水蛭抗肿瘤作用机制研究进展
水蛭抗肿瘤作用机制研究进展作者：季漪李柳吴勉华来源：《中国中医药信息》2015年第03期摘要：中药水蛭具有破血逐瘀消癥之功，一直以来用于治疗各种血瘀顽疾。
随着现代药理学研究进展，水蛭在恶性肿瘤临床治疗中广泛应用，其抗肿瘤作用得到了许多临床及实验研究的证实。
本文通过对国内外近年文献的分析、归纳和总结，从抑制肿瘤的生长和增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成、抗血小板聚集和抗凝血作用、提高机体免疫力、抗肿瘤多药耐药性几方面归纳了水蛭的抗肿瘤作用机制，并指出目前研究中存在的不足和争议之处，希望能为临床应用及进一步研究提供思路。
关键词：水蛭；抗肿瘤；作用机制；综述DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2015.03.037中图分类号：R285 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2015）03-0131-03水蛭是水蛭科动物蚂蟥Whitmania pigra Whitman、水蛭Hirudo nipponica Whitman、柳叶蚂蟥Whitmania acranulata Whitman的干燥全体，主治血瘀经闭、癥瘕积聚、跌打损伤、心腹疼痛等。
现代药理研究表明，水蛭的药用成分主要包括水蛭素、氨基酸、磷脂类化合物、糖脂类化合物、甾醇类及微量元素等，其中水蛭素是其最主要的活性成分[1]。
近年来，水蛭在临床治疗恶性肿瘤中得到广泛应用，兹就其抗肿瘤作用机制综述如下。
1 直接抑制肿瘤生长和增殖肿瘤细胞增殖是肿瘤生长的基础，也是肿瘤侵袭和转移的前提。
水蛭素可以调控肿瘤细胞某些基因表达，使细胞生长的DNA、RNA、蛋白质的合成受到严重障碍，从而抑制肿瘤细胞的生长与增殖。
张氏等[2]进行了“复方水蛭素对小鼠移植瘤组织中p53、Ki67以及VEGF表达的影响”的实验研究，结果复方水蛭素对小鼠移植瘤具有显著的抑制作用，使肿瘤组织Ki67表达降低，从而抑制肿瘤细胞的增殖。
郭氏等[3]以液氮快速冻融法制备水蛭提取物，以常规水提醇沉法水蛭提取物作为对照，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）微量酶反应比色法检测不同浓度的2种水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用，并进行细胞计数。
结果表明，水蛭液氮快速冻融法提取物可体外抑制HepG2细胞的增殖，并呈剂量依赖性。
方氏[4]采用MTT法检测水蛭提取物对HepG2细胞的增殖抑制作用，结果显示，水蛭提取物以剂量依赖性方式抑制HepG2细胞增殖，其抑制率随水蛭提取物浓度增高而上升。
贺氏[5]采用MTT法研究了水蛭素和阿霉素各自及两者联合对人舌鳞癌细胞株TCA8113细胞增殖的抑制作用，应用流式细胞术分析细胞周期的变化。
结果显示，水蛭素、阿霉素对TCA8113细胞增殖均具有抑制作用且呈明显的时间-剂量效应，水蛭素还可明显增强阿霉素对TCA8113细胞增殖的抑制作用；利用流式细胞术检测细胞周期发现，水蛭素还有细胞阻滞作用，使细胞阻滞于G0/G1期。
2 诱导肿瘤细胞凋亡细胞凋亡是机体清除细胞的主动性过程。
其发生是由外源性和内源性因素引起的DNA损伤、细胞膜损伤、生长因子信号传导途径异常等引起，通过凋亡相关信号传导途径完成。
从某种意义上说，恶性肿瘤可以看作是细胞凋亡被阻断的疾病，凋亡相关基因的突变或表达异常均可阻断凋亡，进而促进肿瘤的发生、发展。
郭氏[6]以液氮快速冻融法制备水蛭提取物体外干预人肝癌HepG2细胞，用流式细胞术检测细胞凋亡，吖啶橙荧光染色法观察细胞凋亡形态。
结果提示，水蛭提取物具有诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的作用。
