微生物、消毒剂基础知识及洁净区作业.doc
洁净区微生物常识
微生物常识微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。
微生物污染是指因微生物产生、附着而给特定的环境带来的不良影响。
如果细菌得到了必要的养料、一定量的水份和合适的温度，它们就能迅速繁殖，它们繁殖的速度快得惊人。
通常一个细菌在仅仅24小时后可产生出281兆(百万)个的细菌。
空气空气是污染的危险携带者。
充满微生物的尘埃和水滴就是通过空气作为侵袭我们产品的媒介而成为重要的污染源的。
当我们谈话、咳嗽和打喷嚏时，被污染的水滴正是不断地从我们的呼吸道中放入我们的工作场所。
尘埃微粒正是通过空气流不间断地在我们整个药厂范围循环运行着。
空气中存在的尘埃微粒是含有微生物(细菌等)的。
因此，空气是侵袭我们产品的污染物的主要媒介。
这就是为什么要尽量保持空气洁净是极为重要的。
水从理论上来讲，微生物在纯水中是不能生长的。
但是，所有的各类水，不管怎样仔细地蒸溜或过滤，总会含有一定量的可溶性有机物和盐类。
正是这些可溶性的物质可被微生物利用作为它们生长的养料源泉。
在生产过程中，水是应用最广泛的原料之一。
这就是为什么我们药厂的卫生规程不仅必须仔细地控制用于生产过程的水，而且要控制好如何正确地用水来清洗我们的设备。
表面：天花板、墙壁、地面、设备、容器、工具或桌子；由于空气中的湿度，所有表面都包上一层含水的薄膜。
这层薄膜由于静电吸引而饱含尘埃微粒，有很多时候，表面还覆盖一层油状物质，此层油膜易受到尘粒污染。
表面因尘埃微粒和微生物由空气传播的回降而受到污染人人是最常见的传染源。
事实上，人们常说，人是药厂中最不清洁的成份，最大的污染源。
为什么呢?一个原因，人体是一个永不休止的污染媒介。
当您每天来药厂上班时，您也许随身将几百万细菌带入工厂。
人体不同部位所带细菌数量部位细菌数量手部前额头皮腋窝鼻腔分泌物唾液粪便100～1000/ cm2 1000～100000/ cm2 约100万/ cm2约1000万/ g约1000万/ g约10亿/ g710亿/ g人员的发菌量洁净室内当工作人员穿无菌服时，静止时的发菌量为10～300个/(min·人)，躯体一般活动时的发菌量为150～1000个(min·人)，快步行走时的发菌量为900～2500个(min·人)；穿平常衣服时发菌量为3300～62000个(min·人)；有口罩发菌量：无口罩发菌量为(1:7)～(1:14)；咳嗽一次的发菌量为70～700个，喷嚏一次的发菌量为4000～60000个。
洁净区的清洁与消毒培训
2019/5/22
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1.1几种常见细菌
金黄色葡萄球菌
2019/5/22
沙门氏菌
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大肠杆菌
2019/5/22
5
铜绿假单胞杆菌
2019/5/22
6
枯草芽孢杆菌
2019/5/22
7
酵母菌
2019/5/22
8
黑曲霉
2019/5/22
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1.2常见污染药物制剂的微生物
? 1.葡萄球菌：可引起局部感染 ? 2.大肠杆菌：胆道及尿道感染 ? 3.绿脓杆菌：化脓性感染、中耳炎、肺炎 ? 4.枯草杆菌：结膜炎 ? 5.酵母菌：使糖分解，药液产生有机酸 ? 6.霉菌：使制剂霉坏、酸败变质
的，99%的微生物都附在颗粒上。控制空气中的微粒 数，就是控制了微生物数量。
? 灰尘、微粒具有沉降和粘附的趋势，所以同一区域内
，地面是微粒相对集中的地方，也是微生物相对较多 的地方，墙壁也容易粘附灰尘。
