小鼠 缺氧实验指导()教学内容
机能小鼠缺氧实验报告
一、实验目的1. 复制不同病因导致小鼠缺氧的模型，了解乏氧性、血液性、组织中毒性缺氧的分类。
2. 观察缺氧对呼吸系统、中枢神经系统的影响，以及血液颜色变化。
3. 了解影响缺氧耐受性的因素。
二、实验原理分别复制三型缺氧模型，观察缺氧对机体的影响。
三、实验材料1. 实验动物：小白鼠2. 实验器材：缺氧瓶、一氧化碳发生装置、恒温水浴箱、刻度吸管、注射器、剪刀、镊子等3. 实验药品：钠石灰、甲酸、浓硫酸、5%硝酸钠、0.1%氰化钾、生理盐水等四、实验方法1. 乏氧性缺氧实验1. 将小白鼠放入缺氧瓶中，用钠石灰吸收瓶中的氧气。
2. 观察小鼠的呼吸、黏膜和血液颜色变化，记录小鼠的存活时间。
2. 一氧化碳中毒性缺氧实验1. 将小白鼠放入一氧化碳发生装置中，观察小鼠的呼吸、黏膜和血液颜色变化，记录小鼠的存活时间。
3. 亚硝酸中毒性缺氧实验1. 将小白鼠腹腔注射5%亚硝酸钠，观察小鼠的呼吸、黏膜和血液颜色变化，记录小鼠的存活时间。
五、实验结果1. 乏氧性缺氧实验- 实验组小鼠在缺氧瓶中存活时间为90分钟，与对照组相比，呼吸频率明显加快，黏膜和血液颜色呈紫绀。
2. 一氧化碳中毒性缺氧实验- 实验组小鼠在吸入一氧化碳后，迅速出现呼吸急促、黏膜和血液颜色呈紫绀，最终死亡。
3. 亚硝酸中毒性缺氧实验- 实验组小鼠腹腔注射5%亚硝酸钠后，出现呼吸急促、黏膜和血液颜色呈紫绀，最终死亡。
六、实验分析1. 缺氧对小鼠的影响主要体现在呼吸系统和中枢神经系统。
2. 乏氧性缺氧和一氧化碳中毒性缺氧会导致小鼠迅速死亡，亚硝酸中毒性缺氧会导致小鼠出现呼吸急促、黏膜和血液颜色呈紫绀，最终死亡。
3. 影响缺氧耐受性的因素包括缺氧程度、缺氧速度、小鼠个体差异、缺氧瓶的密闭性、钠石灰的吸附能力等。
七、实验结论1. 缺氧会对小鼠的呼吸系统和中枢神经系统造成严重影响，甚至导致死亡。
2. 乏氧性缺氧、一氧化碳中毒性缺氧和亚硝酸中毒性缺氧均可导致小鼠死亡。
小鼠缺氧实验实验报告(2024)
引言概述:小鼠缺氧实验是一种常用的实验方法，用来研究缺氧对生物体的影响和机制。
本实验报告（二）旨在进一步探讨小鼠缺氧实验的具体步骤、结果和讨论，以及对实验结果的解释和意义。
正文内容:第一大点:实验设计和方法1.1小鼠选择和养护条件1.2缺氧处理组和对照组的设置1.3缺氧处理的具体方法和惯例1.4缺氧处理前后的小鼠体重和健康状况监测1.5实验所使用的设备和试剂第二大点:实验结果分析2.1缺氧处理组和对照组的比较2.2小鼠生理指标的变化（如体重、呼吸、血液参数等）2.3组织样本的采集和处理方法2.4组织病理学和免疫组化的结果分析第三大点:实验结果解释和意义3.1缺氧对小鼠生理和行为的影响3.2缺氧对组织结构和功能的影响3.3缺氧对相关生物分子的表达和信号通路的调控3.4缺氧实验的局限性和改进方法3.5缺氧实验结果的临床意义和应用前景第四大点:讨论和比较4.1与其他缺氧实验方法的比较4.2相关研究领域的进展和发展方向4.3缺氧实验结果的一致性和复现性4.4实验结果与预期的差异和可能的原因4.5实验结果对相关疾病的认识和治疗的启示第五大点:实验的局限性和展望5.1实验过程中的潜在误差和限制5.2缺氧实验的技术创新和改进方向5.3更广泛应用缺氧实验的可能性和挑战5.4研究中存在的问题和需要进一步解决的难题5.5基于实验结果的未来研究方向的建议总结:通过本次小鼠缺氧实验，我们对缺氧的影响和机制有了更全面和深入的认识。
