荧光基团 荧光寿命
荧光寿命_论文-自然科学论文
荧光寿命荧光寿命（ FLT）检测摘要这个技术手册介绍了荧光寿命（ FLT）这种新技术的基本原理。
从这本技术手册里，我们可以简单的了解与这项技术相关的理论基础和与之配合的实验条件，以及通过一项应用实例讨论了如何对实验中所获得的数据进行解析和归类的方法。
•微孔板技术在高通量筛选中的价值使用者利用一个 marker或者是标记物受光激发后，通过一台普通的微孔板阅读器，就可以监测生化和生物反应进程。
常用的读取模式包括检测吸收光，荧光强度(FI)，荧光偏振（FP），时间分辨荧光（TRF）。
一般没有方法能够包含所有可能的分析模式，如果达到这样的高分析程度，需要一个配套的方法能够覆盖尽可能宽的实验范围。
尽管如此，，还是会有一种方法被优选选择，通过它能够得到更可靠的数据，更高端的信息，以及迅速的读取数据。
荧光寿命被定义成荧光分析在回到基态之前驻留在激发态的时间。
荧光寿命对荧光标记物周围的微环境高度敏感。
当标记一个反应对，由于化学反应改变这个反应对的状态（例如在酶反应体系中）或者是发生了与其他结合伴侣的结合（例如受体 -配体的结合），将影响到上面所提到的微环境。
无论如何，检测荧光寿命将直接指示反应环境。
这类信号要远远强于通常会影响其它探测方法的干扰信号，因此它将为市场需求加入巨大的推动力。
Tecan Ultran Evolution detection platform已经融入了对荧光寿命的检测。
除了已经发展的各种检测方法以外，这项新技术使得Ultran Evolution技术平台具有更强的市场应用前景。
2.荧光寿命测定的原理用 Ultra Evolution测定荧光寿命采用的一种方法，称作时间关联的单光子计数（TCSPC）。
实验的基本流程显示在图1。
一个脉冲激光器重复激发样品。
调节激发脉冲的强度，使得对于任何一个脉冲，在探测器上只有一个光子被计数。
按照测量的激光脉冲和探测器感应之间的这段时间，将计数值引入已用荧光计数和时间绘制的柱状图。
荧光探针的合成及自由基检测研究要点
荧光探针的合成及自由基检测研究摘要荧光分析法在生物化学、医学、工业和化学研究中的应用与日俱增，其原因在于荧光分析法具有高灵敏度的优点，且荧光现象具有有利的时间表度。
由于物质分子结构不同，其所吸收光的波长和发射的荧光波长也不同，利用这一特性可以定性鉴别物质。
荧光探针技术是一种利用探针化合物的光物理和光化学特性，在分子水平上研究某些体系的物理、化学过程和检测某种特殊环境材料的结构及物理性质的方法。
该技术不仅可用于对某些体系的稳态性质进行研究，而且还可对某些体系的快速动态过程如对某种新物种的产生和衰变等进行监测。
这种技术具备极高的灵敏性和极宽的动态时间响应范围的基本特点。
羟基自由基(HO·)和超氧阴离子自由基(O2-·)是生物体内活性氧代谢产生的物质，当体内蓄积过量自由基时，它能损伤细胞，进而引起慢性疾病及衰老效应。
因此，近些年来人们为了预防这类疾病的发生，自由基的研究已逐渐成为热点。
而快速、灵敏和实用的自由基检测方法就显得十分重要。
荧光探针检测自由基具有操作简便、响应迅速、选择性高等多种优点，我们将着重研究一类苯并噻唑结构荧光探针的合成及其对超氧阴离子自由基(O2-·)的检测。
关键词：荧光探针，苯并噻唑，超氧阴离子自由基，自由基检测SYNTHESIS OF FLUORESCENT PROBES AND DETECTION OF FREE RADICALSABSTRACTApplications of fluorescence analysis method in biochemistry, medicine, industry and chemical research grow with each passing day, the reason is that fluorescence analysis method has the advantages of high sensitivity, and the flurescence phenomenon has a favorable time characterization. Since the molecular structure of different materials, the absorption