产品微生物检测方法
化妆品微生物五项检测
双倍胆盐乳糖
产酸：黄色 产气：气泡
EMB琼脂
镜检
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
化妆品微生物五项检验
菌落总数检验
菌落总数（Aerobic bacterial count）：化妆品检样经过处理,
在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、 pH值、需氧性质等）,1g（1mL）检样中所含菌落的总数.所得 结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性和 兼性厌氧菌落总数.
配培 养基 和稀 释液
供试 品的 处理
耐盐分
Baird Parker’s 或血琼脂
增 菌 24±2h 培 36±1℃ 养
分
离 24~48h 纯 36±1℃ 化
镜检
特征菌落
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验
甘露醇发酵试验
金黄色葡萄球菌检查流程图
灰/黑色
问题2
油性样品如何处理
稀释子型表面活性剂,分子一端 是亲水基团,一端是亲油基团,常用作增溶剂和 油/水乳化剂.决定了加入的顺序.
微生物许可检验项目 问题3
检验项目
特殊用途化妆品
非特殊用途 育 化妆品 发 类
染 发 类
烫 发 类
脱 毛 类
谢谢大家
接种阳性菌计算回收率
推荐了解： 人员培训能力掌握的检验重要指标. 有条件可做视具体样品测试结果. 在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着于颗粒状
浅谈纯生啤酒生产中有害微生物的检测和防治措施
浅谈纯生啤酒生产中有害微生物的检测和防治措施在纯生啤酒生产中，常见的有害微生物主要包括酵母菌、酸奶菌、霉菌和细菌等。
针对这些有害微生物，生产企业需要进行定期的检测，以确保产品的卫生安全和口感质量。
常用的有害微生物检测方法主要有以下几种：1. 可视检测法：利用肉眼观察啤酒的外观、味道和气味等特征来判断是否有害微生物污染。
如果啤酒出现浑浊、发酵异常、异味等现象，就可以判断有害微生物可能存在。
2. 微生物培养法：将啤酒样品在适宜的培养基上进行培养，利用菌落计数或断膜法来检测有害微生物的数量和种类。
这种方法需要一定的实验室设备和培养技术，但结果准确可靠。
3. 分子生物学检测法：采用PCR、荧光定量PCR、纳米孔测序等分子生物学技术，通过检测有害微生物的DNA或RNA来判断是否存在污染。
这种方法灵敏度高，结果快速，可以准确鉴定微生物和测定其数量。
针对检测到的有害微生物，纯生啤酒生产中还需要采取一系列的防治措施来保证产品的质量和安全。
常见的防治措施主要包括以下几点：1. 设立严格的生产卫生管理制度：制定并执行完善的生产卫生规程，对生产过程中的卫生操作、设备清洁和工作人员卫生等进行规范管理，确保生产环境的洁净度和生产过程的卫生安全。
2. 控制原材料的卫生质量：对进货的原材料进行严格的检验和把关，确保原材料的卫生质量符合要求，避免有害微生物再生或污染。
3. 采用适宜的酿造工艺：合理控制酿造工艺中的温度、时间和酵母用量等参数，以达到杀灭有害微生物的目的。
在酿造过程中要注意保持设备的卫生和无菌状态，避免杂菌污染。
4. 加强产品质量监控：定期对生产过程中的啤酒样品进行微生物检测，及时发现异常并采取措施。
对产品出厂前的最终产品进行全面检测，确保产品达到卫生指标和质量要求。
纯生啤酒生产中有害微生物的检测和防治是确保产品质量和安全的重要环节。
通过采用适宜的检测方法和防治措施，可以有效预防有害微生物的污染，保证纯生啤酒的质量，赢得消费者的信任和支持。
化妆品微生物检验方法标准
