测定尿糖原理的班氏法解析
高中生物必修3实验：模拟尿糖的检测
高中生物必修3实验：模拟尿糖的检测
实验十六模拟尿糖的检测
目的：学会尿糖的检测方法、检查“尿样”中是否含有葡萄糖。
1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液
2、检测方法：斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸
3、结果：(用斐林试剂检测)试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。
4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。
班氏试剂：①在40ML水中加入85ML柠檬酸钠和50g无水碳酸钠，形成柠檬酸钠――Na2CO3溶液。
②在50ML热水中加入8.5g无水CuSO4制成CuSO4溶液，③把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠――Na2CO3溶液中，边加边搅拌，如有沉淀可过滤。
班氏试剂同斐林试剂一样，同还原糖反应，生成砖红色沉淀。
优点：1，班氏试剂可长期保存，不必现配现用，柠檬酸钠――Na2CO3为缓冲对，产生的OH-有限，2，碱性比斐林试剂弱，灵敏度高，干扰因素少，实际应用更多。
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尿糖的定性检测-尿糖定性试验
尿糖的定性检测
目的：初步学会尿糖定性检验的方法。
材料器具：人体新鲜尿液；试管，酒精灯，试管夹，火柴，滴管；班氏试剂。
步骤：1、在试管中加入1毫升班氏试剂，加热到沸腾，如不变色，则可使用。
2、再在试管中滴入2滴新鲜澄清的尿液，摇匀。
3、加热上述混合液到沸腾，并持续二三分钟。
4、观察试管内混合液颜色是否发生变化，是否有沉淀物产生，并按下表提示作出判断记录。
注意事项：1、班氏试剂和尿液混合液的比例应为10∶1。
2、如是糖尿病人，检验前二三天最好停止服药。
分析和讨论：
正常人的尿液中只含微量葡萄糖（少于0.02克%），一般定性检验不能检出。
一旦出现尿糖应及时请医生检查原因，并予以治疗。
尿蛋白定性检验
目的：初步学会尿蛋白定性检验的方法。
材料器材：新鲜尿液；酒精灯,试管,试管夹；2%乙酸溶液,20%磺酸水杨酸溶液
方法一加热乙酸法
步骤：在试管里加入新鲜尿液3毫升，放在酒精灯上加热到沸腾，观察有无混浊产生，如无混浊，或虽有轻微混浊，但在加入数滴2%乙酸溶液后，混浊消失，这表示尿液中不含有蛋白质。
如有混浊，并在加入数滴2%乙酸溶液后，仍不消失的，这表示尿液中含有蛋白质，并可根据下表中提示定性判断尿液中蛋白质的含量。
如何正确的化验尿糖(图).docx
如何正确的化验尿糖(图)
目前常用的化验尿糖的方法为班氏(Benedict)尿糖定性检查法。
其化验用的试剂及器具有：班氏试剂(蓝色，医院化验室或药房有售，也可自己配制)，滴管2支，木夹1个，试管(10毫升长)1支，酒精灯1盏。
具体操作方法如下：
取班氏液1毫升(必须原色——蓝色不变方可使用)故人试管内，点燃酒精灯，用木夹夹住试管在酒精灯上加热煮沸，随即加入尿液2滴(试剂与尿液之比不得超过10∶1。
为方便起见，也可用20滴班氏试剂加热至沸后加入2滴尿液，置于酒精灯上再煮沸1～2分钟，边煮边摆动，以防液体喷溅出管外，并注意试管口不要对着自己脸面，以防沸液喷溅烫伤面部，也不要将火烧到液面以上试管，防止将试管烧裂。
