萤光素酶报告基因技术
双荧光素酶报告基因和单荧光素酶报告基因

双荧光素酶报告基因和单荧光素酶报告基因双荧光素酶报告基因是一种利用荧光技术对两种不同样本进行同时检测的技术。
这种技术通常用于检测基因表达水平差异或者鉴定基因变异。
双荧光素酶报告基因由两个不同的荧光报告基因组成,一个称为“参考荧光基因”,另一个称为“检测荧光基因”。
这两个基因都被置于同一个位点,通过一条多外显子基因互补的RNA链来实现对同一片DNA的双重检测。
参考荧光基因包括一个模板序列和一个感兴趣的序列,模板序列由参考荧光基因敲入DNA中,能够准确地定位感兴趣序列,这就是所谓的“特征序列”。
如果特征序列存在与基因片段中,那么参考荧光报告基因就会被激活,产生一定数量的荧光蛋白质,从而将荧光信号传递到另一端,即检测荧光基因。
检测荧光基因同样具有特征序列,以及一组检测序列,检测序列中包含与参考荧光基因“特征序列”配对的特征序列。
如果参考荧光基因产生的荧光信号与检测荧光基因的检测序列匹配,那么检测荧光基因也会被激活,产生荧光信号传递到检测荧光信号探测器。
这时,两个荧光报告基因产生的信号就会被比较,从而实现双荧光素酶报告基因的功能。
单荧光素酶报告基因是一种利用荧光技术监测基因活性的技术。
其基本原理是,在一个多外显子基因的载体上,编码一个荧光报告基因,将其茧入指定的基因片段,使其发挥不同的功能,例如检测基因表达水平、检测基因变异等。
单荧光素酶报告基因由一个荧光报告基因组成,其中包括一个特定的模板序列和一个感兴趣序列。
模板序列由单荧光素酶报告基因敲入DNA 中,能够准确地定位感兴趣序列,使其与检测序列特征相匹配,从而实现特定的功能。
当荧光报告基因成功敲入到DNA序列中时,它将引发激活,从而产生荧光蛋白质,从而向检测器传递荧光信号,从而实现单荧光素酶报告基因的功能。
此外,双荧光素酶报告基因和单荧光素酶报告基因都有其自身的优点和缺点。
双荧光素酶报告基因可以同时监测两个样本的变化情况,它的灵敏度更高,而且可以检测更广泛的基因表达情况,但是它也受受到一些偏差的影响,如果参考荧光基因和检测荧光基因的敏感度不同,就可能产生误差。
荧光素酶报告基因实验的用途

荧光素酶报告基因实验的用途
荧光素酶报告基因实验是一种常用的生物技术实验,其用途主要有两个方面。
一、检测基因转录活性
荧光素酶报告基因实验可以用来检测基因的转录活性,即某一特定基因在细胞中是否被转录成RNA。
实验中,将荧光素酶基因与待测基因的启动子序列连接,构建成荧光素酶报告基因,然后将其转染到细胞中。
若待测基因的启动子序列在该细胞中被活化,则会促使荧光素酶基因转录成mRNA,再进一步转化成荧光素酶,从而发出荧光信号。
通过测量荧光信号的强度,可以判断待测基因的转录活性。
二、筛选基因调控剂
荧光素酶报告基因实验还可以用来筛选基因调控剂,即寻找能够调节某一特定基因转录活性的化合物。
实验中,将荧光素酶基因与待测基因的启动子序列连接,构建成荧光素酶报告基因,然后将其转染到细胞中。
接着,将待测化合物加入细胞培养基中,观察荧光信号的变化。
若待测化合物能够促进或抑制待测基因的转录活性,则会对荧光信号产生影响。
通过比较不同化合物对荧光信号的影响,可以筛选出能够调节待测基因转录活性的化合物。
总之,荧光素酶报告基因实验是一种重要的生物技术实验,可用于检测基因转录活性和筛选基因调控剂,具有广泛的应用前景。
荧光素酶报告基因实验

荧光素酶报告基因实验荧光素酶报告基因实验是一种常见的分子生物学实验方法,用于研究基因表达、转录调控以及蛋白质相互作用等生物学过程。
荧光素酶(Luciferase)是一种能够产生荧光的酶,通过将其与感兴趣的基因或启动子相连,可以实现对基因表达水平的定量检测。
本文将介绍荧光素酶报告基因实验的基本原理、操作步骤以及实验注意事项。
