淀粉水解实验报告
化学淀粉水解实验报告

一、实验目的1. 了解淀粉水解的基本原理和实验方法。
2. 掌握淀粉水解过程中各阶段的特征和检验方法。
3. 熟悉淀粉水解实验的实验操作和数据处理。
二、实验原理淀粉是一种天然高分子碳水化合物,由大量葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键连接而成。
淀粉水解是指淀粉分子在酸、酶或碱等催化剂的作用下,逐步分解成糊精、麦芽糖和葡萄糖等低聚糖或单糖的过程。
本实验采用稀硫酸作为催化剂,加热条件下,淀粉分子在稀硫酸的作用下发生水解反应,生成葡萄糖。
通过观察溶液颜色变化、碘液反应和银镜反应等,判断淀粉水解的程度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:烧杯、试管、酒精灯、试管夹、滴管、玻璃棒、漏斗、蒸发皿、滤纸、锥形瓶等。
2. 试剂:淀粉、稀硫酸、氢氧化钠溶液、碘液、银氨溶液、新制氢氧化铜悬浊液、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 准备淀粉溶液:称取0.5g淀粉,加入50mL蒸馏水,搅拌均匀,备用。
2. 淀粉水解:取两个试管,分别标记为1号和2号。
在1号试管中加入5mL淀粉溶液,2号试管中加入5mL蒸馏水。
向1号试管中加入5mL 20%硫酸溶液,2号试管中加入5mL氢氧化钠溶液。
将两个试管放入水浴锅中,加热30分钟。
3. 碘液检验:待水解反应完成后,分别向1号和2号试管中加入几滴碘液,观察溶液颜色变化。
4. 银镜反应:取一个试管,加入1mL水解液,滴加几滴新制氢氧化铜悬浊液,加热煮沸。
观察试管内壁是否有银镜生成。
5. 水解液酸碱度调节:取一部分1号试管中的水解液,用氢氧化钠溶液中和至碱性。
6. 银氨溶液检验:取另一部分1号试管中的水解液,滴加几滴银氨溶液,观察溶液颜色变化。
五、实验结果与分析1. 碘液检验:1号试管中加入碘液后,溶液颜色由蓝变浅,说明淀粉发生了水解反应;2号试管中加入碘液后,溶液颜色保持蓝色,说明淀粉未发生水解。
2. 银镜反应:1号试管中加热煮沸后,试管内壁无银镜生成,说明水解液中的葡萄糖浓度较低;2号试管中加热煮沸后,试管内壁无银镜生成,说明淀粉未发生水解。
淀粉水解试验实验报告

一、实验目的1. 了解淀粉的结构和性质。
2. 掌握淀粉水解实验的基本原理和方法。
3. 学习利用碘液检测淀粉是否水解。
4. 探究不同条件对淀粉水解的影响。
二、实验原理淀粉是一种由葡萄糖分子组成的多糖,广泛存在于植物中。
淀粉在水解过程中,首先生成糊精,然后进一步水解生成麦芽糖,最终生成葡萄糖。
碘液与淀粉结合形成蓝色复合物,可以用来检测淀粉的存在。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 淀粉- 碘液- 20%硫酸- 10%氢氧化钠- 2%硫酸铜- 水- 试管- 烧杯- 酒精灯- 试管夹- 玻璃棒2. 实验仪器:- 酒精灯- 烧杯- 试管- 试管夹- 玻璃棒四、实验步骤1. 淀粉水解实验(1)取一只试管,加入0.5g淀粉和4ml水,作为对照组。
(2)取另一只试管,加入0.5g淀粉和4ml 20%硫酸溶液,作为实验组。
(3)将两只试管放入水浴锅中加热3-4分钟。
(4)取出试管,向对照组和实验组分别加入几滴碘液。
(5)观察并记录现象。
2. 检测淀粉水解产物(1)取一只试管,加入0.5g淀粉和4ml水,作为对照组。
(2)取另一只试管,加入0.5g淀粉和4ml 20%硫酸溶液,作为实验组。
(3)将两只试管放入水浴锅中加热3-4分钟。
(4)取出试管,向对照组和实验组分别加入几滴碘液。
(5)向实验组试管中加入10%氢氧化钠溶液,调节溶液pH值至9-10。
