【实验报告】从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇

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叶绿素的提纯实验报告(3篇)

叶绿素的提纯实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和性质。

2. 掌握叶绿素的提取和提纯方法。

3. 学习利用有机溶剂提取叶绿素,并通过色谱法进行分离和纯化。

二、实验原理叶绿素是绿色植物中进行光合作用的重要色素,主要由叶绿素a和叶绿素b组成。

叶绿素不溶于水,但可溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。

通过提取和提纯,可以得到高纯度的叶绿素,为进一步研究其性质和作用提供条件。

实验过程中,首先将植物叶片用有机溶剂提取叶绿素,然后通过层析法分离叶绿素和其他色素,最后收集纯化的叶绿素。

三、实验器材1. 新鲜植物叶片(如菠菜、青菜等)2. 研钵、研杵3. 乙醇、丙酮(分析纯)4. 层析柱、层析板5. 滤纸、脱脂棉6. 移液管、滴管7. 恒温水浴锅8. 显微镜9. 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 提取叶绿素(1)取新鲜植物叶片,用剪刀剪碎,放入研钵中。

(2)加入适量乙醇和丙酮(体积比1:1),研磨至匀浆。

(3)将匀浆倒入分液漏斗,静置分层。

(4)收集有机层,用无水硫酸钠干燥。

(5)过滤,得到叶绿素提取液。

2. 分离叶绿素(1)将层析板放入层析柱中,在底部铺一层脱脂棉。

(2)取适量叶绿素提取液,用移液管滴加于层析板上,确保液面低于层析板边缘。

(3)选择合适的溶剂系统,如正己烷-乙酸乙酯(体积比4:1)。

(4)将溶剂滴加于层析板上,观察层析过程,直至溶剂前沿到达预定位置。

(5)取出层析板,用铅笔标记层析结果。

3. 收集纯化叶绿素(1)用移液管收集叶绿素层,倒入小烧杯中。

(2)加入少量乙醇,搅拌均匀。

(3)用滤纸过滤,收集滤液。

(4)将滤液倒入蒸发皿中,用恒温水浴锅蒸干。

(5)用少量乙醇溶解残留物,得到纯化叶绿素。

五、实验结果与分析1. 叶绿素提取:通过有机溶剂提取,可以得到绿色叶片提取物,表明叶绿素已从植物叶片中提取出来。

2. 叶绿素分离:通过层析法,可以将叶绿素与其他色素分离,证明叶绿素具有独特的性质。

3. 叶绿素纯化:通过蒸发和溶解,可以得到纯化的叶绿素,说明实验过程中叶绿素得到了有效的纯化。

从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇实验报告一:菠菜中提取叶绿素的方法比较1.引言叶绿素是一种重要的植物色素,它在光合作用中承担着捕获光能和转化化学能的重要角色。

菠菜是叶绿素含量较高的植物之一,因此本实验旨在比较不同方法提取菠菜中的叶绿素,探索最有效的提取方式。

2.材料与方法2.1 材料:- 新鲜菠菜叶片- 无水乙醚- 丙酮- 高速离心机- 比色皿2.2 方法:- 方法一:无水乙醚提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的无水乙醚,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醚中,然后离心10分钟收集上层液体。

- 方法二:丙酮提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的丙酮,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于丙酮中,然后离心10分钟收集上层液体。

- 方法三:乙醇提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的乙醇,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醇中,然后离心10分钟收集上层液体。

