叶绿素的提取实验报告
叶绿素提取纯化实验报告

一、实验目的1. 学习叶绿素的提取方法,掌握叶绿素提取纯化的基本原理和操作步骤。
2. 了解叶绿素在植物光合作用中的重要作用,以及叶绿素提取纯化在科研、食品、医药等领域的应用。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,存在于叶绿体的类囊体薄膜上。
叶绿素主要分为叶绿素a和叶绿素b,两者结构相似,仅分子中的镁离子被铁离子取代。
叶绿素提取纯化主要通过以下步骤:1. 提取:利用有机溶剂(如丙酮、乙醇等)溶解叶绿素,使叶绿素从植物组织中分离出来。
2. 离心:通过离心分离叶绿素提取液中的杂质,得到较纯的叶绿素。
3. 分离:采用层析技术(如纸层析、薄层层析等)将叶绿素与其他色素分离。
4. 纯化:通过重结晶、吸附等方法进一步纯化叶绿素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜、丙酮、无水乙醇、碳酸钙、滤纸、层析板、滤液、层析溶剂等。
2. 实验仪器:研钵、剪刀、离心机、层析缸、紫外灯、比色计等。
四、实验步骤1. 叶绿素提取(1)取新鲜菠菜叶片,洗净、擦干,去掉中脉剪碎。
(2)将剪碎的菠菜叶片放入研钵中,加入少量碳酸钙粉和丙酮,研磨至糊状。
(3)将研磨后的混合物转入离心管中,以3000r/min离心5分钟,取上清液。
2. 离心分离(1)将离心后的上清液转入另一离心管中,以4000r/min离心10分钟。
(2)取上清液,即为叶绿素提取液。
3. 叶绿素分离(1)取层析板,用铅笔标记起始线。
(2)用毛细管将叶绿素提取液点在起始线上,重复点样2-3次,待溶剂挥发后,再点样。
(3)将层析板放入层析缸中,加入适量层析溶剂,使溶剂面低于起始线。
(4)待层析溶剂上行至距离起始线约1cm时,取出层析板,晾干。
(5)用紫外灯照射层析板,观察叶绿素a和叶绿素b的分离情况。
4. 叶绿素纯化(1)将分离出的叶绿素a和叶绿素b分别用无水乙醇溶解。
(2)将溶液置于冰浴中,缓慢加入无水乙醇,使叶绿素沉淀。
(3)过滤沉淀,用无水乙醇洗涤沉淀,晾干。
叶绿素的提纯实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和性质。
2. 掌握叶绿素的提取和提纯方法。
3. 学习利用有机溶剂提取叶绿素,并通过色谱法进行分离和纯化。
二、实验原理叶绿素是绿色植物中进行光合作用的重要色素,主要由叶绿素a和叶绿素b组成。
叶绿素不溶于水,但可溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。
通过提取和提纯,可以得到高纯度的叶绿素,为进一步研究其性质和作用提供条件。
实验过程中,首先将植物叶片用有机溶剂提取叶绿素,然后通过层析法分离叶绿素和其他色素,最后收集纯化的叶绿素。
三、实验器材1. 新鲜植物叶片(如菠菜、青菜等)2. 研钵、研杵3. 乙醇、丙酮(分析纯)4. 层析柱、层析板5. 滤纸、脱脂棉6. 移液管、滴管7. 恒温水浴锅8. 显微镜9. 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 提取叶绿素(1)取新鲜植物叶片,用剪刀剪碎,放入研钵中。
(2)加入适量乙醇和丙酮(体积比1:1),研磨至匀浆。
(3)将匀浆倒入分液漏斗,静置分层。
(4)收集有机层,用无水硫酸钠干燥。
(5)过滤,得到叶绿素提取液。
2. 分离叶绿素(1)将层析板放入层析柱中,在底部铺一层脱脂棉。
(2)取适量叶绿素提取液,用移液管滴加于层析板上,确保液面低于层析板边缘。
(3)选择合适的溶剂系统,如正己烷-乙酸乙酯(体积比4:1)。
(4)将溶剂滴加于层析板上,观察层析过程,直至溶剂前沿到达预定位置。
(5)取出层析板,用铅笔标记层析结果。
3. 收集纯化叶绿素(1)用移液管收集叶绿素层,倒入小烧杯中。
(2)加入少量乙醇,搅拌均匀。
(3)用滤纸过滤,收集滤液。
(4)将滤液倒入蒸发皿中,用恒温水浴锅蒸干。
(5)用少量乙醇溶解残留物,得到纯化叶绿素。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取:通过有机溶剂提取,可以得到绿色叶片提取物,表明叶绿素已从植物叶片中提取出来。
2. 叶绿素分离:通过层析法,可以将叶绿素与其他色素分离,证明叶绿素具有独特的性质。
3. 叶绿素纯化:通过蒸发和溶解,可以得到纯化的叶绿素,说明实验过程中叶绿素得到了有效的纯化。
提取叶绿素的实验报告