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2.3 粒子的粒径范围及悬浮时间
不同粒径粒子在空气中的悬浮时间
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2.5 洁净区洁净级别划分
各级别空气悬浮粒子标准（2010版GMP）
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洁净区洁净级别划分
洁净区微生物检测动态标准
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2.6 空气调节系统及过滤器
1.HVAC概念：空气调节系统，是包含温度、湿度、空气清净度以及空气 循环的控制系统，被称为HVAC（英语：Heating, Ventilation, Airconditioning ）。
其他适宜的方法制得的制药用水。不含任何添加剂，其 质量应符合纯化水项下的规定。
微生物基础知识及洁净室的行为规范
3.1 洁净室（区）的基本要求
YY 0033－2000《无菌医疗器具生产管理规范》 对洁净室（区）的基本要求： 洁净区应设计合理，能满足生产需要，还应配置 与洁净度级别相适应的空气调节净化系统。
对于有要求或者采用无菌操作技术加工的植 入型无菌医疗器械（包括医用材料），应当 在10000级下的局部100级洁净室（区）内进 行生产
直接接触药物的容器、用具、设备表面、天 中等毒性 花、墙面及人手部的消毒（24小时用完） 适用于空间的消毒 中等毒性 腐蚀性
3% ~5% 容器、用具、设备表面、天花、墙面
消毒剂杀菌原理
• 酒精能使菌体蛋白质脱水变性，常用酒精 杀菌浓度为70-75%。 • 氯的消毒作用，即是HCLO作用，HCLO是 中性分子，可以扩散至带负电的细菌表面， 并穿过细胞膜进入细胞内部，由于氯原子 的氧化作用，破坏某些酶系统，最终致细 菌死亡。 • 表面活性剂作用：破坏细胞膜，使蛋白质 变性。
1、微生物的概念
2、微生物的特点
3、微生物的分类 4、微生物的形态结构
1.1 微生物的概念
微生物是广泛存在于自然界的
体形微小， 结构简单， 数量多 ，分 布广。
一群体形微小（直径小于1mm）、
结构简单、肉眼看不见，必须藉助 光学或电子显微镜放大数百至数万 倍才能观察到的生物。
1.2 微生物的特点
球菌
杆菌
螺旋状菌
螺旋体
出芽状及柄状菌
各种芽胞的形态及位置
丝状菌
细菌的各种形态示意图及电镜照片 （据Madigan等）
乙型肝炎病毒
酵母菌
细菌形态构造
•
细菌形态
细菌的结构与生长
• 细胞壁 • 细胞膜 • 细胞质 • 细胞核
(完整版)新版GMP微生物学基础知识及洁净区管理指导试题(含参考答案)
精心整理
新版GMP微生物学基础知识及洁净区管理培训试题
姓名部门得分
一、填空题（40*1.5）
1.微生物类群十分庞杂，主要包括立克次体、、、、螺旋体、枝
原体、衣原体与等，还包括显微藻类和原生动物。
2.在药品生产过程中，应按GMP要求不断进行各项微生物卫生学监测。
例如：对洁净室空气中
4.
5.
6.
7.
8.
9.
品。
对人体而言可能造成：、中毒、
、甚至死亡。
二、名词解释（3*5）
消毒：
灭菌：
防腐：
三、简答题
1．简述微生物的五大特征及生长繁殖所需的条件。
（10分）
精心整理
2. 人是药厂中最不清洁的成分最大的污染源，请结合以下数据，分析可采取哪些有效措施来降低和控制由人员引发的微生物污染。
（15分）
人的皮肤上平均每平方厘米含有10万个细菌，而且繁殖速度惊人，刚洗过的皮肤，在几小时之内细菌就可恢复到原来的数量。
一般人每个喷嚏的飞沫含有4500-150000个细菌；感冒患者一个喷嚏含有多达8500万个细菌。
1.细菌、放线菌、真菌（霉菌、酵母菌）、病毒
2.浮游菌、沉降菌
4.
5.
6.
7.