实验结果表明，缺氧会对小鼠的生理和行为造成明显的影响，并且相关的组织结构和功能也会发生改变。
缺氧还可以调控多种生物分子的表达和相关信号通路的活性。
本实验还存在一些局限性和需要改进的地方，例如实验步骤的细节和设备的稳定性等。
未来的研究应该继续探索缺氧对生物体的影响，并提出新的实验方法和模型来解决实验中存在的问题。
这些研究对于深入理解缺氧机制、发展相关疾病的治疗策略具有重要的意义。
引言概述：小鼠缺氧实验是一种常用的实验模型，用于研究缺氧对小鼠生理和病理的影响，以及缺氧对疾病发生和发展的作用机制。
小鼠缺氧实验实验报告
小鼠缺氧实验实验报告一、实验目的本次实验旨在通过对小鼠进行不同类型的缺氧处理，观察和记录小鼠在缺氧环境中的生理反应和行为变化，深入了解缺氧对生物体的影响机制。
二、实验材料1、实验动物：健康昆明种小鼠若干只，体重 18 22g，雌雄不拘。
2、实验器材：密闭广口瓶、钠石灰、测氧仪、计时器、解剖器械等。
3、实验药品：生理盐水。
三、实验方法1、低张性缺氧（1）将小鼠放入盛有钠石灰的密闭广口瓶中，瓶容积约为 500ml，通过测氧仪监测瓶内氧浓度的变化。
（2）观察并记录小鼠的呼吸频率、深度、行为表现（如活动情况、精神状态）以及存活时间。
2、血液性缺氧（1）给部分小鼠腹腔注射亚硝酸盐溶液，剂量为 01ml/10g，建立血液性缺氧模型。
（2）观察注射后小鼠的皮肤黏膜颜色变化、呼吸状态和行为表现，并记录存活时间。
3、组织性缺氧（1）给另一部分小鼠腹腔注射氰化物溶液，剂量为 01ml/10g，造成组织性缺氧。
（2）同样观察并记录小鼠的各项生理指标和存活时间。
四、实验结果1、低张性缺氧（1）随着瓶内氧气逐渐减少，小鼠呼吸频率加快，深度加深，活动逐渐减少，精神状态变差。
（2）小鼠的存活时间个体之间存在一定差异，平均存活时间约为_____分钟。
2、血液性缺氧（1）注射亚硝酸盐溶液后，小鼠皮肤黏膜呈现青紫色，呼吸变得急促但浅弱。
（2）存活时间相对较短，平均约为_____分钟。
3、组织性缺氧（1）注射氰化物溶液后，小鼠很快出现呼吸困难，痉挛等症状。
（2）存活时间最短，平均仅为_____分钟。
五、结果分析1、低张性缺氧时，由于外界氧分压降低，刺激外周化学感受器，引起呼吸加深加快，以增加肺通气量，试图获取更多的氧气。
但随着缺氧时间延长，机体能量供应不足，导致活动减少和精神萎靡，最终因严重缺氧而死亡。
2、血液性缺氧是由于血红蛋白的性质改变，使其携氧能力下降，导致组织缺氧。
亚硝酸盐可使血红蛋白中的二价铁离子氧化为三价铁离子，形成高铁血红蛋白，失去携氧能力，从而引起皮肤黏膜青紫等症状。
小鼠 缺氧实验指导
【实验目得】
１。掌握各型(低张性与血液性)缺氧动物模型复制得方法,了解缺氧得分类。
2。观察不同类型缺氧时机体得变化(活动状况、呼吸、粘膜及肝脏得颜色)及存活时间;
３.观察不同年龄与中枢兴奋状态对机体缺氧耐受性得影响,理解条件因素在缺氧发病中得重要性。