待冷却后分杨结果：蓝色(原色不变)为(一)，说明无糖；绿．色为(十)，含糖微量，＜0．5克％；绿黄色为(十十)，含糖少量，0．5克％～1克％；土黄色为(十十十)，含糖中等量，1克％～2克％；砖红色为(十十十十)，含糖大量，2克％～3克％。
尿糖试纸法。
此方法简便、准确，携带也方便，国内已有生产，如广州白云山制药厂生产的尿糖试纸，在全国各地均有销售，很受广大糖尿病人的欢迎。
使用方法是：将试纸浸入尿液中，湿透(约1秒钟)后取出，在1分钟内观察试纸颧色并与标准色板对照，即能得出测定结果。
在使用时应注意，每次取试纸后，须立即将瓶塞盖紧，在阴凉干燥处保存，以防变质。
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尿糖的检测实验报告
一、实验目的1. 了解尿液中糖分的存在情况。
2. 掌握尿糖的定性检测方法。
3. 学习班氏法检测尿糖的原理和操作步骤。
二、实验原理尿糖检测是通过检测尿液中葡萄糖的含量来评估机体糖代谢状况的一种方法。
葡萄糖是人体代谢过程中产生的主要糖类物质，正常情况下，肾脏会将多余的葡萄糖重吸收，因此尿液中葡萄糖含量极低。
当血糖浓度升高，超过肾脏的重吸收阈值时，多余的葡萄糖会随尿液排出体外，形成尿糖。
班氏法检测尿糖的原理是：葡萄糖分子中含有醛基，在碱性条件下，葡萄糖可以将试剂中的蓝色硫酸铜还原成黄色的氢氧化亚铜，并进一步与班氏试剂中的酒石酸钾钠反应生成红色氧化亚铜沉淀，从而判断尿液中是否存在葡萄糖。
三、实验仪器和试剂1. 仪器：离心机、移液器、试管、试管架、酒精灯、石棉网、加热板等。
2. 试剂：尿液样本、班氏试剂（含硫酸铜、酒石酸钾钠、氢氧化钠）、盐酸、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 尿液样本准备：取适量尿液样本，离心后取上清液备用。
2. 班氏试剂准备：将班氏试剂中的硫酸铜、酒石酸钾钠、氢氧化钠按比例混合，配制成班氏试剂。
3. 尿糖检测：a. 取三个试管，分别标记为A、B、C。
b. 在A、B、C试管中分别加入等量的尿液样本。
c. 在每个试管中加入2滴班氏试剂。
d. 将试管放入水浴中加热，保持沸腾状态5分钟。
e. 观察试管中颜色变化，记录结果。
五、实验结果与分析1. 结果：- A试管：出现红色沉淀。
- B试管：出现淡红色沉淀。
- C试管：无沉淀。
2. 分析：- A试管中出现红色沉淀，说明尿液样本中葡萄糖含量较高。
- B试管中出现淡红色沉淀，说明尿液样本中葡萄糖含量较低。
- C试管中无沉淀，说明尿液样本中不含葡萄糖。
六、实验结论1. 通过本次实验，成功掌握了尿糖的定性检测方法。
2. 班氏法检测尿糖操作简便、结果准确，适用于临床诊断。
3. 实验结果表明，尿液样本中葡萄糖含量与检测结果呈正相关。
七、实验注意事项1. 实验过程中注意操作规范，避免污染。
尿糖捡测实验报告
一、实验目的本次实验旨在了解尿液中糖分的存在情况，掌握尿糖捡测的基本原理和方法，并通过实验验证尿糖捡测结果的准确性。
二、实验原理尿糖捡测是基于尿液中的葡萄糖在特定条件下与试剂发生化学反应，产生颜色变化来定性判断尿液中的糖分含量。
常用的尿糖捡测方法有班氏法、葡萄糖氧化酶法等。
本实验采用班氏法进行尿糖捡测，其原理如下：葡萄糖含有醛基，在碱性条件下，能将班氏试剂中的蓝色硫酸铜还原为黄色氢氧化亚铜，进而生成红色的氧化亚铜沉淀。
沉淀颜色的深浅与尿液中的葡萄糖含量成正比。
三、实验仪器和试剂1. 仪器：试管、酒精灯、试管夹、滴管、恒温水浴锅等。
2. 试剂：班氏试剂、尿液样本、盐酸、氢氧化钠等。
四、实验步骤1. 取一支试管，加入2ml尿液样本。
2. 加入1ml班氏试剂，充分混合。
3. 将试管放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态5分钟。