提取叶绿素的实验报告探究叶绿素在光合作用中的重要性和功能。
实验材料:1. 叶绿体提取液:通过离心植物组织获得的液体。
2. 植物叶片:新鲜且健康的绿色植物叶片。
3. 75% 乙醇:用于提取叶绿素的有机溶剂。
4. 富含二氧化碳的水:提供光合作用所需的二氧化碳。
5. 无色试剂:用于检测叶绿素的存在。
实验步骤:1. 准备:将乙醇和富含二氧化碳的水分别倒入两个玻璃瓶中,并为每个瓶子准备一片植物叶片。
2. 反应前处理:将一片植物叶片放入乙醇玻璃瓶中,摇晃约1分钟,待叶绿素溶解入乙醇,使叶绿素变成绿色提取液。
3. 提取叶绿素:将叶绿体提取液缓慢倒入富含二氧化碳的水中,同时观察溶液颜色变化。
4. 观察结果:根据溶液颜色变化,可以得出叶绿素在光合作用中的功能。
实验结果:通过实验观察,溶液从橙黄色逐渐变成绿色,说明叶绿体提取液中的叶绿素受到光的作用后发生了变化。
这表明叶绿素在光合作用中起到了重要的作用。
实验讨论:叶绿素是一种存在于植物和某些浮游生物中的绿色色素,它是光合作用中的关键物质。
通过吸收光能,叶绿素能够将阳光转化为植物可用的化学能。
在光合作用中,叶绿素通过光合色素复合体吸收光能,并将其转化为电子能和激发态能。
这些能量在光合色素复合体中传递,最终用于合成葡萄糖等有机物质并释放出氧气。
实验中,通过将叶绿体提取液与富含二氧化碳的水混合,我们可以观察到溶液颜色的变化。
这一变化表明叶绿素受到光的激发后发生了变化。
光能激发了叶绿素分子中的电子,使其从基态跃迁到激发态。
随后,叶绿素分子中的电子通过光合色素复合体传递,最终用于光合作用的化学反应。
叶绿素的存在使植物能够进行光合作用,从而合成有机物质并释放出氧气。
光合作用是地球上生物圈中最重要的能量转换过程之一,它不仅为植物提供了能量,也为其他生物提供了能量来源。
叶绿素的作用不仅体现在能量转换上,还参与了光合作用的调节和保护等多个方面。
综上所述,叶绿素在光合作用中起到了重要的作用。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇实验报告一:菠菜中提取叶绿素的方法比较1.引言叶绿素是一种重要的植物色素,它在光合作用中承担着捕获光能和转化化学能的重要角色。
菠菜是叶绿素含量较高的植物之一,因此本实验旨在比较不同方法提取菠菜中的叶绿素,探索最有效的提取方式。
2.材料与方法2.1 材料:- 新鲜菠菜叶片- 无水乙醚- 丙酮- 高速离心机- 比色皿2.2 方法:- 方法一:无水乙醚提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的无水乙醚,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醚中,然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法二:丙酮提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的丙酮,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于丙酮中,然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法三:乙醇提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的乙醇,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醇中,然后离心10分钟收集上层液体。
3.结果在三种提取方法中,通过观察可以发现,方法一和方法二提取的叶绿素溶液呈现绿色,而方法三提取的叶绿素溶液呈现黄绿色。
利用分光光度计测定三个试管中叶绿素溶液的吸光度,发现方法一和方法二提取的叶绿素吸光度较高,而方法三的吸光度较低。
4.讨论方法一使用无水乙醚作为提取溶剂,乙醚能有效溶解叶绿素,并且在离心过程中上层液体的分离效果较好。
方法二使用丙酮作为提取溶剂,丙酮也能有效溶解叶绿素,并且丙酮相对于乙醚来说更易于购买。
方法三使用乙醇作为提取溶剂,乙醇对叶绿素的溶解能力较差,导致提取的叶绿素溶液吸光度较低。
5.结论通过对菠菜中提取叶绿素的实验比较,我们发现使用无水乙醚和丙酮作为提取溶剂的方法能够较好地提取菠菜中的叶绿素,并且吸光度较高。
因此,在菠菜中提取叶绿素的实验中,建议使用无水乙醚或丙酮作为提取溶剂。
实验报告二:叶绿素在光合作用中的作用研究1.引言叶绿素是植物体内最重要的色素之一,它在光合作用中起着关键作用。
本实验旨在研究叶绿素在光合作用中的功能和重要性。