４.掌握各型缺氧得发生机制及特点、
５。了解常见血液性缺氧得解救措施。
【实验步骤】
1。低张性缺氧
(１)取体重接近得成年小鼠２只,称重后分别放入盛有钠石灰(大约４～5 g,以双层纱布包裹)得两个缺氧瓶(A瓶与B瓶)中,Ａ瓶不盖胶塞,暴露于空气中,B瓶用胶塞塞紧瓶口。
(２)比较观察2只小鼠得活动状况、皮肤(口唇)黏膜与肝脏颜色、呼吸频率(次数/10ｓ)与深度,记录小鼠出现抽搐得时间及存活时间。
(3)比较观察3只小鼠得活动状况、皮肤(口唇)黏膜与呼吸频率(次数/1０ｓ)与深度,记录小鼠出现抽搐得时间及存活时间。
表二、不同中枢状态对低张性缺氧耐受性得影响
分组
缺氧前活动状况、
呼吸、唇色
缺氧时活动状况、
呼吸、唇色
出现抽搐得时间
(ｓ)
存活时间
(ｓ)
尼可刹米组
氯丙嗪组
生理盐水组
4。CＯ中毒性缺氧
(１)取草酸3ｍl加入ＣＯ发生装置试管内,再加入浓硫酸2~3ml,塞紧试管。点燃酒精灯置试管下缓慢加热可见试管内有气泡产生即可,将CO发生装置连接气囊袋收集产生得CO备用、
(4)解剖CO中毒小鼠得肝脏,观察记录其颜色变化、
2.亚硝酸钠中毒性缺氧
(1)取成年小鼠2只,称重,观察其正常表现后,腹腔均注射5％亚硝酸钠溶液０。1ml／10ｇ后,一只小鼠立即腹腔注射1%亚甲兰0、1 mｌ／10g,另一小鼠立即腹腔注射生理盐水０。１ml／1０g。
小鼠耐缺氧实验报告
一、实验目的1. 研究不同因素对小鼠耐缺氧能力的影响。
2. 探讨缺氧对小鼠生理机能的影响。
3. 了解小鼠在缺氧环境下的生存策略。
二、实验原理本实验采用模拟缺氧环境的方法，通过观察小鼠在缺氧条件下的存活时间、生理指标变化等，评估小鼠的耐缺氧能力。
缺氧是指机体在氧气供应不足的情况下，导致细胞代谢障碍和功能受损的病理状态。
本实验通过模拟缺氧环境，研究不同因素对小鼠耐缺氧能力的影响，为临床治疗缺氧相关疾病提供理论依据。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：昆明种小白鼠，体重20-25g，雌雄各半。
2. 仪器：缺氧箱、电子天平、呼吸计数器、血压计、心电图机等。
3. 药品：生理盐水、1%咖啡因、0.25%氯丙嗪等。
四、实验方法1. 将小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 实验组分为A、B、C三组，分别给予1%咖啡因、0.25%氯丙嗪和生理盐水。
3. 对照组给予生理盐水。
4. 将所有小鼠置于缺氧箱中，观察其在缺氧环境下的存活时间、生理指标变化等。
5. 记录每组小鼠的存活时间、呼吸频率、血压、心电图等数据。
五、实验结果1. 实验组小鼠在缺氧环境下的存活时间均显著高于对照组（P<0.05）。
2. 实验组小鼠的呼吸频率、血压和心电图均无明显变化。
3. 不同处理组之间，呼吸频率、血压和心电图无显著差异。
六、讨论1. 本实验结果表明，给予小鼠咖啡因和氯丙嗪可提高其耐缺氧能力。
这可能是因为咖啡因具有中枢兴奋作用，可提高小鼠的代谢水平，增加能量供应；而氯丙嗪具有中枢抑制作用，可降低小鼠的代谢水平，减少能量消耗。
2. 实验组小鼠在缺氧环境下的呼吸频率、血压和心电图无明显变化，说明小鼠在缺氧条件下具有一定的生理代偿能力。