4. 取出试管，用冷水冲洗至室温。
5. 观察试管中是否出现红色沉淀，记录结果。
五、实验结果与分析1. 正常尿液：无红色沉淀产生。
2. 尿糖阳性尿液：出现红色沉淀，沉淀颜色越深，说明尿液中的糖分含量越高。
六、实验讨论1. 本实验采用班氏法进行尿糖捡测，该方法简单易行，操作方便，适用于临床诊断和健康检查。
2. 实验过程中，应严格控制加热时间，以确保反应充分进行。
同时，应避免过度加热，以免影响实验结果。
3. 在观察实验结果时，应注意沉淀颜色的深浅，以便准确判断尿液中的糖分含量。
4. 本实验结果表明，班氏法可用于尿糖捡测，且结果准确可靠。
七、结论通过本次实验，我们掌握了尿糖捡测的基本原理和方法，了解了尿液中的糖分含量。
实验结果表明，班氏法是一种简单易行、结果准确的尿糖捡测方法，适用于临床诊断和健康检查。
八、注意事项1. 实验过程中，应严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性。
2. 在进行尿糖捡测时，应注意尿液样本的采集和保存，避免污染和变质。
3. 实验结果仅作为参考，确诊糖尿病等疾病需结合临床诊断和其他检查结果。
尿液化学(一)
加尿液 加氯化钙 离心取上清液 加Ehrlicn试剂 观察反应
尿液 1m l 磺基水杨酸试剂 1～2滴 立即观察结果
尿液蛋白质定性（磺基水杨酸法）
尿液蛋白质定性（干化学法）
【原理】利用指示剂的蛋白质误差原理，在PH3.2的条件下， 酸碱指示剂（溴酚蓝）产生的阴离子与带阳离子的蛋白质结合 生成复合物，引起指示剂进一步电离，当超越缓冲范围时，指 示剂发生颜色改变，颜色的深浅与蛋白质含量成正比。 【评价】 1. 试带对白蛋白敏感，对球蛋白的灵敏度仅为白蛋白的1/100～ 1/50，容易漏检本周氏蛋白 2. 试带法不适用于肾脏疾病的疗效观察及预后判断 3. 采用单克隆抗体技术的试带检测白蛋白可排除其他蛋白质的干 扰。基于考马斯亮蓝等染料结合蛋白质的原理，国外已研发一 种新型蛋白质试带，对白、球、本周氏同样灵敏。 4. 操作影响：试带浸渍时间过长，反应颜色变深，反之。
尿液蛋白质定性（磺基水杨酸法）
【原理】在略低于蛋白质等电点的酸性环境下，磺基水杨酸根离子 与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不溶性蛋折盐而沉淀。沉淀量或 溶液浑浊程度，可反映蛋白质的含量，为定性或半定量检查方法。 【评价】简便、敏感，清蛋白、球蛋白、本周氏蛋白均可检出，曾 为CCCLS推荐为参考方法，便干扰因素多，有些药物（大剂量的庆 大、青霉素）及盐类结晶可致假阳性。而大剂量的奎宁、磺胺等药 物使尿液呈碱性（PH＞9），造成尿蛋白呈假阴性 【灵敏度】达50mg/L 【操作】
尿糖的测定实验报告
一、实验目的1. 了解尿糖检测的基本原理和方法。
2. 掌握班氏法测定尿糖的操作步骤和注意事项。
3. 培养实验操作技能，提高对尿糖测定的实际应用能力。
二、实验原理尿糖检测是诊断糖尿病及其并发症的重要手段之一。
尿糖的检测原理基于班氏法，该方法利用葡萄糖在碱性溶液中能将硫酸铜还原为氧化亚铜，氧化亚铜在加热条件下与斐林试剂反应生成砖红色沉淀，从而判断尿液中是否存在葡萄糖。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：班氏试剂、硫酸铜试剂、斐林试剂、加热器、试管、试管架、滴管、酒精灯、蒸馏水等。
2. 试剂：尿液样本、班氏试剂、硫酸铜试剂、斐林试剂。
四、实验步骤1. 取一支试管，加入1ml尿液样本。
2. 向试管中加入0.5ml班氏试剂，轻轻振荡混合。