8.
9.
名词解释
简答：
*生长繁殖条件
*(1) 充足的营养物质（碳源、氮源、无机盐、水）
*(2) 适宜的酸碱度
*(3) 合适的温度
*(4) 必要的气体环境（CO2 和氧气）
*五大特征：
精心整理
*体积小面积大；
*吸收多转化快；
*生长旺繁殖快；
*适应强变异频；
*分布广种类多。
洁净区微生物基础知识
消毒注意事项
• 消毒剂浓度合适，针对特定范围内的细菌选择相应的消毒剂 • 消毒剂在一定周期内轮换使用，以防细菌耐药。我公司常用消 毒剂为：0.2%新洁尔灭、75%酒精溶液 • 紫外灯消毒时记录使用时间，紫外灯的输出功率随使用时间增 加而降低。国产紫外灯的平均寿命（点到70%额定功率的时间）一 般为2000h，超过平均寿命时，就达不到预期效果，必须更换。我 公司规定紫外灯使用时间为1000h。
可引起局部感染 道和尿道感染 化脓性感染、中耳炎、肺炎 结膜炎 使糖分解，药液产生有机酸
使制剂霉坏，酸败变质
精品课件
洁净室内微生物在哪里
• 空气 •水 • 人员 • 器具
精品课件
空气中的微生物
• 灰尘——微生物的飞行器 • 微生物不是凭空存在，99%的微生物都附在颗粒上。控制空 气中的微粒数，就是控制了微生物数量。 • 灰尘、微粒具有沉降和粘附在趋势，所以同一区域内，地 面是微粒相对集中在地方，也是微生物相对较多的地方，墙 壁也容易粘附灰尘。
精品课件
如何阻断人体污染源
◆ 《药品生产质量管理规范》中明确规定：进入洁净室（ 区）的人员不得化妆和佩带饰物，不得裸手直接接触药品。 ◆《药品生产质量管理规范》中明确规定：无菌工作服必须 包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物。
精品课件
• ①洁净室内当工作人员穿无菌服时，静止时的发菌量一般为10～300 个／(min·人)， 躯体一般活动时的发菌量为150～1000 个／(min·人)，快步行走时的发菌量为900— 2500 个／(min·人)。 • ②咳嗽一次的发菌量一般为70～700 个／(min·人)，喷嚏一次的发菌量一般为4000～ 60000 个／(min·人)。 • ③穿平常衣服时发菌量为3300～62000 个／(min·人)。 • ④无口罩发菌量：有口罩发菌量为(1：7)～(1：14)。 • ⑤发菌量：发尘量为(1 ： 500)～(1：1000)。 • 可知洁净室内穿无菌衣人员的静态发菌量一般不超过300 个／(min·人)，动态发菌量 一般不超过1000 个／(min·人)
洁净区环境控制及微生物知识培训
• 30-35℃的培养箱中培养3天。
沉降菌的监测方法
• 沉降菌监测的注意点： • 摆放位置和高度（抑制物质的引入）
洁净区环境控制及微生物 知识培训
zwx 2013.10
制药生产洁净控制
主要:
（一）人员控制系统 （二）公用工程控制系统 （三）设备控制系统 （四）物料控制系统 （五）生产过程控制系统 （六）质量检测控制系统
相关术语
• 洁净室(区)：需要对尘粒及微生物含量进行控制 的房间(区域)。
• 悬浮粒子：洁净室内悬浮在空气约在0.1µm至 5µm之间的固体和液体粒子，用于空气洁净度分 级。
• 非本岗位人员进入洁净区（包括维修、辅助人员） 应定期进行卫生和微生物学基础知识、洁净作业 等方面的培训及考核。非本岗位人员进入洁净区 要严格按规定程序进出、作业，并有登记记录。
洁净区卫生管理规程
工作服应制定清洗周期，工作服包括服装和一切用于 包裹头、脸、手臂等的遮护用品。不同空气洁净度级别使 用的工作服应分别清洗、整理，必要时消毒或灭菌。
1
＜1 1
＜1 1
＜1
1
1
3
1
3
1
5
3
3
1
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洁净室环境控制
• 压差的控制：洁净区与非洁净区之间、不同级别 洁净区之间的压差应当不低于10帕斯卡。必要时， 相同洁净度级别的不同功能区域（操作间）之间 也应保持适当的压差梯度。
