儿茶酚胺类神经递质检测方法研究
鼠脑尾核和海马区微透析液中儿茶酚胺类神经递质的高效液相色谱分析

Mg I0 8mmo/ C C 2 . C2 . lL, a I1 2mmo/ ) p iL , H一6 7 . ,流速 Iu / n L mi.每只 鼠只插入 一 根微 透析探 针.
收 藕 日期 :2 0- 32 . 0 10 .1
基金项 目; 国家 自然科 学基金 ( 批准号 : 9 7 0 7 和中国科 学院基础性研究重大项目t 准号: j9 1A .0 — 3资 助 2752) 批 K 5. 15 70 )
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儿 茶酚胺类 神经递质 的含量 关键 词
测 定 肾上 腺 素 , 敏 度 为 2 g 1 灵 5g / .
神经递质 ;微透析取样 ;脉 冲安 培检测 O 5 67 文献标 识码 A 文章编号 0 5.7 0 20 ) 0 5一3 2 10 9 (0 2 o 52o
中图分类号
自瑞典科 学 家 Un eset等 提 出 了同心 型微 透析 取样 技术 以来 , g rt d 用微 透析 取 样对 活 体动 物 的各
鼠脑尾 核和海 马区微透 析液 中儿茶酚胺 类 神经递质的高效液相色谱分析
儿茶酚胺检查方法

儿茶酚胺检查方法儿茶酚胺(catecholamine)是指一类含有羟基化苯环的生物活性物质,包括肾上腺素(epinephrine)、去甲肾上腺素(norepinephrine)和多巴胺(dopamine)。
儿茶酚胺在人体内的分泌和代谢异常与多种疾病有关,如高血压、心血管疾病、精神障碍等。
因此,检查儿茶酚胺的水平可以作为疾病诊断和治疗的重要指标。
目前常用的方法包括高效液相色谱法、放免法以及气相色谱法等。
高效液相色谱法是目前儿茶酚胺检查的主要方法之一。
该方法基于儿茶酚胺具有发光性质,通过将样品与荧光标记的试剂一起注入液相色谱仪中,分离出儿茶酚胺,然后在荧光检测器中检测它们的发光信号,从而确定儿茶酚胺的水平。
这种方法具有灵敏度高、特异性好、操作简便等优点,被广泛用于生物学研究和临床诊断。
放免法是另一种常用于儿茶酚胺检查的方法。
它基于儿茶酚胺与特异性抗体之间的免疫反应,通过将样品与标记有酶、荧光物质或放射性同位素的抗体一起进行反应,然后通过测定其酶活性、荧光强度或放射性来确定儿茶酚胺的水平。
适用于临床实验室常规检测的优势之一是可同时检测多种儿茶酚胺,如肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺等,具有高灵敏度和高特异性。
气相色谱法是一种分离和测定儿茶酚胺的有效方法。
该方法基于儿茶酚胺的挥发性,通过样品的蒸发和在气相色谱柱中的分离,再经过检测器检测其峰的形成来定量测定儿茶酚胺的水平。
由于气相色谱法具有高分辨率和定量精度高的特点,被广泛应用于临床和研究领域。
需要注意的是,儿茶酚胺的检查方法需要特殊的样品制备步骤。
首先,需要选择合适的采样时间和方式,通常在早上或者剧烈运动后采集血液样品,以获得较高的儿茶酚胺水平。
其次,应尽量避免外部因素的影响,如戒除儿茶酚胺类药物、停止运动、戒烟等。
在采样后的处理过程中,要密封保存样品以防止儿茶酚胺的分解和损失。
此外,在检测前,还需要根据具体的检查方法准备样品,如提取、净化等。
总的来说,儿茶酚胺的检查方法有高效液相色谱法、放免法和气相色谱法等。
生物样品中儿茶酚胺类物质检测方法的研究进展113

生物样品中儿茶酚胺类物质检测方法的研究进展儿茶酚胺类(CAs)物质主要包括去甲肾上腺素(NE),肾上腺素(EP)和多巴胺(DA),广泛用于高血压的诊断和治疗,心脏骤停,支气管哮喘,帕金森氏病,心肌梗塞和心脏手术等。
近年来,随着对CAs研究的深入,国内外很多研究者开始将前期的分离与后期的检测步骤相结合,从而开发了一系列高效、高选择性、高灵敏度的CAs类物质检测方法。
的应用。
接下来分别从电化学分析法,荧光分析法,化学发光分析法以及液质联用法四个方面来分别进行综述。
1.电化学分析法由于ECD的高选择性,因此ECD最常被用来检测CAs类物质。
实验方法通过电化学氧化,CAs类物质很容易转换成醌类物质。
近年来,HPLC-ECD联用法已成功被用于各种生物流体中CAs类物质的分析检测,如血浆、尿液以及组织样品,同样也被用于血浆、尿液以及鼠脑微透析样品中CAs类物质的分析检测。
近年来,CE与ECD联用的方法也被用来检测生物样品中的CAs类物质[1]。
2.荧光分析法FL因其具有高度的选择性和灵敏度而备受人们的青睐。
该法之所以能直接用来检测CAs类物质,是由于CAs类物质本身就具有荧光[2]。
