细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告篇一实验教师:xxx所在学校:xxx中学目的要求:1练习徒手切片2认识叶片的结构3画叶片的表皮细胞和保卫细胞材料用具:新鲜叶片(如菠菜、槐树、蚕豆的叶片),显微镜,双面刀片(两片、并在一起、一侧用胶布粘牢)、镊子、载玻片、盖玻片、叶片的永久切片、盛有清水的培养皿、滴管、吸水纸、碘液、纱布、毛笔、小木板。
方法步骤方法与步骤要点注意事项(一)练习徒手切片,制作叶片横切片的临时切片1将新鲜的叶片平放在小木板上。
2右手捏紧并排的两片刀片,沿着图中虚线的方向,迅速切割。
3把刀片夹缝中存在的切下的薄片放入盛有清水培养皿中。
要多切几次(每切一次,刀片要蘸一下水)。
4用毛笔蘸出较薄的一片,制成临时切片。
叶片下面要垫上小块木板,以防损坏桌面。
刀片要捏紧,切割速度要快,注意安全。
为了便于观察,载玻片的水滴中可以同时放几片叶的横切片,选择切得较薄的一片用来观察。
(二)观察叶片的结构1.用显微镜先观察叶片横切面的临时切片,再观察叶片的永久横切片。
2.观察时注意分清时的表皮、叶肉和叶脉。
仔细观察上、下表皮细胞的`区别(三)观察叶片的下表皮1.用镊子撕下一小块叶片的下表皮,制成临时装片。
2.用显微镜进行观察,下表皮细胞的形态是什么样子的,下表皮上有没有气孔?撕取下表皮时,一定要薄,否则影响观察效果。
注意观察气孔的结构。
(四)画图在下面空白处画出下表皮上一对保卫细胞及周围的几个表皮细胞,这一对保卫细胞要详细画,周围的细胞只需勾出轮廓。
画图时,要真实、实事求是。
讨论与交流1.保卫细胞的结构特点对植物的蒸腾作用有什么意义?2.从结构上看,叶片有哪些方面是适于接受阳光的?细胞生物学实验报告篇二一、实验目的1. 初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。
2. 理解植物细胞发生渗透作用的原理。
二、实验原理当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定的收缩。
细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告动物细胞融合【实验目的】⒈了解动物细胞融合的常用方法。
⒉学习化学融合的基本操作过程。
⒊观察动物细胞融合过程中细胞的行为和变化。
【实验原理】细胞融合是指在自发或者诱导条件下,两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。
目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合,包括病毒诱导融合、化学诱导融合和电激诱导融合。
⒈病毒诱导融合仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融合。
这类病毒的被膜中含有融合蛋白,可介导病毒和宿主细胞融合,同时也可介导细胞与细胞的融合。
用紫外线灭活后,这些病毒即可诱导细胞发生融合。
⒉化学诱导融合很多化学试剂能够诱导细胞融合,如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。
这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列,在去除这些物质之后,细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。
在恢复过程中相接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力,细胞膜融合,胞质流通,发生融合。
化学诱导方法,操作方便,诱导融合的概率比较高,效果稳定,适用于动、植物细胞,但对细胞具有一定的毒性。
PEG是被广泛使用的化学融合剂。
⒊电激诱导融合包括电诱导、激光诱导等。
其中,电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子,沿电力线排布成串,再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜,细胞膜的脂质分子发生重排,由于表面张力的作用,两细胞发生融合。
