黄连Rhizoma Coptidis 2
石大生药学实验指导04根茎类生药的鉴定
实验四根茎类生药的鉴定【目的要求】1．认识常用根茎类生药的外形及饮片，并熟悉其功效。
2．掌握大黄及黄连的来源、性状、显微特征及理化鉴别方法。
【实验主要仪器及试剂】显微镜、天平、量筒、紫外灯、解剖针、载玻片、盖玻片、刀片、镊子、酒精灯、水浴、蒸发皿；水合氯醛试液、稀甘油、蒸馏水、甘油醋酸试液、氢氧化钠(钾)溶液或氨水、1％盐酸、30％硝酸、乙醇、漂白粉、5％五倍子酸乙醇溶液、硫酸。
【实验材料】大黄、黄连、贯众、延胡索、川芎、苍术、白术、羌活、半夏、知母、黄精、玉竹、白及、天麻。
【实验内容】一、大黄(Radix et Rhizoma Rhei)的鉴别1．观察大黄药材的外形及饮片。
2．大黄根茎横切面：木栓层与皮层偶有残存。
韧皮射线1～4列细胞，内含棕色物。
形成层明显。
木质部导管径向稀疏排列。
髓部宽广，散有异型维管束，外侧为木质部，内侧为韧皮部。
射线呈星芒状，含棕色物质。
薄壁细胞中含众多草酸钙簇晶、淀粉粒。
3．粉末：棕黄色。
⑴草酸钙簇晶：众多，直径21～135µm，棱角大多短钝。
⑵导管：多为网纹、具缘纹孔，直径约140µm，均非木化或微木化。
⑶淀粉粒：大多圆球形，直径3～32µm，脐点星状、十字状；复粒由2～7分粒组成。
4．理化试验⑴显色反应：取少量大黄粉末，置于滤纸上，滴加氢氧化钠(钾)溶液或氨水，观察颜色变化。
⑵微量升华试验：观察结晶形状、颜色。
二、黄连(Rhizoma Coptidis)的鉴别1. 观察黄连药材的外形及饮片。
2．观察黄连的横切面：⑴木栓层：由数列扁平的木栓细胞组成，外侧常附有鳞叶组织。
⑵皮层：散有鲜黄色石细胞，壁厚，层纹及细胞腔明显。
⑶维管束：无限外韧型，呈不连续的环状排列。
韧皮部狭窄，外侧有黄色纤维束，并伴有少数黄色石细胞。
形成层为1～2列扁平细胞，束间形成层不明显。
木质部细胞均木化，由纤维、导管及管胞组成。
射线宽窄不一。
⑷髓部：有时可见石细胞群。
3．黄连粉末：棕黄色⑴水或甘油醋酸试液装置：观察淀粉粒。
黄连的理化鉴别
汉语拼音:Huanglian英文名:RHIZOMA COPTIDIS鉴别:（1）本品横切面:味连木栓层为数列细胞。
皮层较宽，石细胞单个或成群散在。
中柱鞘纤维成束，或伴有少数石细胞，均显黄色。
维管束外韧型，环列。
木质部黄色．均木化，木纤维较发达。
髓部均为薄壁细胞，无石细胞。
雅连髓都有石细胞。
云连皮层、中柱鞘及髓部均无石细胞。
（2）取本品粗粉约1g，加乙醇10ml，加热至沸腾，放冷，滤过。
取滤液5滴，加稀盐酸1ml与含氯石灰少量，即显樱红色；另取滤液5滴，加5％没食子酸乙醇溶液2-3滴，蒸干，趁热加硫酸数滴，即显深绿色。
（3）取本品粉末50mg，加甲醇5ml，加热回流卜分钟，滤过，滤液补加甲醇使成5ml，作为供试品溶液。
另取黄连对照药材，同法制成对照药材溶液。
再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水（6:3:1.5:1.5:0.3）为展开利，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出。
晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的一个黄色荧光斑点。
检查:总灰分不得过5.0（附录Ⅸ K）。
含量测定:取本品粉末约0.1g，精密称定，置100ml量瓶中，加入盐酸-甲醇（1:100）约95ml，60℃水浴中加热15分钟，取出，超声处理30分钟，室温放置过夜，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，滤液作为供试品溶液。
另取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.04mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液1μl、对照品溶液1μl与3μl，交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水（6:3:1.5:1.5:0.3）为展开剂，另槽加入等体积的浓氨试液，顶平衡15分钟，展开至8cm，取出，挥干，照薄层色谱法（附录Ⅵ B 薄层色谱扫描法）进行荧光扫描，激发波长λ=366nm，测量供试品与对照品荧光强度的积分值，计算，即得。
第四章茎类第二节(四)黄连～(七)川芎
第四章 茎类药材
第二节 根茎类药材鉴定
四、黄连 Rhizoma Coptidis
（一）原植物鉴定 黄连为多年生草本，根茎直 生向上分枝，形如倒鸡爪。叶基 生具长柄，叶片卵状三角形，三 全裂，中央裂片卵状菱形具长柄， 边缘有锐锯齿，侧生叶片裂片斜 卵形，呈不等2深裂或有时全裂， 裂片再作疏羽状分裂，上面沿脉 被短毛。 如图4-16所示。 图4-16 黄连原植物
三角叶黄连 单枝 云连 单枝、 钩状
第四章 茎类药材
第二节 根茎类药材鉴定
五、北豆根 Rhizoma Menispermi