微生物与洁净区操作常识培训
头发断面
15μm
肉眼可见 5μm
2、发菌量 分析国外试验资料可以认为： （１） 洁净室内当工作人员穿无菌服时： 静止时的发菌量 一般为10-300 个/min.人躯体一般活动时的发菌量为 150-1000 个/min.人快步行走时的发菌量为 900-2500 个/min.人 （２） 咳嗽一次一般为 70~700 个/ min.人喷嚏一次一般为 4000~62000 个/ min.人 （３） 穿平常衣服时发菌量 3300~62000 个/ min.人 （４） 无口罩发菌量:有口罩发菌量 1:7~1:14 （５） 发菌量：发尘量 1:500~1:1000 据国内事例： （６） 手术中人员发菌量 878 个/ min.人 所以，可知洁净室内无菌衣人员的静态发菌量一般不超过 300 个/ min.人，动态发菌量一般不超过1000 个/ min/人，以 此作为计算依据是可行的。 洁净室之建筑主体构造，一般是用钢筋或骨水泥，但无论是 何种构造，必须满足如下之条件：A.不会因温度变化与振动 而发生裂痕；B.不易产生微尘粒子，且很难附着粒子；C.吸 湿性小；D.为了维持室内之湿度条件，热绝缘性要高
感性认知
一般微粒粒径对比
0.3μm 微尘粒 \ 0.5μm 微尘粒
PM2.5可吸入颗粒 2.5μm 微尘粒
肉眼可视 (5μm)
人类头发 (15μm)
感性认知
一般自然界气体等级
外大气层
1,000
大气层 田园地带
100,000
10,000
街市区
1,000,000
工业地带
10,000,000
空气洁净级别
大量临床资料表明，注射剂（尤其是静脉注射剂）如污 染了7~12μm的尘粒，可导致热原反应、肺动脉炎、微 血栓或异物肉芽肿等，严重的还会致人死命。而如果污 染了细菌，轻则局部红肿化脓，重则引起全身细菌性感 染。因此，对微生物和尘粒进行更加严格的控制对于针 剂生产洁净室非常重要。 人是洁净室最大的污染源，占90%左右。一般男性每人 每分钟向周围排放1000个以上的含菌粒子，女性为750 个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量为10~300个/min， 一般活动时发菌量为150~1000个/min，行走时发菌量为 900~2500个/min。咳嗽一次发菌量为70~700个/min，喷 嚏一次为4000~60000个/min。所以在洁净室中，人的数 量和活动应有特别严格的限制。
微生物知识及洁净区操作常识培训
微生物的营养
根据其生命活动所需能量的来源不同， 可分为光能营养菌和化能营养菌。前者 是从光线中获得能量，后者则从化学物 质氧化中取得能量。 因此，根据微生物所需的碳源和能源不 同，可将微生物分为光能自养菌、光能 异养菌、化能自养菌、化能异养菌等四 类。
消毒与灭菌
消毒（disinfection) 杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽胞的细菌或 非病原微生物。用以消毒的药品称为消毒剂(disinfectant)。 灭菌（sterilization） 杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细 菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。 抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为各种抗 生素，可抑制细菌的繁殖。 防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。 同一种化学药品在高浓度时为消毒剂，低浓度时常为防腐剂。
