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细胞生物学实验

细胞生物学实验

二、实验原理
植物原生质体是除去细胞壁后为原生质所包围的“裸露细胞”,是开展基础研究的理想材料。其中酶解法分离原生质体是一个常用的技术,其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成,因而使用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶能降解细胞壁成分,除去细胞壁而使原生质体释放出来。
原生质体分离纯化或融合后,在适当的培养基上应用合适的培养方法,能够再生细胞壁,并启动细胞持续分裂,直至形成细胞团,长成愈伤组织或胚状体,再分化发育成苗。其中,选择合适的培养基及培养方法是原生质体培养中最基础也是最关键的环节。
选取新鲜的嫩菠菜叶,洗净擦干后去除叶梗脉,称30g于150ml 0.35mol/L NaCl溶液中,装入组织捣碎机。
将匀浆用6层纱布过滤于500ml烧杯中。
利用组织捣碎机低速(5000r/min)匀桨3-5min。
将上清液在3000r/min下离心5min。弃去上清液,沉淀即是叶绿体(混有部分细胞核)。
二、实验原理
凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果。
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凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合价,并与细胞膜上受体的分布有关。
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三、实验仪器
显微镜、粗天平、载玻片、滴 管、 离心管、离心机等.
用镊子撕去叶的下表皮,然后将叶放有酶液的培养皿或带盖三角瓶,每10ml酶液放2g叶片;
洋葱、小麦种子或黄豆幼根根尖
人口腔上皮细胞
五、实验内容与实施过程
1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察
1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察 清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金属板上 ↓ 滴2滴1/5000詹纳斯绿B染液 ↓ 用牙签口腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞 ↓ 刮下的粘液状物放大载玻片的染液滴中 ↓ 染色10-l5min(注意不可使染液干燥,必要时可再加滴染液) ↓ 盖上盖玻片,显微镜下观察

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告篇一实验教师:xxx所在学校:xxx中学目的要求:1练习徒手切片2认识叶片的结构3画叶片的表皮细胞和保卫细胞材料用具:新鲜叶片(如菠菜、槐树、蚕豆的叶片),显微镜,双面刀片(两片、并在一起、一侧用胶布粘牢)、镊子、载玻片、盖玻片、叶片的永久切片、盛有清水的培养皿、滴管、吸水纸、碘液、纱布、毛笔、小木板。

方法步骤方法与步骤要点注意事项(一)练习徒手切片,制作叶片横切片的临时切片1将新鲜的叶片平放在小木板上。

2右手捏紧并排的两片刀片,沿着图中虚线的方向,迅速切割。

3把刀片夹缝中存在的切下的薄片放入盛有清水培养皿中。

要多切几次(每切一次,刀片要蘸一下水)。

4用毛笔蘸出较薄的一片,制成临时切片。

叶片下面要垫上小块木板,以防损坏桌面。

刀片要捏紧,切割速度要快,注意安全。

为了便于观察,载玻片的水滴中可以同时放几片叶的横切片,选择切得较薄的一片用来观察。

(二)观察叶片的结构1.用显微镜先观察叶片横切面的临时切片,再观察叶片的永久横切片。

2.观察时注意分清时的表皮、叶肉和叶脉。

仔细观察上、下表皮细胞的`区别(三)观察叶片的下表皮1.用镊子撕下一小块叶片的下表皮,制成临时装片。

2.用显微镜进行观察,下表皮细胞的形态是什么样子的,下表皮上有没有气孔?撕取下表皮时,一定要薄,否则影响观察效果。

注意观察气孔的结构。

(四)画图在下面空白处画出下表皮上一对保卫细胞及周围的几个表皮细胞,这一对保卫细胞要详细画,周围的细胞只需勾出轮廓。

画图时,要真实、实事求是。

讨论与交流1.保卫细胞的结构特点对植物的蒸腾作用有什么意义?2.从结构上看,叶片有哪些方面是适于接受阳光的?细胞生物学实验报告篇二一、实验目的1. 初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。

