
02
03
04
禁食12小时后，抽取静 脉血液样本。
将血液样本进行离心处 理，分离出血浆或血清 。
治疗效果。
02
血脂检测
血脂检测的项目与指标
• 总胆固醇（TC）：反映血脂水平的重要指标，过高可能增加动脉粥样硬 化的风险。
• 三酰甘油（TG）：影响血脂水平的关键因素，过高可能增加心血管疾病的风险。 • 低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）：低密度脂蛋白是一种运载胆固醇进入外周组织细胞的脂蛋白颗粒，可被氧化成氧化低
指导减重与治疗
了解肥胖程度和类型，为制定 减重计划提供依据。
监测治疗效果
定期检测肥胖相关指标，评估 减重或治疗的效果。
提高公共卫生意识
推动肥胖检测的普及，提高公 众对肥胖危害的认识。
05
其他脂代谢相关检测
脂肪细胞因子检测
总结词
脂肪细胞因子检测是评估脂代谢状况的重要手段之一，通过检测脂肪细胞分泌 的因子，可以了解脂肪组织的生理和病理状态。
使用酶法或化学发光法 等检测方法，测定各项 血脂指标。
记录并分析检测结果。
血脂检测的临床意义
简述生物化学检验项目在脂代谢紊乱诊治中的应用。
简述生物化学检验项目在脂代谢紊乱诊治中的应用。
生物化学检验项目在脂代谢紊乱诊治中具有重要的应用价值。
其中包括血脂类指标的检测，如总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯等；血糖类指标的检测，如空腹血糖和糖化血红蛋白等；以及炎症类指标的检测，如超敏C反应蛋白等。
这些检验项目可以帮助医生了解患者的血脂代谢情况，进而制定相应的诊治方案。
例如，在高胆固醇血症患者中，可通过药物治疗和改变生活方式来降低胆固醇水平；在糖尿病患者中，可通过控制血糖水平和饮食习惯来改善患者的病情；在炎症反应明显的患者中，可通过抗炎治疗来缓解症状。
总之，生物化学检验项目在脂代谢紊乱的诊治中具有不可替代的作用，可以帮助医生更准确地了解患者的病情，制定更有效的治疗方案，提高患者的治疗效果和生活质量。
- 1 -。
血脂和脂蛋白检测方法
血脂和脂蛋白检测是评估血液中脂质代谢状况的常见方法。
下面是几种常用的检测方法：
1. 血液样本采集：在进行血脂和脂蛋白检测之前，需要抽取一定量的静脉血液样本。
常用的采血方法是在手腕、手臂或手背处使用安全针针头进行采血。
2. 总胆固醇（TC）：血液中的总胆固醇含量是评估脂质代谢的一个重要指标。
总胆固醇检测常常通过血液生化分析仪器来测定，这些仪器可以测量血液中胆固醇的浓度。
3. 低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）：LDL-C 是致动脉粥样硬化的主要因素之一。
测量LDL-C 的常见方法是使用直接法或间接法。
直接法通过将血液样本中的LDL-C 直接测量出来。
间接法通常使用血液生化分析仪器，计算得出LDL-C 的浓度。
4. 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）：HDL-C 被认为是“好胆固醇”，具有保护心血管健康的作用。
测量HDL-C 通常使用血液生化分析仪器，通过测定血液样本中HDL-C 的浓度来进行评估。
5. 三酰甘油（TG）：三酰甘油是血液中最常见的脂质之一，它通常与胆固醇一起进行检测。
血液生化分析仪器可以测量血液中TG 的浓度。
6. 脂蛋白：脂蛋白是一种将脂质从一个部位输送到另一个部位的复合物。
脂蛋白检测通过血液生化分析仪器，可以评估血液中不同类型脂蛋白的浓度和比例，如低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）等。