（一）来源 防己科植物蝙蝠葛Menispermum dauricum DC.的干燥根茎。 （二）性状鉴定注意点 1.根茎细长圆柱形，常弯曲或分枝，长可达50cm，直径0.3～ 0.8cm。 2.表面黄棕色至暗棕色，有弯曲的细根、突起的根痕及纵皱纹 ，外皮易片状脱落。 3.质韧，折断面纤维性，木部淡黄色，呈放射状排列，中心有 髓。 4.气微，味苦。 如图4-23所示。
第四章 茎类药材
第二节 根茎类药材鉴定
四、黄连 Rhizoma Coptidis
黄连，“根如连珠而色黄”得名。古人云：“哑巴吃黄连，有 苦说不出”，黄连几乎成了“苦”的代名词，然《神农本草经》将 黄连列为上品，现代药理发现黄连是一味疗效极佳的广谱抗菌药， 真可谓是“良药苦口利于病”的典范。 （一）原植物鉴定 毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连C. deltoirea C.Y.Cheng et Hsiao、云南黄连C. teeta Wall.的干燥 根茎。商品药材分别习称为 和 “味连” 、 “雅连” “云连”。
第四章 茎类药材
第二节 根茎类药材鉴定
黄连·黄芩·黄柏的区别
黄连·黄芩·黄柏的区别
黄连、黄芩和黄柏都是常用的中药材，它们在中医药学中有着广泛的应用。
尽管它们
的名称相似，但它们之间有着不同的药性和功效。
下面我们来分别介绍一下黄连、黄芩和
黄柏的区别。
一、黄连
中文名：黄连
拉丁名：Coptidis Rhizoma
来源：黄连是毛茛科植物黄连的干燥根茎。
性味：苦，寒
功效：清热燥湿、泻火解毒
主要成分：黄连素、小檗碱、黄连素等
适应症：黄连主要用于湿热痰滞证，如口舌生疮、疖肿、咽痛、湿疹等。
黄连还可以
用于痢疾、泄泻等症。
黄连与黄芩、黄柏的区别：
1.药性不同：黄连的味道非常苦，性寒，有清热解毒的作用。
而黄芩的味道较苦、辛，性寒，主要具有清热燥湿的功效。
黄柏的味道则味苦、涩，性寒，主要具有清热燥湿、止
血的功效。
2.用途不同：黄连主要用于湿热痰滞证，如口舌生疮、疖肿、咽痛、湿疹等。
黄芩主
要用于湿热痰滞、肺胃热盛等症。
黄柏主要用于湿热病证、心腹痛症、久痢等。
3.主要成分不同：黄连的主要活性成分是黄连素、小檗碱等。
而黄芩的主要活性成分
是黄芩苷、黄芩甙等。
黄柏的主要活性成分是黄柏素、黄柏酸等。
黄连、黄芩和黄柏虽然名称相似，但是它们的药性和功效有所区别。
在选择使用时，
需要根据具体的病情和症状来确定使用哪一种药材。
需要在医生指导下使用，遵循适量用
药的原则，以免出现不良反应。
黄连、枳实药对的配伍研究
黄连、枳实药对的配伍研究黄连、枳实药对配伍研究摘要：黄连与枳实作为中国传统草药，已经被广泛应用于中医药疗法和保健品行业。
由于这两种草药具有良好的功效，药常在复方制剂中结合起来使用以取得更好的治疗效果，但是其中的具体配伍还未得到充分的研究。
本文将就黄连与枳实的配伍及其作用进行研究，旨在从理论和实践的角度探讨两者配伍的具体方法及其影响，最终建立出一个科学的配伍方案。
关键词：黄连；枳实；配伍1 绪论黄连（Rhizoma Coptidis）属于紫花苜蓿科，枳实（Fructus Aurantii）属于橘树科，是我国传统植物药二大重要材料，常用于药物复方中，它们之间可以结合使用，达到治疗目的。
药物混合配伍，不仅可以加强药物作用，又可以缓解药物毒性，减少治疗副作用。
在中药学的研究中，提倡药物的温和，以防止药物影响人体组织细胞，所以在配伍药物中，应考虑到药物性状和药物作用，使它们相互抵消，这样可以最大程度地保护人体健康，减少治疗后的副作用。
黄连与枳实药对有着独特的药理作用，它们的配伍研究具有重要的意义。
在实际治疗中，许多新的药物复方在中医药领域中被广泛应用，然而黄连与枳实的药理作用和有效比例仍未得到完全的探索和研究，仍有极大的空间可以拓展。
本文将从理论和实践的角度研究黄连、枳实药对的配伍，通过深入分析和对比药物性状，探讨两者如何调节有效成分，最终建立出科学的配伍方案，以期促进它们在实践中的更好应用。
2 黄连枳实药对性状特征2.1 黄连性状黄连（Rhizoma Coptidis）绿色的植物，从中生出的根茎和木质部分称为黄连，用于药用。
它有着清淡苦涩的味道，呈浅黄色，湿润度稍高，气微，甘，苦，温，质地较硬，有一定的弹性，有淡淡的清香。
黄连含有多种有效成分，其中包括黄连素、黄桔毒碱、噻唑啉等，而且还含有多种矿物质，胆碱类、维生素类以及20多种氨基酸。
2.2 枳实性状枳实（Fructus Aurantii）由枳皮和枳实组成，含有脂肪油、桔皮素、桔皮酸、大豆淀粉、十八碳三酸酐等有效成分。
山黄的功能主治
山黄的功能主治1. 山黄的概述山黄（学名：Rhizoma Coptidis）是一种常见的中药材，被广泛应用于中医临床。
它是以黄连科植物黄连的根和根茎为药材，经过干燥加工而成。
山黄在中药学中具有重要的地位，被誉为“药中之王”，其主要成分为黄连素、黄连酮等。
山黄不仅具有苦寒、清热、燥湿、解毒等药性，还具有丰富的功能主治。
2. 山黄的功能主治山黄具有多种重要的功能和主治，下面将逐一介绍：2.1 清热解毒山黄具有清热解毒的作用，对于由于热毒引起的各种感染疾病具有显著的疗效。