3. 将试管放入水浴中，加热至沸腾，保持沸腾状态5分钟。
4. 取出试管，加入0.5ml斐林试剂，轻轻振荡混合。
5. 再次将试管放入水浴中，加热至沸腾，保持沸腾状态2分钟。
6. 观察试管内颜色变化，与标准比色卡进行对比，判断尿液中葡萄糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果通过实验，观察尿液样本在加入班氏试剂和斐林试剂后的颜色变化，与标准比色卡进行对比，得出尿液样本中葡萄糖的含量。
2. 结果分析实验结果显示，尿液样本中葡萄糖含量为（数值）mg/dl。
根据实验结果，可以判断尿液样本中是否存在葡萄糖，从而判断是否患有糖尿病。
六、实验讨论1. 实验过程中，加热温度和时间对实验结果有一定影响。
加热温度过高或时间过长，可能导致实验结果偏大；加热温度过低或时间过短，可能导致实验结果偏小。
2. 实验过程中，应严格控制尿液样本的量，避免尿液样本过多或过少对实验结果产生影响。
3. 实验过程中，应注意避免外界因素的干扰，如室温、湿度等。
七、实验总结本次实验通过班氏法测定尿糖，掌握了尿糖检测的基本原理和操作步骤。
实验过程中，需要注意加热温度、时间等因素对实验结果的影响，同时严格控制尿液样本的量，以获得准确的实验结果。
尿液糖定性检查分析
尿液糖定性检查分析葡萄糖为分子量180的单糖，含有还原性的醛基。
由食物中吸收，肝细胞将其大量摄取转化为肝糖原贮存，血浆浓度为3.9～6.1mmol/L(葡萄糖氧化酶测定法)，经肾小球全部滤过，在肾近曲小管几乎全部被主动重吸收，正常人尿液中仅有微量葡萄糖，排出量为0.6～1.7mmol(0.1～0.3g)/24h，浓度为0.3～0.8mmol/L(50～150mg/L)，定性为阴性。
当血浆葡萄糖含量超过肾糖阈(>8.88mmol/L)，或肾小管重吸收能力下降时，尿糖定性为阳性，称为糖尿。
1 测定方法及评价1.1 班氏法葡萄糖的还原性醛基在热碱性条件下，将蓝色硫酸铜还原为氧化亚铜，进而生成红色的氢氧化亚铜沉淀。
本法创建于1911年，由美国辛辛那提大学一名17岁大学生Stanly Benedict首先报道，在试剂配方上历经改进沿用至今。
该法稳定，敏感度为5.5mmol/L，但缺乏特异性，尿中其它糖类(果糖、乳糖、戊糖等)和许多还原性物质(肌酐、尿酸、Vit C等)都可与班氏试剂起反应，出现假阳性。
因此逐渐被葡萄糖氧化酶试带法取代。
1.2 干化学试带法自1956年起，开始研制出葡萄糖氧化酶干化学试带，葡萄糖氧化酶只与尿中葡萄糖产生氧化还原反应，生成的H2O2可催化色原邻甲苯胺(或碘化钾)显色。
本法简便、快速、特异性高、较班氏法更为敏感(试带敏感度在2.0～5.0mmol/L)、与班氏法测定结果之间存在一定差异、具有半定量作用，但尿中含有Vit C等还原性物质的竞争性抑制而呈假阴性，现已研制出含Vit C氧化酶的试带可排除这一干扰。
另外，高浓度酮体、高比重尿均可降低试带的敏感性，该法极少出现假阳性。
本法可以目测，也可用于尿自动分析仪。
2 质量控制2.1 标本留取根据临床需要留取清晨空腹尿或餐后2h尿。
2.2 容器清洁不含氧化性物质，否则易导致班氏法假阴性而试带法假阳性。
2.3 及时送检标本不宜长时间存放，以免细菌繁殖造成假阴性结果。
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测定尿糖原理的班氏法解析
测定尿糖是人体健康监测的重要指标之一。
尿糖的测定方法众多，其
中班氏法是常用的一种。
本文将介绍班氏法的原理和操作步骤，以及
其在尿糖测定中的应用和局限性。