张氏等[2]建立小鼠移植瘤模型（均接种S180瘤细胞），模型对照组给予生理盐水，阳性对照组给予环磷酰胺，实验组给予复方水蛭素，用免疫组化法检测各组肿瘤组织p53的表达。
结果实验组肿瘤组织中的p53阳性细胞百分数均低于模型对照组，说明复方水蛭素能降低p53的表达从而促进肿瘤细胞的凋亡。
贺氏[5]应用流式细胞术研究了水蛭素对人舌鳞癌细胞株TCA8113细胞凋亡的影响，结果显示水蛭素能够诱导TCA8113细胞凋亡。
3 抑制肿瘤血管生成肿瘤新生血管不仅是肿瘤增殖的营养来源，还为肿瘤细胞在向周围组织侵袭进程中进入循环系统完成转移提供了条件。
现代研究表明，肿瘤血管生成抑制剂可以抑制肿瘤生长和转移，甚至使肿瘤消退[7]。
吴氏等[8-9]研究发现，水蛭能够抑制血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶9的表达，降低肿瘤组织的微血管密度及抑制血管内皮细胞的增殖，从而抑制肿瘤血管的生成，起到抗肿瘤的作用。
研究人员在上述实验的基础上又进行了“水蛭含药血清对人脐静脉血管内皮细胞的增殖作用影响”的实验研究，以探讨促成肿瘤生长从没有血管的缓慢生长阶段变为有血管的快速增殖阶段的关键环节，结果发现，水蛭能够抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖[10]。
李氏等[11]以氯化钴模拟化学缺氧，采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、VEGF mRNA的表达，蛋白印迹法（Western blot）检测HIF-1α蛋白水平。
结果表明，水蛭能通过改善肿瘤缺氧微环境抑制肿瘤血管生成来发挥抗肿瘤作用。
4 抗血小板聚集和抗凝血作用大部分恶性肿瘤患者的血液都处于高凝状态，这种高凝状态与肿瘤的转移密切相关。
临床研究显示，血小板与恶性肿瘤关系密切，肿瘤细胞可激发并活化血小板；同时，血小板可刺激肿瘤增长、促进肿瘤细胞转移[12]。
Chang MC等[13]研究发现，水蛭素能抑制SAS肿瘤细胞诱导的血小板聚集，从而延长潜伏期。
郑氏等[14]采用C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型，研究了重楼、水蛭对改善血黏度及肺癌转移的影响。
结果表明，水蛭能明显降低肺癌小鼠的血黏度，并抑制肺癌的转移。
还有一些研究发现，水蛭素可通过抑制凝血酶活性产生抗肿瘤作用[15-17]。
5 提高机体免疫力机体免疫功能与肿瘤发生、发展及预后都有一定的关系，免疫力提高能够抑制肿瘤的发生及发展、改善预后。
研究发现，水蛭能够使移植性动物肿瘤低下的Th1类细胞数目增多，免疫力提高，促使漂移失调的Th1/Th2类细胞达到平衡状态[18]。
自然杀伤细胞（NK）是机体防御反应中起免疫监视功能的主要效应细胞之一，无需肿瘤特异性抗原识别便可直接杀伤肿瘤细胞。
研究显示，水蛭的抗凝作用能提高NK的活性，促进其侵入肿瘤组织杀伤肿瘤细胞[1]。
超氧化物歧化酶（SOD）具有提高免疫力、抗肿瘤等作用。
牟氏等[19]研究了水蛭素对荷瘤鼠SOD及丙二醛水平的影响，发现水蛭素能明显提高荷瘤鼠血清SOD含量。
6 抗肿瘤多药耐药性多药耐药性（MDR）是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物出现耐药的同时，对其他许多结构和作用机制不同的抗肿瘤药物亦产生交叉抗药性。
MDR是目前肿瘤患者化疗失败的主要原因之一，也是化疗急待解决的难题。
郭氏[3]研究了水蛭提取物对HepG2细胞MDR1表达的影响，发现水蛭提取物能明显下调HepG2细胞MDR1 mRNA的表达，从而达到抗肿瘤MDR的作用。