2. 理解植物细胞发生渗透作用的原理。

二、实验原理当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定的收缩。

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告动物细胞融合【实验目的】⒈了解动物细胞融合的常用方法。

⒉学习化学融合的基本操作过程。

⒊观察动物细胞融合过程中细胞的行为和变化。

【实验原理】细胞融合是指在自发或者诱导条件下,两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。

目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合,包括病毒诱导融合、化学诱导融合和电激诱导融合。

⒈病毒诱导融合仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融合。

这类病毒的被膜中含有融合蛋白,可介导病毒和宿主细胞融合,同时也可介导细胞与细胞的融合。

用紫外线灭活后,这些病毒即可诱导细胞发生融合。

⒉化学诱导融合很多化学试剂能够诱导细胞融合,如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。

这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列,在去除这些物质之后,细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。

在恢复过程中相接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力,细胞膜融合,胞质流通,发生融合。

化学诱导方法,操作方便,诱导融合的概率比较高,效果稳定,适用于动、植物细胞,但对细胞具有一定的毒性。

PEG是被广泛使用的化学融合剂。

⒊电激诱导融合包括电诱导、激光诱导等。

其中,电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子,沿电力线排布成串,再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜,细胞膜的脂质分子发生重排,由于表面张力的作用,两细胞发生融合。

电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。

【实验用品】⒈材料鸡血红细胞。

⒉试剂50%PEG、Hank’s溶液(pH7.4)、Alsever’s细胞保存液、0.85%氯化钠溶液。

⒊器材正置显微镜、离心机、离心管、载玻片、盖玻片、滴管、注射器等。

【实验步骤】⒈鸡血红细胞的制备和保存用无菌注射器先吸入Alsevers溶液1ml,再从鸡翼下静脉取血0.5~1ml,取出后放入刻度离心管中,再加入2~3mlAlsevers溶液,使总量为4~5ml,混匀并封口,置于4℃冰箱内。

细胞生物学自主实验

细胞生物学自主实验
培养瓶瓶 标号 1(男生) 2(男生) 3(女生) 4(女生) 完全培养基 (ml) 3 3 3 3 0.18 0.18 0.18 0.18 血量(ml) 秋水仙素终浓 度(ug/ml) 16uml 半滴 8uml 半滴 秋水仙素作用 时间(h) 3 3 3 3 60 60 60 60 10mg/mlPHA (微升)
染色
• 1、把滴好的在载玻片放入染缸中,将稀释 后的Giemsa染色滴在染缸里中,室温染色 20分钟;
• 2、自来水轻轻冲洗(冲洗标本片的背面) 3~5秒钟,晾干(或烘干); • 3、镜下观察染色体分带及染色情况。
五、注意事项
• 1 、细胞培养的环境必须无污染环境,温度保持 恒定,有适宜气体环境,pH适宜。 • 2、 操作及培养条件、培养仪器等无菌避免污染。 • 3、控制好离心速度,过快或过慢都会影响实验 结果。 • 4、低渗处理是实验成败的关键,其目的是使细 胞体积膨大,染色体松散,处理时间过长染色 体丢失会影响观察,处理时间不足,细胞内染 色体会聚集在仪器无法区分。
六、核型分析结果
女性染色体
男性染色体
结果分析讨论
一、在这次试验中我们做了4张片子,但其中一男一 女两张装片没有看到分裂相,分析原因可能有以下 几点: 1、片的高度不够,导致细胞没有摔开。 2、秋水仙素用量分配不均,导致用量不足。
• 二、核型结果分析: • 核型分析数据与正常的核型数据比较吻合。
• 女生组的细胞较好,经过三天的恒温培养 细胞的数目较多,分裂相也较多,但是男 生组的细胞数目就很少,分裂相也很少。 原因可能以下几点有: • 1、男生的细胞不容易被PHA诱导分裂; • 2、男生的细胞在制作装片的时候有损失; • 3、秋水仙处理时的用量太少(只有半滴)。
• • • •

细胞生物学实验报告(3篇)

细胞生物学实验报告(3篇)