关于叶绿素的实验报告

一、实验目的1. 了解叶绿素的提取方法;2. 掌握叶绿素的鉴定方法;3. 探究叶绿素在不同植物组织中的含量差异。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。
叶绿素易溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等,因此可用有机溶剂提取。
叶绿素在紫外光下呈现绿色荧光,可用于鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜、新鲜小麦、新鲜胡萝卜;2. 仪器:研钵、剪刀、漏斗、100ml三角瓶、酒精灯、紫外灯、比色皿、吸管、滴管、天平。
四、实验步骤1. 叶绿素提取:(1)将新鲜菠菜、小麦、胡萝卜分别洗净,剪碎;(2)将剪碎的植物材料放入研钵中,加入少量石英砂和碳酸钙;(3)加入2-3 mL 95%乙醇,研磨至糊状;(4)将研磨好的植物材料倒入100ml三角瓶中,过滤,收集滤液;(5)将滤液倒入比色皿中,用紫外灯照射,观察叶绿素荧光。
2. 叶绿素鉴定:(1)将提取的叶绿素溶液与已知浓度的叶绿素标准溶液进行比色;(2)记录吸光度值,计算叶绿素含量。
3. 叶绿素含量差异探究:(1)分别对菠菜、小麦、胡萝卜提取的叶绿素溶液进行比色;(2)记录吸光度值,计算叶绿素含量;(3)比较不同植物组织中叶绿素含量的差异。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取:实验成功提取了菠菜、小麦、胡萝卜中的叶绿素,且在紫外光下呈现绿色荧光。
2. 叶绿素鉴定:通过比色实验,确定提取的叶绿素溶液中叶绿素含量。
3. 叶绿素含量差异探究:实验结果表明,菠菜、小麦、胡萝卜中的叶绿素含量存在差异。
菠菜中叶绿素含量最高,小麦次之,胡萝卜最低。
六、实验结论1. 成功提取了菠菜、小麦、胡萝卜中的叶绿素;2. 掌握了叶绿素的鉴定方法;3. 不同植物组织中叶绿素含量存在差异,其中菠菜中叶绿素含量最高。
七、实验反思1. 实验过程中,要注意研磨充分,以确保叶绿素充分提取;2. 实验过程中,要注意操作规范,避免污染;3. 实验结果受多种因素影响,如植物品种、生长环境等,需进一步研究。
从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇从菠菜中提取叶绿素实验报告 (1)1.1 仪器与试剂仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240紫外分光光度计试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目~160目)1.2 提取与分离1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶,加入20 mL3:2(体积比)石油醚—乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。
洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。
弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。
1.2.2 薄层层析取四块显微载玻片,硅胶G经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°C活化1h。
选取效果最好的一块进行点样。
展开剂:(1)石油醚—丙酮=8:2(体积比)(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(体积比)取活化后的层析板,点样,放入预先选定展开剂的广口瓶。
瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入展开剂中,盖上瓶盖。
待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,晾干,做出标记。
分别用两种展开剂展开,比较不同展开剂的展开效果。
观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。
注意更换展开剂时,需干燥层析瓶,不允许前一种展开剂带入后一系统。
1.2.3 柱层析取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部。
在层析柱中加15cm石油醚。