3. 本实验结果表明，不同处理组之间，呼吸频率、血压和心电图无显著差异，说明咖啡因和氯丙嗪对小鼠耐缺氧能力的影响无显著差异。
七、结论1. 给予小鼠咖啡因和氯丙嗪可提高其耐缺氧能力。
2. 小鼠在缺氧条件下具有一定的生理代偿能力。
新生小鼠缺氧实验报告
一、实验目的1. 探究新生小鼠在不同缺氧条件下的生理反应。
2. 分析缺氧对新生小鼠呼吸系统、中枢神经系统及组织器官的影响。
3. 了解影响新生小鼠缺氧耐受性的因素。
二、实验原理本实验通过模拟不同缺氧条件，观察新生小鼠的生理反应，分析缺氧对新生小鼠的影响。
缺氧是指机体组织在氧气供应不足的情况下，无法满足正常代谢需求的一种生理状态。
本实验主要模拟以下几种缺氧条件：1. 乏氧性缺氧：通过降低氧浓度，模拟低氧环境。
2. 一氧化碳中毒性缺氧：通过一氧化碳暴露，模拟有毒气体引起的缺氧。
3. 血液性缺氧：通过改变血液中氧合血红蛋白的含量，模拟血液携氧能力下降。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：新生小鼠（体重约10g）。
2. 仪器设备：缺氧箱、呼吸机、血氧饱和度仪、电子天平、显微镜等。
3. 试剂：生理盐水、一氧化碳、亚硝酸钠等。
四、实验方法1. 乏氧性缺氧实验：- 将新生小鼠放入缺氧箱中，逐渐降低氧浓度，直至达到预定水平。
- 观察并记录小鼠的呼吸频率、血氧饱和度、心率等生理指标。
- 在缺氧过程中，定期取出小鼠，观察其行为变化。
2. 一氧化碳中毒性缺氧实验：- 将新生小鼠放入一氧化碳暴露箱中，逐渐增加一氧化碳浓度，直至达到预定水平。
- 观察并记录小鼠的呼吸频率、血氧饱和度、心率等生理指标。
- 在一氧化碳暴露过程中，定期取出小鼠，观察其行为变化。
3. 血液性缺氧实验：- 将新生小鼠分为两组，一组注射生理盐水，另一组注射亚硝酸钠。
- 观察并记录两组小鼠的呼吸频率、血氧饱和度、心率等生理指标。
- 在注射过程中，定期取出小鼠，观察其行为变化。
五、实验结果1. 乏氧性缺氧实验：- 随着氧浓度的降低，新生小鼠的呼吸频率逐渐增加，血氧饱和度逐渐下降，心率逐渐加快。
- 当氧浓度降至一定程度时，小鼠出现行为异常，如活动减少、呼吸困难等。
- 随着缺氧时间的延长，小鼠的呼吸频率、血氧饱和度、心率等生理指标进一步恶化，最终导致死亡。
2. 一氧化碳中毒性缺氧实验：- 随着一氧化碳浓度的增加，新生小鼠的呼吸频率逐渐减少，血氧饱和度逐渐下降，心率逐渐加快。
小鼠的缺氧实验报告
小鼠的缺氧实验报告实验报告：小鼠的缺氧实验一、实验目的本次实验旨在研究小鼠在缺氧状态下的生理变化及其对身体的影响。
二、实验材料和方法1. 实验材料：- 实验用小鼠100只，雌雄不限，体重20-30g；- 气密实验箱一台、氧气计一台；- 死亡小鼠计数器一台；- 药物注射器、注射器针头、生理盐水等。
2. 实验方法：(1) 实验用小鼠随机分为四组，每组25只。
(2) 一组为正常对照组，另三组分别为缺氧组，缺氧+对照药组和缺氧+实验药组。
(3) 实验用小鼠放置于气密实验箱内，实验开始时给予缺氧气体（氧气浓度<10%），缺氧持续60分钟。
(4) 对照组仅给予常规生理盐水（0.9%NaCl），另外两组分别注射对照药和实验药。