它能够抑制细菌的生长和繁殖，对于一些常见的感染症状如发热、咽喉肿痛、口腔溃疡等有很好的缓解作用。
2.2 燥湿利水山黄具有燥湿利水的效果，对于湿热引起的一些疾病如湿疹、湿热性腹泻等具有明显的治疗作用。
它能够促进体内湿气的排出，减轻相关症状。
2.3 调节消化系统山黄对于消化系统具有调节作用，能够促进胃肠道的消化液分泌和肠蠕动，改善食欲不振、腹胀、消化不良等症状。
2.4 抗菌消炎山黄中的黄连素和黄连酮具有显著的抗菌和消炎作用，能够有效抑制细菌和病毒的生长和繁殖，对于一些感染性疾病如咽炎、肺炎等具有良好的疗效。
2.5 抗氧化作用山黄富含黄连素等活性成分，具有很强的抗氧化作用，能够清除体内的自由基，起到延缓衰老、预防一些疾病的作用。
3. 山黄的使用方法和注意事项山黄的使用方法主要有以下几种：•冲剂：将山黄研磨成细粉，用开水冲服，可根据需要调整剂量。
•煎剂：将山黄切成薄片或碎末，放入锅中，加水煎煮，再过滤出药液，分次服用。
•胶囊剂：将山黄粉末装入胶囊中，口服。
在使用山黄时需要注意以下几点：•儿童、孕妇、哺乳期妇女和体质虚弱的个体应避免使用山黄。
•使用山黄时应遵医嘱，不可超量使用。
•对山黄过敏或有严重肝肾功能障碍的患者不宜使用山黄。
4. 总结山黄是一种广泛应用于中医临床的药材，具有清热解毒、燥湿利水、抗菌消炎、调节消化系统、抗氧化作用等多种功能主治。
中药材商品规格等级 黄连
中药材商品规格等级黄连（味连）1 范围本标准规定了黄连（味连）的商品规格等级。
本标准适用于黄连（味连）中药材生产，流通以及使用过程中的商品规格等级评价。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
中华人民共和国药典GB/T 191包装储运图示标志SB/T 11094中药材仓储管理规范SB/T 11095中药材仓库技术规范中药材生产质量管理规范(试行)（国家药品监督管理局令第32号）中药材商品规格等级通则3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
为了便于使用，以下重复列出了某些术语和定义。
黄连Coptidis Rhizoma为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch．、三角叶黄连Coptis deLtoidea C．Y．Cheng et Hsiao或云连Coptisteeta Wall.的干燥根茎。
以上三种分别习称“味连”、“雅连”、“云连”。
秋季采挖，除去须根和泥沙，干燥，撞去残留须根。
黄连规格Coptidis Rhizoma specification黄连药材在流通过程中用于区分不同交易品类的依据。
黄连等级Coptidis Rhizoma grade在黄连药材各规格下，用于区分黄连品质的交易品种的依据。
味连weilian主要为黄连的干燥根及根茎，主产于重庆、四川、湖北、湖南、陕西等地的黄连。
雅连yalian主要为三角叶黄连的根和根茎，主产于四川峨眉、眉山等市的黄连。
云连yunlian主要为云南黄连的干燥根及根茎，主要产于云南福贡、腾冲等地的黄连。
鸡爪形jizhuaxing黄连根或根茎呈簇状分枝，弯曲互抱形似鸡爪。
焦糊jiaohu黄连药材因加工不当而变黑变焦。
过桥guoqiao黄连的根茎有一段节间很长，光滑如茎秆，称“过桥”。
道地药材川黄连Dao-di Herbs chuanhuanglian指产于四川省峨眉山市及其周边各地区的黄连。
黄连生物碱治疗糖尿病——解偶联蛋白
第38卷第6期西南师范大学学报(自然科学版)2013年6月V o l.38N o.6J o u r n a l o f S o u t h w e s t C h i n aN o r m a lU n i v e r s i t y(N a t u r a l S c i e n c eE d i t i o n)J u n.2013文章编号:10005471(2013)06005404黄连生物碱治疗糖尿病解偶联蛋白2①舒何晶1,李学刚2,史青1,刘旭晶2,叶小利11.西南大学生命科学学院,重庆400715;2.西南大学药学院,重庆400715摘要:用不同浓度(4.00,2.00,1.00,0.50和0.25m g/L)的黄连生物碱(黄连碱㊁小檗碱㊁表小檗碱㊁巴马汀)处理肝癌细胞(H e p G2),应用H P L C和蛋白质印迹技术检测黄连生物碱在H e p G2细胞中的吸收及黄连生物碱对解偶联蛋白2(U C P2)表达的影响.同一浓度下,H e p G2细胞内黄连碱的浓度最高,小檗碱次之,其余生物碱含量较低;U C P2的表达量,黄连碱组最高㊁小檗碱次之,且随着黄连碱浓度和表小檗碱浓度的不断增加,细胞内U C P2相对表达量也增加,其它两组对U C P2表达影响不明显.黄连碱与小檗碱可以促进线粒体U C P2的表达且与治疗糖尿病并发症相关联.关键词:黄连生物碱;解偶联蛋白2;糖尿病;活性氧中图分类号:R961文献标志码:A现代中药化学研究:黄连(R h i z o m aC o p t i d i s)的有效成分为黄连生物碱,主要包括小檗碱㊁巴马汀㊁黄连碱㊁表小檗碱等[1-2].