加入中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中堆积。
装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面)。
将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面下降,几次反复,使色素全部进入柱体。
叶绿素提取实验报告

一、实验目的1. 学习叶绿素的提取方法。
2. 掌握有机溶剂在叶绿素提取中的应用。
3. 了解叶绿素在植物光合作用中的重要作用。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,主要包括叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素。
这些色素在水中不溶,但在有机溶剂(如乙醇、丙酮等)中溶解度较好。
本实验采用有机溶剂提取叶绿素,通过研磨、过滤等步骤,将叶绿素从植物组织中分离出来。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜植物叶片(如菠菜、青菜等)。
2. 仪器:研钵、剪刀、漏斗、烧杯、量筒、玻璃棒、酒精灯、滤纸、滤器、电热恒温水浴锅等。
四、实验步骤1. 取新鲜植物叶片1克,洗净、擦干,去掉中脉剪碎,放入研钵中。
2. 在研钵中加入少量石英砂和碳酸钙粉,再加入2-3 mL 95%乙醇。
3. 用研棒研磨至糊状,然后加入2-3 mL 95%乙醇,继续研磨。
4. 将研磨好的叶绿素提取液倒入烧杯中,用滤纸过滤,收集滤液。
5. 将滤液置于电热恒温水浴锅中,加热至60℃,继续搅拌30分钟,以加速叶绿素提取。
6. 取出烧杯,待其自然冷却至室温。
7. 用滤纸过滤提取液,收集滤液。
8. 将滤液置于冰箱中保存,以备后续实验。
五、实验结果与分析1. 实验结果:通过以上步骤,成功提取出叶绿素,提取液呈绿色。
2. 结果分析:叶绿素在有机溶剂中的溶解度较好,通过研磨、过滤等步骤,可以将其从植物组织中分离出来。
提取出的叶绿素溶液呈绿色,说明实验成功。
六、实验讨论1. 影响叶绿素提取的因素:提取溶剂的选择、研磨时间、温度等都会影响叶绿素的提取效果。
2. 叶绿素在植物光合作用中的作用:叶绿素能够吸收太阳光能,将其转化为化学能,为植物提供能量。
3. 本实验的优点:采用有机溶剂提取叶绿素,操作简便,提取效果较好。
七、实验结论通过本实验,成功提取出叶绿素,并了解了有机溶剂在叶绿素提取中的应用。
实验结果表明,叶绿素在植物光合作用中起着至关重要的作用。
八、实验注意事项1. 实验过程中,注意安全操作,防止有机溶剂溅入眼睛或皮肤。
叶绿素的提取、分离和测定

Ca=12.7OD663-2.69OD645 Cb=22.9OD645-4.68OD663 Ct=Ca+Cb=20.2D645+8.02D663
解方程式得
(二)步骤
称取0.5g叶片,剪碎后置于玻璃匀浆器中加纯丙酮5mL,研成匀浆,用80%丙酮10mL洗匀浆器,用80%丙酮定容到25mL,避光静置5min。用移液管吸取上面的绿色清液1mL置于一大试管中,加入丙酮4ml稀释,摇动试管,作测定用。
测量光密度值 取上述提取液以80%丙酮作为空白对照,于663及645nm下读取光密度值
计算结果代入公式求出各来自绿素的含量(单位mg/L)最后计算时需考虑稀释因子
叶绿素a含量(mg/g鲜重)=CA*5 *25*2/1000 =0.25CA
叶绿素b的含量(mg/g鲜重)=0.25CB
研钵、吸管、小烧杯、试管、培养皿等
01
95%酒精、石油醚
02
碳酸钙
03
(二)仪器和药品
(三)步骤
用天平称取15g鲜叶,剪碎放入研钵中,加少量的CaCO3粉末及95%酒精5-10mL研成糊状,再加95%酒精20mL,充分混匀以提取叶片匀浆中的色素,5-10分钟后,过滤入三角烧瓶中加塞待用。
取一张色层分析纸或定性滤纸代用,剪成圆形,直径应略大于培养皿的直径;将圆形滤纸平放在培养皿上,用滴管吸取叶绿素提取液,滴在滤纸的中心位置,稍干后,再重复操作几次;然后取另一滴管吸取石油醚,慢慢地推动叶绿素提取液,不久即可看到分离的各种色素的同心圆环,由内到外依次为:叶绿素a为蓝绿色、叶绿素b为黄绿色、叶黄素呈鲜黄色、胡萝卜素为橙黄色。
叶绿素a、b在长波方面的最大吸收峰分别为为663nm和645nm。
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一.实验目地
、学习从植物中提取色素地方法.