首先,进行荧光素酶报告基因实验前,需要准备好所需的材料和试剂,包括质粒载体、荧光素酶底物、细胞培养基、转染试剂等。
在实验操作前,务必保证实验室操作台面和仪器设备的清洁,并采取严格的无菌操作措施,以确保实验结果的准确性和可重复性。
其次,进行荧光素酶报告基因实验的关键步骤包括转染细胞、添加荧光素酶底物、测定荧光强度等。
在转染细胞时,需要根据实验设计选择合适的转染试剂和转染时间,确保目标基因能够高效地表达。
添加荧光素酶底物后,需根据实验要求选择合适的底物浓度和反应时间,以获取准确的荧光素酶活性数据。
在测定荧光强度时,可以利用荧光素酶底物产生的荧光信号进行定量检测,从而分析基因表达水平的变化。
在进行荧光素酶报告基因实验时,需要注意一些实验技巧和注意事项。
首先,要严格控制实验条件的一致性,包括细胞的密度、培养基的配制、荧光素酶底物的处理等,以减小实验误差。
其次,需要选择合适的阳性对照和阴性对照,以验证实验结果的可靠性和准确性。
最后,要及时记录实验数据并进行统计分析,以得出科学可靠的结论。
综上所述,荧光素酶报告基因实验是一种重要的分子生物学实验方法,可用于研究基因表达调控、信号转导通路等生物学过程。
通过掌握实验原理、操作步骤和注意事项,可以有效开展荧光素酶报告基因实验,并获取可靠的实验数据。
希望本文的介绍能够对科研工作者在进行荧光素酶报告基因实验时有所帮助。
荧光素酶报告基因实验原理

荧光素酶报告基因实验原理一、引言荧光素酶报告基因实验是一种常用的分子生物学技术,它可以用来研究基因的表达情况。
本报告将介绍荧光素酶报告基因实验的原理、步骤、优缺点以及应用。
二、原理荧光素酶(luciferase)是一种能够将化学能转化为光能的酶,它可以与荧光素底物发生反应,产生强烈的荧光信号。
在荧光素酶报告基因实验中,将荧光素酶基因与感兴趣的基因连在一起,构建成一个重组质粒。
当这个重组质粒被转染到细胞中时,只有在目标基因表达时才会产生荧光信号。
通过测量荧光信号的强度,可以间接地反映目标基因的表达水平。
三、步骤1.构建重组质粒:将荧光素酶基因和感兴趣的基因连接起来,并插入适当的启动子和终止子序列。
2.转染到细胞中:将构建好的重组质粒导入到感兴趣的细胞中,可以使用化学法、电转染法或病毒载体等方法。
3.添加底物:将荧光素底物注入到细胞培养基中,观察产生的荧光信号。
4.测量荧光强度:通过荧光显微镜或流式细胞术等技术测量荧光信号的强度,从而间接反映目标基因的表达水平。
四、优缺点优点:1.高灵敏度:荧光素酶报告基因实验可以检测非常低水平的基因表达。
2.高特异性:只有在目标基因表达时才会产生荧光信号,不会被其他非目标基因影响。
3.实时性:可以在活细胞中进行检测,观察动态变化。
缺点:1.需要构建重组质粒:需要进行DNA重组技术,操作复杂。
2.需要添加底物:需要购买和添加特定的底物,成本较高。
3.受到细胞状态和环境影响:细胞状态和环境对实验结果有一定影响。
五、应用1.研究基因调控机制:通过构建不同启动子或转录因子的荧光素酶报告基因,可以研究基因调控机制。
2.筛选药物:可以使用荧光素酶报告基因实验来筛选和评估药物的效果。
3.检测生物污染:可以将荧光素酶基因插入到细菌或病毒中,用于检测生物污染。
六、结论荧光素酶报告基因实验是一种常用的分子生物学技术,具有高灵敏度、高特异性和实时性等优点。
它可以用于研究基因调控机制、筛选药物和检测生物污染等领域。
荧光素酶报告基因实验原理和应用

荧光素酶报告基因实验原理和应用全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:荧光素酶报告基因实验是一种常用的分子生物学技术,它利用荧光素酶报告基因发出的荧光信号来研究基因表达、蛋白质定位、蛋白质相互作用等生物学过程。