(6)取一只试管,加入3ml氢氧化钠溶液,滴入4滴2%硫酸铜溶液,立即有蓝色氢氧化铜沉淀生成。
(7)将实验组试管中的溶液倒入上述试管中,混合均匀后,加热煮沸。
(8)观察并记录溶液颜色的变化。
五、实验结果与分析1. 淀粉水解实验对照组试管中的溶液呈蓝色,说明淀粉未水解。
实验组试管中的溶液无明显颜色变化,说明淀粉在酸性条件下加热后发生了水解。
2. 检测淀粉水解产物在加热煮沸的过程中,溶液颜色由蓝色变为黄色,再变为绿色,最终变为红色,并生成红色沉淀。
这表明淀粉在酸性条件下水解生成了葡萄糖,葡萄糖与氢氧化铜反应生成了红色氧化亚铜沉淀。
淀粉水解实验报告

淀粉水解实验报告篇一:淀粉水解糖的制备淀粉水解糖的制备一实验目的:(1)通过实验,了解淀粉糊化及酶法制备淀粉糖浆的基本原理;(2)掌握淀粉酶解法制备淀粉糖浆的实验方法。
二实验原理水解淀粉为葡萄糖的方法有三种,即酸解法,酶解法,酶酸法及双酶法。
本实验采用的是双酶法将淀粉水解成葡萄糖。
首先利用的是α-淀粉酶将淀粉液化,转化为糊精及低聚糖,使淀粉可溶性增加;接着利用糖化酶将糊精及低聚糖进一步水解,转化为葡萄糖。
三实验器材1,实验材料玉米粉α—淀粉酶(2000u/g)糖化酶(50000 u/g)2,仪器设备恒温水浴槽真空泵抽滤纸及布氏漏斗四操作步骤50克淀粉置于400毫升烧杯中,加水100毫升,搅拌均匀,配成淀粉浆,用5% Na2CO3调节pH=—,加入1毫升5%CaCL2溶液,于90-95℃水浴上加热,并不断搅拌,淀粉浆由开始糊化直至完全成糊。
加入液化型α---淀粉酶1克,不断搅拌使其液化,并使温度保持在70℃。
然后将烧杯移至电炉加热到95℃至沸,灭活10分钟。
过滤,滤液冷却到55℃,加入糖化酶1克,调节pH=,于60-65℃恒温水浴中糖化3-4小时,即为淀粉糖浆,若要浓浆,可进一步浓缩。
称重篇二:实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定一、试验目的①掌握酸法制糖的工艺与方法;②掌握还原糖的测定方法。
二、酸水解制糖原理在淀粉酸水解过程中,有如下三种反应:在水解过程中,淀粉的颗粒结构被破坏,α--糖苷键及α--糖苷键在酸的催化下被切断,示踪同位素原子O18研究证明,H+先与H2O结合生成H3O +,H3O+能与糖苷键的氧原子结合生成不稳定化合物Ⅰ,随后C1-O键断裂生成C1正碳离子Ⅱ,H2O与具有正电荷的C1结合,再使C1失去H+,完成糖苷键的水解过程。
三、实验仪器7230型分光光度计、水浴锅或电炉、100mL量筒、100mL或50mL容量瓶9个、10mL与2mL移液管各1支、250mL 烧杯、250mL锥形瓶2个、布氏漏斗、真空泵、牛皮纸。
淀粉水解的实验报告

一、实验目的1. 掌握淀粉水解的基本原理和方法。
2. 了解淀粉水解过程中影响反应速率的因素。
3. 学会使用碘液检测淀粉是否完全水解。
二、实验原理淀粉是一种高分子碳水化合物,由大量的葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键连接而成。
在酸性条件下,淀粉分子可以被水解成糊精、麦芽糖和葡萄糖等低分子糖类。
本实验通过加热淀粉溶液,并加入稀硫酸作为催化剂,观察淀粉是否发生水解,并使用碘液检测水解程度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 淀粉- 稀硫酸(1mol/L)- 碘液- 水浴锅- 烧杯- 试管- 滴管2. 实验仪器:- 紫外可见分光光度计- 电子天平- 移液器四、实验步骤1. 配制淀粉溶液:称取0.5g淀粉,加入4ml蒸馏水,搅拌均匀,得到淀粉溶液。
2. 设置实验组:- 将淀粉溶液分为两组,分别标记为试管A和试管B。