细胞生物学实验报告(3篇)细胞生物学实验报告(精选3篇)细胞生物学实验报告篇1一、实验目的:1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。

2.了解细胞凋亡的生物学意义3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法二、实验原理:1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物,用联苯胺处理标本,细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。

中间产物蓝色联苯胺是不稳定的,无需酶的参加即可氧化为棕色化合物。

2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。

它是一个主动的、高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。

3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。

三、实验步骤:细胞中过氧化物酶的显示1、在载片上滴一滴PBS缓冲液;2、取骨髓细胞:用断颈法处死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剥出后肢股骨,剪开股骨一端,用牙签尖的一端插入剪开的小孔中,抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上;3、涂片:用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开,室温晾干;4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸铜液,以盖满涂片为宜,处理30秒-1分钟。

5、倾去硫酸铜液,直接滴入联苯胺混合液反应6分钟(以盖满涂片为宜)6、清水冲洗,番红复染2min。

7、镜检:清水冲洗,室温晾干,先低倍镜下观察,后换高倍镜下观察(油镜100_)细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min4、PBS缓冲液洗2次5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液7、普通光学显微镜下观察。

吖啶橙染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告实验名称:细胞培养实验实验目的:1. 了解细胞培养的基本原理和过程2. 观察细胞生长和分化的现象3. 掌握细胞培养的实验技术和方法实验原理:细胞培养是一种将生物体细胞从其原始生存环境中分离出来,在体外条件下进行培养的技术。

这种技术对于研究细胞生物学、发育生物学、药物筛选等学科具有重要意义。

本实验将通过观察细胞生长和分化的现象,加深对细胞培养技术的理解。

实验材料:1. 人体皮肤细胞2. 培养基(包含血清、抗生素、氨基酸、维生素等)3. 塑料瓶(培养皿)4. 显微镜5. 记录表实验步骤:1. 取适量人体皮肤细胞,用胰蛋白酶消化,使其从组织中分离出来。

2. 将细胞接种到塑料瓶(培养皿)中,加入适当浓度的培养基。

3. 将塑料瓶(培养皿)放入恒温培养箱中,定期观察并记录细胞生长和分化的现象。

4. 在合适的时间点,使用显微镜拍照记录细胞生长和分化的过程。

5. 实验结束后,整理数据和图片,撰写实验报告。

实验结果:经过一段时间的培养,我们观察到皮肤细胞在培养基中开始贴壁,并逐渐生长。

随着时间的推移,部分细胞开始出现分裂,形成相互连接的细胞团。

一些细胞逐渐伸展成梭形或扁平形,呈现出典型的贴壁生长形态。

在某些区域,我们观察到细胞开始分化为两种不同形态的细胞群,一种呈圆形或椭圆形,另一种呈多角形。

这些现象表明细胞已经开始分化。

实验分析:根据实验结果,我们可以得出以下结论:1. 细胞确实可以在体外条件下贴壁生长并增殖。

这证明了细胞培养技术的可行性。

2. 细胞分化是一个自然的过程,在本实验中得到了证实。

这说明细胞具有自我更新和多向分化的潜能。

3. 实验过程中需要注意无菌操作和适宜的培养条件,以确保细胞的存活和正常生长。

此外,不同种类的细胞可能需要不同的培养条件,因此在实际操作中需要针对具体细胞类型进行实验。

实验结论:通过本次实验,我们了解了细胞培养的基本原理和过程,观察了细胞生长和分化的现象,并掌握了细胞培养的实验技术和方法。

医学细胞生物实验报告

医学细胞生物实验报告

实验名称:医学细胞生物学实验一、实验目的1. 了解细胞的基本结构和功能。

2. 掌握显微镜的使用方法。

3. 观察并分析细胞在不同生理状态下的形态变化。

二、实验原理细胞是生物体的基本结构和功能单位。

通过显微镜观察细胞,可以了解细胞的形态、结构和功能,从而为医学研究和临床诊断提供依据。

三、实验材料1. 实验仪器:显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、吸水纸、纱布、显微镜专用清洁液。