黄连治疗 消渴 (中医称糖尿病为 消渴 症)最早见于‘名医别录“(成书于约公元220-450年),近年来,在抗糖尿病及其并发症方面均有一定的研究发展[3-4].糖尿病防治是全球关注的重大问题[5],体内㊁外实验证实糖尿病情况下存在明显的氧化应激反应,是导致各种并发症的主要原因[6-10].因此,控制活性氧(R O S)的产生是调节体内氧化应激的主要措施之一.解偶联蛋白2(U C P2)作为线粒体载体蛋白中的新成员,能通过解偶联减少线粒体内R O S的产生[11].本实验,观察黄连生物碱在H e p G2细胞中的吸收情况以及其进入细胞后对U C P2表达的影响.1材料与方法1.1材料黄连生物碱(本实验室制备[12]);人肝癌胚胎瘤细胞H e p G2(中国典型培养物保藏中心);胎牛血清㊁R P M I-1640培养基(G i b c o公司);β-a c t i n鼠多克隆抗体㊁辣根过氧化物酶标记羊抗鼠I g G(s i g m a公司); U C P2鼠多克隆抗体(A b c a m公司);彩色预染蛋白质分子量标准㊁E C L化学发光检测试剂㊁硝酸纤维素膜(北京鼎国生物技术有限公司);其它所用试剂均为国产或进口分析纯.1.2方法1.2.1黄连生物碱在H e p G2细胞中的吸收情况1.2.1.1制备样品分别称取4种黄连生物碱各0.01g,各溶于10m L一级水中.将其分别与无血清培养基混合,使培养液中每种生物碱的终浓度(C培养液)分别为:4.00,2.00,1.00,0.50和0.25m g/L.细胞培养[5]24h后,培养基换成含有生物碱的无血清培养基和空白对照组,再培养24h.P B S缓冲溶液清洗细胞5次,最后1次清①收稿日期:20130115基金项目:国家科技重大专项10).作者简介:舒何晶(1988),女,.通信作者:叶小利,教授,硕士生导师.洗用的缓冲液用H P L C 检测其中生物碱含量.每个孔中加入1.50m LR I P A 强裂解液,静置5m i n,取混合液于20000g 离心30m i n ,取上清液浓缩10倍(此时上清液中生物碱浓度为C 浓缩).1.2.1.2 色谱条件[13]色谱柱:H y p e r s i lO D S 2(250mmˑ4.6mm ,5μm );流动相:乙腈-0.05m o l /LK H 2P O 4溶液(50ʒ50)(每100m L 加0.2g SD S );流速:1m L /m i n ;进样量:20μL ;柱温:30ħ;检测波长:345n m.1.2.2 黄连生物碱调节H e p G 2细胞中解偶联蛋白(U C P 2)的表达情况1.2.2.1 蛋白质样品的制备培养H e p G 2细胞[5],将H e p G 2细胞按5ˑ105接种于培养瓶内,待H e pG 2细胞铺满培养瓶80%,用P B S 缓冲液清洗后,加入无血清培养基培养24h ,换上含黄连生物碱(黄连碱㊁小檗碱㊁表小檗碱㊁巴马汀)的培养液,每个成分设4个浓度(0.02,0.10,0.50和2.00m g /L ),每个浓度做3个重复,培养24h 后,洗净,消化,裂解,并将同一成分的同一浓度混合,按B C A 试剂法测定蛋白浓度.1.2.2.2 W e s t e r nb l o t 检测U C P 2和β-a c t i n 蛋白每泳道上样品40μg ,12%S D S -P A G E 电泳分离蛋白样品,湿法转印N C 膜,5%脱脂奶粉37ħ封闭2h ,一抗(1ʒ1000)稀释,室温杂交1h 或4ħ过夜,辣根过氧化物酶标记的二抗孵育2h ,用E C L 发光液进行显色,胶片曝光显影,将胶片拍照,以凝胶分析软件计算各条带灰度值,目的条带与β-a c t i n 条带灰度值之比表示样本表达强度.2 结 果2.1 H e pG 2细胞对不同生物碱的吸收H P L C 检测出来的生物碱浓度即为C 浓缩,通过公式(1)计算得到细胞内生物碱的真实浓度(表1).C 胞内=C 浓缩ˑV 强裂解液S 孔ˑD 细胞ˑ10(1) 式中:C 胞内为细胞内生物碱的真实浓度;C 浓缩为经H P L C 所测得的生物碱浓度;V 强裂解液为加入的强裂解液的体积;S 孔为六孔板中每个孔的底面积;D 细胞为H e p G 2细胞的平均直径.结果显示:在同一浓度下,细胞对4种黄连生物碱的吸收程度大小为:黄连碱>小檗碱>表小檗碱>巴马汀,且细胞内相应的黄连碱和小檗碱的浓度与培养液生物碱的浓度呈良好的线性关系(表1,图1).表1 细胞内生物碱浓度C 培养液/(m g㊃L -1)C 胞内/(m g㊃L -1)表小檗碱巴马汀黄连碱小檗碱0----0.250.541ʃ0.120.386ʃ0.160.760ʃ0.240.750ʃ0.320.500.651ʃ0.410.504ʃ0.241.600ʃ0.641.080ʃ0.401.000.695ʃ0.281.240ʃ0.402.672ʃ0.801.598ʃ0.322.000.923ʃ0.480.892ʃ0.324.744ʃ0.402.104ʃ0.414.001.560ʃ0.240.945ʃ0.488.800ʃ0.644.000ʃ0.56A :黄连碱;B :小檗碱图1 培养液生物碱浓度与细胞内生物碱浓度的关系65西南师范大学学报(自然科学版) h t t p ://x b b jb .s w u .c n 第38卷Copyright ©博看网. All Rights Reserved.2.2 黄连生物碱对线粒体U C P 2的影响W e s t e r nb l o t 实验后,检测到目的条带位于33k D a 处,β-a c t i n 条带位于43k D a 处,不同生物碱不同浓度的反应条带着色不一(图2),反应了不同生物碱对促进细胞内U C P 2表达的作用不一.