3.结果在三种提取方法中,通过观察可以发现,方法一和方法二提取的叶绿素溶液呈现绿色,而方法三提取的叶绿素溶液呈现黄绿色。

利用分光光度计测定三个试管中叶绿素溶液的吸光度,发现方法一和方法二提取的叶绿素吸光度较高,而方法三的吸光度较低。

4.讨论方法一使用无水乙醚作为提取溶剂,乙醚能有效溶解叶绿素,并且在离心过程中上层液体的分离效果较好。

方法二使用丙酮作为提取溶剂,丙酮也能有效溶解叶绿素,并且丙酮相对于乙醚来说更易于购买。

方法三使用乙醇作为提取溶剂,乙醇对叶绿素的溶解能力较差,导致提取的叶绿素溶液吸光度较低。

5.结论通过对菠菜中提取叶绿素的实验比较,我们发现使用无水乙醚和丙酮作为提取溶剂的方法能够较好地提取菠菜中的叶绿素,并且吸光度较高。

因此,在菠菜中提取叶绿素的实验中,建议使用无水乙醚或丙酮作为提取溶剂。

实验报告二:叶绿素在光合作用中的作用研究1.引言叶绿素是植物体内最重要的色素之一,它在光合作用中起着关键作用。

本实验旨在研究叶绿素在光合作用中的功能和重要性。

菠菜叶中色素的提取实验报告

菠菜叶中色素的提取实验报告

菠菜叶中色素的提取实验报告一、实验目的1、了解菠菜叶中所含色素的种类和化学性质。

2、掌握从菠菜叶中提取和分离色素的实验方法。

3、学习使用分光光度计测定色素溶液的吸光度。

二、实验原理菠菜叶中含有多种色素,如叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素等。

这些色素在有机溶剂中的溶解度不同,因此可以通过萃取的方法将它们分离出来。

叶绿素 a 和叶绿素 b 为吡咯衍生物,可溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。

叶绿素 a 为蓝绿色,叶绿素 b 为黄绿色。

叶黄素和胡萝卜素属于类胡萝卜素,叶黄素为黄色,胡萝卜素为橙黄色,它们也能溶于有机溶剂。

根据不同色素在层析液中的溶解度不同,在层析过程中,溶解度大的色素随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度小的色素扩散得慢,从而将不同的色素分离开来。

三、实验材料与仪器1、材料:新鲜菠菜叶2、仪器:研钵、漏斗、玻璃棒、分液漏斗、容量瓶、分光光度计、滤纸、脱脂棉等。

3、试剂:无水乙醇、石油醚、丙酮、层析液(石油醚:丙酮=9:1)四、实验步骤1、提取色素称取 5g 新鲜菠菜叶,剪碎后放入研钵中,加入 5mL 无水乙醇、少许碳酸钙和石英砂,充分研磨成匀浆。

将研磨好的匀浆用漏斗过滤到分液漏斗中,用 5mL 无水乙醇冲洗研钵和漏斗,将滤液合并到分液漏斗中。

轻轻振摇分液漏斗,静置分层,放出下层的水相,保留有机相。

2、制备色素溶液将有机相转移到容量瓶中,用无水乙醇定容至 25mL,得到色素提取液。

3、色素的分离取一块干燥的滤纸,剪成 15cm×3cm 的长条,在一端剪去两角,在距离剪角一端 1cm 处用铅笔轻轻画一条横线。

用毛细吸管吸取少量色素提取液,在铅笔线处点样,每次点样后吹干,重复多次,使点样处形成一条细而直的色素线。

将点样好的滤纸放入装有层析液的层析缸中,层析液液面不能超过滤纸的铅笔线。

盖上盖子,进行层析。

当层析液前沿接近滤纸的上端边缘时,取出滤纸,用铅笔标记出色素带的位置。

4、色素的鉴定用分光光度计分别测定叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素溶液在不同波长下的吸光度,绘制吸光度波长曲线,确定最大吸收波长。

从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)

从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)

从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告(精选3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告篇1【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。

2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。

【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。

当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。

【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。

【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。

2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。

按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。

3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。

4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。

5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。

6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。

【实验记录】虽然分层现象不是非常明显,但是还是可以看得见分层现象。

【结果与讨论】1、做这个实验的时候,我觉得不应该用纱布挤干,因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了,导致后来的实验现象没有很明显,经过对比,没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。

2、有机溶剂往往比较容易挥发,所以加入后要盖上表面皿。

3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显,因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的,15分钟足矣。