2. 实验材料:洋葱鳞片叶、人体口腔上皮细胞、动物红细胞。

四、实验步骤1. 制作洋葱鳞片叶临时装片a. 用纱布将载玻片、盖玻片擦干净。

b. 用滴管在载玻片上滴一滴清水。

c. 用镊子在洋葱鳞片叶上撕下一小片表皮。

d. 将撕下的表皮放入载玻片上的水滴中,用针将其展开。

e. 用镊子夹住盖玻片,先将一边接触载玻片的水滴边,再慢慢把盖玻片放平,制成临时切片。

f. 在盖玻片的翼侧滴加稀碘液,用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润标本的全部。

2. 制作人体口腔上皮细胞临时装片a. 用生理盐水漱口,用纱布将载玻片、盖玻片擦干净。

b. 用滴管在载玻片上滴一滴生理盐水。

c. 用牙签轻轻刮取口腔上皮细胞,将细胞涂抹在载玻片上的生理盐水滴中。

d. 用盖玻片将细胞涂抹区域覆盖,制成临时切片。

e. 在盖玻片的翼侧滴加稀碘液,用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润标本的全部。

3. 制作动物红细胞临时装片a. 将动物血液滴在载玻片上,用吸水纸将血液吸干。

b. 用盖玻片将血液涂抹区域覆盖,制成临时切片。

c. 在盖玻片的翼侧滴加稀碘液,用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润标本的全部。

4. 观察并分析细胞形态a. 将临时装片放在显微镜下,调整显微镜与临时切片位置,直到可以观察到清晰的图像为止。

b. 观察洋葱鳞片叶细胞、人体口腔上皮细胞和动物红细胞的形态、结构和功能,并进行比较和分析。

五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶细胞a. 细胞壁:呈不规则形状,厚薄不一,具有细胞间隙。

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告实验目的,通过观察细胞在不同环境条件下的变化,了解细胞的结构和功能。

实验材料,显微镜、玻璃片、盐水、葡萄糖水溶液、洋葱、细胞培养基、显微镜玻璃片、移液管、显微镜盖玻片、细胞标本。

实验步骤:1. 取一片洋葱表皮,放入盐水中浸泡5分钟,然后用移液管将洋葱表皮移至显微镜玻璃片上,加一滴盐水,用显微镜盖玻片盖好,放入显微镜下观察。

2. 取一片洋葱表皮,放入葡萄糖水溶液中浸泡5分钟,然后用移液管将洋葱表皮移至显微镜玻璃片上,加一滴葡萄糖水溶液,用显微镜盖玻片盖好,放入显微镜下观察。

3. 取一片洋葱表皮,直接放入显微镜玻璃片上,加一滴蒸馏水,用显微镜盖玻片盖好,放入显微镜下观察。

实验结果:在盐水中浸泡的洋葱表皮细胞,细胞质内部出现了空泡,并且细胞质收缩,细胞膜离细胞壁。

在葡萄糖水溶液中浸泡的洋葱表皮细胞,细胞质内部没有出现空泡,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。

直接放入蒸馏水中的洋葱表皮细胞,细胞质内部也没有出现空泡,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。

实验分析:盐水中的高渗环境导致了细胞失水和质内空泡的形成,细胞质收缩,细胞膜离细胞壁。

而葡萄糖水溶液中的低渗环境对细胞没有明显的影响,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。

蒸馏水中的等渗环境对细胞也没有明显的影响,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。

结论:细胞在不同渗透压环境下会出现不同的变化,高渗环境会导致细胞失水、质内空泡形成和细胞质收缩,而低渗环境对细胞没有明显的影响,等渗环境也不会对细胞产生明显的影响。