- 在试管A中加入2ml稀硫酸,加热至80℃左右,保持5分钟。
- 在试管B中不加热,仅作为对照组。
3. 观察现象:- 在试管A和试管B中分别滴加几滴碘液,观察颜色变化。
4. 水解液处理:- 将试管A中的溶液冷却至室温,加入适量的氢氧化钠溶液,调节pH值至中性。
- 将试管A中的溶液过滤,得到水解液。
5. 水解液检测:- 使用紫外可见分光光度计测定水解液在特定波长下的吸光度值。
- 根据吸光度值计算水解液中葡萄糖的浓度。
6. 结果分析:- 比较试管A和试管B的碘液反应现象,分析淀粉是否发生水解。
- 根据水解液中葡萄糖的浓度,评估淀粉水解程度。
五、实验结果与分析1. 实验现象:- 试管A中滴加碘液后,溶液由蓝色变为无色,表明淀粉发生了水解。
- 试管B中滴加碘液后,溶液仍呈蓝色,表明淀粉未发生水解。
2. 结果分析:- 在酸性条件下,淀粉分子在加热过程中发生水解,生成葡萄糖等低分子糖类。
- 水解液的吸光度值与葡萄糖浓度成正比,通过测定吸光度值,可以评估淀粉水解程度。
六、实验结论1. 淀粉在酸性条件下,加热后可发生水解反应,生成葡萄糖等低分子糖类。
淀粉水解圈实验报告

一、实验目的1. 了解淀粉水解的基本原理和实验方法。
2. 掌握通过淀粉水解圈实验判断酶活性大小和酶反应条件的技巧。
3. 学习如何观察并记录实验现象,分析实验结果。
二、实验原理淀粉是一种由葡萄糖单元组成的多糖,在特定条件下,可以被淀粉酶水解成葡萄糖。
淀粉水解圈实验是利用淀粉酶催化淀粉水解,形成透明圈,从而判断酶活性大小和酶反应条件的一种方法。
三、实验材料1. 淀粉酶2. 淀粉3. 蒸馏水4. 碘液5. 玻璃棒6. 研钵7. 试管8. 烧杯9. 酒精灯10. 温度计四、实验步骤1. 将淀粉和蒸馏水按一定比例混合,配制成淀粉溶液。
2. 将淀粉溶液均匀涂抹在载玻片上,形成薄层。
3. 将淀粉酶滴加在淀粉溶液上,用玻璃棒轻轻搅拌,使淀粉酶均匀分布。
4. 将载玻片放入恒温箱中,设定适宜的温度,进行反应。
5. 反应结束后,用碘液滴加在淀粉溶液上,观察淀粉水解圈的形成。
6. 记录实验结果,分析酶活性大小和酶反应条件。
五、实验结果与分析1. 实验结果:- 在一定温度和pH条件下,淀粉酶能够催化淀粉水解,形成透明圈。
- 随着反应时间的延长,淀粉水解圈逐渐扩大。
- 不同酶活性条件下,淀粉水解圈的大小不同。
2. 分析:- 温度对淀粉酶活性有显著影响。
在一定温度范围内,淀粉酶活性随温度升高而增强。
当温度过高时,酶活性反而下降,甚至失活。
- pH值对淀粉酶活性也有显著影响。
在一定pH范围内,淀粉酶活性随pH值升高而增强。
当pH值过高或过低时,酶活性下降。
- 酶浓度对淀粉水解圈的大小有直接影响。
酶浓度越高,淀粉水解圈越大。
六、实验结论1. 淀粉酶能够催化淀粉水解,形成透明圈。
2. 温度、pH值和酶浓度对淀粉酶活性有显著影响。
3. 通过淀粉水解圈实验,可以判断酶活性大小和酶反应条件。
七、实验讨论1. 实验过程中,淀粉酶浓度、反应时间等因素对实验结果有何影响?2. 如何优化实验条件,提高淀粉水解圈的大小?3. 淀粉水解圈实验在食品、医药等领域有何应用?八、实验总结本次实验通过淀粉水解圈实验,成功掌握了酶催化淀粉水解的原理和方法。
淀粉的水解实验报告

一、实验目的1. 了解淀粉的水解原理和过程。
2. 掌握淀粉水解实验的操作步骤。
3. 通过实验验证淀粉在酸、碱催化下的水解反应。
4. 探究不同条件下淀粉水解速率的变化。
二、实验原理淀粉是一种天然高分子碳水化合物,主要由α-葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键连接而成。