、学习柱色谱(层析)地原理及其操作方法.
、掌握天然药物化学实验报告地一般写法.
二.实验原理
、绿色植物叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素.各种色素能溶解在有机溶剂(无水乙醇等)中形成溶液,使色素从生物组织中脱离出来.文档来自于网络搜索
、柱色谱是通过色谱柱来实现分离地.在色谱柱内装有固体吸附剂(固定相)如氧化铝或硅胶.液体样品从柱顶加入,当液体流经吸附剂时,由于吸附剂表面对液体中各组分吸附能力不同而按一定地顺序吸附.然后从柱顶加入洗脱剂(流动相),样品中地各组分随洗脱剂按一定地顺序从色谱柱下端流出,根据不同颜色分段收集.吸附剂,常用吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁等.吸附剂对化合物地吸附能力与分子地极性有关,极性越强,吸附能力越大,分子中含有极性较大地基团,其吸附能力也越强.溶剂,溶剂分为溶解样品地溶剂和洗脱剂.选择溶剂时还要考虑到被分离物各组分地极性和溶解度.通常是先将要分离地样品溶于非极性溶剂中,从柱顶加入柱中.然后用稍大极性地溶剂使各组分在柱中形成若干谱带.再用极性更大地溶剂洗脱被吸附地物质.为了提高洗脱效果,有时也使用混合溶剂.在本实验中色素成分在不同比例混合洗脱剂地作用下可以分离出来.文档来自于网络搜索
三.实验仪器及试剂
仪器:烧杯、量筒、色谱柱、分液漏斗、玻璃棒、干燥地锥形瓶、滤纸、旋转蒸发仪、酸式滴定管、布氏漏斗、研钵、胶头滴管、剪刀、天平文档来自于网络搜索
试剂:新鲜植物叶、中性氧化铝、甲醇( %,分析纯) 、乙醇、石油醚( ~%) 、丙酮、无水硫酸钠、正丁醇、新鲜植物叶、文档来自于网络搜索
四.实验内容
. 绿叶色素地提取
把新鲜绿叶洗净晾干或用滤纸吸干,称取绿叶,剪碎后放入研钵,再加入乙醇.研磨后用布氏漏斗抽滤,弃去滤渣.文档来自于网络搜索
将滤液放回研钵,每次用(体积比)地石油醚甲醇混合液萃取两次,每次需加以研磨并且抽滤.把两次滤液合并,转入分液漏斗中.用水洗涤两次,弃去水甲醇层, 洗涤时要轻轻旋荡,以防止产生乳化.石油醚层转入干燥地锥形瓶中用无水硫酸钠干燥.干燥后地液体在旋转蒸发仪上蒸除石油醚至体积约左右.文档来自于网络搜索
.柱色谱分离色素
取一支干净地酸式滴定管,向柱内加入石油醚至柱高约处.再缓慢加入氧化铝,并打开活塞,控制流出速度约为滴,并保持液面不低于固定相.打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面溶剂剩下-高时关上活塞.注意,在任何情况下,氧化铝表面不得露出液面.文档来自于网络搜索
色素浓溶液用滴管小心加到色谱柱顶部,并要旋转加入.加完后打开下部活塞,让液面下降到柱面以下左右关闭活塞.旋转加入数滴石油醚,重新打开活塞使液面下降,重复几次使有色物质全部进入柱体内,待色素全部进入柱体后,观察并记录下此时实验地现象.在柱顶小心加洗脱剂—石油醚丙酮溶液(体积比).打开活塞,让洗脱剂逐滴放出,层析即开始进行,用试管收集.当第一个有色成分即将滴出时,取另一试管收集,得橙黄色溶液,它就是胡萝卜素.用石油醚丙酮(体积比)作洗脱剂,分出第二个黄色带,它是叶黄素().再用丁醇乙醇水(体积比)洗脱叶绿素(蓝绿色)和叶绿素(黄绿色).文档来自于网络搜索