经Q u a n t i t y On e 软件分析后,结果如图3.实验表明:4种黄连生物碱中只有黄连碱和小檗碱能明显促进H e pG 2细胞内U C P 2的表达,在同一浓度下黄连碱促进U C P 2表达的能力较小檗碱强.表小檗碱与巴马汀在低浓度时出现抑制目的蛋白表达的现象,但随着浓度的增加,表小檗碱也能略微促进U C P 2的表达,但巴马汀却几乎无增加目的蛋白表达的作用.图2 对照及4种黄连生物碱细胞内的U C P 2的w e s t e r nb l o t结果图3 对照及4种黄连生物碱对应的U C P 2表达的影响3 分析与讨论目前,黄连及其生物碱治疗糖尿病及并发症的作用机制主要体现在以下几个方面:改善葡萄糖代谢㊁对炎症因子的影响㊁抗氧化㊁清除自由基㊁改善脂质代谢.线粒体呼吸链是糖类代谢的主要场所,在这一过程中糖被代谢产生大量的活性氧(R O S ),而细胞内过量的R O S 正是造成糖尿病并发症的罪魁祸首[14-15].P a r k i n s o n 和B r a n d 教授发现U C P 2通过解偶联作用可以抑制活性氧的产生[16].线粒体是生理条件下R O S的主要来源,R O S 的产生与电化学质子梯度(e l e c t r o c h e m i c a l pr o t o n g r a d i e n t ,әψm )呈正相关[17],解偶联蛋白2(U C P 2)作为线粒体载体蛋白中的新成员,能通过解偶联作用减少细胞内R O S 的含量.目前,黄连生物碱以U C P 2为作用位点而产生抗氧化作用的研究尚未见报道.本实验利用H P L C 和W e s t e r nb l o t 检测黄连生物碱在H e pG 2细胞中的吸收度及生物碱对U C P 2表达的影响.实验结果表明,黄连中的黄连碱和小檗碱能更好地被细胞所吸收,同时它们可以有效地提高U C P 2的表达量,可作为治疗糖尿病的新靶点.参考文献:[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M ].北京:中国医药科技出版社,2010:285-286.[2] 匡艳辉,朱晶晶,王智民,等.黄连属植物化学成分和质量控制的研究进展[J ].中国药学杂志,2008,43(15):1121-1125.[3] 彩 虹,周克元.黄连活性成分的作用及机制研究进展[J ].时珍国医国药,2010,21(2):467-468.[4] 舒 华,向丽华.黄连药理作用及临床应用[J ].甘肃中医,2004,17(12):5-6.[5] Z HUJ i a -y i n ,C E NX i a o -f e n g ,C H E NX i n ,e t a l .T h eR e s e a r c h o f C o p t i sC h i n e n s i sA l k a l o i d s S y n e r g i e s o fH y p o g l y c e m i s A c t i v i t y [J ].L i s h i z h e n M e d i c i n e a n d M a t e r i aM e d i c aR e s e a r c h.2010,21(9):2282-2284.[6] HA H ,L E E H B .R e a c t i v eO x y g e nS p e c i e sa sG l u c o s eS i g n A l i n g m o l e c u l e s i n M e s a n g i a lC e l l sC u l t u r e d U n d e rH i g h G l u c o s e [J ].K i d n e y In t ,2000,77(1):1925.[7] J O S E P H I N E M F ,M E L I N D ATC ,MA R KEC .O x i d a t i v e S t r e s s a s aM a j o r C u l p r i t i nK i d n e y D i s e a s e i nD i a b e t e s [J ].D I A B E T E S ,2008,57(6):1446-1454.