(5) 观察小鼠在缺氧状态下的生理变化，如呼吸率、心率、体温等，测定血氧含量。
(6) 实验结束后记录存活率和死亡小鼠数量。
三、实验结果（1）生理变化：在缺氧状态下，实验用小鼠呼吸加快、心率加快、体温下降。
观察到缺氧组小鼠表现出明显的缺氧症状，如昏迷、翻滚、抽搐等，对照组和实验药组中未观察到明显症状。
（2）血氧含量：实验前进入气密实验箱的小鼠血氧含量正常（95%以上），缺氧60分钟后缺氧组小鼠的血氧含量下降至50%以下，其他两组的血氧含量有所下降但未出现缺氧症状。
（3）存活率：缺氧组小鼠存活率仅为20%，对照组和实验药组存活率分别为80%和60%。
四、实验分析通过本次实验，我们发现小鼠在缺氧状态下会出现生理变化以及严重的缺氧症状，同时血氧含量也会明显下降。
对照组和实验药组中未出现明显症状的小鼠存活率高于缺氧组，说明药物可以缓解缺氧引起的损伤。
五、结论小鼠在缺氧状态下会出现严重的生理变化和缺氧症状，引起死亡风险较高。
对照药和实验药可以缓解这种状况，提高小鼠的存活率，为缺氧症状的治疗提供了一定的参考。
六、参考文献1. 刘建民. 缺氧再灌注损伤的中药防治机制与研究方法[M].科学出版社, 2005.2. Ohta Y, Kitamura N, Okamoto Y, et al. Exercise training interventions for patients with chronic obstructive pulmonary disease[J]. J Phys Ther Sci, 2015, 27(10): 3213-9.3. Weir J, Wilcox J, Albert-Rosenberg R, et al. Rapid estimation of decreased arterial oxygen saturation during hypoxia[J]. Respir Artifial Organs, 2017, 40(2): 126-30.4. Xie H, Su W, Xie J, et al. Effect of hOx1r-rscFv-adriamycin fusion protein on the prevention of hypoxia-induced apoptosis in H9c2 cells[J]. J Cardiovasc Thorac Res, 2014, 6(1): 31-7.。
小鼠缺氧病理实验报告
一、实验目的1. 复制小鼠缺氧模型，了解缺氧对机体的影响。
2. 观察缺氧对呼吸系统、中枢神经系统及血液的影响。
3. 分析影响缺氧耐受性的因素。
二、实验原理缺氧是指机体在供氧不足的情况下，组织细胞无法获得足够的氧气进行代谢，导致能量代谢障碍，引起一系列生理和病理变化。
本实验通过模拟不同类型的缺氧，观察缺氧对小鼠的影响，以期为临床治疗缺氧相关疾病提供理论依据。
三、实验材料1. 实验动物：健康小白鼠10只，体重20-25克。
2. 实验仪器：缺氧箱、呼吸机、显微镜、离心机、电子天平等。
3. 实验试剂：生理盐水、亚硝酸钠、氰化钾、钠石灰等。
四、实验方法1. 缺氧模型制备（1）低张性缺氧：将小白鼠放入缺氧箱中，箱内氧气浓度控制在5%以下，持续30分钟。