化妆品微生物检验方法标准概述：化妆品微生物检验是对产品中的微生物含量和活性进行检测，旨在确保化妆品的质量和安全性。
本文将介绍化妆品微生物检验的方法标准，包括采样方法、微生物总数测试、致病微生物测试等内容。
一、采样方法采样是化妆品微生物检验的第一步，正确的采样方法对检验结果的准确性至关重要。
总体的采样方法包括以下几个方面：1. 选取适当数量和规格的样品，并确保样品具有代表性；2. 使用干净的取样工具，避免污染样品；3. 选择不同生产批次和生产日期的化妆品进行采样，以评估产品的质量稳定性；4. 遵循严格的卫生规范和操作规程进行采样。
二、微生物总数测试微生物总数测试是对化妆品样品中微生物总数量的测定。
其目的是评估产品的细菌污染程度和是否符合相关的卫生标准。
以下是常用的微生物总数测试方法：1. 高效液相色谱法（HPLC）：该方法通过分离、测定化妆品中微生物代谢产物的含量，从而推断微生物总数；2. 膜过滤法：通过将样品通过膜过滤器，然后将膜培养在适当的培养基上，计数培养基上出现的菌落数量；3. 稀释平板计数法：将样品进行系列稀释后，移取适量的稀释液均匀涂布在含有适当培养基的平板上，培养并计数菌落数量；4. 流式细胞术：利用流式细胞仪对样品中微生物进行计数和鉴定。
三、致病微生物测试致病微生物测试是对化妆品样品中致病微生物含量的检测。
该测试主要关注常见的致病菌，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
以下是常用的致病微生物测试方法：1. 酶免疫分析法（ELISA）：通过检测样品中致病菌特异性的抗原或抗体来判断样品是否存在致病菌；2. PCR技术：通过引物特异性扩增样品中的致病菌DNA，从而检测样品是否受到致病菌污染；3. 快速培养技术：利用快速培养方法，减少培养周期，快速检测致病菌的存在。
四、标准和参考文献化妆品微生物检验方法的标准和参考文献主要包括国际组织和国家相关机构发布的标准。
以下是几个常见的标准：1. 国家药品监督管理局发布的《化妆品质量规范》2. 国际标准化组织（ISO）发布的相关标准，如ISO 21149：2020 "Cosmetics -- Microbiology -- Enumeration and detection of aerobic mesophilic bacteria"3. 美国食品药品管理局（FDA）发布的相关指导文件，如《微生物检验的尺度适应性》总结：化妆品微生物检验是保证化妆品质量和安全的重要环节。
微生物限度检测操作步骤
微生物限度检测是对产品中微生物数量进行定量或定性检测的过程。
以下是一般的微生物限度检测操作步骤：
1. 准备工作：
-清洁和消毒实验室设备、试剂瓶和工作台等。
-准备所需的培养基、培养基平板和培养基管等。
2. 样品处理：
-取得待检样品，确保样品的采集和保存符合规范和要求。
-如果需要，将样品稀释到适当的浓度，以便在培养基上形成可数的菌落。
3. 培养基制备和接种：
-准备所需的培养基，并按照说明书的要求进行制备。
-将适量的培养基倒入无菌平板或管中，并在适当温度下固化。
-在培养基表面均匀涂布待检样品，或将待检样品滴于培养基管中。
4. 培养和孵育：
-将培养基平板放置在恒温培养箱中，按照规定的时间和温度进行培养。
-监控培养过程中的温度和湿度，确保适宜的条件。
5. 菌落计数和鉴定：
-培养结束后，观察培养基上的菌落情况。
-使用显微镜进行菌落计数和鉴定，根据形态、颜色、大小等特征确定菌落类型。
6. 结果分析和报告：
-根据菌落计数和鉴定结果，判断样品的微生物限度是否符合规定的标准。
-撰写检测报告，将结果详细记录并汇总，包括样品信息、检测方法、结果和结论等。
以上是一般微生物限度检测的操作步骤。