7 小结上述研究表明，水蛭主要通过抑制肿瘤的生长和增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成、抗血小板聚集和抗凝血作用、提高机体免疫力、抗肿瘤MDR的途径发挥其抗肿瘤作用。
这为水蛭抗肿瘤的临床应用提供了理论依据，也为临床治疗肿瘤提供了新的思路。
但目前的研究存在一些不足：①关于水蛭抗肿瘤作用的临床研究相对较少，大多数研究还是基于动物模型阶段，具体应用于临床的作用机制尚待进一步证实；②水蛭的上述抗肿瘤作用机制还需要进一步从分子生物学水平具体研究；③水蛭属传统中药中的活血化瘀药，目前对活血化瘀类中药是否会促进肿瘤复发、转移尚存一定争议，如艾氏[20]研究发现，水蛭提取物能通过上调粒细胞集落刺激因子受体蛋白表达水平，从而促进肝癌细胞的侵袭、转移。
因此，对水蛭抗肿瘤作用及其机制还需要进一步研究探讨。
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水蛭化学成分及其药理作用探讨综述
水蛭化学成分及其药理作用探讨综述水蛭是一种典型的血吸虫类动物，它的唾液含有许多药理活性成分，对于很多疾病有着广泛的治疗作用。
本文将对水蛭化学成分及其药理作用进行综述。
一、水蛭的化学成分水蛭的口吸器分泌有丰富的唾液，唾液成分主要包括以下物质：粘蛋白、过氧化物酶、酰胺酶、活性酪氨酸、蛋白酶、胶原酶、糠酸酯酶、利多卡因、肝素类物质、抗凝血酶、纤溶酶、生物碱等10多种成分。
其中，唾液中的利多卡因是一种局部麻醉剂，它可以减轻器械操作时的疼痛感；肝素类物质可以抑制血液凝固；抗凝血酶、纤溶酶等物质则有药理活性，可以促进血管扩张、增强微循环，达到降血压、抗血栓、抗心肌缺血等药理作用。
二、水蛭的药理作用1、抗凝血作用水蛭的口吸液中含有的肝素类物质、抗凝血酶、纤溶酶等成分，可以抑制血小板聚集和纤维蛋白的形成，具有明显的抗凝血作用。
同时，水蛭的唾液中含有的活性酪氨酸也可以通过一系列生物反应产生的一氧化氮，促进血管扩张，进一步增强了水蛭的抗凝血作用。
水蛭的唾液中含有很多生物活性成分，如粘蛋白、酰胺酶、过氧化物酶和多种酶类等，这些成分具有明显的抗炎活性。
研究表明，水蛭唾液中的一种脂多糖物质（LMWL）可以显著抑制人外周血中单核细胞和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）刺激下的白细胞介素-8（IL-8）的释放，从而发挥了抗炎作用。
3、抗肿瘤作用水蛭的唾液中含有多种生物碱，如卡汀、伯氨喹、升降氨等，这些化合物具有抗肿瘤功效。
研究表明，水蛭唾液提取物能够显著抑制小鼠腹膜巨细胞瘤的生长，并且能够显著降低血清中肿瘤标志物浓度，从而发挥了抗肿瘤作用。
水蛭唾液中含有多种酶类，如过氧化物酶、酰胺酶、蛋白酶等，这些成分具有显著的抗菌作用。
研究表明，水蛭唾液中的过氧化物酶可以通过产生一氧化氮、超氧化物等多种自由基，对各种病原菌具有明显的抗菌作用。
综上所述，水蛭唾液中含有丰富的生物活性成分，具有明显的抗凝血、抗炎、抗肿瘤和抗菌等多种药理作用。
因此，水蛭在传统医学中，一直被广泛用于治疗各种疾病，如高血压、心脏病、肝炎、癌症等。
水蛭药理及机制(经销商培训)
王正红，单味水蛭粉治疗高脂血症78例疗效观察[J].天津中医杂志,1998,15(1):25.
23
水蛭与肾病综合征高凝血症
醋酸泼尼龙片+阿魏酸哌嗪片基础治疗，与加用水蛭粉治疗6个月做对照，水蛭粉组 能显著延长凝血指标，治疗肾病综合征高凝血症疗效确切，总有效率高达92.50%， 且不良反应少。
姜鹤林, 徐首航, 金秋玲. 水蛭粉治疗肾病综合征高凝血症40例[J]. 中国中医急症, 2011, 20(3): 476-477. 24
21
水蛭与急性脑梗塞
与血塞通做对照，水蛭可显著降低全血粘度、血浆粘度、纤维 蛋白原、红细胞压积，是治疗急性脑梗塞的理想药物。
马黎霞, 李春生. 水蛭治疗急性脑梗塞疗效观察[J]. 临床医学, 2000, 20(1): 52-53.