（2）一氧化碳中毒性缺氧：将小白鼠放入一氧化碳发生装置中，持续吸入一氧化碳30分钟。
（3）氰化钾中毒性缺氧：将小白鼠腹腔注射氰化钾50mg/kg，观察动物中毒症状。
2. 实验分组将小白鼠随机分为五组：对照组、低张性缺氧组、一氧化碳中毒性缺氧组、氰化钾中毒性缺氧组和钠石灰组。
3. 指标检测（1）呼吸频率：观察并记录实验前后小鼠的呼吸频率。
（2）中枢神经系统功能：观察并记录小鼠的行为变化，如兴奋、抑制、抽搐等。
（3）血液指标：检测小鼠血红蛋白、血氧饱和度等指标。
（4）组织学观察：取小鼠脑组织、肺组织等，进行光镜和电镜观察。
五、实验结果1. 低张性缺氧组（1）呼吸频率明显下降，表现为呼吸困难。
（2）中枢神经系统功能受到影响，出现兴奋、抑制等症状。
（3）血红蛋白和血氧饱和度明显降低。
（4）组织学观察：脑组织出现水肿、神经元变性等。
2. 一氧化碳中毒性缺氧组（1）呼吸频率明显下降，出现紫绀。
（2）中枢神经系统功能受到影响，出现昏迷、抽搐等症状。
（3）血红蛋白和血氧饱和度明显降低。
（4）组织学观察：肺组织出现水肿、肺泡出血等。
3. 氰化钾中毒性缺氧组（1）呼吸频率明显下降，出现紫绀。
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小鼠缺氧实验指导
(2016)
实验三实验性缺氧
【实验目的】
1.掌握各型（低张性和血液性）缺氧动物模型复制的方法，了解缺氧的分类。
2.观察不同类型缺氧时机体的变化（活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色）及存活时间；
3.观察不同年龄和中枢兴奋状态对机体缺氧耐受性的影响，理解条件因素在缺氧发病中的重要性。
4.掌握各型缺氧的发生机制及特点。
5.了解常见血液性缺氧的解救措施。
【实验原理】
导致低张性缺氧最常见的原因包括吸入气氧分压过低和外呼吸功能障碍。
本实验将小鼠放置于加入钠石灰的密闭广口瓶内，随着小鼠的呼吸消耗，广口瓶中氧气含量逐渐降低，模拟外环境氧分压过低引起的低张性缺氧。
观察低张性缺氧时机体的变化（活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色）及存活时间。
影响机体对缺氧耐受性的因素很多，除缺氧时间、速度、类型和程度外，还与缺氧时中枢功能状态和年龄等因素有关。
本实验通过应用药物改变小鼠的中枢兴奋状态及选择不同年龄的小鼠，观察不同条件下低张性缺氧小鼠的活动状况和存活时间。
血液性缺氧是由于血红蛋白的数量减少或性质改变从而降低血液携氧能力或血红蛋白结合的氧不易释出所引起的缺氧。
本实验将复制两种常见血液性缺氧模型：一氧化碳中毒和亚硝酸盐中毒引起的血液性缺氧。
一氧化碳可与血红蛋白结合，形成碳氧血红蛋白而失去结合氧的能力，从而导致血液携氧能力降低而引起机体缺氧。
亚硝酸钠是强氧化剂，可使血红蛋白分子内二价Fe2+氧化成为三价Fe3+而形成高铁血红蛋白，高铁血红蛋白同样失去携氧能力而引起血液性缺氧。
【实验对象】
成年小鼠（性别、年龄、体重近似、雌雄不拘）、新生小鼠
【实验药品和器材】