这些结果说明了渗透压对细胞的影响,也说明了细胞对外界环境的敏感性。

实验的意义:通过这个实验,我们更深入地了解了细胞在不同环境条件下的变化,也更加深入地了解了细胞的结构和功能。

这对于我们进一步研究细胞生物学,了解生命的奥秘,具有重要的意义。

实验存在的不足:本实验只是对细胞在不同渗透压环境下的变化进行了初步的观察和分析,还需要进一步的研究和探讨,以便更加全面地了解细胞的生物学特性。

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第五章物质的跨膜运输与信号传递一.教学目标:1深刻理解被动运输、主动运输和内吞外排的概念,以及物质跨膜运输的重要意义;2.理解细胞信号传递的主要特点,掌握甾类激素信号通路、cAMP信号通路、磷脂酰肌醇信号通路和EGF受体信号通路的主要环节。

二.重点:跨膜运输的方式和细胞通讯的信号通路。

三.难点:跨膜运输的机制。

四.授课方式与教学方法:讲授、讨论、多媒体辅助教学。

五.教学内容:细胞膜是细胞与细胞外环境之间的一种选择性通透屏障,物质的跨膜运输对细胞的生存和生长至关重要。

多细胞生物是一个繁忙而有序的细胞社会,这种社会性的维持不仅依赖于细胞的物质代谢与能量代谢,还有赖于细胞通讯与信号传递,以协调细胞的行为。

第一节物质的跨膜运输一.被动运输(passive transport)◆定义:通过简单扩散或协助扩散实现物质由高浓度向低浓度方向的跨膜转运。

转运的动力来自物质的浓度梯度,不需要细胞提供能量。

◆类型:简单扩散(simple diffusion)、协助扩散(facilitated diffusion)◆膜转运蛋白:✧1.载体蛋白(carrier proteins)——通透酶(permease)性质;介导被动运输与主动运输。

✧2.通道蛋白(channel proteins)——具有离子选择性,转运速率高;离子通道是门控的;只介导被动运输膜转运蛋白通道蛋白(被动运输)膜转运蛋白载体蛋白单运输(被动运输+主动运输) 共运输协同运输对向运输细胞膜上的运输蛋白:载体蛋白:通过构象变化运输物质通道蛋白:形成通道、运输物质载体蛋白:膜上一类转运蛋白,可特异的、可逆的与某物质结合,通过构象变化将物质从膜的一侧运到另一侧。

又称通透酶,与运输物质的结合与酶的动力学相似。

通道蛋白:形成亲水的通道,允许一定大小和一定电荷的离子通过。

因运转的几乎都是离子,又称离子通道.通道蛋白形成通道:持续开放(如水通道)间断开放(闸门通道)配体闸门通道:配体与受体结合,通道开放。

电压闸门通道:膜电位变化,启动通道开放。

压力激活通道:压力变化,启动通道开放。

离子闸门通道:特定离子浓度变化,启动通道。

神经---肌肉兴奋,不到1秒钟的时间内完成,这一过程包括四种通道顺次例如:神经---肌肉兴奋,不到1秒钟的时间内完成,这一过程包括四种通道顺次开放:A、刺激-神经冲动-神经末梢,膜去极化,电压闸门通道钙离子通道开放,钙离子进入神经末梢,刺激乙酰胆碱(ACH)分泌到突触间隙中;B、ACH与突触后肌细胞膜上的受体结合,配体闸门钠离子通道开放,钠离子进入肌细胞,肌细胞膜去极化;C、肌细胞膜上电压闸门钠离子通道开放,更多的钠离子进入肌细胞,肌细胞膜进一步去极化,产生动作电位,扩散到肌细胞膜;D、肌浆网上的离子闸门通道钙离子通道开放,钙离子进入细胞质,引起肌肉收缩。

二.主动运输(a c t i v e t r a n s p o r t)●定义:是由载体蛋白所介导的物质逆浓度梯度或电化学梯度由浓度低的一侧向浓度高的一侧进行跨膜转运的方式。

细胞耗能。

由ATP直接提供能量和间接提供能量及光能驱动.被动与主动运输的比较●主动运输类型:三种基本类型◆由ATP直接提供能量的主动运输✧钠钾泵✧钙泵(Ca2+-ATP酶)✧质子泵:P-型质子泵、V-型质子泵、H+-ATP酶◆协同运输(cotransport)由Na+-K+泵(或H+-泵)与载体蛋白协同作用,靠间接消耗ATP所完成的主动运输方式◆物质的跨膜转运与膜电位进行主动运输的物质:各种离子(如钠离子、钾离子、氯离子、碳酸根离子、钙离子等)。