[8] R O S C A M G ,MU S T A T ATG ,K I N T E R M T ,e t a l .G l y c a t i o n o fM i t o c h o n d r i a l P r o t e i n sF r o m D i a b e t i cR a tK i d n e yi s 75第6期 舒何晶,等:黄连生物碱治疗糖尿病 解偶联蛋白2Copyright ©博看网. All Rights Reserved.85西南师范大学学报(自然科学版)h t t p://x b b j b.s w u.c n第38卷A s s o c i a t e dw i t hE x c e s sS u p e r o x i d eF o r m a t i o n[J].A mJP h y s i o lR e n a l P h y s i o l,2005,289(2):420-430.[9] MA T S UMO T OS,K O S H I I S H I I,I N O G U C H IT,e t a l.C o n f i r m a t i o no f S u p e r o x i d eG e n e r a t i o nV i aX a n t h i n eO x i d a s ei nS t r e p t o z o t o c i n-I n d u c e dD i a b e t i cM i c e[J].F r e eR a d i cR e s,2003,37(7):767-772.[10]K A N GS W,N A T A R A J A NR,S HA H E DA,e t a l.R o l e o f12-L i p o x y g e n a s e i n t h e S t i m u l a t i o n o f P38M i t o g e n-A c t i v a-t e dP r o t e i nK i n a s e a n dC o l l a g e n5i nE x p e r i m e n t a lD i a b e t i cN e p h r o p a t h y a n d i nG l u c o s eS t i m u l a t e dP o d o c y t e s[J].A m S o cN e p h r o l,2003(14):317-331.[11]C H R I S T O P H EF L E U R Y,D A N I E LS A N C H I S.T h e M i t o c h o n d r i a lU n c o u p l i n g P r o t e i n-2C u r r e n tS t a t u s[J].T h e i n-t e r n a t i o n a l j o u r n a l o f b i o c h e m i s t r y&c e l l b i o l o g y,1999,31(11):1261-1278.[12]C H E N H o n g-y i n g,Y EX i a o-l i,CXL,H EK a i,e t a l.C y t o t o x i c i t y a n dA n t i h y p e r g l y c e m i cE f f e c t o fM i n o rC o n s t i t u e n t sF r o m R h i z o m aC o p t i s i nH e p G2C e l l s[J].F i t o t e r a p i a,2012,83(1):67-73.[13]李艳艳,周光明,辛丹敏,等.H P L C法测定杜仲中绿原酸和芦丁[J].西南大学学报:自然科学版,2010,32(1):59-62.[14]B R OWN L E E M.B i o c h e m i s t r y a n dM o l e c u l a rC e l l B i o l o g y o fD i a b e t i cC o m p l i c a t i o n s[J].N a t u r e,2001,414(13):813-820.[15]V I N C E N T A M,C A L L A G HA N BC,S M I T H A L,e t a l.D i a b e t i cN e u r o p a t h y:C e l l u l a rM e c h a n i s m sa sT h e r a p e u t i cT a r g e t s[J].N a t u r eR e v i e w sN e u r o l o g y,2011(10):573-583.[16]MA R T I N D.B R A N D,T E L MA C.E S T E V E S.R e v i e w-P h y s i o l o g i c a lF u n c t i o n so f t h e M i t o c h o n d r i a lU n c o u p l i n g P r o-t e i n sU C P2a n dU C P3[J].C e l lM e t a b o l i s m,2005(2):85-90.[17]贾晓丽.U C P2的研究进展[J].