具体的操作可能会因实验室和产品类型而有所不同，需要根据相关标准和方法进行调整和执行。
在进行微生物限度检测时，应严格遵守实验室的操作规程和安全要求，确保检测结果的准确性和可靠性。
微生物限度检测方法
微生物限度检测方法微生物限度检测是指在药品、食品、化妆品等产品中，对微生物的数量和种类进行检测，以确保产品的质量安全。
微生物限度检测方法的选择和执行对产品的质量控制和安全性评价具有重要意义。
本文将介绍常见的微生物限度检测方法及其应用。
一、培养法。
培养法是一种常见的微生物限度检测方法，它通过将样品接种在适当的培养基上，利用微生物在培养基上生长、分裂和形成可见的典型菌落的特性，来检测微生物的数量和种类。
培养法主要包括菌落计数法、膜过滤法等。
菌落计数法是将样品均匀涂布在含有营养物质的琼脂平板上，经过一定时间的培养后，根据菌落的数量来确定微生物的数量。
膜过滤法是将样品过滤到孔径为0.45μm的膜上，然后将膜放置在含有营养物质的琼脂平板上培养，根据在膜上形成的菌落数量来确定微生物的数量。
二、生物学法。
生物学法是利用微生物的生物学特性，通过培养微生物或者利用生物学试剂来检测微生物的数量和种类。
生物学法主要包括酶标记法、PCR法等。
酶标记法是利用酶标记的抗体或抗原来检测微生物的数量和种类，其原理是将酶标记的抗体或抗原与待检测微生物发生特异性反应，然后通过酶反应产生显色物质或荧光物质来进行检测。
PCR法是利用聚合酶链式反应技术，通过扩增微生物的特异基因序列来检测微生物的数量和种类。
三、物理化学法。
物理化学法是利用微生物的生理生化特性，通过测定微生物的生长代谢产物或者利用特定的物理化学性质来检测微生物的数量和种类。
物理化学法主要包括ATP生物发光法、流式细胞术等。
ATP生物发光法是利用微生物在生长过程中产生的ATP来进行检测，通过测定样品中的ATP含量来确定微生物的数量。
流式细胞术是利用流式细胞仪对微生物进行快速、高效的检测和鉴定，通过测定微生物在流式细胞仪中的光散射和荧光信号来确定微生物的数量和种类。
综上所述，微生物限度检测方法多种多样，每种方法都有其适用的范围和特点。
在实际应用中，需要根据产品的特点和检测的目的选择合适的检测方法，并严格按照相应的标准和规范进行执行，以确保产品的质量安全。
中国药典微生物限度检查法
中国药典微生物限度检查法
中国药典是中华人民共和国国家药品监督管理局编制的用于药品质量标准和规范的权威性文献。
其中，微生物限度检查是对药物产品中的微生物污染进行评估和控制的重要环节。
中国药典中的微生物限度检查法主要包括以下几个方面：
1.检测项目：微生物限度检查主要关注细菌、真菌和酵母菌
的存在与数量。
通常会检测大肠杆菌、铜绿假单胞菌、霉
菌和酵母菌等常见微生物。
2.样品准备：样品准备过程中，要根据具体要求制备适当稀
释的样品溶液。
根据不同产品的特点和要求，可能需要使
用适当的培养基进行预处理。
3.检测方法：中国药典中提供了一系列的微生物限度检测方
法，包括涂片法、水洗法、滤膜法等。
这些方法可以根据
不同的样品类型和特性选择适合的检测方法。
4.培养和观察：按照检测方法的要求，将样品接种在适当的
培养基上，进行培养并观察一定时间。
观察期间，需要注
意各种细菌、真菌和酵母菌的生长情况。
5.计数和判定：根据培养结果，进行微生物数量的计数，并
与规定的限度标准进行比较。
根据比较结果，判定样品是
否符合微生物限度标准。
通过微生物限度检查，可以评估药物产品中的微生物污染状况，并确保其在接受者使用时的安全性。
中国药典中的微生物限度
检查法为药品质量控制提供了重要的指导和标准。
微生物检测方法
微生物检测方法微生物检测是指对环境、食品、药品、生物制品等中的微生物进行检测和监测的过程。
微生物检测的方法多种多样，根据不同的检测对象和要求，可以选择合适的方法进行检测。