从菠菜中提取叶绿素实验报告文档

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2020从菠菜中提取叶绿素实验报告文档Contract Template从菠菜中提取叶绿素实验报告文档前言语料:温馨提醒,报告一般是指适用于下级向上级机关汇报工作,反映情况,答复上级机关的询问。

按性质的不同,报告可划分为:综合报告和专题报告;按行文的直接目的不同,可将报告划分为:呈报性报告和呈转性报告。

体会指的是接触一件事、一篇文章、或者其他什么东西之后,对你接触的事物产生的一些内心的想法和自己的理解本文内容如下:【下载该文档后使用Word打开】从菠菜中提取叶绿素实验报告一【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。

2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。

【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{C55H70O6N4Mg};胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。

当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。

【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。

【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。

2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。

按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。

3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。

4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL 水洗涤一次。

5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。

叶绿体特征研究实验报告(3篇)

叶绿体特征研究实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解叶绿体的基本结构、功能和生理特性。

2. 掌握叶绿体色素的提取、分离和鉴定方法。

3. 学习使用显微镜观察叶绿体的形态和分布。

二、实验原理叶绿体是植物细胞中的一种重要细胞器,负责光合作用,将光能转化为化学能,为植物生长提供能量。

叶绿体主要由类囊体、基质和基质蛋白组成,其中类囊体是光合作用的主要场所。

叶绿体中含有多种色素,如叶绿素、类胡萝卜素等,这些色素对光的吸收和传递起着重要作用。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜植物叶片(如菠菜、甘蓝等)、酒精、碳酸钙、石英砂、蒸馏水、滤纸、剪刀、研钵、漏斗、三角瓶、烧杯、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管等。

2. 实验仪器:显微镜、研钵、漏斗、三角瓶、烧杯、剪刀、研钵、滤纸、载玻片、盖玻片、滴管等。

四、实验步骤1. 叶绿体色素的提取与分离(1)取新鲜植物叶片1克,洗净、擦干,去掉中脉,剪碎,放入研钵中。

(2)加入少量石英砂、碳酸钙粉和2-3 mL 95%乙醇,研磨至糊状。

(3)再加入2-3 mL 95%乙醇,继续研磨,直至形成均匀的糊状物。

(4)将糊状物倒入漏斗中,用滤纸过滤,收集滤液。

(5)将滤液倒入三角瓶中,加入少量碳酸钙粉,充分搅拌,静置一段时间。

(6)取少量滤液,滴在滤纸上,用铅笔轻轻画出滤液滴的形状,作为色素带的标记。

2. 叶绿体色素的鉴定(1)观察滤纸上的色素带,记录各色素带的颜色、宽度和位置。

(2)将滤纸上的色素带与标准色素带进行对比,确定各色素带的成分。

3. 叶绿体的观察(1)取新鲜植物叶片,制作临时装片。

(2)将装片置于显微镜下,观察叶绿体的形态、大小、分布和数量。

五、实验结果与分析1. 叶绿体色素的提取与分离实验中,从新鲜植物叶片中成功提取了叶绿体色素,并分离出叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素等色素。

2. 叶绿体色素的鉴定通过观察滤纸上的色素带,并与标准色素带进行对比,确定各色素带的成分。

实验结果与理论相符。

3. 叶绿体的观察在显微镜下观察到叶绿体呈椭球状,分布在细胞质基质中,数量较多。

从菠菜中提取叶绿素实验报告文档3篇

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从菠菜中提取叶绿素实验报告文档3篇Report document of chlorophyll extraction from spinac h从菠菜中提取叶绿素实验报告文档3篇小泰温馨提示:实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来,经过整理,写成的书面汇报。

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本文简要目录如下:【下载该文档后使用Word打开,按住键盘Ctrl键且鼠标单击目录内容即可跳转到对应篇章】1、篇章1:从菠菜中提取叶绿素实验报告文档2、篇章2:从菠菜中提取叶绿素实验报告文档3、篇章3:从菠菜中提取叶绿素实验报告文档篇章1:从菠菜中提取叶绿素实验报告文档【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。