电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。
【实验用品】⒈材料鸡血红细胞。
⒉试剂50%PEG、Hank’s溶液(pH7.4)、Alsever’s细胞保存液、0.85%氯化钠溶液。
⒊器材正置显微镜、离心机、离心管、载玻片、盖玻片、滴管、注射器等。
【实验步骤】⒈鸡血红细胞的制备和保存用无菌注射器先吸入Alsevers溶液1ml,再从鸡翼下静脉取血0.5~1ml,取出后放入刻度离心管中,再加入2~3mlAlsevers溶液,使总量为4~5ml,混匀并封口,置于4℃冰箱内。
细胞生物学研究实验报告

细胞生物学研究实验报告1. 引言在细胞生物学领域,研究细胞的结构和功能对于理解生命的基本原理至关重要。
本实验旨在利用细胞培养技术,观察并探究不同条件下细胞的生长和变化,以及细胞代谢的影响因素。
2. 实验材料与方法2.1 细胞培养物准备:选择合适的培养基,并根据说明书的指导进行配制,确保培养基的pH值及其他参数的准确性。
2.2 细胞处理:将细胞培养物均匀接种于含有培养基的培养皿中,根据实验设计设置不同的处理组和对照组。
2.3 细胞观察:在指定时间点,使用显微镜观察细胞的形态和数量,并记录相关数据。
2.4 细胞计数:利用细胞计数板或自动细胞计数器,对处理组和对照组的细胞数量进行计数,并进行统计学分析。
3. 实验结果在本实验中,我们观察了不同培养条件对细胞生长的影响以及细胞数量的变化。
3.1 培养基成分对细胞生长的影响:将细胞分别培养于不同成分的培养基中,并观察其生长情况。
结果显示,不同成分的培养基对细胞生长产生了明显的影响。
例如,在含有特定营养因子的培养基中,细胞的生长速率显著提高。
3.2 不同培养温度对细胞生长的影响:将细胞在不同的温度条件下培养,并在一定时间内观察其生长情况。
实验结果显示,细胞的生长速率在适宜温度范围内最高,而过低或过高的温度均对细胞生长产生了抑制作用。
3.3 细胞代谢产物对细胞生长的影响:添加不同浓度的代谢产物(如乙醛、乙酸等)到培养基中,观察其对细胞生长的影响。
实验结果显示,过高或过低的代谢产物浓度均对细胞生长产生了不利影响,而适宜浓度范围内则促进了细胞的繁殖能力。
4. 讨论与结论本实验结果表明,细胞的生长和变化受到多种因素的影响,包括培养基成分、培养温度以及代谢产物浓度等。
细胞在适宜的培养条件下能够更好地进行增殖和发育,而不利因素则会抑制细胞的生长。
因此,在细胞生物学研究中,合理控制和优化培养条件对于获得准确可靠的实验结果至关重要。
总结:通过本次实验,我们深入了解了细胞生物学领域中的相关实验技术和细胞生长的条件调控。
细胞生物学实验报告_2

细胞生物学实验报告细胞凝集反应【实验目的】⒈了解细胞膜的表面结构。
⒉掌握凝集素促使细胞凝集的原理。
⒊学习研究细胞凝集反应的方法。
【实验原理】⒈细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构, 脂和蛋白质又能和糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。
目前认为: 细胞间的联系, 细胞的生长和分化, 免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖外被有关。
⒉凝集素(lectin)是一类含糖(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质, 它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
凝集素使细胞凝集是由于它与细胞外被中的糖分子连接, 在细胞间形成“桥”的结果, 加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
【实验用品】⒈材料土豆块茎、家兔。
⒉试剂⑴PBS缓冲液称取NaCl 7.2g、Na2HPO4 1.48g、KH2PO4 0.43g, 加蒸馏水, 定容至1L, 调pH至7.2。
⑵1%肝素溶液0.1g肝素溶解于10mL0.9%氯化钠溶液中。
⒊器材5mL注射器、酒精棉球、双凹片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管。