wavelength and fluorescence wavelength of the emitted light is different, this feature can be characterized using differential substances. Fluorescent probe technology is a method using photophysical and photochemical properties for researching some systems’physical and chemical process at the molecular level and detecting a particular structure and physical property of the special environment material. This technology not only can be used for steady-state nature of certain system, but also can monitore fast dynamic processes of a certain system such as the production and decay of a new species. This technology has the basic characteristics of a high degree of sensitivity and very wide dynamic range response time. Hydroxyl radical(HO-·)and superoxide anion radical(O2-·) is a substance produced in vivo metabolism of reactive oxygen species. When the body accumulates excess free radicals that will damage cells thereby causing chronic diseases and aging effects. Thus, in recent years people in order to prevent the occurrence of such diseases, the study of free radicals has become a hot spot. And fast, sensitive and practical method for the detection is very important. Using the fluorescent probes for the detection of free radicals is a simple, quick response, high selectivity variety of advantages. We will focus on the study of a classof synthetic fluorescent probes of benzothiazole structure and detection of superoxide anion radical.Key words：Fluorescent probes, Benzothiazole, Superoxide anion radical, Detection of free radicals目录1 绪论 (1)1.1 引言 (1)1.2 荧光 (1)1.2.1 荧光的产生 (1)1.2.2 荧光探针结构特点 (2)1.2.3 荧光探针传感机理 (3)1.2.4 常见荧光团 (3)1.2.5 荧光探针的性能 (5)1.2.6 影响荧光探针性能的因素 (5)1.2.7 荧光淬灭 (5)1.3 自由基 (6)1.3.1 自由基的间接检测技术 (6)1.3.2 自由基的直接检测技术 (7)1.4 研究现状 (8)1.4.1 超氧化物歧化酶(SOD)的检测 (8)1.4.2 2-(2-吡啶)-苯并噻唑啉荧光探针 (8)1.4.3 PF-1和PNF-1 (8)1.4.4 香草醛缩苯胺 (8)1.4.5 Hydroethidine类荧光探针 (9)1.4.6 二(2,4-二硝基苯磺酰基)二氟荧光素 (9)1.5 选题背景和意义 (10)1.6 课题研究内容 (10)2 荧光探针的合成 (11)2.1 引言 (11)2.2 还原文献 (11)2.3 新探针合成 (11)2.3.1 2-(4-二甲氨基苯)-苯并噻唑 (11)2.3.2 2-(4-氰基苯)-苯并噻唑 (12)2.3.3 2-(苯)-苯并噻唑 (12)2.3.4 2-(4-甲基苯)-苯并噻唑 (12)2.3.5 2-(4-硝基苯)-苯并噻唑 (13)2.3.6 2-(水杨醛)-苯并噻唑 (13)2.4 合成小结 (14)2.5 实验药品及规格 (14)2.6 实验仪器及型号 (15)3 实验结果与讨论 (16)3.1 引言 (16)3.2 荧光性能测试 (16)3.2.1 荧光性能待测溶液配制 (16)3.2.2 荧光性能测试结果 (16)3.2.3 测试谱图 (17)3.3 1H NMR数据 (21)3.3.1 2-(2-吡啶)-苯并噻唑 (21)3.3.2 2-(4-二甲氨基苯)-苯并噻唑 (22)3.3.3 2-(4-氰基苯)-苯并噻唑 (23)3.3.4 2-(苯)-苯并噻唑 (24)3.3.5 2-(4-甲基苯)-苯并噻唑 (25)3.3.6 2-(水杨醛)-苯并噻唑 (25)3.3.7 2-(2-噻吩)-苯并噻唑 (26)3.4 反应条件控制及处理 (27)3.5 结论与展望 (27)参考文献 (28)致谢 (30)译文及原文 (31)1 绪论1.1 引言荧光分析法在生物化学、医学、工业和化学研究中的应用与日俱增, 其原因在于荧光分析法具有高灵敏度的优点, 且荧光现象具有有利的时间表度。
荧光寿命的认识 ppt课件
从下式可以得到F的粗略估计值(单位为秒)。 1/F≈104 max
在讨论寿命时，必须注意不要把寿命与跃迁时间混 淆起来。跃迁时间是跃迁频率的倒数，而寿命是指分 子在某种特定状态下存在的时间。
通过量测寿命，可以得到有关分子结构和动力学方 面的信息。
ppt课件
5
• 荧光寿命及其含义
• （1）假定一个无限窄的脉冲光(δ函数)激发n0个荧 光分子到其激发态,处于激发态的分子将通过辐射 或非辐射跃迁返回基态。假定两种衰减跃迁速率分
• 图中第二条曲线为样品的实测荧光衰减曲线N(tk) ,
实际上为L(tk)与脉冲响应函数I(t)的卷积，即N(tk)
= L(tk) ○I(t) (6)
ppt课件
10
• 第三条曲线是实测荧光强度衰减曲线的拟合 函数Nc(tk) 。利用解卷积的办法有可能得到 脉冲响应函数I(t) ,进而求得描述样品荧光衰 减本质的荧光寿命(τ)等有关参量。
荧光寿命(fluorescence lifetime)
当某种物质被一束激光激发后，该物质的分
子吸收能量后从基态跃迁到某一激发态上，再以
辐射跃迁的形式发出荧光回到基态。当去掉激发
光后，分子的荧光强度降到激发时的荧光最大强
度I0的1/e所需要的时间，称为荧光寿命，常用表 示。如荧光强度的衰减符合指数衰减的规律:
ppt课件
7
• 事实上当荧光物质被激发后有些激发态分子立即返 回基态,有的甚至可以延迟到5倍于荧光寿命时才返 回基态,这样就形成了实验测定的荧光强度衰减曲 线。由于实际体系的复杂性,荧光衰减往往要用多 指数或非指数衰减方程描述:
荧光寿命测定的现代方法与应用
荧光寿命测定的现代方法与应用房 喻 王 辉(陕西师范大学化学系 西安 710062)摘 要 介绍了时间相关单光子计数、相调制和频闪等三种现代荧光寿命测定方法的工作原理,指出了各种方法的优点和局限性;介绍了时间相关单光子计数实验数据的处理方法;概述了时间分辨荧光技术在化学和生命科学中的应用。