葡萄糖、氨基酸等带电荷极性分子。

进行主动运输的载体又称“离子泵”²钠钾泵膜上运输钠和钾离子的载体称“钠钾泵”或“钠钾ATP酶”。

钠---钾泵的组成:大亚基(100000DN):外侧:1、钾结合位点;2、鸟苯苷结合位点内侧:1、钠结合点;2、ATP结合点小亚基(45000DN):与大亚基结合,作用不明。

“钠钾泵”的主动运输机制即:3Na+结合到结合位点上®酶磷酸化®酶构象变化® 3 Na+释放到细胞外® 2K+结合到位点上®酶去磷酸化® 2K+释放到细胞内,酶构象恢复原始状态。

N a+-K+泵的作用产生和维持膜电位;为葡萄糖、氨基酸的主动运输创造条件;维持细胞的渗透压,例如:当肾小管细胞间隙钠过高时会导致细胞内水分外渗,细胞内缺水,人会感到口渴而饮水多。

钙泵,又称C a2+-A T P酶位于质膜和内质网上的跨膜蛋白,将C a2+输出细胞或泵入内质网腔中储存,以维持细胞内低浓度的游离C a2+.钙泵工作与A T P的水解相偶联,每消耗一个A T P分子转运两个C a2+.钙调蛋白是钙泵的激活因子.钙调蛋白(C a M)是C a2+应答蛋白,由148个氨基酸残基组成,含4个结构域,每个结构域可以与一个C a2+.C a M 本身无活性,C a2+与C a M结合后形成C a2+-C a M复合体,再与靶酶结合将其活化.质子泵,又称H+-A T P酶位于植物细胞、真菌和细菌质膜上的跨膜蛋白,将H+泵出细胞建立跨膜的H+电化学梯度,驱动转运溶质进入细胞。

P-型质子泵:位于真核细胞的质膜上,转运H+过程中涉及磷酸化和去磷酸化。

V-型质子泵:位于动物细胞溶酶体膜和植物液泡膜上,转运H+过程中不涉及磷酸化的中间体。

提高细胞质中的pH和细胞器内的酸度。

H+-ATP酶:位于线粒体的内膜,植物类囊体膜和细菌质膜上,利用膜上H+梯度合成ATP。

协同运输(cotransport)由Na+-K+泵(或H+-泵)与载体蛋白协同作用,靠间接消耗ATP所完成的主动运输方式主动运输的能量不是由ATP直接提供,而是由储存在膜上离子梯度中的能量来驱动的。

这类运输进行时,一种物质的运输必须依赖另一种物质的同时运输,故称为协同运输。

协同运输两种物质同时相向转运,称对向运输(逆向协同运输)。

如Na+--K+;Na+—H+;Cl-—HCl3-两种物质同时同向转运,称共运输(同向协同运输)。

如Na+--G;Na+--aa浓度差+电位差→电化学梯度动物细胞中,Na+的电化学梯度通常是驱动另一种分子主运输的能量,如Na+ 梯度驱动G、aa的主动运输三、胞吞作用(endocytosis)与胞吐作用(exocytosis)作用:完成大分子与颗粒性物质的跨膜运输,又称膜泡运输或批量运输(bulk transport)。