下面将介绍几种常见的微生物检测方法。
首先，传统的培养方法是一种常见的微生物检测方法。
这种方法是将样品在适宜的培养基上培养一段时间，然后观察培养基上是否有微生物生长，根据生长的数量和形态来判断样品中是否存在微生物。
这种方法简单易行，但需要较长的时间，且对于某些难以培养的微生物可能无法检测出来。
其次，PCR方法是一种快速准确的微生物检测方法。
PCR方法是利用聚合酶链式反应技术，通过扩增微生物DNA片段来进行检测。
这种方法具有高度的特异性和敏感性，可以快速准确地检测出微生物的存在和数量。
但是，PCR方法需要设备和技术的支持，成本较高，且对样品的前处理要求较高。
另外，免疫学方法也是一种常用的微生物检测方法。
这种方法是利用抗体与特定的微生物抗原结合的原理进行检测。
免疫学方法具有高度的特异性和灵敏度，可以快速准确地检测出微生物的存在和数量。
但是，免疫学方法需要较长的培养时间，且受到环境因素的影响较大。
此外，基因测序技术也是一种新兴的微生物检测方法。
这种方法是通过对微生物的基因进行测序分析，来确定微生物的种属和数量。
基因测序技术具有高度的准确性和全面性，可以对微生物进行全面的检测和分析。
但是，基因测序技术需要较长的分析时间和复杂的数据处理，且对设备和技术要求较高。
综上所述，微生物检测方法有传统的培养方法、PCR方法、免疫学方法和基因测序技术等多种选择。
在实际应用中，可以根据检测对象和要求选择合适的方法进行检测。
随着科学技术的不断发展，相信微生物检测方法会更加快速、准确、全面，为微生物监测和控制提供更好的技术支持。
产品微生物检测方法
产品微生物检测方法微生物检测是生物学中的一项重要技术，用于分析和检测样品中的微生物种类和数量。
在产品生产过程中，微生物检测被广泛应用于食品、药品、化妆品等各个领域，以保证产品的质量和安全性。
本文将介绍一些常用的产品微生物检测方法。
一、传统培养方法传统培养方法是微生物检测中最常用的方法之一、它基于菌落的形态、生理和生化特性进行微生物的分离和鉴定。
具体步骤包括样品采集、样品制备、选取适当培养基和条件、培养、分离、鉴定等。
优点是成本相对较低，鉴定结果比较准确；缺点是操作较为繁琐，耗时较长，有些微生物不能通过此方法鉴定。
二、荧光倒置显微镜法荧光倒置显微镜法是一种非破坏性的微生物检测方法，可用于观察和计数微生物的形状、大小、颜色和运动等特征。
该方法主要通过染色或使用荧光标记的抗体来标记微生物，然后使用荧光倒置显微镜观察标记物。
该方法具有高灵敏度、准确度和快速性的优点，适用于检测环境中的微生物。
三、分子生物学方法分子生物学方法包括多种技术，如聚合酶链反应（PCR）、实时定量聚合酶链反应（qPCR）、DNA测序等。
这些方法可以在样品中检测微生物的DNA或RNA序列，并通过比对数据库中的序列来确定微生物的种类和数量。
分子生物学方法具有高灵敏度、高特异性和快速性的优点，可用于检测微生物的多样性和复杂性。
四、流式细胞仪法流式细胞仪法通过将荧光标记的微生物悬浮液通过细胞仪进行流式检测。
细胞仪通过激光照射悬浮液中的微生物，激发荧光信号，并通过光电倍增管等光学探测器检测信号强度，从而获得微生物的数量和信息。
流式细胞仪法具有高灵敏度、快速性和高通量的优点，可以用于分析大规模的微生物样本。
五、质谱法质谱法是一种基于微生物代谢产物的检测方法，包括质谱成像（MSI）和气相色谱-质谱（GC-MS）等技术。
质谱法通过分析微生物代谢产物的质谱图谱来确定微生物的种类和数量。
该方法具有高分辨率、高灵敏度和高特异性的优点，适用于复杂样品的微生物分析。