22
水蛭与高脂血症
水蛭粉对降低血脂有较好的疗效，总有效率88.5%。
凝血酶
外源性凝血系统 (组织因子)
纤维蛋酶原
纤维蛋白
（三）药理作用及机制——抗凝作用
与凝血酶亲和力极强，结合后形成稳定的非共价复合物 直接抑制凝血酶（世界公认的最强凝血酶特效抑制剂，
1μg水蛭素可中和5μg凝血酶，相应摩尔比为1∶1）
抑制血小板聚集：凝血酶是最强的促进血小板激活的物质 抑制凝血因子的活化：抑制凝血因子Ⅱ、Ⅶ、X 抑制纤维蛋白原转化为纤维蛋白
重组水蛭素63位酪氨酸残基未硫酸化，对凝血酶 的抑制比天然水蛭素降低了90%
（三）药理作用及机制——抗凝作用
病因
血 胶原暴露 管 相
血管损伤 出血
血管收缩
血 小
血管外压力
血流缓慢
板
相
血小板活化
血小板+血浆纤维蛋白
中药水蛭的活性成分及药理作用研究概况
２３ 抗肿瘤作用 ． 刘京生等［ 用水蛙 提取液灌胃荷瘤小 鼠（ ］ ’ Ｌ－ １ ２， 镜观察肿瘤组织凋亡的形态学改变， ２ ）电 １ 流式细
胞仪观察凋亡率和细胞 周期动 力学变化 ， Ｔ 法检测 Ｍ
Ｎ细 Ｋ 胞活性， 结果表明水蛙可通过诱导肿瘤细胞凋 亡， 提高荷瘤小鼠的细胞免疫功能， 抑制荷瘤小鼠 肿瘤
特异性抑制剂拮抗 了其与毒性 受体 的结合 ， 了神 避免
水 蛙素能 够增加心肌营养性血流量， 水蛙素能抗
垂体后 叶素引起的家兔冠状 动脉痉 挛， 防止垂体后 叶
素引起的第一期 及第二期心电图改变。同时水蛙可分
泌一种组织胺 样物质 ， 使毛细血管扩张 ， 缓解小动脉痉
经细胞进一步损伤， 对减轻脑水肿， 促进神经细胞功能 恢复起到非常重要的 作用。 但造成损伤的 受体机制与
期妊娠作用不 同。水 蛙对蜕膜 瘤亦有 抑制作 用 ， 作 此
响发现， 蛙素对早期细胞外基质主要成分层粘连蛋 水 白 和Ｎ型胶原均有抑制作用。刘晓颖等［研究揭示， ［ ９ １
水蛙能拮抗主动脉 内膜 Ｅ － Ｎ Ｔ Ｒ Ａ在皮细胞 （Ｃ 、 ｍ Ｅ 平
用又能被外源性 孕酮所对抗， 则可防止早产〔 川。杨健 等〔 对水蛙中 １ ５ ］ 抗早孕有效 成分的研究， 分离得到的单
ＩＣＭ．－ ２０ Ｖ ２ ， Ｔ Ｊ ０ ６， ３ＮＯ． ｄ １
中药水蛙的活性成分及药理作用研究概况
潘贺‘刚宏林“苏云明２ ， ，
（． １齐齐哈 尔市中医院， 黑龙江 齐齐哈尔 １１ ０ ． ６ ０； 黑龙江中医药大学， ０ ２ 黑龙江 哈尔滨 １ ０ ５４ ００
作用， 对凝血酶诱导的其他细胞非凝血现象也有 而且
作用 ， 能够抑制凝血酶诱导 的成纤维 细胞 的增殖 和凝 血酶对 内皮细胞 的刺激 ， 抑制血小板的解 离和释放 等。 郑燕林等观察水蛙素对外伤性增生性玻璃体视网膜病 变（Ｖ ） Ｐ Ｒ形成 的影 响， 观察水蛙 素对细胞 外基质 的影
水蛭的现代药理作用
水蛭的现代药理作用随着生物科学拄术的不断发展，水蛭的研究将会取得更大的成绩。
其在心血管疾病的治疗中更加显示出其优越性。
下面是店铺推荐给大家的水蛭的现代药理作用，供大家参考。
水蛭的现代药理作用1.水蛭能抗脑血栓——水蛭的抗血栓作用通过两方面来体现。
第一，水蛭中的水蛭素能抗血小板聚集能防止血液凝固，这就从根本上达到抗栓效果。
第二，水蛭提取物能改变血液流变学，降低血液粘稠度从源头上切断血栓的形成。
2.水蛭能降血脂——通过临床实验研究发现，水蛭能降低血液中的胆固醇和甘油三酯含量，减少血管中的斑块。
因此水蛭对于高血脂患者有很好的疗效。
3.水蛭能增加心血管的功能——水蛭素给小鼠腹腔注射后，小鼠的心肌能力增加，心肌血流量改变。
一些心肌疾病的药方中常含有水蛭。
4.水蛭能消水肿——水蛭提取液能促进炎性水肿的吸收，特别是促进脑血肿及皮下血肿的吸收，减轻周围炎症反应及水肿，缓解颅内压升高，改善局部血流循环，保护脑组织免遭坏死及促进神经功能的恢复所以一些心脑血管药物中多含有水蛭。
5.水蛭还能终止妊娠作用，抑制肿瘤的增大，对于肾损害的有很好的改善作用。
水蛭的提取物——天然水蛭素从水蛭中提取的天然水蛭素具有强大的抗凝血，溶栓，降血脂，加速伤口愈合，抗癌的作用，因为这一作用，天然水蛭素被广泛用于心脑血管疾病治疗中。
特别是对于脑血栓，高血脂等疾病，天然水蛭素能发挥很好的效果。
具体的来说，天然水蛭素能预防血栓形成，扩张外周血管，加速血液循环。