空气洁净技术采用的过滤方法 空气净化装置可用于整个房间如无菌操 作室，也可只限于操作区域局部如超净 工作台。 化学消毒方法：采用消毒剂作用于室内 空气和物体表面 紫外线照射方法 ：采用紫外线对室内空 气进行照射。
制药用水中的微生物
化学消毒剂方法 对水的消毒以化学消毒 剂方法较常用，效果也最好。常使用次 氯酸钠或通氯气。 膜过滤法 适用于水系统的连续循环处理 紫外线照射法 在水系统中应用紫外线 照射消毒，适用于需要特殊处理的水（ 如光学透明度要求高），一般在末端之 前。
人员污染的途径和方式
人的头发和皮肤 水滴 衣着 化妆品和珠宝手饰 生产过程中人们所引起的混杂和误差
人体不同部位所带细菌数量
部位 细菌数量
手 部 前 额 头 皮 腋 窝 鼻腔分泌物 唾 液 粪 便
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微生物基础知识、消毒剂及消毒方法、
洁净区作业培训试题
部门： _________ 姓名： ______________ 编号： _____________ 分数： ___________ 一、填空题（每空1分，共35分） 1、 ____________________________ 微它们是一类 _______ 非常快的生物。
—的单细胞或多细胞生物，它们对营养的要求非常
低。
、厂房与设备、药品生产用
、
、 昆虫和其它啮齿动物、 ___________ 3、常用的灭菌法有 、
______ O
、 、 、
辐射
灭菌法。
4、 ____________________________________ 不同等级洁净室之间的静压差应大于 帕，洁净区与室外的静压差应大于 — 严防倒流。
5、 常用的消毒剂有 、 、 、 、碘酒
_
帕,
6洁净室对温湿度、压差及 _______ 7、 30万级洁净室的温度要求为 ____
8、 进入洁净室（区）的人员不得— 9、 微生物的污染途径：
、 一和 _____ 进行严格的控制。
___ ，相对湿度要求为 _______ 0
—和佩带饰物，不得 _______ 直接接触药品。
、 和其他污染。
1（）、洁净区人员进入时的更衣程序： 、 、
、
、戴帽
子、 戴口罩、消毒双手经缓冲间进入洁净生产区。
11、人体产尘：人眼可见最小颗粒为 _____ 微米。
12、 微生物在空气和人体内外表面包括、、和酵母。
13、 空气中的尘埃粒子是含有微生物的。
因此，是侵袭我们产品的污染物的主要媒 介。
二、多项选择题（每题3分，共15分） 1、
下列哪些有微生物存在（ ）
A 、水
B 、衣服
C 、头发
D 、空气
E 、食物
2、 以下哪些属于微生物类群（
）
A 、大肠杆菌
B 、葡萄球菌
C 、链球菌
D 、黑曲霉菌 3、
洗手时，用流水（如自来水）洗手，能使手上的致病微生物减少（ ）;用皂液充分洗
手，再用自来水冲洗能使致病微生物减少（
）。
洗手后正确使用消毒剂能使致病微生
物
减少到99%
A、75%
B、90%
C、80%
D、95%
4、下列哪些属于微生物的特点（）
A、体积小，面积大
B、吸收多，转化快
C、生长旺，繁殖快
D、易变异，适应强
5、正确的洗手步骤：1）手心搓手心；2）； 3）； 4）； 5） o
A、手指交叉
B、手心搓手腕
C、手心搓拇指
D、手心搓手背
三、判断题（每题2分，共10分）
1、人的行为是维持洁净区平衡不可或缺的，但是可以大幅度的动作，大声交谈。
（）
2、一切接触药品和直接接触药品部位的操作必须带上手套，对于带手套不便于操作的情况（如机器台面维修、更换包装材料等）必须手消毒后进行。
（）
3、不同洁净级别缓冲间或传递窗内外二侧门不能同时打开。
（）
4、消毒剂的验证时间点为消毒剂的有效期内最后一天。
（）
5、不同种类的消毒剂过滤可以使用同一根滤芯。
（）
四、简答题（共40分）
1、理想消毒剂的特点。
（15分）
2、分别从人、机、料、法、环”五方面分工序排查。
木岗位有哪些对微生物控制需要进行完善？（25分）。