2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。

【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。

当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。

【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。

【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。

2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。

按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。

3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。

4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。

菠菜中叶绿体实验报告(3篇)

菠菜中叶绿体实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 通过对菠菜叶绿体的提取,了解叶绿体在植物细胞中的分布和结构。

2. 掌握叶绿体提取和观察的基本方法。

3. 通过显微镜观察叶绿体的形态和结构,加深对叶绿体功能及植物光合作用的认识。

二、实验原理叶绿体是植物细胞中进行光合作用的重要细胞器,含有叶绿素,呈绿色。

叶绿体主要分布在植物细胞的叶绿体膜中,其形状、大小和数量因植物种类和生长环境的不同而有所差异。

叶绿体的提取方法有多种,本实验采用研磨法提取菠菜叶绿体。

三、实验仪器与试剂1. 仪器:显微镜、载玻片、盖玻片、研钵、剪刀、镊子、滴管、酒精灯、酒精、蒸馏水、碳酸钙、无水乙醇、碘液、脱脂棉、纱布等。

2. 试剂:菠菜叶片、碘液、碳酸钙、无水乙醇、蒸馏水。

四、实验步骤1. 准备菠菜叶片:选取新鲜的菠菜叶片,用蒸馏水洗净,用剪刀剪成小片。

2. 研磨:将菠菜叶片放入研钵中,加入少量碳酸钙和适量无水乙醇,用研杵研磨至叶片烂碎。

3. 提取:将研磨好的菠菜叶片转移至载玻片上,加入适量蒸馏水,用滴管轻轻搅拌均匀。

4. 观察叶绿体:用显微镜观察载玻片上的菠菜叶片,调节显微镜至适当倍数,观察叶绿体的形态和结构。

5. 碘液染色:在载玻片上的菠菜叶片滴加适量碘液,用镊子轻轻搅拌均匀,待碘液充分染色后再次观察叶绿体的形态和结构。

6. 清洗:用蒸馏水清洗载玻片上的菠菜叶片,去除多余的碘液。

7. 重复观察:用显微镜重复观察清洗后的菠菜叶片,观察叶绿体的形态和结构。

五、实验结果与分析1. 观察到菠菜叶片细胞中含有大量绿色颗粒,这些绿色颗粒即为叶绿体。

2. 叶绿体呈椭圆形、圆形或不规则形状,大小不一,通常直径为2-5微米。

3. 叶绿体具有明显的双层膜结构,外层膜较薄,内层膜较厚,两层膜之间为叶绿体基质。

4. 叶绿体内含有大量叶绿素,使叶绿体呈绿色。

5. 通过碘液染色,叶绿体更加清晰,可以观察到叶绿体内部的叶绿素颗粒。

六、实验结论通过本实验,我们成功提取了菠菜叶绿体,并观察到了叶绿体的形态和结构。

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从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。

2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。

【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。

当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。

【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。

【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。

2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。

按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。

3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。

4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。

5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。

6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。

【实验记录】虽然分层现象不是非常明显,但是还是可以看得见分层现象。

【结果与讨论】1、做这个实验的时候,我觉得不应该用纱布挤干,因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了,导致后来的实验现象没有很明显,经过对比,没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。

2、有机溶剂往往比较容易挥发,所以加入后要盖上表面皿。

3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显,因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的,15分钟足矣。

4、若最后颜色没有明显的分层,可以加入几滴丙酮帮助分层。

绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。

叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)),差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。

它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂,也是食用的绿色色素,可用于糕点、饮料水等中,添加于胶姆糖中还可消除口臭。