【实验程序】⒈以无菌方法抽取兔耳缘静脉血液(5mL注射器先吸取3mL1%肝素溶液)1mL, 用0.9%氯化钠溶液洗5次, 每次3000r/min离心5min, 最后按沉淀的红细胞体积用0.9%氯化钠溶液配成1%红细胞悬液。
⒉称取去皮土豆块茎2g, 切成薄片, 加10mLPBS缓冲溶液, 浸泡2h, 浸出的粗提取液中含有可溶性土豆凝集素。
⒊用滴管吸取土豆凝集素和PBS缓冲液各一滴, 置于双凹片的左右两孔内, 再分别滴入一滴1%红细胞悬液, 振荡10min。
4.待红细胞液发生明显凝集反应后, 将双凹片置于显微镜下观察。
【实验结果】⒈结果细胞凝集反应实验现象⒉图像加土豆凝集素加PBS缓冲液【分析与讨论】⒈结果分析实验过程中可以观察到: 在双凹片上, 加有土豆凝集素的一侧, 震荡过程中, 红细胞液先变浑浊, 随后又变澄清, 同时发生凝集反应, 且凝集后的块状物聚集在液滴中央;而加有PBS缓冲液的一侧, 震荡过程中, 红细胞不发生明显变化, 静置后, 后细胞逐渐集中于液滴中间部位, 而四周表现为澄清。
细胞生物学实验报告(3篇)

细胞生物学实验报告(3篇)细胞生物学实验报告(精选3篇)细胞生物学实验报告篇1一、实验目的:1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。
2.了解细胞凋亡的生物学意义3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法二、实验原理:1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物,用联苯胺处理标本,细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。
中间产物蓝色联苯胺是不稳定的,无需酶的参加即可氧化为棕色化合物。
2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。
它是一个主动的、高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。
3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。
三、实验步骤:细胞中过氧化物酶的显示1、在载片上滴一滴PBS缓冲液;2、取骨髓细胞:用断颈法处死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剥出后肢股骨,剪开股骨一端,用牙签尖的一端插入剪开的小孔中,抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上;3、涂片:用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开,室温晾干;4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸铜液,以盖满涂片为宜,处理30秒-1分钟。
5、倾去硫酸铜液,直接滴入联苯胺混合液反应6分钟(以盖满涂片为宜)6、清水冲洗,番红复染2min。
7、镜检:清水冲洗,室温晾干,先低倍镜下观察,后换高倍镜下观察(油镜100_)细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min4、PBS缓冲液洗2次5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液7、普通光学显微镜下观察。
吖啶橙染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。
细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告实验名称:细胞培养实验实验目的:1. 了解细胞培养的基本原理和过程2. 观察细胞生长和分化的现象3. 掌握细胞培养的实验技术和方法实验原理:细胞培养是一种将生物体细胞从其原始生存环境中分离出来,在体外条件下进行培养的技术。
这种技术对于研究细胞生物学、发育生物学、药物筛选等学科具有重要意义。
本实验将通过观察细胞生长和分化的现象,加深对细胞培养技术的理解。