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产品微生物检测方法B1产品采集与样品处理于同一批号的三个运输包装中至少抽取12个最小销售包装样品，1/4样品用于留样，另1/2样品（可就地封存）必要时用于复检。
抽样的最小销售包装不应有破裂，检验前不得启开。
在100级净化条件下用无菌方法打开检测的至少3个包装，从每个包装中取样，准确称取10g±1g样品，剪碎后加入到200ml灭菌生理盐水中，充分混匀，得到生理盐水样液。
液体产品用原液直接做样液。
如被检样品含有大量吸水树脂材料而导致不能吸出足够样液时，稀释液量可按每次50ml递增，直到能吸出足够测试用样液。
在计算细菌菌落总数与真菌菌落总数时应调整稀释度。
B2细菌菌落总数与初始污染菌检测方法本方法适用于产品除始污染菌与细菌菌落总数（以下统称为细菌菌落总数）检测。
B2.1操作步骤待上述生理盐水样液自然沉降后取上小清液作菌落计数。
共接种5个平皿，每个平皿中加入1mL样液，然后用冷却至45℃左右的熔化的营养琼脂培养基15-20ml倒入每个平皿内混合均匀。
待琼脂凝固后翻转平皿置35℃±2℃培养46h 后，计算平板上的菌落数。
B2.2结果报告菌落呈片状生长的平板不宜采用；计数符合要求的平板上的菌落，按式（B1）计算结果：X1=A？K＼5……………….B1式中：X1─细菌菌落总数，cfu／g或cfu／ml；A─5块营养营养琼脂培养基平板上的细菌菌落总数；K─稀释度。
当菌落数在100以内，按实有数报告，大于100时采用二位有效数字。
如果样品菌落总数超过本标准的规定，按B2.3进行复检和结果报告。
B2.3 复检方法将留存的复检样品依前法复测2次，2次结果平均值都达到本标准的规定，则判定被检样品合格；其中有任何1次结果平均超过本标准规定，则判定被检样品不合格。
B3 大肠菌群检测方法B3.1 操作步骤取样液5ml接种50mL乳糖胆盐发酵管，置35℃±2℃培养24h，如不产酸也不产气，则报告为大肠菌群阴性。
如产酸产气，则划线接种伊红蓝琼脂平板，置35℃±2℃培养18-24h，观察平板上菌落形态。
典型的大肠菌落为黑紫色或红紫色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽，也有的呈紫黑色，不带或略带金属光泽，或粉红色，中心较深的菌落。
取疑似大肠菌落1-2个革兰氏染色镜检，同时接种乳糖发酵管，置35℃±2℃培养24h，观察产气情况。
B3.2 结果报告凡乳糖胆盐发酵管产酸产气，乳糖发酵管产酸产气，在伊红美蓝平板上有典型大肠菌落，革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌，可报告被检样品检出大肠杆菌。
B4 绿脓杆菌检测方法B4.1操作步骤取样液5ml，加入到50mlSCDLP培养液中，充分混匀，置35℃±2℃培养18 ～24h。
如有绿脓杆菌生长，培养液表面呈现一层薄菌膜，培养液常呈黄绿色或蓝绿色。
从培养液的薄菌膜处取培养物，划线接种十六烷三甲基溴化琼脂平板，置35℃±2℃培养18-24h，观察菌落特征。
绿脓杆菌在此培养基上生长良好，菌落扁平，边缘不整，菌落周围培养基略带粉红色，其他菌不长。
取可疑菌落涂片作革兰氏染色，镜检为革兰氏阴性菌者应进行下列试验：氧化酶试验：取一小块洁净的白色滤纸片放在灭菌平皿内，用无菌玻棒挑取可疑菌落涂在滤纸片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基对苯二胺试液，30s内出现粉红色或紫红色，为氧化酶试验阳性，不变色者为阴性。
绿脓菌素试验：取2-3个可疑菌落，分别接种在绿脓菌素测定用培养基斜面，35℃±2℃培养24h，加入氯甲烷3-5ml，充分振荡使培养物中可能存在的绿脓菌素溶解，待三氯甲烷呈蓝色时，用吸管到移到另一试管中并加入1mol/L的盐酸1mL，振荡后静置片刻。