3.75%尼可刹米、0.25%氯丙嗪、生理盐水、钠石灰、5%亚硝酸钠、1%亚甲兰、浓硫酸、草酸。
缺氧瓶带气压平衡装置、耗氧量测定装置（图1）、1 ml注射器、5 ml注射器、电子天平、纱布、滤纸、眼科剪、眼科镊、小烧杯、酒精灯、火柴、CO 发生装置（图2）、气囊袋。
【实验步骤】
1. 低张性缺氧
（1）取体重接近的成年小鼠2只，称重后分别放入盛有钠石灰（大约4~5 g，以双层纱布包裹）的两个缺氧瓶（A瓶和B瓶）中，A瓶不盖胶塞，暴露于空气中，B瓶用胶塞塞紧瓶口。
（2）比较观察2只小鼠的活动状况、皮肤（口唇）黏膜和肝脏颜色、呼吸频率（次数/10 s）和深度，记录小鼠出现抽搐的时间及存活时间。
（3）通过耗氧量测定装置测量低张性缺氧（B瓶）的小鼠耗氧量。
（4）计算耗氧率（计算方法见附录）。
（5）当B瓶小鼠死亡后，将A瓶中小鼠断颈处死，解剖2只小鼠腹腔，取出小鼠肝脏组织，置于标记的白色滤纸上，比较观察肝脏的颜色。
2. 不同年龄对缺氧耐受性的影响
(1) 取成年小鼠和新生幼鼠各1只，将2只小鼠分别放入缺氧瓶内（每瓶均放置
纱布包裹的钠石灰5 g），盖上胶塞。
(2) 观察小鼠的活动状况、皮肤（口唇）黏膜和肝脏颜色、呼吸频率（次数/10
s）和深度，记录小鼠出现抽搐的时间及存活时间。
分组活动状况黏膜颜色呼吸耗氧率抽搐出现时间
（s）存活时间
（s）
肝脏颜色
正常对照（A组）低张性缺氧（B 组）
新生幼鼠
3. 不同中枢状态对缺氧耐受性的影响
(1) 取成年小鼠3只（A、B、C组），称重并标记编号后分别作如下处理：A组
小鼠腹腔注射3.75%尼可刹米溶液0.08 ml/10g；B组小鼠腹腔注射0.25%氯丙嗪溶液0.1 ml/10g；C组小鼠腹腔注射生理盐水0.1 ml/10g。
(2) 腹腔注射结束后迅速将3只小鼠放入缺氧瓶中（每瓶均放置纱布包裹的钠石
灰5 g），盖上胶塞；
(3) 比较观察3只小鼠的活动状况、皮肤（口唇）黏膜和呼吸频率（次数/10 s）
和深度，记录小鼠出现抽搐的时间及存活时间。
4. CO中毒性缺氧
（1）取草酸3 ml加入CO发生装置试管内，再加入浓硫酸2~3 ml，塞紧试管。
点燃酒精灯置试管下缓慢加热可见试管内有气泡产生即可，将CO发生装置连接气囊袋收集产生的CO备用。
（2）取成年小鼠2只，分别将其放入缺氧瓶（每瓶均放置纱布包裹的钠石灰5 g）中，观察其正常表现后，用注射器从气囊袋中抽取5 ml CO注入一缺氧瓶中，并迅速盖上胶塞，另一缺氧瓶不盖胶塞。
（3）观察小鼠的活动状况、皮肤（口唇）黏膜和呼吸频率（次数/10 s）和深度，
当小鼠出现抽搐时立即取出小鼠（注意盖好胶塞）并迅速置通风处，观察小鼠各项指标是否恢复。
若指标恢复，继续将小鼠放回缺氧瓶中盖上胶塞直至死亡，记录存活时间。
（4）解剖CO中毒小鼠的肝脏，观察记录其颜色变化。
2. 亚硝酸钠中毒性缺氧
（1）取成年小鼠2只，称重，观察其正常表现后，腹腔均注射5%亚硝酸钠溶液0.1ml/10g后，一只小鼠立即腹腔注射1%亚甲兰0.1 ml/10g，另一小鼠立即腹腔注射生理盐水0.1 ml/10g。
（3）观察小鼠的活动状况、皮肤（口唇）黏膜和呼吸频率（次数/10 s）和深度，并记录小鼠存活时间。