五.实验结论与分析
、本次实验总共重复了三次,第一次采用地是蚕豆叶,提取地色素浓液很少所以色素带分层现象不明显;第二次采用地是野草地嫩叶,提取出来地主要是淡黄色地色素,叶绿素较少;第三次因为时间关系采用了少量地是莴苣叶比较前两次实验,很遗憾实验分层现象还是不明显.通过不同品种地原材料地选取,以及用量地多少对实验很关键,总地来说还是用适当地过量地绿叶较好,可以避免转移过程中地损失,而且绿叶最好是深绿色地肉质植物.文档来自于网络搜索
、研磨时加入适量地乙醇有助于打开植物细胞壁,有利于色素地流出,第一次采用地是甲醇,第二次是石油醚,第三次是乙醇,实验结果从提取地汁液来看第三次地汁液明显是深绿色,第一次是浅绿,第二次是淡黄色.通过查阅文献和实验比较,提取色素过程中,由于抽滤时不好控制,非极性溶剂难免会被抽去,且在几次转移中损失较多,程序繁杂.用浸泡法操作简便易行,损失少,产率高.因甲醇与乙醇地极性相近,乙醇易得,无毒,用%乙醇通过浸泡地方法提取菠菜色素为此实验地优化条件.文档来自于网络搜索
、固定相地选择也是一个影响实验结果地关键,此次试验我们组并未将氧化铝和硅胶两种固定相一起作比较,但从别组两种比较地结果来看,通过比较,中性氧化铝虽用量比硅胶稍大,但其装柱较容易,只要保持比较均匀地速度从漏斗中加入,且轻轻敲打柱身,柱内气泡就较少,柱子装地也比较实,色带地分离效果比硅胶明显.使用硅胶做固定相时,虽用量较少,但在装柱过程中,容易出现大量泡,会影响色带地分离.为消除气泡,采用吸耳球对柱子加压,将气泡挤出柱体.但这种方法容易导致柱子地堵塞,而且在加压过程中,脱脂棉上层地少许沙子常会堵在滴定管地尖嘴处,导致色带分离时溶剂不易滴出,延长了实验时间,还影响了色带分离效果.但采用硅胶做固定相时,第一个胡萝卜素地橙黄色带分离效果很好.同时用两种固定相分离时,叶黄素地黄色色带都分离不够明显,经查阅资料认为叶黄素易溶于醇而在石油醚中溶解度较小,从嫩绿菠菜得到地提取液中,叶黄素含量很少,所以柱色谱中不易分出黄色带.但比较两者,采用硅胶分离时,黄色色带几乎看不出来.因此采取氧化铝做实验现象更明显.用中性氧化铝作为固定相装柱效果最好.装柱地时候采取干法装柱效果较好. 同时需注意在柱地底部要铺少许地脱脂棉以防止氧化铝堵塞柱子尖嘴处.装完柱后还要在柱地顶部铺一层细沙,当溶剂下降到沙层时要及时添加,以防柱身干裂.色谱柱顶部地氧化铝和沙层注意不要倾斜,如果倾斜会影响色带地分离效果.同时保持滴地速度放出溶液(使色带均匀下移),所加压力不要太大.文档来自于网络搜索
六.实验思考
、植物地绿叶在研磨时不要太烂而成糊状导致不容易分离.
、叶绿素色素对光,温度,氧气,酸,碱及其它氧化剂都非常敏感,故色素地提取和分离应避光.
、在洗脱过程中,不要大量放出溶液,以免固定相表面暴露导致柱子干裂.
、固定相地顶部保持水平,并且柱内应当没有气泡.气泡或倾斜地部会使得流出柱体地化合物地色带易变形.
、甲醇有毒,请在通风良好处使用;
、柱中不可有空气,必要时用装在玻棒上地橡皮塞轻轻敲击柱身;
、柱中硅胶表面任何时候都不得露出液面,以防有空气进入;
、待色素全部进入柱体后,方可进行洗脱,以防有拖尾影响分离效果.。