赤峰学院学报:自然科学版,2011,27(7):39-41.O naN e wT a r g e t f o rT r e a t i n g D i a b e t e s b y A l k a l o i d so f R h i z o m a C o p t i s-U C P2S HU H e-j i n g1,L IX u e-g a n g2,S H I Q i n g1, L I U X u-j i n g2, Y EX i a o-l i11.T h eS c h o o l o f L i f eS c i e n c e,S o u t h w e s t U n i v e r s i t y,C h o n g q i n g400715,C h i n a;2.I n s t i t u t eo fM e d i c i n e,S o u t h w e s t U n i v e r s i t y,C h o n g q i n g400715,C h i n aA b s t r a c t:T o i n v e s t i g a t e t h e a b s o r p t i o no f t h e a l k a l o i d s f r o mr h i z o m a C o p t i s b y H e p G2c e l l s a n d t h e e f f e c t o f a l k a l o i d s o nt h ee x p r e s s i o no fu n c o u p l i n gp r o t e i n2(U C P2),t h ec e l l h a sb e e nd i v i d e d i n t o5g r o u p s: c o n t r o l g r o u p,c o p t i s i n e g r o u p,b e r b e r i n e g r o u p,e p i b e r b e r i n e g r o u p a n d p a l m a t i n e g r o u p,E a c h g r o u p c o n t a i n s d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s a s f o l l o w s:4.00,2.00,1.00,0.50,0.25m g/L.A f t e r24h o u r sd r u g a d-m i n i s t r a t i o n,t h ec o n c e n t r a t i o no fd r u g i n t r a c e l l u l a ra n dt h ee x p r e s s i o no fU C P2h a v eb e e nd e t e c t e db y H P L Ca n dw e s t e r n b l o t,r e s p e c t i v e l y.I n t h e s a m e d r u g d o s e,t h e c o n c e n t r a t i o n o f i n t r a c e l l u l a r c o p t i s i n e i s t h eh i g h e s t,f o l l o w e db y b e r b e r i n e,o t h e r s a r e t h e l o w e s t,a n d s o i s t h e e x p r e s s i o no fU C P2.T h e e x p r e s-s i o no fU C P2c a nb e p r o m o t e db y c o p t i s i n e a n db e r b e r i n e,w h i c h i s a s s o c i a t e dw i t h t h e t r e a t m e n t o f d i a b e-t e s c o m p l i c a t i o n s.K e y w o r d s:a l k a l o i d s o f r h i z o m a C o p t i s;U C P2;d i a b e t e s;R O S责任编辑周仁惠Copyright©博看网. 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石大生药学实验指导02生药理化鉴别(二)
实睑二生药理化鉴别（二）［目的要求］掌握生药化学成分的主要性质与理化鉴别方法。
【实验主要仪器及试剂】试管、试管架、天平、量筒、水浴、烧杯、酒精灯、微量升华装置、显微镜；蒸储水、1%盐酸、碘化铀钾、碘化汞钾、碘-碘化钾、硅鸨酸溶液、30%硝酸、45%乙醇、三氯化铁溶液、醋酸铅试液、澳水、石灰水、1%香草醛浓硫酸试液。
【实验材料】百部、黄连、槟榔、五倍子、冰片。
【实验内容】一、生物碱1.沉淀反应：取百部（RadiXStenIonae）粉末1g,力口1%盐酸15ml,水浴加热10分钟，滤过，将滤液分置于5个试管中（其中一管做空白试验），分别滴加以下生物碱沉淀剂：碘化例钾、碘化汞钾、碘-碘化钾、硅鸨酸试液，观察有无沉淀，并注意沉淀的颜色。