方兰云[2]等建立了一种固相萃取-HPLC-FL联用的方法,对吸毒人员血浆中NE、EP和DA及其代谢产物分别进行了测定,该方法首先利用固相萃取小柱 (SUPELCO RIDA C18) 对血浆样品进行前处理,然后通过HPLC将待测物进行分离,最后经过FL对CAs及其代谢产物进行检测。
3.化学发光分析法3.1 LC-CL联用法LC-CL联用法由于其具有灵敏度高,仪器简单和自动化程度高等优点,被人们普遍用来检测生物流体中痕量CAs类物质。
到目前为止,用来检测CAs类物质的CL体系主要有鲁米诺化学发光体系、过氧化草酸酯发光体系以及ECL[4]。
3.2 CE-CL联用法CE作为一种新的分离技术已经被应用到许多相关领域,作为一种高效能的分离分析手段,国内外很多学者已经将其应用于CAs类物质的检测[5],该方法分离时间短,操作简便,样本不需要进行衍生,但是其检测灵敏度较其他方法低。
儿茶酚胺及其代谢产物检测意义

儿茶酚胺及其代谢产物检测意义
儿茶酚胺是一类重要的神经递质,包括肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺等。
它们在调节中枢神经系统、自主神经系统和内分泌系统等方面起着重要作用。
因此,儿茶酚胺及其代谢产物的检测对于评估神经功能和疾病诊断具有重要意义。
儿茶酚胺及其代谢产物的检测可以用于以下方面:
1. 神经系统疾病诊断:儿茶酚胺的代谢产物在体内循环,其水平的改变可以反映某些神经系统疾病的存在和程度。
例如,儿茶酚胺代谢产物的测量可用于帕金森病、抑郁症和注意力缺陷多动症等疾病的诊断和疾病进展的监测。
2. 肿瘤生物标志物:某些神经内分泌肿瘤会产生过量的儿茶酚胺,如嗜铬细胞瘤和神经节细胞瘤。
通过检测儿茶酚胺及其代谢产物的水平,可以帮助诊断和监测这些肿瘤的存在和治疗效果。
3. 药物和毒物代谢研究:某些药物和毒物的代谢需要通过儿茶酚胺途径完成。
通过检测儿茶酚胺及其代谢产物的水平,可以了解药物和毒物在体内的代谢过程,评估其安全性和有效性。
综上所述,儿茶酚胺及其代谢产物的检测对于评估神经功能、神经系统疾病诊断和治疗效果评估等具有重要意义。
高效液相色谱法检测大脑神经递质多巴胺-最新文档资料

高效液相色谱法检测大脑神经递质多巴胺多巴胺(dopamine, DA)是一类儿茶酚胺类物质(CAs),它存在于神经组织及体液中,是下丘脑和脑垂体腺中的一种重要的神经递质,脑垂体内分泌功能的协调与多巴胺在脑内特定区域的分布及含量有密切关系,导致神经功能紊乱,是帕金森病(Parkinson’s disease)发病的一个重要影响因素。
另外,多巴胺还能够引起心脏兴奋,使血流量增加,以用于感染性休克和心源性休克。
所以,进行多巴胺检测的研究具有重要的现实意义[1]。
本文就多巴胺的高效液相色谱法检测作一综述。
高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)[2,3]也是通用的DA的检测方法。
近年来,由于高效液相色谱技术的不断发展,用HPLC法分离测定体液和组织中CAs的方法日趋完善,检测灵敏度可达pmol水平。
高效液相色谱法具有高分离率,所以在CAs的分析中受到极大重视,HPLC法同电化学检测和荧光检测相结合是目前最有效且最常用的方法。
CAs本身有自然荧光,经HPLC法分离后,可以利用它的荧光进行检测,但是由于其自然荧光相对比较弱,不能用作生物样品灵敏的选择性测定方法。
儿茶酚胺类物质具有两个官能团(氨基和邻二羟基),因此可以通过衍生化形成具有强荧光的物质,借此提高检测灵敏度。
吴予明等[4]利用HPLC和荧光检测器对嗜铬细胞瘤患者和正常人24h尿中DA含量进行测定,对样品进行调酸、萃取、调碱、吸附、洗涤、解析处理后,100微升进样,结果可见:多巴胺浓度在1.3*10-7mol/L~3.8*10-6mol/L内与色谱峰峰高的线性关系良好(r=0.998)精密度RSD(n=6)4.2%~10.3%。
衍生化可分成柱前衍生化和柱后衍生化两种,在分离前需要制备荧光衍生物的柱前衍生化是,有邻苯二甲醛(OPA)、荧光胺(FA)、丹磺酞氯(DNSCI) l,2一二苯基乙二胺(DPE)及萘一2,3一二羧醛等属于柱前衍生化试剂。
儿茶酚胺测定方法

儿茶酚胺测定方法儿茶酚胺(也称为生物胺)是一类含有芳香胺结构的有机化合物,包括组胺、色胺、肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺等。
它们在人体内起着重要的生理功能,包括调节血压、控制神经传递、参与免疫反应等。
因此,准确测量儿茶酚胺的含量对于临床诊断、药物研发以及食品安全等方面具有重要意义。