水蛭的化学成分水蛭主含蛋白质，含有17种氨基酸，水解氨基酸含量达49. 4%，包括人体必需的8种氨基酸，其中谷氨酸含量高达8. 3%;还含有Zn、Mn、Fe，Co. Cr、 Se，Mo、Ni等14种微量元素。
不同种水蛭分离出活性成分是不相同的，大致可分为两大类：一类是直接作用于凝血系统的成分，包括凝血酶抑制剂，以及其他一些血液凝固的物质，如水蛭素、菲牛蛭素、森林山蛭素等; 第二类是其他蛋白酶抑制剂及其他活性成分，如溶纤素、待可森等。
水蛭药理作用的研究进展
ｎｃ ｉ ａ ） 柳 叶 蚂 蝗 （ ｉ ｎａ ａｒｎ ｌｔ ｉ Ｗｈｔ ｎ 或 ａ ｍ Ｗｈｔ ｉ ｃａ ｕａａ ｍａ
Ｗｈｔ ｎ 的 干 燥 全 体 。近 年 来 ，水 蛭 的 医 用研 究 ｉ ｍａ ） 越 来 越 广 泛 ，从 水 蛭 的化 学 成 分 、炮 制 方 法 到 药
程 。血栓 ｌ 病严 重威 胁着 人 类 的生命 健 康 ，其 发 生疾 病 率 高 居 各 种疾 病 之 首 ，且 近 年 来 还 有 渐增 之 势 ， 是 当代 医学研 究 的重点 和热 点之 一 。
我 们 的 祖 先 对它 的医疗 效 用 就 有所 认 识 ，《 农 本 神
１ 抗 凝 、抗 血 栓 作 用
血 栓性 疾病 包 括血栓 形 成 和血栓 栓 塞 。血 栓 形 成 是指 在 一定条 件 下 ，血液 有形 成分 在 血管 形成 栓 子 ，造 成血 管 部分 或完全 堵 塞 、相应 部位 血供 障碍 的病 理 过 程 。依 血栓 组 成 成 分 可 分 为血 小 板 血 栓 、 红 细 胞血 栓 、纤 维 蛋 白血 栓 、混 合血 栓 ４ ；按 血 种 管 种 类 可分 为动 脉性 、静 脉 性及 毛细 血 管性 血栓 。
水 蛭 中的水蛭 素是 迄今 发 现 的最强 的凝 血 酶特
理 作 用 均 日益 深 入 。 随着 生 物 技术 的发 展 ，水蛭
作 为一 种疗效 好 ，无 明显毒 副作用 的传统 中药 ，
ｅｆｅｃ ｓ ｆ ｔ ．Ｗ ｉ ｈ ｔ ｔ ｅ ｄｅｖ ｌ ｈ ｅｏｐｍ ｅｎ ｅ ｈｎ ｏｇ ｄ ｆ ｔ ｔ ｙ，Ｈｉｕｄ ｓ ｂ ｔｏｆｔ ｃ ｏｌ ｙ ａｎ ｕｒｈｅｒｓ ｕｄ ｒ ｏ ｈａ ｅｅｎ ｗ ｉ ｙ ａｐｐ ｉ ｏ ｄｅｌ ｌ ｅｄ ｔ ｔ ｃ ｉ ｃ ， ｆ ｇ ｄ ｈｅ ｌ ａｌ ｏｒ ｏｏ ｍ ｅｄ ｃ ｌ ｐ ｏｓ ｃ ｓ． Ｔｈｉ ｐ ｅｒ ｅ ｅ ｅ ｔ ｅ ｅ ａｒ ｈ ｒ ｇｒ ｓ ｎｉ ｉ ａ ｒ ｐｅ ｔ ｓ ａｐ ｒ ｖｉｗ ｄ ｈ ｒ ｓｅ ｃ ｐ ｏ ｅｓ ｏｎ ｈ ｔ ｅ ｐｈａ ｍ ａｃ ｏ ｃ ｒ ｏ． ｒ ｏｌ ｇｉａｌ Ｈｉｕｄ ｏｆ
水蛭素剂型研究进展
水蛭素剂型研究进展毛全高【摘要】Hirudin is the active ingredient of leeches,which has good anticoagulant and antithrombotic function.But because of its short half-life and bleeding risk in clinics, its application effect is not ideal, so some researches in new dosage forms of hirudin have been made.This article reviewed the ways of drug delivery and dosage forms of hirudin based on its pharmacological effects and clinical application,so as to provide a reference for further research and clinical application.%水蛭素是水蛭的活性成分，具有良好的抗凝血和抗血栓作用。
但由于临床应用中存在半衰期短、出血危险等不足，实际应用效果并不理想，因此一些水蛭素新剂型的研究也在不断进行。
现结合水蛭素的不同药理作用和临床应用对其给药途径及给药剂型进行综述，以期为水蛭素以后的研究和应用提供参考依据。