这些是常见的血脂和脂蛋白检测方法，具体的检测项目和方法可根据医生或实验室的要求进行选择。
在进行检测之前，建议咨询医生或专业人员，以了解具体的检测方法和准备事项。
2022-2023年检验类《临床医学检验技术(中级)》预测试题6(答案解析)
2022-2023年检验类《临床医学检验技术（中级)》预测试题（答案解析）全文为Word可编辑，若为PDF皆为盗版，请谨慎购买！第壹卷一.综合考点题库(共50题)1.有关脂代谢实验室检查中，推荐的常规检查项目不包括（）。
A.ApoEB.TC.TGD.Lp（a）E.LDL-C正确答案：A本题解析：脂代谢常规检查项目包括TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoAⅠ、ApoB。
2.患者男，22岁。
头昏乏力，鼻黏膜及牙龈出血1周。
化验：WBC 42×109/L，Hb 85g/L，PLT 23×109/L，血片中有幼稚细胞。
骨髓增生极度活跃，原始细胞50%，早幼粒细胞21%，POX染色阳性，α-NAE染色部分呈阳性反应，不被NaF抑制，确诊为急非淋巴细胞白血病，FAB分型是（）。
A.AML-M1B.AML-M2C.AML-M3D.AML-M4E.AML-M5正确答案：B本题解析：M2（急性粒细胞白血病部分分化型）主要特征如下：原粒细胞（Ⅰ型＋Ⅰ型）占骨髓非红系细胞的30%～89%，单核细胞＜20%，其他粒细胞＞10%。
POX染色阳性，α-NAE染色可呈阳性反应，不被NaF抑制。
本病例符合M2特征。
3.t（15：17）见于哪种疾病？（）A.慢性粒细胞白血病B.AML-M3白血病C.AML-M2b白血病D.急性淋巴细胞白血病E.骨髓增生异常综合征正确答案：B本题解析：t（9：22）见于慢性粒细胞白血病；t（8：21）多见于M2患者；t（15；17）（q22；q12）主要见急性早幼粒细胞白血病（AML-M3白血病）。
急髓白血病在FAB分型标准中分为八个亚型：①M0：急性髓细胞白血病微小分化型；②M1：急性粒细胞未分化型；③M2：急性粒细胞部分分化型白血病；④M3：急性早幼粒细胞白血病；⑤M4：急性粒-单核细胞白血病；⑥M5：急性单核细胞白血病；⑦M6：急性红白血病；⑧M7：急性巨核细胞白血病。
代谢疾病的实验诊断--血脂脂蛋白
代谢疾病的实验诊断—血脂脂蛋白血脂和脂蛋白异常血症脂类代谢紊乱的疾病可以由遗传因素引起，可因环境因素导致,也可继发于其他疾病。
目前对脂质代谢紊乱与疾病关系的研究已从脂质和脂蛋白水平进入载脂蛋白、脂蛋白受体、相关酶、基因等的研究。
多数血脂和脂蛋白异常与动脉粥样硬化有关，是动脉粥样硬化性心脑血管病的危险因子。
1、血脂测定与动脉粥样硬化血脂、脂蛋白、载脂蛋白等测定已广泛用于动脉粥样硬化引起的心血脑血管疾病的流行病学和临床医学领域，但是必须了解这些项目只能用于评估发生动脉粥样硬化和由其引起的心脑血管疾病的危险程度，而不能对这类疾病如CHD作出诊断；但是对于遗传性异常脂蛋白血症等类疾病，则必须用这些试验作为诊断指标。
⑴危险因素的概念：人体的某些生理特征对某些疾病的发生有一定程度的相关性，人们就称这些特征为某种疾病的危险因素。
现在都很重视血脂水平和发生动脉粥样硬化的关系，实际上血脂就是发生动脉粥样硬化的危险因素，但只能用于估计发生动脉粥样硬化的危险性，而不能用做特异性的诊断指标。
以冠心病（CHD）为例，CHD是一种多因素疾病，血脂异常只是CHD的发病因素之一，不是所有CHD患者血脂都增高，也不是所有血脂增高者都必然患CHD，所以它对CHD来说不能做为一个诊断指标，只能作为一个危险因素看待。