如上层出现粉红色或紫红色即为阳性，表示有绿脓菌素存在。
硝酸盐还原产气试验：挑取被检菌纯培养物接种在硝酸盐胨水培养基中，置35℃±2℃培养24h，培养基小倒管中有气者即为阳性。
明胶液化试验：取可疑菌落纯培养物，穿刺接种在明胶培养基内，置35℃±2℃培养24h，取出放于4-10℃，如仍呈液态为阳性，凝固者为阴性。
42℃生长试验：挑取可疑培养物，接种在普通琼脂斜面培养基上，置42℃培养24-48h，有绿脓杆菌生长为阳性。
B4.2 结果报告被检样品经增菌分离培养后，证实为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓杆菌试验均为阳性者，即可报告被检样品检出绿脓杆菌。
如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出绿脓杆菌。
B5 金黄色葡萄球菌检测方法B5.1 操作步骤取样液5ml，加入到50mlSCDLP培养液中，充分混匀，置35℃±2℃培养24h。
自上述增菌液中取1-2接种环，划线接种在血琼脂培养基上，置35℃±2℃培养24-48h。
在血琼脂平板上该菌菌落呈金黄色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有溶血圈。
挑取典型菌落，涂片作革兰氏染色镜检，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，排列成葡萄状，无芽胞与荚膜。
镜检符合上述情况，应进行下列试验：甘露醇发酵试验：玻片法：取清洁干燥载玻片，一端滴加一滴生理盐水，另一端滴加一滴兔血浆，挑取菌落分别与生理盐水和血浆混合，5min如血浆内出现团块或颗粒状凝块，而盐水滴仍呈均匀混浊无凝固则为阳性，如两者均无凝固则为阴性。
凡盐水滴与血浆滴均有凝固现象，再进行试管凝固酶试验；试管法：吸取1：4新鲜血浆0.5Ml，放灭攻小试管中，加入等量待共菌24h肉汤培养物0.5mL。
混匀，放35℃±2℃温箱或水浴中，每半小时观察一次，24h之内呈现凝块即为阳性。
同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物各0.5mL作阳性与阴性对照。
B5.2 结果报告凡在琼脂平板上有可疑菌落生长，镜检为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。
B6 溶血性链球菌检测方法B6.1 操作步骤取样液5mL加入到50mL葡萄糖肉汤，35℃±2℃培养24h。
将培养物划线接种血琼脂平板，35℃±2℃培养24h观察菌落特征。
溶血性链球菌在血平板上为灰白色，半透明或不透明，针尖状突起，表面光滑，边缘整齐，周围有无色透明溶血圈。
挑取典型菌落作涂片革兰氏染色镜检，应为革兰氏阳性，呈链状排列的球菌。
镜检符合上述情况，应进行下列试验：链激酶试验：吸取草酸钾血浆0.2mL（0.01g草酸钾加5mL兔血浆混匀，经离心沉淀，吸取上清液），加入0.8mL灭菌生理墁水，混合后再加入待检菌24h肉汤培养物0.5mL和0.25%氯化钙0.25mL。
混匀，放35℃±2℃水浴中，2min 观察一次（一般10min内可凝固），待血浆凝固后继续观察并记录溶化时间。
如2h内不溶化，继续放置24h观害人不浅，如凝块全部溶化为阳性，24h仍不溶化为阴性。
杆菌肽敏感试验：将被检菌菌液涂于血平板上，用灭菌镊子取每片含0.04单位杆菌肽的纸片放在平板表面上，同时以已知阳性菌株作对照，在35℃±2℃下放置18-24小时，有抑菌带者为阳性。
B6.2 结果报告镜检革兰氏阳性链状排列球菌，血平板上呈现溶血圈，链激酶和杆菌肽试验阳性，可报告被检样品检出溶血性链球菌。