实验材料:1. 人体皮肤细胞2. 培养基(包含血清、抗生素、氨基酸、维生素等)3. 塑料瓶(培养皿)4. 显微镜5. 记录表实验步骤:1. 取适量人体皮肤细胞,用胰蛋白酶消化,使其从组织中分离出来。
2. 将细胞接种到塑料瓶(培养皿)中,加入适当浓度的培养基。
3. 将塑料瓶(培养皿)放入恒温培养箱中,定期观察并记录细胞生长和分化的现象。
4. 在合适的时间点,使用显微镜拍照记录细胞生长和分化的过程。
5. 实验结束后,整理数据和图片,撰写实验报告。
实验结果:经过一段时间的培养,我们观察到皮肤细胞在培养基中开始贴壁,并逐渐生长。
随着时间的推移,部分细胞开始出现分裂,形成相互连接的细胞团。
一些细胞逐渐伸展成梭形或扁平形,呈现出典型的贴壁生长形态。
在某些区域,我们观察到细胞开始分化为两种不同形态的细胞群,一种呈圆形或椭圆形,另一种呈多角形。
这些现象表明细胞已经开始分化。
实验分析:根据实验结果,我们可以得出以下结论:1. 细胞确实可以在体外条件下贴壁生长并增殖。
这证明了细胞培养技术的可行性。
2. 细胞分化是一个自然的过程,在本实验中得到了证实。
这说明细胞具有自我更新和多向分化的潜能。
3. 实验过程中需要注意无菌操作和适宜的培养条件,以确保细胞的存活和正常生长。
此外,不同种类的细胞可能需要不同的培养条件,因此在实际操作中需要针对具体细胞类型进行实验。
实验结论:通过本次实验,我们了解了细胞培养的基本原理和过程,观察了细胞生长和分化的现象,并掌握了细胞培养的实验技术和方法。
细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告实验目的,通过观察细胞在不同环境条件下的变化,了解细胞的结构和功能。
实验材料,显微镜、玻璃片、盐水、葡萄糖水溶液、洋葱、细胞培养基、显微镜玻璃片、移液管、显微镜盖玻片、细胞标本。
实验步骤:1. 取一片洋葱表皮,放入盐水中浸泡5分钟,然后用移液管将洋葱表皮移至显微镜玻璃片上,加一滴盐水,用显微镜盖玻片盖好,放入显微镜下观察。
2. 取一片洋葱表皮,放入葡萄糖水溶液中浸泡5分钟,然后用移液管将洋葱表皮移至显微镜玻璃片上,加一滴葡萄糖水溶液,用显微镜盖玻片盖好,放入显微镜下观察。
3. 取一片洋葱表皮,直接放入显微镜玻璃片上,加一滴蒸馏水,用显微镜盖玻片盖好,放入显微镜下观察。
实验结果:在盐水中浸泡的洋葱表皮细胞,细胞质内部出现了空泡,并且细胞质收缩,细胞膜离细胞壁。
在葡萄糖水溶液中浸泡的洋葱表皮细胞,细胞质内部没有出现空泡,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。
直接放入蒸馏水中的洋葱表皮细胞,细胞质内部也没有出现空泡,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。
实验分析:盐水中的高渗环境导致了细胞失水和质内空泡的形成,细胞质收缩,细胞膜离细胞壁。
而葡萄糖水溶液中的低渗环境对细胞没有明显的影响,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。
蒸馏水中的等渗环境对细胞也没有明显的影响,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。
结论:细胞在不同渗透压环境下会出现不同的变化,高渗环境会导致细胞失水、质内空泡形成和细胞质收缩,而低渗环境对细胞没有明显的影响,等渗环境也不会对细胞产生明显的影响。
这些结果说明了渗透压对细胞的影响,也说明了细胞对外界环境的敏感性。
实验的意义:通过这个实验,我们更深入地了解了细胞在不同环境条件下的变化,也更加深入地了解了细胞的结构和功能。
这对于我们进一步研究细胞生物学,了解生命的奥秘,具有重要的意义。
实验存在的不足:本实验只是对细胞在不同渗透压环境下的变化进行了初步的观察和分析,还需要进一步的研究和探讨,以便更加全面地了解细胞的生物学特性。
细胞生物实验报告大一

细胞生物实验报告大一实验目的:本实验的目的是通过观察和分析细胞的生物学特性,深入了解细胞的结构和功能。
实验材料:1. 显微镜2. 显微镜玻片和盖片3. 染色剂(如甲苯胺染色液)4. 盐水溶液5. 实验用样本(如洋葱片、口腔腮膜细胞等)实验步骤:1. 准备洋葱片样本:将洋葱切成薄片,并用盐水浸泡片刻。