关键词 荧光寿命 单光子计数 相调制法 频闪技术Abstract The principles and characteristics of s ome of the m odern techniques,including time2correlated single2 photon counting(T CSPC),phase m odulation and strobe techniques,for fluorescence lifetime measurements have been briefly introduced.The advantages and disadvantages of each method have als o been pointed out.The comm on method used for the analysis of the fluorescence decay,taking T CSPC as an example,has been discussed in detail.On the basis of these introductions,the applications of time2res olved fluorescence techniques in chemical and biological re2 search have been overviewed.K ey w ords Fluorescence lifetime,T ime2correlated single photon counting,Phase m odulation methods,S trobe techniques荧光是分子吸收能量后其基态电子被激发到单线激发态后由第一单线激发态回到基态时所发生的,而荧光寿命是指分子在单线激发态所平均停留的时间。
荧光寿命的认识
寿命 是衰减常数k 的倒数。事实上，在 瞬间激发后的某个时 间，荧光强度达到最 大值，然后荧光强度 将按指数规律下降。 从最大荧光强度值后 任一强度值下降到其 1/e所需的时间都应 等于 。
分析采用非线性最小二乘曲线拟合方法, 迭代过程用Marquardt法。拟合初值可由 用户输入,也可对曲线粗略分析得到。如 对两种衰变成分的衰变曲线,先由曲线尾 部段进行单指数曲线拟合得到长寿命成分 参数,再由曲线前段进行双指数曲线拟合 得到(其中长寿命成分参数已得到)短寿命 成分参数。
二．研究荧光寿命的意义
从下式可以得到 F的粗略估计值(单位为秒)。
1/F≈104 max
在讨论寿命时，必须注意不要把寿命与跃迁时 间混淆起来。跃迁时间是跃迁频率的倒数，而 寿命是指分子在某种特定状态下存在的时间。
通过量测寿命，可以得到有关分子结构和动力 学方面的信息。
荧光寿命及其含义
假定一个无限窄的脉冲光(δ函数)激发n0个荧 光分子到其激发态,处于激发态的分子将通 过辐射或非辐射跃迁返回基态。假定两种衰 减跃迁速率分别为Γ和knr,则激发态衰减 速率可表示为dn(t)/dt=- (Γ+ knr) n(t) (1)
Zn3(PO4)2 存在α,β,和γ三种晶体结构对于这三 种磷光体,在α-ZPMG中没有红色长余辉现象,因为在 结构中不存在六配位Mn2+。相反,在β和γ-ZPMG中, 可以很清楚地观察到红色长余辉现象。采用254nm紫 外光激发5min后,立即测得磷光粉的余辉光谱如图6 所示。由图我们可以看出,β和γ-ZPMG中监测到宽 带峰与发射光谱中的峰位相同,均位于616nm,归属为 Mn2+的4T1g(4G) →6A1g(6S)跃迁。
荧光寿命的认识ppt课件
常数k可以用各种退激过程的速率常数之和来表示:
kkF+ki ki表示各种非辐射过程的衰减速率常数。
则总的寿命为:
1/k1/(kF+ ki)
4
由于吸收几率与发射几率有关， F与摩尔消光系数 max (单位为cm2mol-1或 (mol dm-3) -1cm-1)也密切相关。
13
• 研究荧光寿命的意义 • （3）除了直接应用之外,荧光寿命测定还是其它
时间分辨荧光技术的基础。例如基于荧光寿命 测定的荧光猝灭技术可以研究猝灭剂与荧光标 记物或探针相互靠近的难易,从而对所研究体系 中探针或标记物所处微环境的性质作出判断。
• （4）基于荧光寿命测定的时间分辨荧光光谱可 以用来研究激发态发生的分子内或分子间作用 以及作用发生的快慢。
荧光寿命(fluorescence lifetime)
当某种物质被一束激光激发后，该物质的分
子吸收能量后从基态跃迁到某一激发态上，再以
辐射跃迁的形式发出荧光回到基态。当去掉激发
光后，分子的荧光强度降到激发时的荧光最大强
度I0的1/e所需要的时间，称为荧光寿命，常用表 示。如荧光强度的衰减符合指数衰减的规律:
映了体系中荧光物种的多样性或存在状态的复杂性。
8
9
• 图中有三条曲线, 分别是实际测定强度衰减曲线 N(tk) 、仪器响应函数 L(tk)和拟合函数Nc(tk) 。