目前,有多种方法可以用来测定儿茶酚胺的含量,其中最常用的方法包括高效液相色谱法、气相色谱法和电化学法。
下面将详细介绍这些方法的原理和优缺点。
1. 高效液相色谱法(HPLC)是测定儿茶酚胺含量最常用的方法之一。
它基于样品中的儿茶酚胺在液相中的化学行为进行分离和检测。
首先,样品经过合适的前处理步骤,如固相萃取、酸解等,以提取出儿茶酚胺。
然后,将提取液注入高效液相色谱仪中,通过固定相的相互作用与待测儿茶酚胺发生分离。
最后,使用紫外光检测器或电化学检测器在特定波长下进行检测和定量。
这种方法的优点是分离效果好、测量灵敏度高,具有较高的选择性和准确性。
然而,HPLC方法需要复杂的仪器装置和操作技术,在分析过程中可能会受到杂质的干扰。
2. 气相色谱法(GC)是另一种常用的儿茶酚胺测定方法。
与HPLC类似,样品需要经过前处理步骤来提取儿茶酚胺。
然后,将提取液注入气相色谱仪中,通过气相载气流动相与待测儿茶酚胺发生分离。
最后,使用火焰离子化检测器或电子捕获检测器进行检测和定量。
气相色谱法的优点是分离效果好,分析速度快,且对样品矩阵的干扰较小。
然而,这种方法对于热稳定性较差的儿茶酚胺样品可能会导致峰形变形或降解,同时需要较高的操作技术水平。
3. 电化学法是一种测定儿茶酚胺含量的简便方法。
基于儿茶酚胺的电化学活性,在适当的电极上触发与儿茶酚胺的氧化或还原反应,并利用产生的电流或电势信号进行测定和定量。
电化学法的优点是样品前处理简单,测量速度快,操作简便。
同时,电化学法对儿茶酚胺的测量灵敏度较高,且具有良好的选择性。
然而,由于儿茶酚胺具有不同的氧化还原性质,在不同pH值和电极材料条件下可能会出现不同的电化学行为,因此需要根据具体的分析对象选择适当的电极和工作条件。
生物样品中儿茶酚胺的分析方法研究进展

化工科技,2020,28(5) :75〜80SCIENCE & TECHNOLOGY IN CHEMICAL INDUSTRY综述专论生物样品中儿茶酚胺的分析方法研究进展周 慧1,董 佳】,贺茂芳12**,刘文杰1,程清轩】,何孝文1*基金项目:陕西省大学生创新创业训练计划项目(2018DC-43);西安医学院国家自然科学基金孵育项目(2017GJFY08).* * *通讯联系人:贺茂芳(1989-),女,陕西安康人,博士,西安医学院讲师,研究方向为药物分析与样品前处理. 作者简介:周慧(1998-),女,内蒙古呼和浩特人,西安医学院药学院本科生,研究方向为药物分析.收稿日期:2020-09-06(1.西安医学院药学院,陕西西安7100212.西安医学院药物研究所,陕西西安710021)摘要:儿茶酚胺(CAs)是重要的神经递质,在生物体内发挥着至关重要的生理功能.因此,建立选择性好、灵敏度高、快速准确的分析方法在临床诊断中具有重要意义.作者就近年来儿茶酚胺的分离 分析方法进行了综述,包括高效液相色谱法、毛细管电泳法、电化学法和光谱法,为建立CAs 的检测新方法提供了参考依据.关键词:生物样品;儿茶酚胺;分析方法中图分类号:R 927;O 657.3 文献标识码:A 文章编号:1008-0511(2020)05-0075-06儿茶酚胺(Catecholamines, CAs)类物质主要 包括去甲肾上腺素(Norepinephrine, NE)、5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine, 5-HT )、肾上腺素(Epinephrine , E)和多巴胺(Dopamine, DA)[1]. CAs 既是神经传导介质,也是内分泌激素,在生物体内发挥重要的生理功能.临床上,可通过检 测人体中血浆或尿液中CAs 的浓度水平用于诊 断高血压、糖尿病、甲状腺功能异常等内分泌相关的疾病[23].因此,建立选择性好、灵敏度高、快速 准确的分析方法具有重要意义.目前,测定CAs 的方法有高效液相色谱法(HPLC)、毛细管电泳 法(CE)、电化学法和荧光光度法(FL)等.作者就近年来CAs 的测定方法进行了评述,将为发展CAs 的检测新方法提供参考依据.1 HPLC 法HPLC 法由于具有方便、快速、准确等优点,是CAs 最常用的分析方法.由于CAs 分子中的 氢键易于和硅醇基形成氢键,从而造成不可逆吸 附,因此通常向流动相中加入酸改善峰型;或者向流动相中加入离子对试剂,如十八烷基磺酸钠,采用离子对色谱进行分离.HPLC 法常与电化学 检测器(ECD)、荧光检测器(FLD)、质谱(MS)等 联用,以提高灵敏度⑷,ECD 因其高灵敏度、高分离效率成为首选.1.1 HPLC-ECD李静娜等[]建立了 HPLC-ECD 法测定人体 血清中的CAs,首先采用氧化铝作为固相萃取材 料对CAs 进行预富集,再运用HPLC-ECD 检测,获得最低检出限为0.1 ng/mL.