本文将介绍荧光素酶报告基因实验的原理和应用,希望能给大家带来一些帮助。
一、荧光素酶报告基因实验原理1. 荧光素酶原理荧光素酶是一种能产生荧光的酶,它将荧光素底物转化为产生荧光信号的产物。
在荧光素底物存在的情况下,荧光素酶会催化底物的化学反应,使其产生荧光信号。
这种荧光信号可以通过荧光显微镜或荧光分光光度计等仪器来检测和观察。
2. 报告基因原理报告基因是一种在转基因实验中用来标记或研究的基因,它通常被组合到研究对象的基因中,以便通过表型或功能来研究目标基因的表达和功能。
荧光素酶报告基因实验中常用的报告基因包括荧光素酶、绿色荧光蛋白等。
3. 实验原理荧光素酶报告基因实验的原理很简单,即将荧光素酶报告基因和感兴趣的基因进行连接,转染到细胞中。
当目标基因表达时,荧光素酶报告基因也会一同表达,产生荧光信号。
通过检测荧光信号的强度和分布,可以研究目标基因在细胞中的表达水平和定位情况。
1. 基因表达研究荧光素酶报告基因实验广泛应用于基因表达研究中。
通过将荧光素酶报告基因与感兴趣的基因连接,研究人员可以快速准确地检测目标基因的表达水平和调控机制,进而了解基因的功能和作用。
2. 蛋白质定位研究荧光素酶报告基因实验还可用于研究蛋白质在细胞中的定位情况。
通过将荧光素酶报告基因与感兴趣的蛋白质连接,研究人员可以观察蛋白质在细胞内的分布和迁移情况,揭示蛋白质的功能和相互作用。
3. 药物筛选荧光素酶报告基因实验还可用于药物筛选和评价。
研究人员可以利用该技术评估药物对特定基因或蛋白质的影响,以此来筛选出具有潜在治疗效果的药物,为新药研发提供帮助。
通过荧光素酶报告基因实验,我们不仅可以更深入地了解基因和蛋白质的功能和作用机制,还可以为疾病治疗和新药研发提供重要参考。
荧光素酶报告基因

荧光素酶报告基因荧光素酶报告基因是一种常用的生物标记物,广泛应用于分子生物学和细胞生物学领域。
它能够通过荧光素酶的催化作用,将底物荧光素氧化成发光产物,从而实现对特定基因的检测和表达分析。
荧光素酶报告基因的应用不仅提高了基因检测的灵敏度和准确性,还为研究人员提供了一种简便、快速、高效的基因表达分析方法。
在实验室研究中,荧光素酶报告基因常被用于分析基因的启动子活性、转录水平和蛋白质结合活性。
通过将荧光素酶报告基因与感兴趣的基因或启动子连接,研究人员可以利用其发光信号来监测特定基因的表达情况。
这种非破坏性的检测方法不仅避免了对样本的破坏,还能够实现实时、动态的监测,为基因表达调控研究提供了有力的工具。
除了在基础科学研究中的应用,荧光素酶报告基因还被广泛应用于生物医学领域。
在药物研发和药效评价中,荧光素酶报告基因可以用来筛选潜在的药物靶点和评价药物的活性。
通过构建荧光素酶报告基因的转基因小鼠模型,研究人员可以实现对药物代谢、毒性和药效的实时监测,从而加速新药的研发过程。
此外,荧光素酶报告基因还被应用于基因敲除和基因编辑技术中。
通过将荧光素酶报告基因与CRISPR/Cas9等基因编辑工具相结合,研究人员可以实现对特定基因的精准编辑和修复。
荧光素酶报告基因的高灵敏度和高特异性,为基因编辑技术的研究和应用提供了重要的技术支持。
总的来说,荧光素酶报告基因作为一种重要的生物标记物,在生命科学研究和生物医学应用中发挥着重要作用。
它不仅为基因表达分析提供了一种简便、快速、高效的方法,还为药物研发、基因编辑和基因治疗等领域提供了重要的技术支持。
随着生物技术的不断发展和完善,相信荧光素酶报告基因在未来会有更广泛的应用前景。
荧光素酶报告基因检测

荧光素酶报告基因检测荧光素酶报告基因检测是一种常用的生物学实验技术,它利用荧光素酶作为报告基因,通过检测其活性来研究目标基因的表达情况。
荧光素酶报告基因检测技术具有灵敏度高、操作简便、结果快速等优点,在分子生物学研究和生物医学领域得到了广泛的应用。