【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2015(000)012【总页数】5页(P2250-2254)【关键词】水蛭素;药理作用;临床应用;给药途径;给药剂型【作者】毛全高【作者单位】如皋市人民医院药剂科，江苏如皋 226500【正文语种】中文水蛭是我国传统中药中常用的活血化瘀通经的良药，始载于东汉时期的药物学专著《神农本草经》。
水蛭素(hirudin)是存在于水蛭唾液腺里的一种重要活性成分，是由65～66个氨基酸残基组成的小分子单链环肽化合物，相对分子质量为7 000。
水蛭素活性因子抗癌作用的实验研究
１ ． ２ ． １水 蛭 素活性 因子对 Ｈ ２ ２肝癌 瘤 细胞 的影 响 １ ． ２ ． １ ． １肿 瘤 接 种造 模 选 择 腹 腔 接 种 Ｈ ２ ２肝 癌 实 体 瘤株后 ６ － ９ ｄ 、 生 长 良好 的 Ｈ２ ２肝 癌 小 鼠 ， 放 置 于 超 净工作台 ， 腹 部皮 肤 消 毒后 打 开 小 鼠腹 腔 ， 抽取乳 白 色 瘤液 ．用 生 理盐 水 配制 成 含瘤 细胞 ２ ￣ １ ０ ｑ ｍ Ｌ的 细 胞 悬液 。 选取 ４ ８只小 鼠 ， 每只小 鼠左 前腋 下皮肤 消 毒 后 ，接种 Ｈ２ ２肝 癌瘤 细胞 悬 液 ０ ． ２ ｍ Ｌ ，次 日开 始 给
１材 料 与 方 法
１ ． １材 料
１ ． ２ ． ２ ． ２动 物 分组 与 用 药 将 接种 瘤 细胞 后 的 ４ ４只小 鼠， 随机法 分成 ４组 ， 每组 １ １ 只： 模型对 照组 、 ５ 一 Ｆ Ｕ 组、 水蛭 素活性 因子大 、 小 剂量组 。 模型对 照组 给予 同体积 的生 理盐 水 ； ５ 一 Ｆ Ｕ组给予 ５ 一 Ｆ Ｕ ０ ． １ ５ ｇ ／ ｋ ｇ ； 水 蛭 素大 、
１ ． １ ． ２细胞 株
１ ． １ ． １动物
天平 上称 瘤 重 ，计 算抑 瘤率 ： （ Ｃ — Ｔ ） ／ Ｃ ｘ １ ０ ０ ％（ Ｃ为模 型对 照组 平均 瘤 重 ， Ｔ为 给药 组平 均瘤 重 ） ； 比较各 组 肿 瘤生 长情 况 ： 在实验 过 程 中严密 观察 小 鼠的精神 状 态、 活动、 毛发 、 饮食等 。
小 剂 量 组 分 别 给 予 水 蛭 素 活性 因 子 ２ ． ６ ０ 、 １ ． ３ ０ ｋ ｇ 。 昆明种 健康 、 雄性 小 白鼠 ， 体重（ ２ ２ ． ０ ￣ ０ ． ５ ） ｇ ， 由山 ４ ４只小 鼠每 日灌 胃 １ 次， 每次 ０ ． ５ ｍＬ ， 连 续给 药 １ ４ ｄ ， 东 省实 验动 物 中心 提供 ，医学 实验 动物 合格 证号 ： 动 于第 １ ５天 脱颈 椎处 死小 鼠 ， 剥离 瘤块 ， 将 瘤块 置 扭力 管 质字 （ ２ ０ ０ ８ ） 第０ １ ７ ９号 。
水蛭素生物学特性的研究进展
张子文，王尉，刘胜男，张舒宁，张耀方（天津农学院 基础科学学院，天津 ３００３８４）摘 要：水蛭素是由水蛭唾液腺分泌的一种酸性多肽，能够从一定程度上影响血液凝固和促进纤溶，是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂，在治疗血栓类疾病和心血管疾病具有很好疗效，同时还有良好的抗炎、抗肿瘤作用。
本文对水蛭素的结构和作用作一综述。
关键词：水蛭素；凝血酶；抗凝血中图分类号：Ｒ２８５ 文献标志码：ＡＲｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ Ｈｉｒｕｄｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓＺｈａｎｇ Ｚｉ－ｗｅｎ， Ｗａｎｇ Ｗｅｉ， Ｌｉｕ Ｓｈｅｎｇ－ｎａｎ， Ｚｈａｎｇ Ｓｈｕ－ｎｉｎｇ， Ｚｈａｎｇ Ｙａｏ－ｆａｎｇ＊（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂａｓｉｃ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｔｉａｎｊｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｔｉａｎｊｉｎ ３００３８４）Abstract: Ｈｉｒｕｄｉｎ ｉｓ ａ ｋｉｎｄ ｏｆ ａｃｉｄｉｃ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ｓｅｃｒｅｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｓａｌｉｖａｒｙ ｇｌａｎｄ ｏｆ ｌｅｅｃｈ， ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ａｆｆｅｃｔ ｂｌｏｏｄ ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｍｏｔｅ ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ ｔｏ ａ ｃｅｒｔａｉｎ ｅｘｔｅｎｔ． Ｉｔ ｗａｓ ｅｖｅｒ ｆｏｕｎｄ ｔｈｅ ｓｔｒｏｎｇｅｓｔ ｎａｔｕｒａｌ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｈｒｏｍｂｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ， ａｎｄ ｈａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ａｎｔｉ－ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ． Ａｎｄ ｉｔ ａｌｓｏ ｈａｓ ｇｏｏｄ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｎｄ ａｎｔｉ－ｔｕｍｏｒ． Ｔｈｉｓ ａｒｔｉｃｌｅ ｍａｉｎｌｙ ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ ｔｈｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｉｒｕｄｉｎ．Key words： Ｈｉｒｕｄｉｎ； Ｔｈｒｏｍｂｉｎ； Ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ水蛭最初记载于《神农本草经》，具有破血、逐瘀、通络的功效，在中西医中都具有极大的利用价值，在中医方面主要用来治疗跌打损伤，在西医方面被用来治疗血栓等[1]。
水蛭素的研究进展
文章编号：１６７３ ２９９５（２０２１）０２ ０１３５ ０３·综 述·水蛭素的研究进展程晓梅１，张 萌２，王继红１，吕 莉２，宁淑香１ （１．辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连 １１６０３３；２．大连医科大学药学院，辽宁大连 １１６０４４）摘 要：水蛭素是一种来源于水蛭唾液腺的天然肽类活性物质，具备强抗凝血和抗血栓功效，现已被广泛应用于治疗和预防各种心脑血管疾病。
研究表明，水蛭素对癌症、痛风、肾脏疾病等也具有较好的治疗效果。
因此，本文将就水蛭素的结构特性及其药理作用等方面进行综述，以期为水蛭素在临床上更多的应用提供参考。
关 键 词：水蛭素；抗血栓；抗肿瘤；临床应用中图分类号：Ｒ２８ 文献标志码：Ａ 水蛭属环节动物门，具有吸食哺乳动物血液的生物习性，分布在中国的大部分地区。
古人很早就发现水蛭可用于入药疏瘀。
在中医学上水蛭可以通过将其虫体进行干燥、炮制等步骤后入药，用于破血、梳通脉络、除瘀等方面，临床上可减轻中风、偏瘫、血瘀等病症的痛苦［１］。
随着科技的发展，科学家于２０世纪６０年代首次对水蛭唾液腺中的活性物质———水蛭素实现了区别于传统意义上的提纯［２ ３］，这一成果加速了对水蛭素的研究进程。
近年来，有许多科研团队发现水蛭素不仅在抗凝血、抑制血栓形成方面具有显著的作用，而且还可以起到较为明显的抑制肿瘤转移的效果。
因此水蛭素这种活性物质的发现不仅会开辟出多种抗凝血、抗血栓药物的研发新途径，而且还为身患脑血栓、恶性肿瘤等多种疾病的广大患者群众带来了新的希望和福音。
本文将近些年来水蛭素的结构、药理功效及其临床应用的研究情况作一概述。
１ 水蛭素的结构与功能目前科学家已从水蛭体内成功分离出两大类活性物质：一类是可以直接作用于凝血系统，比如水蛭素（ｈｉｒｕｄｉｎ）、菲牛蛭素（ｂｕｆｒｕｄｉｎ）等是较为常见的凝血酶抑制剂；另一类是包括抗栓肽（ｄｅｃｏｒｓｉｎ）等在内的其他蛋白酶类抑制剂和其他活性物质。