2.显微化学反应⑴取黄连（RhizomaCoptidis）粉末少许，置载玻片上，加乙醇1滴润湿，微干，再加1%盐酸或30%硝酸1〜2滴，放置5〜10分钟，盖上盖玻片，置显微镜下，观察结晶形状、颜色（小槃碱）。
⑵取槟榔（SenIenAreCae）粉末O.5g,加水2ml及1滴10%硫酸，水浴中煮沸数分钟，放冷后过滤，取滤液1滴于载玻片上，加碘化例钾试液1滴，观察溶液颜色变化。
放置数分钟，盖上盖玻片，置显微镜下，观察结晶形状、颜色（槟榔碱）。
二、糅质沉淀反应：取五倍子（GalIaChinenSiS）粉末O.5g,置试管中，加水IOnI1,40~50C水浴中浸润10分钟，滤过，滤液分置于5个试管中（其中一管做空白试验），分别滴加三氯化铁溶液、醋酸铅试液、滨水、石灰水，观察有无沉淀产生及沉淀的颜色。
三、挥发油微量升华试验：取冰片(BOmeoIUmSyntyeticum)少许，进行微量升华，将载玻片取下，反转，置显微镜下，观察结晶形状，加数滴乙醇溶解，然后滴加新配制的1%香草醛浓硫酸试液，观察溶液颜色变化。
【作业】记录各类化学成分的反应过程及结果。
【思考题】生物碱、鞍质、挥发油的主要化学性质及常用理化鉴别方法。
一枝黄花的功能主治
一枝黄花的功能主治1. 简介一枝黄花，学名黄连（Scientific name: Rhizoma Coptidis），为毛茛科植物黄连的根茎。
黄连是中国传统草药的重要成员之一，被广泛应用于中医药领域。
一枝黄花在中医药学上有着广泛的应用价值，具有多种功效和主治作用。
本文将主要介绍一枝黄花的功能主治及其应用范围。
2. 功能主治2.1 清热燥湿•一枝黄花具有清热燥湿的功效，可以用于治疗湿热病症，如湿热黄疸、湿热下痢等；•可以用于清热燥湿治疗口舌生疮、疱疹等口腔炎症。
2.2 消炎解毒•一枝黄花具有抗菌、抗炎的作用，可用于感染性疾病的治疗；•可以用于治疗皮肤疾病、疮疡溃烂等症状。
2.3 抗氧化•一枝黄花富含黄连素等物质，具有较强的抗氧化作用，可以抑制自由基的生成，减轻氧化应激对身体的损伤。
2.4 改善消化功能•一枝黄花可以促进胃液分泌，增加胃肠蠕动，改善消化功能；•可用于治疗脂肪肝、胆囊炎等消化系统疾病。
2.5 调节血糖水平•一枝黄花可以降低血糖，对糖尿病患者有一定的辅助治疗作用。
2.6 抗肿瘤•一枝黄花具有一定的抗肿瘤作用，对某些肿瘤有防治作用。
3. 应用范围一枝黄花广泛应用于中医药领域，常见的应用范围包括但不限于：•湿热病症：湿热黄疸、湿热下痢等；•口腔炎症：口舌生疮、疱疹等；•感染性疾病：感冒、肺炎等；•皮肤疾病：湿疹、疮疡溃烂等；•消化系统疾病：脂肪肝、胆囊炎等；•糖尿病：辅助治疗；•肿瘤：防治作用。
4. 注意事项尽管一枝黄花有着多种功效和主治作用，但使用时仍需注意以下事项：•避免过量使用，以免引起不良反应；•孕妇、哺乳期妇女和儿童应在医生指导下使用；•个体差异性较大，使用时需根据个人体质和病情进行调整；•使用过程中如有不适或不良反应，应及时停止使用并咨询医生。
以上是一枝黄花的功能主治及其应用范围的简要介绍，一枝黄花作为一种重要的中药材，在中医药领域有着广泛的应用。
在实际应用过程中，我们应充分认识其功能特点，科学合理地应用于临床。
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来源：毛茛科植物黄连，三角叶黄 连或云连的干燥根茎。药材依次称 为“味连”，“雅连”，“云连”。
三种黄连根茎的外形图
黄连主要分布区
对环境条件的要求
主要商品规格
• 味连 • 一等品：肥壮坚实，间有过桥，长不超过 2cm，无1.5cm以下的碎节 • 二等品：较瘦小，有过桥，间有碎节。
• 雅连 • 一等品：条肥壮，过桥少，长不超过2.5cm， 无碎节，毛须，焦枯； • 二等品：较瘦小，过桥较多，间有碎节， 毛须，焦枯。
• 云连 • 一等品：条肥壮，质坚实，直径在0.3cm以 上，无毛须，过桥; • 二等品：较瘦小，间有过桥，直径在0.3cm 以下。
采收与加工
炮制
包装与贮藏
• 包装:一般用内衬潮纸的纸箱包装 ，每件15 千克 • 贮藏：置通风，阴凉，干燥处。商品安全 水分11%~13%。本品在高温多湿情况下易 生霉，贮藏期间应定期检查，若生霉，要 及时晾晒，或采用密封充氮降氧养护。
质量要求
• 性状：以条粗壮，连珠形，质坚重，断面 红黄色，有菊花心者为佳。 • 总灰分检查：不得超过5.0%。
化学研究
三种黄连的成分区别
功能主治
黄连上清片
双黄连颗粒
2008年1月-2012年5月初黄连价格走势图（单位：元/吨）
参考文献
本节到此结束
谢谢生黄连片Fra bibliotek饮片• （1）黄连片：为不规则薄片或碎片。周边暗黄色， 粗糙，有细小须根。切面皮部暗棕色，木部鲜黄 色或橙黄色，呈放射状排列，髓部有时中空。质 坚硬。气微，微极苦。 • （2）酒黄连：形如黄连片，色泽加深，略有酒气。 • （3）姜黄连：形如黄连片，表面棕黄色，有姜的 辛辣味。 • （4）萸黄连：形如黄连片，色泽加深，有吴茱萸 的辛辣味。