在酸或碱的催化作用下,淀粉可以发生水解反应,生成糊精、麦芽糖和葡萄糖等低聚糖或单糖。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 淀粉- 稀硫酸- 氢氧化钠溶液- 碘溶液- 斐林试剂- 蒸馏水- 试管- 烧杯- 酒精灯- 试管夹- 温度计- pH计2. 实验仪器:- 电子天平- 磁力搅拌器- 移液器- 紫外可见分光光度计四、实验步骤1. 酸催化水解实验1.1 称取0.5g淀粉置于试管中,加入4ml蒸馏水溶解。
1.2 用移液器加入2ml 0.1mol/L稀硫酸,搅拌均匀。
1.3 将试管置于磁力搅拌器上,在45℃水浴中搅拌30分钟。
1.4 取出试管,用pH计测定溶液pH值,调节至中性。
1.5 加入几滴碘溶液,观察溶液颜色变化。
1.6 将溶液稀释至一定浓度,用紫外可见分光光度计测定溶液在特定波长下的吸光度。
2. 碱催化水解实验2.1 称取0.5g淀粉置于试管中,加入4ml蒸馏水溶解。
2.2 用移液器加入2ml 0.1mol/L氢氧化钠溶液,搅拌均匀。
2.3 将试管置于磁力搅拌器上,在45℃水浴中搅拌30分钟。
2.4 取出试管,用pH计测定溶液pH值,调节至中性。
2.5 加入几滴碘溶液,观察溶液颜色变化。
2.6 将溶液稀释至一定浓度,用紫外可见分光光度计测定溶液在特定波长下的吸光度。
3. 不同条件下淀粉水解速率的比较3.1 在不同温度(如30℃、40℃、50℃)下,分别进行酸催化和碱催化水解实验。
3.2 比较不同温度下淀粉水解速率的变化。
五、实验结果与分析1. 酸催化水解实验1.1 加入碘溶液后,溶液颜色由蓝黑色变为淡黄色,说明淀粉在酸催化下发生了水解反应。
淀粉水解实验报告

淀粉水解实验报告实验目的:本实验旨在探究淀粉在不同条件下的水解过程,了解淀粉分解为葡萄糖的化学反应,并观察和比较不同条件对淀粉水解的影响。
实验材料与设备:- 高粱淀粉- 水槽- 恒温槽(37°C)- 观察管- 酶制剂(淀粉酶)- 常数盘- 烧杯- 磁力搅拌器- 热水槽- 减压器- 稀盐酸- 碘液- 奶油纸实验方法:1. 准备淀粉酶溶液:在烧杯中取适量的淀粉酶,加入适量的稀盐酸并溶解。
2. 准备淀粉溶液:在观察管中取一定量的淀粉,加入恒温槽中的适量水,用磁力搅拌器搅拌均匀。
3. 设置实验组:将一部分淀粉溶液分别倒入不同观察管中,标记各观察管。
4. 分别加入淀粉酶溶液:将淀粉酶溶液分别加入实验组观察管中,注意时间。
5. 观察气泡产生情况:观察实验组观察管中是否产生气泡,并记录气泡产生的时间及情况。
6. 测定反应物的质量和浓度:取相同体积观察管,分别加入淀粉酶溶液和淀粉溶液,待一定时间后,用常数盘测定吸光度,并利用已知淀粉浓度的对照组进行比较。
7. 根据实验数据制作反应速率变化曲线,并分析、比较不同条件下的淀粉水解速率。
实验结果与分析:经过一段时间的观察,我们发现在加入淀粉酶溶液后,实验组观察管中开始产生气泡,说明淀粉开始水解为葡萄糖。
同时,通过测定实验组和对照组的吸光度,我们可以得到淀粉水解的速率。
对比不同条件下的淀粉水解速率,我们发现温度的影响是非常显著的。
在常温下(室温),水解速率相对较慢,而在恒温槽(37°C)中进行反应时,淀粉的水解速率则显著增强。
这是因为温度的升高可以提高淀粉酶的活性,加快化学反应速率。
此外,我们还发现淀粉的pH值对水解速率也有一定影响。
在酸性环境下,如加入了稀盐酸,淀粉的水解速率相对较快。
这是由于酸性环境可以促使淀粉酶的活性,有利于淀粉分解为葡萄糖。
综上所述,淀粉在不同条件下的水解速率受到温度和pH值的影响。
对于淀粉的加热水解,温度升高可以促进反应速率;而酸性环境则有利于淀粉的水解。
探究淀粉水解实验报告

一、实验目的1. 了解淀粉的水解原理和过程。
2. 掌握淀粉水解实验的操作步骤。
3. 探究不同条件对淀粉水解的影响。
二、实验原理淀粉是一种天然高分子碳水化合物,由许多葡萄糖分子通过α-1,4-糖苷键连接而成。