该方法操作简单,所需生物样本少,同时,还具有灵敏度高、回收 率和重现性良好的优点.于梦洋等6应用HPLC-ECD 检测大鼠血清 中的E 、NE 以及DA 的含量,研究了束缚挤压伤大鼠血清中CAs 的变化.结果显示,E 、NE 及DA 的分离效果良好,无内源性杂质的干扰,各物质的回收率分别为98.54%.99.21%和97.31%.张文等[]以掺铈纳米二氧化铅修饰电极作为HPLC 的检测器,建立了人体脑脊液中DA 等单胺类神经递质及其代谢产物的测定方法.该修饰电极具有良好的电催化作用,获得了较高的灵敏 度和良好的重现性.-76-化工科技第28卷曾文芳等归采用离子色谱分离、碳纳米管修饰电极检测,以c(硫酸)=10mmol/L-<p(乙月青)= 10%溶液为流动相测定CAso该方法的检出限为0.04〜0.09ng/mL,回收率为96%〜102%,具有准确度高、精密度好的特点,是一种简单快速的分析方法。
荧光法检测血浆中儿茶酚胺类神经递质

WEN Quan —WU ,CHEN H ,JIANG Wei ,MA Song—mei
(1.College of Chemistry and Materials Science,Ladong University,Ya ntai 264O25,China;
aftert he neutralization.Th etrihydroxymeindolefluorescence compoundWa s obtained.1'letitrant ofE a n d NE has good
linear relation with fluorescence value.Th e detectability is 0.05n g 。mL~ ,t he yield is 89.3% ,t he average standard
Байду номын сангаас
(1.鲁东大学 化学与材料科学学院 。山东 烟台 264O25;2.烟台山医院 。山东 烟台 264001)
摘 要 :建立 了一种快 速稳定 的定 量分析 血浆 中儿茶 酚胺 类神 经递 质 的方 法。血浆 中的肾上 腺素 (E)和去 甲肾上腺素 (NE)经 酸性 03吸附后用醋 酸提 取 ,中和后 用铁氰 化钾氧 化 ,生成 三羟吲 哚类荧光 化合物 ,分别在 2ex=455nm和 2ex=410nm的条件 下 ,2em从 300—600nm之 间进行扫 描 ,E及 NE标准液
收稿 日期 :2006—03—20 作者简介 :温全武 (1975一),女 ,助 教 ,硕 士 ,主要从 事有机 合成研
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华中科技大学硕士学位论文儿茶酚胺类神经递质检测方法研究姓名:刘明杰申请学位级别:硕士专业:劳动卫生与环境卫生学指导教师:朱业湘2003.5.1华中科技大掌同挤医学鹿硪士研完生平业论文儿茶酚胺类神经递质检测方法研究研究生:刘明杰导师:朱业湘华中科技大学同济医学院环境医学研究所摘要儿茶酚胺(catecholamines,CAs)包括肾上腺素(epinephrine,E)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)和多巴胺(dopamine,DA),是由肾上腺髓质和一些交感神经元嗜铬细胞分泌的一类非常重要的神经递质,也是重要的激素物质。
儿茶酚胺在人体的心血管系统、神经系统、内分泌腺、肾脏、平滑肌等组织系统的生理活动中起着广泛的调节作用,同时还影响人体的代谢。
检测血浆、尿液中的儿茶酚胺对于嗜铬细胞瘤、神经母细胞瘤、高血压、心衰、肾上腺髓质增生等疾病的临床诊断具有重要意义,并且有助于甲亢、甲低、充血性心衰、糖尿病、肾功能不全、低血糖症等疾病的诊断,对神经电生理等基础医学研究也具有重要意义。
目前常用的儿茶酚胺检测方法是放射酶学法、化学发光法、荧光法和高效液相色谱法,由于样品前处理复杂和检测仪器灵敏度等的限制,在本地区没有建立起快速稳定、可以满足临床诊断和基础研究需要的儿茶酚胺检测技术。
我们在综合国内外有关检测方法的基础上,通过优化设计,建立了可以满足窳诊断和基础医学研究需要的儿茶酚胺衍生荧光测定法和高效液相色谱一电化学检测法。
主要研究内容包括以下两个方面:1.衍生荧光分析法检测儿茶酚胺的研究本研究主要包括两个方面的内容,一是样品提取纯化方法研究,二是最佳衍生条件研究。
我们比较了两种样品的提取和纯化方法,活化氧化铝和阳离子交换树脂提取纯化法。