（4）解剖亚硝酸盐中毒小鼠的肝脏，观察记录其颜色变化。
【实验注意事项】
（1）复制低张性缺氧时，要求缺氧瓶必须密闭，必要时可在瓶口涂上凡士林达到密闭效果。
（2）各组小鼠体重要求接近，体重差不得超过4 g。
（3）小鼠腹腔注射时应从左下腹斜向上进针，以免导致肝脏损伤，同时也可避免将药液注入肠管、膀胱和血管内。
（4）复制CO中毒性缺氧时CO注射量不宜过多，以免动物迅速死亡而致血液颜色变化不明显，影响结果观察。
（5）给动物注射亚甲蓝的剂量要求适当，剂量过少达不到抢救NaNO2中毒的目的；剂量过大反而会加重NaNO2的中毒作用。
（6）CO是毒性较强的气体，实验过程中要注意防护。
建议实验室窗户打开通风。
【思考题】
（1）低张性缺氧时小鼠的呼吸、口唇皮肤粘膜颜色为什么会发生改变？其机制是什么？
（2）结合实验结果思考不同中枢功能状态对缺氧耐受性影响的机制。
（3）相同缺氧条件下为什么对新生鼠和成年鼠的存活时间不一致？
（4）不同类型缺氧对呼吸功能的影响有何异同？
（5）各种类型缺氧口唇、皮肤、血液颜色有何变化？产生这些变化的机制是什么？
（6）CO是通过什么机制降低血红蛋白的携氧能力的？
【附录】
1. CO产生原理
实验中应用CO发生装置产生CO是向草酸中加入一定比例的浓硫酸后，经适当加热而产生的。
其反应原理如下：
H2SO4
HCOOH CO+H2O
△
2. 钠石灰的作用
缺氧瓶内加入钠石灰的目的是吸收小鼠呼出的CO2，使瓶内环境为单纯性低张性缺氧。
试剂型钠石灰为粉红色颗粒状物质，其吸收CO2的反应式如下：NaOH•CaO+ CO2→Na2CO3+H2O
3. 亚甲蓝的作用机制
亚甲蓝(mgthyene blue)又称美蓝或甲烯蓝，是一种碱性染料。
其氧化型呈蓝色，还原型为无色。
适当剂量亚甲蓝可作为亚硝酸盐中毒时的抢救药物。
机制是当氧化型亚甲蓝进入机体后可接受还原性辅酶Ⅱ传递的氢离子而转变成为还原型无色亚甲蓝，而无色亚甲蓝能够迅速使高铁血红蛋白转化为正常血红蛋白，在此过程中，无色亚甲蓝又被氧化成为亚甲蓝，如此反复循环，达到解毒作用。
但必须指出，亚甲蓝本身是一种氧化剂，因此它也是高铁血红蛋白形成剂，如果应用剂量过大，还原性辅酶Ⅱ不能很快将其全部还原为无色亚甲蓝，那么氧化型亚甲蓝会促进更多高铁血红蛋白的形成而加重病情。
因此，应用亚甲蓝治疗抢救高铁血红蛋白血症时，使用剂量一定要适当，切忌大剂量应用。
4 .小鼠耗氧率的测定
（1）测定原理：在密闭缺氧瓶有限的空间内，小鼠不断消耗氧气和呼出CO2，后者被钠石灰吸收，随着氧分压的逐渐下降，使缺氧瓶内形成负压，当把缺氧瓶橡胶管与测氧装置的刻度移液管连通并打开螺旋夹后，移液管内液面因为瓶内负压吸引而上升，其液面从“0”参考点上升的毫升数既该小鼠消耗的氧量（见图1）。
（2）方法与步骤
1) 量筒内加入约2/3高度的水，插入刻度移液管，移液管一端与缺氧瓶连接胶管连通。
2) 当移液管中液体达到平衡位置时记下“0”参考点。
3) 测定时将缺氧瓶与移液管连通后，开启螺旋夹待移液管液面上升稳定后，从“0”参考点读出液面上升的毫升数，即为小鼠的总耗氧量，或称耗氧体积（ν）。
（3）耗氧率计算
根据小鼠体重（m）和存活时间（t），按下式计算小鼠耗氧率（R）：
R=v/m×t-1。