2. 处理洋葱片样本:将浸泡过的洋葱片放置在甲苯胺染色液中,使细胞质着色。
3. 将染色的洋葱片取出,用盖片盖好,放在显微镜玻片上。
4. 将盖片下的洋葱片放在显微镜上,调节镜头使其清晰可见。
5. 通过显微镜观察洋葱细胞的结构,包括细胞膜、细胞质、细胞核等。
6. 记录观察到的细胞特征,包括细胞的大小、形状以及细胞核的位置等。
7. 用显微镜观察其他样本(如口腔腮膜细胞),重复步骤5和步骤6。
8. 对比不同样本的细胞特征,并进行分析和讨论。
实验结果:通过显微镜观察,我们可以清晰地看到洋葱细胞和口腔腮膜细胞的结构。
洋葱细胞呈矩形或长方形,细胞质较为丰富,细胞核位于细胞的中心。
口腔腮膜细胞则呈扁平状,细胞核位于细胞的一侧。
细胞膜在两种细胞中均可清晰观察到。
讨论和分析:根据观察结果,我们可以推断洋葱细胞和口腔腮膜细胞在结构上存在差异。
洋葱细胞的细胞形状较规则,而口腔腮膜细胞的细胞形状较扁平。
这可能与它们不同的功能和位置有关。
另外,洋葱细胞的细胞核位于细胞的中心,而口腔腮膜细胞的细胞核则位于细胞的一侧,也可能与它们不同的生理需求有关。
细胞生物实验的目的是通过观察细胞的结构和功能,加深我们对细胞的了解。
细胞是生物体的基本单位,具有复杂的结构和功能,对生命活动至关重要。
通过实验,我们能够直观地观察到细胞的组成和特征,进一步认识生命的奥秘。
对细胞的研究不仅有助于我们理解生物的生命过程,还为疾病的研究和治疗提供了重要的基础。
结论:通过本实验,我们观察和比较了洋葱细胞和口腔腮膜细胞的结构特征。
洋葱细胞和口腔腮膜细胞在形态上存在差异,这可能与它们的功能和位置有关。
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细胞生物学实验报告
一、细胞形态观察及其大小测量
1.实验结果及分析
(1)细胞形态观察
图1.1 10X40倍镜下肝细胞图1.2 10X40倍镜下血细胞
图1.3 棉花叶横切(栅栏组织细胞)
(2)细胞大小测量
项目原始数值及数据处理平均值
台尺41 35 41 28 20 33 目尺170 145 170 116 83 136.8
根据公式计算得:每
2.412 2.414 2.412 2.414 2.410 2.412
格μm数
项目原始数据及数据处理平均值长格数28 28 29 29 31 28 26 23 25 27.44 宽格数 5 4 5 4 6 4 5 5 4 4.67 长μm 67.54 67.54 69.95 69.95 74.77 67.54 62.71 55.48 60.30 66.20
2.思考题
(1)血细胞分为哪几大类?分别描述你看到的不同血细胞的形态,并阐述其功能。
绘图。
血细胞分为红细胞、白细胞和血小板。
红细胞:主要的功能是运送氧。
白细胞:主要扮演了免疫的角色。
当病菌侵入人体时,白细胞能穿过毛细血管壁,集中到病菌入侵部位,将病菌包围,吞噬。
血小板:止血过程中起着重要作用。
血细胞约占血液容积的45%,包括红细胞、白细胞和血小板。
在正常生理情况下,血细胞和血小板有一定的形态结构,并有相对稳定的数量。
红细胞呈双凹圆盘状,中央较薄(1.0μm),周缘较厚(2.0μm),故在血涂片标本中呈中央染色较浅、周缘较深。
在扫描电镜下,可清楚地显示红细胞这种形态特点。
红细胞的这种形态使它具有较大的表面积(约140μm2),从而能最大限度地适应其功能――携O2和CO2。
白细胞为无色有核的球形细胞,体积比红细胞大,能作变形运动,具有防御和免疫功能。
在血涂片中,血小板常呈多角形,聚集成群。
血小板中央部分有着蓝紫色的颗粒,称颗粒区;周边部呈均质浅蓝色,称透明区(hyalomere)。
电镜下,血小板的膜表面有糖衣,细胞内无核,但有小管系、线粒体、微丝和微管等细胞器,以及血小板颗粒和糖原颗粒等。
(2)任意选择你所看到的动物细胞和植物细胞各一个,绘图并进行适当标注,测量其大小,并比较动植物细胞大小的差异。
就植物叶片的栅栏组织细胞和红细胞而言,栅栏细胞为长方体形,体积较大,紧密排列成栅栏状;红细胞圆饼状,体积较小,具体数值如实验数值所示
(3)在不同的放大倍数下,所测得的细胞大小一致吗?你认为在哪个放大倍数下测定得比较准确?为什么?