淀粉的水解是指淀粉分子在水的作用下,在酸、碱或酶的催化下,逐步断裂α-1,4-糖苷键,生成糊精、麦芽糖和葡萄糖等低聚糖和单糖的过程。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉、碘液、氢氧化钠溶液、硫酸、葡萄糖标准溶液、蒸馏水、烧杯、试管、酒精灯、玻璃棒、滴管、pH计等。
2. 实验仪器:分析天平、电子秤、恒温水浴锅、电热板、分光光度计等。
四、实验步骤1. 准备淀粉溶液:称取一定量的淀粉,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀,制成淀粉溶液。
2. 碘液检测:取少量淀粉溶液,滴加几滴碘液,观察溶液颜色变化,确认淀粉的存在。
3. 水解实验:(1)酸水解:取一定量的淀粉溶液,加入适量的硫酸,搅拌均匀,放入恒温水浴锅中加热,控制温度在60℃左右,反应时间为30分钟。
(2)碱水解:取一定量的淀粉溶液,加入适量的氢氧化钠溶液,搅拌均匀,放入恒温水浴锅中加热,控制温度在60℃左右,反应时间为30分钟。
(3)酶水解:取一定量的淀粉溶液,加入适量的淀粉酶,搅拌均匀,放入恒温水浴锅中加热,控制温度在37℃左右,反应时间为30分钟。
4. 水解产物检测:(1)碘液检测:取少量水解后的溶液,滴加几滴碘液,观察溶液颜色变化,判断淀粉是否完全水解。
(2)葡萄糖标准曲线绘制:取一定量的葡萄糖标准溶液,用蒸馏水稀释成不同浓度的溶液,用分光光度计测定吸光度,绘制葡萄糖标准曲线。
(3)水解产物测定:取少量水解后的溶液,用分光光度计测定吸光度,根据葡萄糖标准曲线计算水解产物的含量。
五、实验结果与分析1. 碘液检测:酸、碱、酶水解后的溶液均出现蓝色,说明淀粉未完全水解。
2. 葡萄糖标准曲线绘制:绘制出葡萄糖标准曲线。
3. 水解产物测定:(1)酸水解:根据葡萄糖标准曲线计算,水解产物含量为X mg。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
竭诚为您提供优质文档/双击可除
淀粉水解实验报告
篇一:淀粉水解糖的制备
淀粉水解糖的制备
一实验目的:
(1)通过实验,了解淀粉糊化及酶法制备淀粉糖浆的基本原理;
(2)掌握淀粉酶解法制备淀粉糖浆的实验方法。
二实验原理
水解淀粉为葡萄糖的方法有三种,即酸解法,酶解法,酶酸法及双酶法。
本实验采用的是双酶法将淀粉水解成葡萄糖。
首先利用的是α-淀粉酶将淀粉液化,转化为糊精及低聚糖,使淀粉可溶性增加;接着利用糖化酶将糊精及低聚糖进一步水解,转化为葡萄糖。
三实验器材
1,实验材料
玉米粉α—淀粉酶(2000u/g)糖化酶(50000u/g)2,仪器设备恒温水浴槽真空泵抽滤纸及布氏漏斗
四操作步骤
50克淀粉置于400毫升烧杯中,加水100毫升,搅拌均匀,配成淀粉浆,用5%na2co3调节ph=6.2—6.3,加入1毫升5%cacL2溶液,于90-95℃水浴上加热,并不断搅拌,淀粉浆由开始糊化直至完全成糊。
加入液化型α---淀粉酶1克,不断搅拌使其液化,并使温度保持在70℃。
然后将烧杯移至电炉加热到95℃至沸,灭活10分钟。
过滤,滤液冷却到55℃,加入糖化酶1克,调节ph=4.5,于60-65℃恒温水浴中糖化3-4小时,即为淀粉糖浆,若要浓浆,可进一步浓缩。
称重
篇二:实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定
实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定
一、试验目的
①掌握酸法制糖的工艺与方法;②掌握还原糖的测定方法。
二、酸水解制糖原理
在淀粉酸水解过程中,有如下三种反应:
在水解过程中,淀粉的颗粒结构被破坏,α-(1,4)-糖苷键及α-(1,6)-糖苷键在酸的催化下被切断,示踪同位素原子o18研究证明,h+先与h2o结合生成h3o+,h3o +能与糖苷键的氧原子结合生成不稳定化合物Ⅰ,随后c1
-o键断裂生成c1正碳离子Ⅱ,h2o与具有正电荷的c1结合,再使c1失去h+,完成糖苷键的水解过程。
三、实验仪器
7230型分光光度计、水浴锅或电炉、100mL量筒、100mL 或50mL容量瓶9个、10mL与2mL移液管各1支、250mL烧杯、250mL锥形瓶2个、布氏漏斗、真空泵、牛皮纸。
四、实验试剂
淀粉(化学纯)、3,5-二硝基水杨酸(化学纯)、1%硫酸、氢氧化钠(分析纯)、酒石酸钾钠、苯酚(化学纯)、亚硫酸钠(na2so3)、葡萄糖(分析纯)、无水酒精、粉末caco3。
①配制Dns(3,5-二硝基水杨酸)试剂:取7.5克3,5-二硝基水杨酸,14.0g氢氧化钠,充分溶解于1000mL蒸馏水中。
再加入酒石酸钾钠216.0克,苯酚(在50℃水浴中融化)5mL,亚硫酸钠6.0克,完全溶解后盛于棕色瓶中。
②葡萄糖标准溶液(1g/L):准确称取干燥衡重的葡萄糖
1g,加1mL1%硫酸(防止微生物生长),以蒸馏水定容至1000mL。
③1%硫酸;④碘-碘化钾溶液四、实验步骤
(一)葡萄糖标准曲线的制定
1
②将各溶量瓶溶液混匀,在水浴锅或电炉上沸水浴5分钟,取出后立即用冷水冷却至室温,并加水定容,摇匀。
③于550nm处用分光光计测定吸光度A值,以葡萄糖浓
度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制葡萄糖标准曲线。
(二)还原糖的制备与测定①淀粉酸水解工艺
取淀粉5~10g,加入250mL锥形瓶,按照固液比1∶10加入1%硫酸,用牛皮纸封好口,在121~125℃水解30min,取出1、2滴置于白瓷板上,加1滴碘-碘化钾溶液直到不呈蓝色,即为水解终点。
冷却,然后用粉末caco3中和至ph
值4.5~5.0,减压过滤,得到含葡萄糖的样品溶液,测定其体积V0。
②还原糖的测定
平行取2.0mL待测样品2份(含糖量为0.2~2.0g/L),加入100mL或50mL容量瓶中,再加入3mLDns试剂,沸水浴5min,冷却至室温后,加水定容摇匀,于550nm处用分光光计测量吸光度A,根据标准葡萄糖液所得数据建立的标准曲线,测算待测试样的平均还原糖浓度,计算淀粉的转化率。
③淀粉的转化率计算
淀粉转化率=
原糖液体积V0(L)?原糖液葡萄糖含量(mg/L)
?100%
投入淀粉量(g)?1000?86%?1.11
注:使用此公式时,应注意测定过程中的稀释倍数
2
篇三:微生物生理生化反应实验报告
20XX年12月4日
姓名系年级20XX级生科2班组别四
科目微生物学实验题目微生物的生理生化反应
微生物的生理生化反应
一、【实验目的】
1.证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力
不同,从而说明不同微生物有着不同的酶系统。
2.掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。
3.了解糖发酵的原理和在肠细菌坚定中的重要作用。
4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
5.了解吲哚和甲基红试验的原理以及其在肠道细菌鉴
定中的意义和方法。
二、【实验仪器与试剂】
菌种:枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、普通变形杆菌、产气肠杆菌培养基:培养基:固体淀粉培养基、固体油脂培养基(大分子水解试验);葡萄糖发酵培养基、乳糖