荧光素酶报告基因检测的原理是利用荧光素酶与其底物荧光素结合产生荧光反应,从而实现对目标基因表达的定量和定性检测。
在实验操作中,首先需要构建含有荧光素酶报告基因的表达载体,然后转染至目标细胞中。
随后添加荧光素底物,荧光素酶与底物结合产生荧光信号,通过荧光测定仪器检测荧光强度,从而反映目标基因在细胞中的表达水平。
荧光素酶报告基因检测技术在基因表达调控、信号转导、蛋白质相互作用等方面发挥着重要作用。
通过该技术可以实现对基因表达水平的定量检测,进而研究基因的调控机制和功能。
在药物筛选、基因治疗、疾病诊断等领域,荧光素酶报告基因检测也被广泛应用,为生物医学研究和临床诊断提供了重要的实验手段。
荧光素酶报告基因检测技术的发展不断推动着生物学研究的进步,但在实验操作中也需要注意一些关键问题。
例如,合理设计实验方案、选择合适的表达载体、优化转染条件等,都会对实验结果产生重要影响。
因此,在进行荧光素酶报告基因检测时,需要充分了解该技术的原理和操作要点,严格按照操作规程进行实验操作,确保获得准确可靠的实验结果。
总的来说,荧光素酶报告基因检测技术作为一种重要的生物学实验技术,具有广泛的应用前景和重要的科学研究意义。
通过对目标基因表达水平的检测和分析,可以深入了解基因调控机制、信号转导途径等生物学问题,为生命科学领域的研究提供有力支持。
随着生物技术的不断发展和完善,相信荧光素酶报告基因检测技术在未来会发挥更加重要的作用,为人类健康和生命科学研究做出更大贡献。
植物双荧光素酶报告基因实验步骤

植物双荧光素酶报告基因实验步骤植物双荧光素酶报告基因实验是一种常用的遗传工程技术,用于研究植物生长和发育过程中的基因表达。
本文将介绍植物双荧光素酶报告基因实验的步骤,包括实验材料的准备、实验过程和数据分析。
希望通过本文的介绍,读者能够了解植物双荧光素酶报告基因实验的基本原理和操作步骤,从而在实验中取得良好的结果。
实验材料的准备1.植物基因表达载体:选择适合植物的基因表达载体,通常是含有CaMV 35S启动子的质粒载体。
2.双荧光素酶基因:选择适合植物的双荧光素酶基因,通常是含有GFP和RFP标记的基因。
3.植物材料:选择要进行基因表达研究的植物材料,通常是拟南芥或番茄等模式植物。
4.转化试剂:选择合适的转化试剂,例如农杆菌或利用基因枪进行转化。
实验过程1.构建双荧光素酶报告基因表达载体:首先将选择的双荧光素酶基因插入到基因表达载体中,通常采用限制酶切和连接酶切方法进行构建。
2.转化植物细胞:将构建好的基因表达载体转化到植物细胞中,可以采用农杆菌介导的转化方法或利用基因枪进行转化。
3.筛选转化植株:筛选转化后的植株,通常通过抗生素筛选或基因标记筛选的方法确定转化植株。
4.观察基因表达:观察转化植株中双荧光素酶基因的表达情况,通常通过荧光显微镜观察GFP和RFP的荧光表达情况。
5.分析基因表达:对双荧光素酶基因的表达进行定量分析,通过荧光素酶酶活性测定或荧光强度测定等方法进行分析。
数据分析1.统计分析:对实验得到的数据进行统计分析,包括双荧光素酶基因的表达比例、荧光强度等指标进行统计。
2.图表分析:将统计分析的结果用图表的形式进行展示,包括柱状图、折线图等形式,直观地展示基因表达的情况。
3.结果解读:根据统计分析和图表分析的结果,对双荧光素酶基因在植物中的表达情况进行解读,探讨其在植物生长和发育过程中的作用。
通过以上步骤,可以完成植物双荧光素酶报告基因实验,研究植物生长和发育过程中的基因表达情况,为了解植物生物学和遗传学提供重要的实验数据。
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第一代
pRL-null pRL-TK pRL-SV40 pRL-CMV
Renilla 萤光素酶载体系列