测定结果不相同。
由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置,都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
但是由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度)进行,而且只能在特定的情况下重复使用,故当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。
在40倍物镜下看更准确,因为观察的台尺更清晰,可以更精确的读数。
二、PAS反应显示糖原和其他多糖物质
1.实验结果及分析
图2.1.1土豆切片PAS染色(紫红色颗粒)图2.2.1小鼠肝细胞PAS染色(紫色颗粒)
2.思考题
1、为所观察到的土豆切片和鼠肝切片绘图,标注其多糖的位置,并描述这两种细胞的多糖分布特点。
肝脏切片中,多糖位置表示在靠近核的区域,而土豆细胞中多糖在细胞质液泡中。
2、影响PAS反应染色效果的关键步骤是什么?
1.Camey固定液固定;
2.Schiff染色液染色;
3.对分色的控制。
3、如何制作徒手切片?应注意什么才能得到薄而均匀的切片?
需要快速连续地地切下多片薄片,从中选出较好的切片。
三、叶绿体的分离与荧光观察
1.实验结果及分析
图3.1.1叶绿体自发荧光(图中红色小圆点) 图3.1.2叶肉表皮细胞叶绿体自发荧光(图中红色小圆点)
从图中可以看出,叶绿体主要集中于液泡的周围,呈现红色。
2.思考题
(1)描述你所观察到的实验现象,自发荧光和次生荧光的区别?
有些生物体内的物质受激发光照射后,可直接发出荧光(称为自发荧光),如叶绿素的火红色荧光。
有的生物材料本身不发荧光,但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光(称为间接荧光),如叶绿体吸附吖啶橙后可发橘红色荧光。
(2)叶绿体分离的原理是什么?操作过程中应注意什么?
通过研磨植物叶片使细胞破损,叶绿体释放到提取液中,再通过等渗介质中差速离心去除杂志,再次离心分离出叶绿体沉淀;注意在低温下迅速提取,注意等渗液溶度,离心速度和时间的把握,避免叶绿体破裂。
四、吖啶橙染色观察口腔上皮荧光
1.实验结果及分析
从图3.1.1中可以看出,菠菜叶片表皮细胞中的叶绿体数目比较少,而在气孔细胞中的叶绿体数目比较多。
从图3.1.2中可以看到,口腔上皮细胞的细胞质发出红色荧光,而细胞核发出的荧光是绿
图4.1.1菠菜叶片表皮细胞叶绿体吖啶橙染色(图中红色小圆点为叶绿体,亮黄色纺锤体状的为气孔)
图4.1.2口腔上皮细胞荧光染色(绿
色为细胞核)
色的。
五、植物细胞骨架的光学显微镜观察
1.实验结果及分析
图 5.1.1洋葱内表皮细胞骨架考马斯亮蓝
R250染色(蓝色的丝状结构为细胞骨架)
这个标本中的骨架分布得比较全面,几乎充斥着整个细胞内部。
2.思考题
(1)绘出洋葱细胞的骨架网络分布。
(2)根据M-缓冲液的成分,分析其作用。
咪唑:稳定PH值,缓冲作用;KCL:提供离子,对骨架起聚合作用;MgCl2:提供离子,对骨架起聚合作用。
EGTA:螯合Ca离子Ca离子对聚合不利;EDTA:螯合Ca离子Ca离子对聚合不利;巯基乙醇:起还原作用,稳定骨架结构。
(3)通过实验过程,推测你所观察到的细胞骨架属于胞质骨架中的哪种类型,为什么?