研究发现氧化铝提取纯化儿茶酚胺的回收率要高于阳离子交换树脂,稳定性也好于阳离子交换树脂,并且活化氧化铝提取纯化法省去了操作繁杂的填充层析柱以及装柱、洗柱等操作过程,操作简便,缩短了分析时间。
并从华中韩技大拳一济巨学院疆士研竞生牛业论文吸附效率、分析时间、重复性三个方面对活化氧化铝提取纯化法中几种调节pH值缓冲液的效果做了综合比较,选择TRIS/EDTA缓冲液(O.2mol/l,pH8.6)作为调节pH值缓冲液。
我们从衍生反应的pH值、衍生试剂的用量、衍生反应的时间、衍生反应终止液的选择几个方面对衍生过程进行研究,结果表明最佳的衍生操作过程是:在1.5ml样品中加入0.2ml的lmol/1NaOH,蒸馏水lml,0.05mJ的0.5%铁氰化钾溶液,反应2min后加入0.2ml的Vc—NaOH溶液终止反应,静置10分钟即可用荧光分光光度计进行测定。
肾上腺素和去甲肾上腺素浓度在0.1ng/ml~lOng/ml与荧光强度之间具有良好的线性关系(R=O.9982,E;R=O.9985,NE),检出限均为50pg/ml,相对标准偏差(RSD)分别为5.64%和4.76%,平均回收率分别为92.5±4.23%和89.6±4.89%,可以很好地满足临床诊断和基础医学研究的需要。
2.高效液相色谱一电化学检测器检测儿茶酚胺的研究本研究主要包括两个方面的内容,一是最佳色谱分离条件的研究,二是最佳色谱检测条件的研究。
我们从色谱柱、流动相、流速和柱温的选择等方面对色谱分离条件进行了研究,经过大量条件试验,选择VARIANBDS柱作为色谱柱,磷酸505mo]/l、柠檬酸50retool/1、辛烷磺酸钠lmmol/1、EDTA20mg/I,氯化钾2mmol/l,用氢氧化钾调节pH值3.5,5%甲醇作为流动相,流速为iml/min,柱温为30"C。
我们选择VARIANProstar370电化学检测器的检测电压为+0.65V,研究了电化学检测器对高效液相色谱系统的特殊要求以及保证检测最大稳定性的方法。
肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺以及内标物在上述色谱分离和检测条件下得到很好的分离而没有受到干扰,四者的保留时间分别为2.85、3.43、6.80和4.58分钟,线性范围均为0.05rig/m]~10ng/ml(R=O.9985,NE;R=O.9989,E;R=O.9982,DA),检出限均为lOpg/ml,相对标准偏差(RSD)分别为3.04%、4.08%和8.02%,肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺的平均回收率分别为94.8±3.27%、93.5--+3.酾%和91.8+4.32%,成为满足临床诊断和基础医学研究需要、/的常规检测方法NL)关键词:儿茶酚胺衍生荧光法高效液相色谱电化学检测器华中科技夫掌属济匪掌院磺士研竞生毕业论文ResearchfordeterminingcatecholamineneurotransmittersAbastractCatecholamines(CAs),secretedbyadrenalmedullaandsomesympatheticnel.trehromaffmcell,areimportantnatmalmoleculescontainingacatecholring,whichactasneurotransmittersorhormones.nlemainendogenouscatecholaminesareepinephrine(E)、norepinephrine(NE)anddopamine(DA).Thedeterminationofcatecholaminesinplasmaorurinesamplecanprovidetheusefulinformationaboutdiagnosisofpheochromocytoma,neuroblastoma,hypertension,congestiveheartfailureandSO011.ManymethodshavebeenproposedforthedeterminationofCAsandtheirmetabolites,suchasradioenzymaticassay,chemiluminescentassay,fluorimetricassayandhi曲performanceliquidchromatographywithelectrochemicalorfluorometricdetection.Butforthelimitofthesamplepretreatmentandsensitivityofdetermination