发酵培养基(内装有倒置的德汉氏小管)(糖发酵试验);蛋白胨水培养基(吲哚试验);葡萄糖蛋白胨水培养基;
试剂:卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水、
仪器:酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、
量筒、德汉氏小管
三、【实验原理】
1.在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为
代谢,代谢过程主要是酶促反应过程,由于各种微生物具有不同的酶系统,所以他们能利用的底物不同,或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同,因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌,尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中,生理生化试验占有重要的地位。
2.淀粉的水解:由于微生物对淀粉这种大分子物质不能直接利用,必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用.胞外酶主要为水解酶,通过加水裂解大的物
质为较小的化合物,使其能被运输至细胞内.如淀粉酶水解
淀粉为小分子的糊精,双糖和单糖;而淀粉遇碘液会产生蓝色,因此能分泌胞外淀粉酶的微生物,则能利用其周围的淀粉,在淀粉培养基上培养用碘处理其菌落周围不呈蓝色,而是无色透明圈,据此可分辨微生物能否产生淀粉酶。
3.油脂的水解:在油脂培养基上接种细菌,培养一段时间后观察菌苔的颜色,若出现红色斑点,则说明此中菌可产生分解油脂的酶。
4.糖发酵试验:糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要.绝大多数细菌都能利
用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上
有很大的差异.有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸,
醋酸,丙酸等)和气体(如氢气,甲烷,二氧化碳等);有些细菌
只产酸不产气.例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气。
产酸后再加入溴甲酚指示剂后会使溶液呈黄色,且德汉氏小管中会收集到一部分气体。
若细菌不能使糖产酸产气,则最后溶液为指示剂的紫色,且德汉氏小管中无气体。
5.ImVc实验主要用于快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌。
(1)吲哚试验:是用来检测吲哚的产生,在蛋白胨培
养基中,若细菌能产生色氨酸酶,则可将蛋白
胨中的色氨酸分解为丙酮酸和吲哚,吲哚与对二甲基苯甲醛反应生成玫瑰色的玫瑰吲哚。
但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力,所以吲哚实验可以作为一个生物化学检测
的指标。
大肠杆菌吲哚反应阳性,产气肠杆菌为阴性。
(2)甲基红试验(mR):某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成丙酮酸,后者进而被分解产生甲酸,
乙酸和乳酸等多种有机酸,培养基就会变酸,使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色转变为红色,即甲基红反应。
大肠杆菌为阳性,产气肠杆菌为阴性。
四、【实验步骤】1.淀粉水解实验
(1)倒平板:按照淀粉培养基配方配制固体淀粉培养基,灭菌,待培养基冷却至50℃左右,在酒精。