B7 真菌菌落总数检测方法B7.1 操作步骤待上述生理盐水样液自然沉降后取上清液作真菌计数，共接种5个平皿，每一个平皿中加入1ml样液，然后用冷却至45℃左右的熔化的沙氏琼脂培养基15-25ml倒入每个平皿内混合均匀，琼脂凝固后翻转平皿置25℃±2℃培养7天，分别于3、5、7天观察，计算平板上菌落数，如果发现菌落蔓延，以前一次的菌落计数为准。
B7.2 结果报告菌落呈片状生产的平板不宜采用；计数符合要求的平板上的菌落，按式（B2）计算结果：KX2=B？--- ……………………………………（B2）5式中：X2………真菌菌落总数，cfu/g或cfu/ml；B………5块沙氏琼脂培养基平板上的真菌菌落总数；K………稀释度。
当菌落数在100以内，按实有数报告，大于100时采用二位有效数字。
如果样品菌落总数超过本标准的规定，按B7.3进行复检和结果报告。
B7.3 复检方法将留存的复检样品依前法复测2次，2次结果都达到本标准的规定，则判定被检样品合格，其中有任何1次结果超过本标准规定，则判定被检样品不合格。
B8 真菌定性检测方法B8.1 操作步骤取样液5ml加入到50ml沙氏培养基中，25℃±2℃培养7天，逐日观察有无真菌生长。
B8.2 结果报告培养管混浊应转种沙氏培养基，证实有真菌生长，可报告被检样品检出真菌。
附录C（标准的附录）产品杀菌性能、抑菌性能与稳定性测试方法C1 样品采集为使样品具有良好的代表性，应于同一批号三个运输包装中至少随机抽取20件最小销售包装样品，其中5件留样，5件做抑菌或杀菌性能测试，10件做稳定性测试。
C2 试验菌与菌液制备C2.1 试验菌C2.1.1细菌：金黄色葡萄菌（ATCC 6538）大肠杆菌（8099或ATRCC25922）。
C2.1.2酵母菌：白色念球菌（ATCC 10231）菌液制备：取菌株第3-14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物（18-24h），用5ml0.03mol\L磷酸盐缓冲液（以下简称PBS）洗下菌苔，使菌悬浮均匀后用上述PBS稀释至所需浓度。
C3 杀菌性能试验方法该试验取样部位，根据被试产品生产者的说明而确定。
C3.1 中和剂鉴定试验进行杀菌性能测试必须通过以下中和剂鉴定试验。
C3.1.1 试验分组1）染菌样片+5mLPBS2）染菌样片+5mL中和剂3）染菌对照片+5mL中和剂4）样片+5mL中和剂+染菌对照片5）染菌对照片+5mLPBS6）同批次PBS7）同批次中和剂8）同批次培养基C3.1.2 评价规定1）第1组无试验菌，或仅有极少数试验菌菌落生长。
2）第2组有较第1组为多，但较第3、4、5组较少的试验菌生长，并符合要求。
3）第3、4、5组有相似量试验菌生长，并在1×104-9×104cfu/片之间,其组间菌落数误差率不超过15%。
4）第6-8组无菌生长。
5）连续3次试验取得合格评价。
C3.2 杀菌试验C3.2.1 操作步骤将试验菌24h斜面培养物用PBS洗下，制成菌悬液（要求的浓度为：用100ml 滴于对照样片上，回收菌数为1×104-9×104cfu/片）取被试样片（2.0cm-3.0cm）和对照样片（与式样同质材料，同等大小，但不含抗菌材料，且经灭菌处理）各4片，分成4组置于4各灭菌平皿内。
取上述菌悬液，分别在每个被试样片上滴加100ml，均匀涂布。
开始计时，作用2、5、10、20min，用无菌镊分别将样片投入含5ml相应中和剂的试管内，充分混匀，作适当稀释，然后取其中2-3个稀释度，分别吸取0.5ml置于两个平皿，用凉至40～45℃的营养琼脂培养基（细菌）或沙氏琼脂培养基（酵母菌）15ml作倾注，转动平皿，使其充分均匀，琼脂凝固后翻转平板，35℃±2℃培养48h（细菌）或72h（酵母菌），作活菌菌落计数。