,therehasbeennotasensitiveandrapidmethodforthedcterrninationofcatecholaminesinOurlab.Inthiswork,wetrytOdevelopandoptimizeaderivativefluorimetricmethodmadahig}1一performanceliquidchromatographywithelectrochemicaldetectormethodforthedeterminationofcatecholamines.Thispaperconsistsoftwoparts:ofcatecholamines1.DerivativefluorimetricmethodforthedeterminationTherearetwosectionsinthisstudy,oneisthestudyonsampleextractionandclean-upprocedures,theotheristhestudyonoptimizedderivativecondition.Wecomparedtwomethodsofsampleextractionandclean-up,theactivatedaluminiumoxideandthepositiveion-exchangeresinextractionmethods,andfoundactivatedaluminiuraoxidemethodWaSmoreefficientandprecise.WestudiedseveralpHadjustingagentswithadsorptionefficiency、stabilityandanalysistimeandchoosedTRIS/EDTAbuffersystem(O.2mol/1,pH8.6).Optimizedderivationprocedurewasasflows:toanaliquotof1.5mlofsample,0.2mloflmol/lNaOH,lmlofdistilled3草巾抖氩犬掌—I济馘掌窿嚷士崭竞生牛舷论文——_——————————————————————_———————————————_———————————————一一一water,O.05mlofO.5%K3Fe(CN)6wereadded,2milllater,0.2mlVc-NaOHwaswasfoundinaddedtotheresultingmixturetoterminatederivation.Agoodlinearitytheconcentrationrangeof0.1ng/ml~10ng/mlforepinephrine(E)andnorepinephrine(NE)fRjO.9982,E;R=0.9985,NE).T弧edetectionlimitwas50pedml-TheRSD(%)wereless5.64%forEand4。
76%forNE,andtheaveragerecovery(%)forEandNEwere92.5±4.23%and89.6±4.89%respectively.Derivativefluorimetricassayisasensitiveandrapidmethod妇也edeterminationofcatecholamines.2.High-performanceUqHadchromatographywithelectrochemicaldetectormethodforthedeterminationofcatecholamines.Therearetwosectionsinthisstudy,oneistheresearchofchromatographicseparationconditions,theotheristheresearchofdetectionconditions.Theoptimizedchromatographicseparationconditionswereasflows:ChromatographicseparationwasachievedonaV剐魁ANBDSreversed-phasecolumn.Themobilephasewasamixtureofmethanol(5%)andanaqueoussolution(95%)of50mmol/1H3P04,50mmol/lcitricacid,20rag/1EDTA,lmmol/loctanesulphonicacid(OSA)bufferedtoandthetemperatureofcolumnis30"C。