植物中a的含量通常是b的3倍。

尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂。

胡萝卜素(C40H56)是具有长链结构的共轭多烯。

它有三种异构体α―,β―,和γ―胡萝卜素,其中β―异构体含量最多,也最重要。

生长期较长的绿色植物中,异构体中β―的含量多达90%。

β―具有维生素A的生理活性,其结构是两分子维生素A在链端失去两分子水结合而成。

生物体内,β―体受酶催化氧化即形成维生素A。

目前,β―体可作为维生素A使用,也可作为食品工业的色素,β一胡萝卜素还有防癌功能。

叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物,在光合作用中能起收集光能的作用。

在绿叶中通常是胡萝卜素的两倍。

较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。

由此可见,叶绿素等天然色素有广泛的用途,对于色素的提取与分离就显得很重要了.本实验就提取和分离做了相关的研究。

1 实验部分1.1 仪器与试剂仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240 紫外分光光度计试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目~160目)1.2 提取与分离1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶,加入20 mL3:2(体积比)石油醚―乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。

洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。

弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。

1.2.2 薄层层析取四块显微载玻片,硅胶G经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°C活化1h。

选取效果最好的一块进行点样。

展开剂:(1)石油醚―丙酮=8:2(体积比)(2)石油醚―乙酸乙酯=6:4(体积比)取活化后的层析板,点样,放入预先选定展开剂的广口瓶。

瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入展开剂中,盖上瓶盖。

待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,晾干,做出标记。

分别用两种展开剂展开,比较不同展开剂的展开效果。

观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。

注意更换展开剂时,需干燥层析瓶,不允许前一种展开剂带入后一系统。

1.2.3 柱层析取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部。

在层析柱中加15cm石油醚。

加入中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中堆积。

装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1―2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面)。

将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面下降,几次反复,使色素全部进入柱体。

在柱顶加1.5cm洗脱剂――9:1(体积比)石油醚―丙酮。

打开活塞,用锥形瓶收集。

当第一个有色成分即将滴出时,取另一锥形瓶收集,得橙黄色溶液,即胡萝卜素。

2.结果与讨论2.1提取由于甲醇与乙醇的极性相近,但是乙醇易得、无毒,所以用3:2的石油醚一乙醇通过浸泡的方法提取菠菜色素,而不是用石油醚―甲醇。

2.2分离薄层层析薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固―液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,可以用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离。

实验中涉及的菠菜色素的比移值(Rf)(薄层色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值)列表如下:在一定的色谱条件下,特定化合物的Rf值是一个常数,因此有可能根据化合物的Rf值鉴定化合物。

菠菜色素中各种色素的比移值Rf大小为:胡萝b素叶黄素叶绿素,按此顺序它们的非极性依次减弱。

物质极性的判断为柱层析中洗脱剂的选择提供了参考价值。

柱层析胡萝卜素极性最小,因此胡萝卜素的洗脱剂用极性较小的9:l的石油醚-丙酮溶剂效果较好。

但要收集其他几种色素得换用其他的洗脱剂,因为色素的极性各不相同,且有一定差别。

如用7:3石油醚-丙酮分离叶黄素.分离出胡萝卜素和叶黄素后,可加大溶剂极性以较快速度洗脱叶绿素.用3:1:1的丁醇-乙醇-水洗脱剂洗脱叶绿素。

3.结论采用浸泡法提取色素比抽滤法更好。

在薄层层析时,用石油醚-丙酮=8:2时,能更明显的看到分层。

在柱色谱洗脱剂的选择上,基于薄层分析的极性判断选择了石油醚-丙酮=9:1的溶剂作为洗脱剂,取得了非常好的效果。

通过实验,进一步认识到洗脱剂在柱层析中的重要性。

【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。

2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。

【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素A(C55H77O5N4Mg)和叶绿素B (C55H70O6N4Mg)胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物。

是胡萝卜素的羟基衍生物。

当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。

【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。

【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。

2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。

按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。

3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。

4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。

5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。

6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。

【注意事项】1.过滤时不能用滤纸,而是用脱脂棉。

原因是滤纸能吸收色素,降低滤液中色素的含量,使实验效果不明显。

2.加入丙酮后要迅速、充分研磨,以防止丙酮挥发,使更多的色素溶解在丙酮中。

3.萃取过程中注意操作,防止溶液喷出。

制备薄层板过程中注意基板的质量,防止玻璃边缘伤及手指。

4.牢记有机化学实验常规安全防范和急救措施。

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