水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞体外抑制作用研究
水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞体外抑制作用研究（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】目的研究水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用。
方法以液氮快速冻融法制备水蛭提取物,以常规水提醇沉法水蛭提取物作对照,不同浓度体外干预人肝癌HepG2细胞,MTT法检测两种水蛭提取物对HepG2细胞增殖的抑制作用,并进行细胞计数,吖啶橙荧光染色法检测细胞凋亡情况。
结果水蛭液氮快速冻融法提取物药物浓度为6～15 mg/mL时,对人肝癌HepG2细胞的增殖有明显抑制作用,细胞数目明显下降,并呈剂量依赖性,与水提醇沉法提取物比较,差异有统计学意义(P＜0.01)。
吖啶橙染色可见典型的凋亡细胞形态学特征。
结论水蛭液氮快速冻融法提取物可体外抑制HepG2细胞的增殖并诱导凋亡,其作用明显优于水蛭水提醇沉法提取物。
【关键词】肝癌HepG2细胞；水蛭提取物；增殖；凋亡；液氮快速冻融法Abstract：Objective To study the inhibition effect of leech extracton HepG2 cells. Methods Human hepatocellular cancer cell line HepG2 were treated with different concentrations of leech extracts which were extracted by method of freeze-thawing with liquid nitrogen and contrasted with that by method of water extracting and ethanol precipitating. The inhibition effects and cell morphous were examined by MTT assay and Acridine orange (AO) fluorescent staining method respectively. Result The 6～15 mg/mL drug concentrations of leech extract by method of freeze-thawing with liquid nitrogen had an obvious inhibition on proliferation of HepG2 cells in a dose-dependent manner, and the effect was better than that by method of water extracting and ethanol precipitating (P＜0.01). Typical morphological features of apoptotic cells were appeared in detection by AO staining. Conclusion The leech extract by method of freeze-thawing with liquid nitrogen can inhibit the proliferation of HepG2 cells and induce apoptosis, andthe effect was better than that by method of water extracting and ethanol precipitating.Key words：hepatocelular carcinoma HepG2 cells；leech extract；proliferation；apoptosis；freeze-thawing with liquid nitrogen水蛭破血逐瘀消癥,主治癥瘕积聚、血瘀经闭及跌打损伤等。