班氏法是利用酚作为还原剂与硫酸铜（Fehling液）反应，生成红色的氧化铜沉淀，进而定量测定尿液中的糖分含量。
该方法的原理基于尿
液中的还原性物质（如葡萄糖、果糖等）能与酚一起氧化，生成对应
的酚醛酸，同时将硫酸铜还原为氧化铜沉淀。
而尿液中没有还原性物
质时，硫酸铜会保持蓝色。
接下来，让我们逐步解析班氏法的操作步骤。
我们需要准备班氏试剂，它是由Fehling A液和Fehling B液组成的。
Fehling A液含有硫酸铜和硝酸铜，Fehling B液含有碱式酱油盐和酚。
接下来，我们将尿液样品与班氏试剂混合，并进行加热。
在加热的过
程中，如果尿液中含有还原性物质，它们将与酚一起氧化，生成红色
的氧化铜沉淀。
这种沉淀的形成可以用肉眼观察到。
我们需要注意一个重要的步骤，就是控制加热的时间和温度。
如果加
热时间太短或温度过低，尿液中的还原性物质可能没有完全氧化，导
致实验结果偏低。
相反，如果加热时间太长或温度过高，还原性物质可能过度氧化，导致实验结果偏高。
完成反应后，我们可以通过比色法来定量测定尿液中的糖分含量。
可以利用分光光度计来测量生成的氧化铜沉淀的吸光度，然后与已知浓度的糖溶液进行比较，从而确定尿液中的糖分含量。
然而，班氏法也存在一些局限性。
该方法只能定性和定量测定还原性糖分，对非还原性糖分的测定效果较差。
班氏法对其他物质的干扰比较敏感，如某些药物和尿液中存在的其他化合物。
在使用班氏法测定尿糖时，需要注意样品的处理和准备，以确保准确性和可靠性。
班氏法是一种常用的测定尿糖的方法，其原理是利用酚作为还原剂与硫酸铜反应，从而测定尿液中的糖分含量。
然而，该方法也存在一定的局限性。
对于准确的尿糖测定，我们建议结合其他方法和技术，以获得更全面、准确和可靠的结果。
1. 班氏法的原理与步骤
班氏法是一种常用的测定尿液中糖分含量的方法。
它的原理是利用酚作为还原剂与硫酸铜反应，生成氧化铜沉淀。
通过测量氧化铜沉淀的吸光度，可以定量测定尿液中的糖分含量。
实施班氏法的步骤如下：
1) 将尿液样品与一定数量的酚溶液混合，待反应进行。
2) 将混合物中加入硫酸铜溶液，继续反应。
3) 接下来，将混合物在加热的条件下进行反应。
加热的时间和温度需要控制好，以确保反应的充分进行。
4) 反应结束后，使用分光光度计测量生成的氧化铜沉淀的吸光度。
5) 将测得的吸光度与已知浓度的糖溶液进行比较，从而确定尿液中的糖分含量。
2. 班氏法的局限性
尽管班氏法是一种简单而常用的测定尿糖的方法，但它也存在一些局限性。
班氏法只能定性和定量测定还原性糖分，对非还原性糖分的测定效果较差。
这是由于酚作为还原剂仅能与还原性糖分发生反应，而不能与非还原性糖分发生反应。
班氏法对其他物质的干扰比较敏感。
某些药物和尿液中存在的其他化合物可干扰班氏法的测定结果，导致误差的产生。
在使用班氏法测定尿糖时，需要注意样品的处理和准备，以减少干扰物的存在。
3. 提高尿糖测定准确性的建议
为了获得准确和可靠的尿糖测定结果，建议结合其他方法和技术进行测定。
以下是一些建议：
1) 结合尿糖试纸和尿糖仪一起使用，能够快速进行尿糖的定性检测。
尿糖试纸能够根据尿液中的糖分含量显示不同的颜色，尿糖仪可以进
一步定量分析尿糖的浓度。
2) 可以使用光谱法来测定尿液中糖分的含量。
利用光谱仪测量特定波
长下尿液的吸光度，可以与已知浓度的糖溶液进行比较从而确定尿液
中糖分的含量。
3) 结合高效液相色谱法或气相色谱-质谱联用技术进行尿糖的准确测定。
这些方法可以检测多种糖类同时存在的情况，并具有高灵敏度和准确性。
在测定尿糖时，班氏法是一种常用且简便的方法。
然而，为了获得更
准确和可靠的结果，我们建议结合其他方法和技术进行测定，以克服
班氏法的局限性，并确保测定结果的准确性。