其它脂质和脂蛋白测定如HDL-C、LDL-C、apoA、ApoB等也都是属于危险因素而非诊断指标。
⑵血脂检查的临床应用血脂检测是临床常用的检验指标之一，血脂代谢异常与许多疾病的发生关系密切，临床血脂检测主要用于：①作为健康普查指标，预防和早期发现高脂蛋白血症，起监控作用；②协助判断动脉粥样硬化，进行病情观察和指导治疗；③评价冠心病，脑梗塞等动脉粥样硬化疾患的危险度；④对少见的遗传性脂蛋白异常性疾病进行诊断；⑤对继发性血脂异常的疾病进行监测和评估；⑥监测和评价饮食和药物治疗效果；⑦其他。
⑶血脂试验项目的选择：血清中主要的脂质有TG、TC，脂蛋白有HDL、LDL、VLDL、Lp(a)，临床上可以分别选择测定这几种脂蛋白。
代谢综合征实验室检测方法
代谢综合征实验室检测方法
代谢综合征是一种包括高血压、高血糖、高血脂和肥胖等多种疾病的综合征。
以下是代谢综合征实验室检测方法：
1. 血糖水平检测：采用静脉血测定血糖水平，经常应用的有空腹血糖和随机血糖。
2. 血脂相关指标检测：包括总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯等，也是通过采集静脉血进行检测。
3. 血压检测：可以通过自动血压计或者手动测量进行检测，通常采集手臂部位的血压数据。
4. 体脂检测：包括B超、DEXA、生物电阻抗等多种检测手段，通过对身体的成分分析，得出体脂率和肌肉量等数据。
以上是代谢综合征实验室检测方法的介绍，建议在医生指导下进行检测以及后续的处理。
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❖高危险性水平＜1.03 mmol/L
20
（五）载脂蛋白测定
❖载脂蛋白检测优势： ❖不受饮食因素影响 ❖直接参与动脉粥样硬化过程
21
ApoA
载脂蛋白
ApoB
ApoC ApoD ApoE Apo(a)
AI A II A IV B48 B100 CI C II C III
HDL、CM
CM VLDL、IDL、LDL
素C等在高浓度时也有干扰
16
（二）甘油三脂测定
17
（三）低密度脂蛋白胆固醇LDL-C
❖ LDL 分为两类：①大而有浮力的LDL颗粒（A 类LDL），富含胆固醇； ②小而致密LDL颗 粒（B类LDL），含胆固醇较少
❖ B类LDL 颗粒小，更易进入动脉壁，更易与 动脉壁上的糖蛋白结合，更易氧化。
❖ B类LDL 更易引起血栓形成和炎症反应，使 血管内壁损伤
13
（一）总胆固醇测定
❖ 1997年的我国“血脂异常防治建议” ❖ ≤5.17 mmol/L为合适水平 ❖ ≥5.69 mmol/L为高危水平
14
15
（二）甘油三脂测定
❖ 方法：GPO-PAP法 ❖ 评价：简便、快速、微量、精密 ❖ 内源性干扰物----游离甘油 （两步法可去除） ❖ 表面活性剂可干扰酶的作用；胆红素、维生
V型
CM↑ VLDL↑
血浆脂质
TC正常or↑ TG↑↑↑
TC↑↑↑ TG正常
TC↑↑ TG↑↑
TC↑↑ TC正常or↓ TC正常or↑
TG↑↑
TG↑↑
TG↑↑↑
TC/TG
<0.2
>1.6 >1.0
～1 >0.6且<1.6 <0.6
病因
LPL缺失 ApoCII缺失 LDL受体 （外因性高 异常
脂血症）
脂蛋白Lp
超速离心法
电度脂蛋
白
VLDL 前β
中间密 度脂蛋
白
IDL β
低密度 脂蛋白
LDL β
Lp(a) 前β
高密度 脂蛋白
HDL α8
高脂蛋白血症分型及其特征
指标
I型
增加的LP CM↑↑
II型
IIa
IIb
LDL↑