MCS 内含子 hRL 基因 SV40 晚poly(A)
phRL-null
HSV TK 启动子
T7 启动子
phRL-TK
CMV即时早期增强子/启动子
phRL-CMV
SV40 早期 增强子/启动子
phRL-SV40
• Dual-Luciferase® 双萤光素酶报告基因系统( 非均质检测)
– E1910,100次 – E1960,E1980,1000次
• Dual-GloTM 萤光素酶检测系统 (均质检测)
– E2920,10ml – E2940,100ml – EE2980,10X100ml
均质检测与非均质检测
1 2 3
处理A
5,128 7,553 10,555 7,745
2,511 3,815 5,413 3,913
1.98
1.00
1 2 3
处理B
5,1376 4,467 40,712 3,574 88,787 7,654 6,0292 5,232 587,635 988,347 409,881 661,954 5,144 8,832 3,564 5,847
pGL3-Enhancer Map
pGL3-Promoter Map
内对照载体可能存在的问题
辅助报告基因的相对萤光单位 (RLU)
启动子交叉交谈或互相干扰 实验刺激给辅助报告基因的不必要的调节
•
•
•
载体 - 海肾萤光素酶报告基因载体
第二代
phRL-null phRL-TK phRL-TK (int-) phRL-SV40 phRL-CMV phRG-B phRG-TK
荧光计(Fluorometer)
液闪仪(Scintilation Counter) 电荷耦合装置光学成像系统 (CCD opitical imaging system)
荧光显微镜
各种报告基因的优点和缺点
报告基因 萤光素酶 优点
•优越的灵敏度 –高信号值 –无内源活性
•灵敏度好
缺点
•需要底物
ß-gal
• 检测系统
– 非均质双报告基因检测系统(通量较低) – 均质的双报告基因检测系统(适合高通量,自动化)
载体 - 萤火虫萤光素酶载体
•pGL3 家族
pGL3-Basic pGL3-Control pGL3-Enhancer pGL3-Promoter
pGL3-Basic Map
pGL3-Control Map
• 线形范围广 (在10-16 M(10pg/L)至10-8 M(1mg/L)范围内,光 强度与萤光素酶浓度成正比) • 一般比显微镜检测的荧光更灵敏 (对多孔板而言) • 生物萤光比荧光更稳定,因为自然界进化的酶能保护光子发 射器 • 通过基因工程可以延伸生物萤光的性能和能力
萤光素酶报告基因的使用
Selective quench of firefly luminescence
Dual-Glo™萤光素酶检测系统
试剂盒组成 • • • • Dual-Glo™萤光素酶缓冲液 Dual-Glo™萤光素酶底物(冻干粉) Dual-Glo™Stop-Glo®缓冲液 Dual-Glo™Stop-Glo®底物
Passive lysis buffer
Stop&Glo Reagent
DLRTM For HTS
DLR™双报告基因检测系统应用举例
α-黑色素刺激激素(α-MSH)对由人酪氨酸酶启动子/增 强子控制的萤光素酶的表达的诱导(Promega eNotes)
• 目的:监测细胞对α-MSH诱导的应答 • 材料: 实验载体:pGL3-Try14A:人酪氨酸酶启动子/增强子+Luc(+) 阳性对照:pGL3-Control 阴性对照:pGL3-Basic 内对照:pRL-SV40 B16-F1细胞(鼠黑素瘤细胞系CRL-6323) DLR ™双萤光素酶检测试剂盒
• 不能同时对在一个管中组合了萤光素酶和CAT,或Gal ,的两个报告基因的检测都灵敏而快速.