• 仪器响应函数也被称之为光源函数,实际工作中 以胶体SiO2为虚拟样品进行
• 测定,所得到的衰减曲线就是图中的L(tk) ,光源函数 表明了仪器能够测定的最短荧光寿命。
6
• 式中τ为荧光寿命。荧光强度正比于衰减的激发态分子 数,因此可将上式改写为:
荧光寿命的认识
荧光寿命在环境科学中的 应用拓展
利用荧光寿命对环境因素的敏 感性，开发基于荧光寿命的环 境监测技术，实现对环境污染 物的快速、灵敏检测。
跨学科合作与交流
加强荧光寿命研究领域的跨学 科合作与交流，推动荧光寿命 理论、技术和应用的创新发展 。
THANK YOU
感谢聆听
荧光寿命的认识
目
CONTENCT
录
• 荧光现象与荧光寿命基本概念 • 荧光寿命测量方法与技术 • 荧光寿命影响因素分析 • 荧光寿命在科学研究中的应用 • 荧光寿命测量实验设计与操作注意
事项 • 总结与展望
01
荧光现象与荧光寿命基本概念
荧光现象定义及产生原理
荧光现象定义
荧光现象是指某些物质在受到激发光照射后，能够吸收光能并发 出比激发光波长更长的可见光的现象。
光电材料
荧光寿命是研究光电材料性能的重要参数，可用 于评估材料的发光效率、载流子传输等性能。
3
荧光传感器
基于荧光寿命变化的荧光传感器具有高灵敏度、 高选择性等优点，可用于检测各种分析物，如离 子、分子、气体等。
05
荧光寿命测量实验设计与操作注意事项
实验设计思路及步骤
01
02
03
04
明确实验目的
荧光寿命测量可用于研究分子 结构、能量转移等过程，首先 需要明确实验的具体目的。
的程度也有所差异。
溶剂效应对荧光寿命影响
溶剂极性对荧光寿命的影响
溶剂的极性会影响荧光物质的激发态能量和稳定性，从而影响荧光寿命。一般来说，极性 溶剂会使荧光寿命变短。
溶剂粘度对荧光寿命的影响
溶剂的粘度会影响荧光分子在激发态时的旋转和振动，从而影响荧光寿命。粘度较大的溶 剂通常会使荧光寿命变长。
荧光寿命的认识 ppt
•τ= (Γ+ knr)- 1(4)
•也就是说荧光强度衰减到初始强度的1/e时所需要的
时间就是该荧光物种在测定条件下的荧光寿命。实际
上用荧光强度的对数对时间作图,直线斜率即为荧光
寿命倒数的负值。荧光寿命也可以理解为荧光物种在
-
7
• 事实上当荧光物质被激发后有些激发态分子立即返 回基态,有的甚至可以延迟到5倍于荧光寿命时才返 回基态,这样就形成了实验测定的荧光强度衰减曲 线。由于实际体系的复杂性,荧光衰减往往要用多 指数或非指数衰减方程描述:
的时间都应等于。
-
2
如果激发态分子只以发射荧光的方式丢失能量，则 荧光寿命与荧光发射速率的衰减常数成反比，荧光发射 速率即为单位时间中发射的光子数，因此有F 1/KF。 KF是发射速率衰减常数。
F表示荧光分子的固有荧光寿命，kF表示荧光发射 速率的衰减常数。
-
3
处于激发态的分子，除了通过发射荧光回到基态以外， 还会通过一些其它过程(如淬灭和能量转移)回到基态，其 结果是加快了激发态分子回到基态的过程(或称退激过程) ，结果是荧光寿命降低。
从下式可以得到F的粗略估计值(单位为秒)。 1/F≈104 max
在讨论寿命时，必须注意不要把寿命与跃迁时间混淆 起来。跃迁时间是跃迁频率的倒数，而寿命是指分子 在某种特定状态下存在的时间。
通过量测寿命，可以得到有关分子结构和动力学方面 的信息。
-
5
• 荧光寿命及其含义
• （1）假定一个无限窄的脉冲光(δ函数)激发n0个荧 光分子到其激发态,处于激发态的分子将通过辐射 或非辐射跃迁返回基态。假定两种衰减跃迁速率分 别为Γ和knr,则激发态衰减速率可表示为dn(t)/dt=-
ItI 0e-kt
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
荧光基团荧光寿命
荧光基团是指分子中具有荧光性的部分，它们在吸收光能时会发出荧光。
荧光寿命是指荧光基团从激发态回到基态所需的时间，通常以纳秒为单位。
荧光寿命可以用来研究分子的动力学行为和环境特征，例如荧光寿命的改变可以用来探测分子的聚集状态、离子强度和溶剂极性等。
同时，荧光寿命也是荧光成像技术中的一个重要参数，它可以用来提高成像的分辨率和对样品的识别能力。
因此，荧光基团的荧光寿命是研究生物学、化学和材料科学等领域中的重要问题之一。
- 1 -。