推测洋葱的细胞骨架属于中间纤维。
六、PEG法诱导细胞融合
1.实验结果及分析
图6.1.1鸽子血细胞融合 图6.1.2鸽子血细胞融合
从这两幅图中,我们可以看出鸽子血细胞在融合前与融合后的不同,融合后的细胞是好几个聚合在一起的,融合之前是分散开的。
2.思考题
(1)请分析Hanks 溶液的作用是什么(可以从其成分的角度来回答)?
作为平衡盐溶液;终止细胞融合;细胞悬液,使细胞分散 (2)PEG 诱导细胞融合率受哪些因素影响?
PEG 的相对分子质量、PEG 的体积分数、融合时的温度、时间。
七、动物骨髓细胞染色体标本的制备与观察
1.实验结果及分析
图7.1.1小鼠骨髓细胞染色体
从这两幅图中,我们可以看出染色体的形态及分布区域。
2.思考题
在制备小鼠骨髓细胞染色体时为什么要进行预固定?
图7.1.2小鼠骨髓细胞染色体(细胞分裂被阻断在中期,染色体聚集在一起)
因为在之前得到的染色体都处于不同的分裂期,预固定是为了使这些细胞及其染色体都固定在当前所处的时期,便于观察。
其实质就是把细胞杀死,使其无法继续进行有丝分裂。
八、酵母活性检测及线粒体原位
1.实验结果及分析 (1)图片
(2)数据
处理方法 活细胞 死细胞 存活率 衰老细胞 0 159 0 静置 18 54 25% 震荡 109
13
89%
TTC
图8.1.1酵母细胞台盼蓝染色(图中蓝色细胞是死亡的细胞)
图8.1.2老化酵母詹纳斯绿染色(图中死细胞为无色,活细胞线粒体呈蓝色)
图8.1.3静置酵母詹纳斯绿染色
图8.1.4震荡酵母詹纳斯绿染色
处理方法活细胞死细胞存活率
衰老细胞 2 71 2.7%
静置48 36 57.1%
震荡172 2 98.8%
美兰
处理方法活细胞死细胞存活率
衰老细胞11 70 13.6%
静置39 21 65%
震荡71 17 80.7%
2.思考题
(1)三种染色方法所得存活率差异原因探讨。
美兰和TTC染色原理都与细胞活性有关,所以染色结果即使活细胞也有染色差异,对观察计数有影响,台盼蓝只是判别细胞存活或是死亡,结果较明显。
(2)绘制光学显微镜下TTC染色的酵母细胞图。
(3)设计实验验证美兰染色及台盼兰染色原理上是否存在差异。
是存在有差异;美兰可以透过活细胞,区别的原理是活细胞体内有美兰的分解酶;而台盼蓝染色中,则是以细胞膜通透性作为区别,活细胞完全隔绝染液进入,死细胞不能,染色剂能进入死细胞中使胞质染色。
(4)比较詹纳斯绿B与TTC染色结果的差异。
詹纳斯绿B染色使线粒体呈现蓝绿色,而胞质显无色;TTC染色使细胞中线粒体呈红色,其他胞质部分呈无色。
九、细胞分裂中期纺锤体和染色体结构荧光观察
1.实验结果及分析
9.1.1Hela细胞传代培养细胞9.1.2分裂中期和后期染色体形态
在本次实验中,虽然细胞传代比较困难,但我们还是比较成功的,虽然在后面我们组的细胞板被打翻了两片,但其余两片的观察结果还不错,得到了几个比较清晰的观察结果,不过以后我们操作就要更加小心了。