LDL↑ VLDL↑
III型
CM残粒↑ IDL↑
IV型 VLDL↑
❖ Lp(a)是一个独立于其它脂类参数的冠心病危 险因素，其浓度水平的上升预示着心血管病 的危险
27
28
冠心病危险增加；反之则表示B类LDL不增高，冠心 病危险性不增加
25
2.载脂蛋白AI （Apo AI）
❖Apo AI是HDL的主要颗粒结构，与 HDL-C高度相关
❖方法采用：免疫比浊法 ❖临床意义：同HDL-C
26
3.脂蛋白（a）Lp(a)
❖ Lp(a)是由一个LDL分子结合Apo(a)组成的二 聚体，两者通过二硫键结合
总死亡原因的41%，居各种疾病之首。
5
一、背景资料
❖ 血脂代谢异常是动脉粥样硬化性心血管 病的重要致病因素。
❖ 了解体内血脂状况的检测项目因而成为 临床医学检验中的重要检测内容。
6
二、血 脂
血脂
甘油三酯(TG) 总胆固醇(TC)
磷脂(PL)
游离胆固醇(FC) 胆固醇脂(CE)
7
血脂以脂蛋白形式存在于血液中
11
（一）总胆固醇测定
❖总胆固醇（total cholesterol,TC） 包括： ❖胆固醇脂（CE） 60%～70% ❖游离型胆固醇（FC） 30%～40% ❖测定方法：COD-PAP法
12
（一）总胆固醇测定
❖ 成年男子胆固醇每降低 8.5% ❖ 冠心病的发生率可以降低 19% ❖ 如何判断胆固醇水平？
不明
LPL缺失（杂
ApoE异常 不明（内因 合子，部分）
（2/2） 等
性高脂血 （外因性和内
症）
因性混合型高9
脂血症）
三、血脂的相关测定
❖ TG、 TC、HDL-C、LDL-C测定是血脂 测定的四个基本指标。
10
血脂相关测定的标本收集
❖取血前2周保持正常饮食习惯 ❖取血前24小时不做激烈运动 ❖一次异常，间隔一周以上2月内复查 ❖妊娠后期生理性增高 ❖采血管最好使用血清管
Lp(a) 22
1．载脂蛋白B（Apo B）
❖ Apo B是 VLDL、IDL和LDL的主要结构 蛋白。
❖ Apo B是Apo B100和Apo B48之和 ❖ 一分子CM或CM残粒中基本上都只含
有一个分子Apo B48 ❖ 一分子LDL、VLDL﹑IDL及Lp（a）中
基本上都只含有一个分子Apo B100
自贡市第四人民医院 伍涛
1
学习内容 ❖血脂常规四项 （TG、TC、HDL-C、LDL-C） ❖载脂蛋白 （apoAI、apoB、LP(a)）
2
3
一、背景资料
❖冠心病
❖动脉粥样硬化 ❖脑出血
心脑血管疾病
❖脑梗塞
都和高脂血症高度相关 4
健康的隐形杀手—高血脂
《中国心血管病报告2013》
❖ 估计全国心血管病患者2.9亿，即每 5 个 成人中有 1人，每年死于心血管病（包 括心脏病和脑血管病）约 350 万人，占
23
检测LDL胆固醇 对LDL颗粒估计的局限性
脂蛋白颗粒多达70%
A类LDL
胆固醇平衡
B类LDL
24
Apo B检测的意义
❖ 检测Apo B成为目前估计动脉硬化病变颗粒数最好 的方式
❖ Apo B是冠心病的强有力的预示因子，其预示能力 要优于LDL-C
❖ 他汀类药物治疗效果观察中Apo B要优于LDL-C ❖ Non-HDL-C不高而Apo B增高者（B类LDL增加），
18
（三）低密度脂蛋白胆固醇LDL-C
❖ LDL-C医学决定水平[mmol/L]
合适水平 接近理想
＜2.59 2.59～3.34
增高边缘
3.37～4.13
增高
4.14～4.89
很高
≥4.91
19
（四）高密度脂蛋白胆固醇HDL-C
❖HDL-C 与冠心病发病有密切的、独 立的负相关性；
❖HDL-C 每下降 0.26 mmol/L, 冠心 病的危险性可增加2～3%