双萤光素酶报告基因系统比用CAT和ß-Gal做内对照 的优点
• 速度
– 样品不需预处理,不需孵育。两次检测在几秒种内 完成
• 灵敏
– 两个萤光素酶的线性范围超过7个酶浓度数量级。内 源萤光素酶背景极低
• 方便
• 裂解细胞
– 被动裂解
• 除去培养基..PBS洗..加1XPLB, 振荡15分钟..检测
– 主动裂解
• 除去培养基..PBS洗..在1XPLB中刮下细胞..细胞转移到试 管或小瓶中..1-2次冻融..检测
• 检测
双萤光素酶检测方案
1 支试管 2 步检测 30 秒钟
Luciferase Assay Reagent II
•自发萤光低于检测水平
Dual-Glo Assay: 同一样品中检测两种萤光信号
Cells in culture medium
Primary reporter: Firefly bioluminescence Add firefly assay reagent Secondary reporter: Renilla bioluminescence Add combination firefly quench reagent & Renilla assay reagent
– 一管完成检测,样品不必分份
用两个萤光素酶做报告基因 (萤火虫+海肾)
实验质粒
萤火虫萤光素酶
对照质粒
海肾萤光素酶
用海肾萤光素酶作对照归一实验变化
归一反应 = 实验的 (萤火虫萤光素酶) 对照的(海肾萤光素酶)
数据处理举例
第一天 样品处理重复 对照 F 萤光素酶活性(RLU) R 比率 (F:R) 归一的活性 变化倍数
•细菌,血清等内源活性高 •需要底物
GUS(葡糖醛酸糖 苷酶)
•灵敏度好 •植物中内源活性低
• 90% 的 E.coli, 人/动物细胞中 有内源活性 •酶的扩散可引起 “过度报告” •需要底物
•在 HeLa , 癌 和其它细胞类型 中有高的内源活性 •需要底物 •放射性的 •灵敏度底 •50h半衰期 •背景可能高 •折叠 “情形” 可导致信号差别
Firefly Renilla
为什么要使用双报告基因
报告基因 A (首要信号)
报告基因 B (第二信号)
特异生物学反馈 + 非特异生物学反馈
非特异生物学反馈 检测结果
比较首要与第二信号确定 特异生物学反馈
传统的双报告基因的缺点
• 细胞可能有内源脱乙酰基酶 -Gal 或 GUS 活性. • CAT, -Gal 和 GUS 检测是终点检测.
Δ活性倍数
11.52 5.82
1 2 3
第二天 对照
(F/R)样品
=
113.21 57.18
F/R)对照
1 2 •
处理C
15,529 20,433 21,897 30,841 10,760 13,620 16,062 21,631 850,239 578,951 943,873 791,021 20,843 14,830 21,788 19,154
Renilla 萤光素酶载体系列
TK 启动子 hRL 基因 SV40 晚 poly(A)
phRL-TK(Int-)
三个读码框的 终止密码子
MCS
phRG-B
合成 poly(A) 信号 转录停止位点
三个读码框的 终止密码子
TK 启动子
phRG-TK
合成 poly(A) 信号 转录停止位点
用萤火虫和海肾两个萤光素酶做报告基因
SEAP(分泌性碱 性磷酸酶) CAT(氯霉素转乙 酰基酶) GFP(绿色荧光蛋 白)
•分泌性报告基因 (不需裂 解) -真核细胞没有背景表达 -易于使用 -设备现成(液闪仪,层析) •显微镜: 亚细胞定位 •不需底物
萤光素酶报告基因的主要优点
• • • • 非放射性 检测快(比CAT等) 灵敏度高(可比CAT检测灵敏度高100倍) 半衰期短(在理想条件下,可检测到10-20 摩尔的萤光素酶 分子。在哺乳动物细胞中半衰期3小时,在植物细胞中半衰 期3.5小时。而CAT在哺乳动物细胞中的半衰期约50小时)
Report Smartly
-萤光素酶报告基因技术
自然界的萤光
发光真菌
发光节虫
发光海星
发光甲壳虫
自然界的萤光
发 光 鱼
发 光 甲 虫
自然界的萤光
萤 火 虫
报告基因的作用
• • • • • • 细胞信号转导途径 启动子/增强子 受体结合 病毒/细胞相互作用 转录因子 药物诱导Fluorescence
荧光
Fire
- Fluorescence
萤光
Worm
- Luminescence
萤光 (Bioluminescence)
荧光 (Fluorescence)
是化学发光(Chemilumi- nescence) 吸收来自光源的光,再发射 另一光子 的一种,激发能量来自化学反应
萤光发光计(Luminometer)
“碰撞启动子”:
1) 全序列:
Promoter
luc+
Light
2) 逐步缺失:
Promoter
luc+
Light
Promoter
luc+
Firefly and Renilla
萤火虫生物萤光的化学
萤光素 + ATP + O2
萤光素酶:
辅-底物:
萤光素酶