属于主动运输。

●胞吞作用●胞吐作用胞吞作用●胞饮作用(pinocytosis)与吞噬作用(phagocytosis)。

胞饮作用与吞噬作用主要有三点区别受体介导的内吞作用及包被的组装胞内体:是动物细胞内由膜包围的细胞器,其作用是传输由胞吞作用新摄入的物质到溶酶体被降解。

胞内体上有质子泵。

胞吐作用胞吐作用:是将细胞内的分泌泡或其他某些膜泡中的物质通过细胞膜运出细胞的过程。

●组成型的外排途径(constitutive exocytosis pathway)所有真核细胞连续分泌过程用于质膜更新(膜脂、膜蛋白、胞外基质组分、营养或信号分子)default pathway:除某些有特殊标志的駐留蛋白和调节型分泌泡外,其余蛋白的转运途径:粗面内质网→高尔基体→分泌泡→细胞表面●调节型外排途径(regulated exocytosis pathway)特化的分泌细胞储存——刺激——释放产生的分泌物(如激素、粘液或消化酶)具有共同的分选机制,分选信号存在于蛋白本身,分选主要由高尔基体TGN上的受体类蛋白来决定●膜流:动态过程对质膜更新和维持细胞的生存与生长是必要的●囊泡与靶膜的识别与融合胞吞作用途径膜上糖蛋白或糖脂识别与膜接触膜内陷包围物质膜融合去封口囊泡进入细胞胞内体:是动物细胞内由膜包围的细胞器,其作用是传输由胞吞作用新摄入的物质到溶酶体被降解。

胞内体上有质子泵。

第二节细胞通讯与信号传递一、细胞通讯与细胞识别(一)细胞通讯(cell communication)一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个细胞产生相应的反应。

细胞间的通讯对于多细胞生物体的发生和组织的构建,协调细胞的功能,控制细胞的生长、分裂、分化和凋亡是必须的。

●细胞通讯方式:◆分泌化学信号进行通讯✧内分泌(endocrine)激素分泌后作用较远的靶细胞,其传递介质为血液。

✧旁分泌(paracrine)激素分泌释放后作用于邻近的靶细胞,其传递介质为细胞间液。

✧自分泌(autocrine)激素分泌释放后仍作用于自身细胞,其传递介质为胞液;✧化学突触(chemical synapse)◆接触性依赖的通讯细胞间直接接触,信号分子与受体都是细胞的跨膜蛋白◆间隙连接实现代谢偶联或电偶联(二)细胞识别(cell recognition)●概念:细胞通过其表面的受体与胞外信号物质分子(配体)选择性地相互作用,进而导致胞内一系列生理生化变化,最终表现为细胞整体的生物学效应的过程。

●信号通路(signaling pathway)细胞识别是通过各种不同的信号通路实现的。

细胞接受外界信号,通过一整套特定的机制,将胞外信号转导为胞内信号,最终调节特定基因的表达,引起细胞的应答反应,这种反应系列称之为细胞信号通路。

(三)细胞的信号分子与受体●信号分子(signal molecule)◆亲脂性信号分子()◆亲水性信号分子◆气体性信号分子(NO)受体(receptor)受体是细胞膜或细胞内的功能性糖蛋白,可特异地识别配体并与之结合,引起相应的生物效应。

多为糖蛋白◆细胞内受体:为胞外亲脂性信号分子所激活激素激活的基因调控蛋白(胞内受体超家族)此型受体主要包括类固醇激素受体,如糖皮质激素受体(GR)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、雄激素受体(AR)、盐皮质激素受体(MR)等;维生素D3受体(VDR)以及甲状腺激素受体(TR)。

这些激素进入细胞以后,能与特异性受体结合形成活性复合物,然后作用于染色体DNA,调节基因表达,从而影响细胞的物质代谢和生理活动。

◆细胞表面受体:为胞外亲水性信号分子所激活细胞表面受体分属三大家族:✧离子通道偶联的受体(ion-channel-linked receptor)✧G-蛋白偶联的受体(G-protein-linkedreceptor)✧酶偶连的受体(enzyme-linked receptor)受体的功能:介导物质跨膜运输(受体介导的内吞作用)信号转导:受体的激活(activation)(级联反应);受体失敏(desensitization)关闭反应、减量调节(down-regulation)降低反应。

●第二信使(second messenger)cAMP、cGMP、三磷酸肌醇(IP3),二酰基甘油(DG)●分子开关(molecular switches)细胞内信号传递中起举足轻重作用的一类蛋白质,通过磷酸化或结合GTP而活化,开启信号通路,通过去磷酸化或结合GDP而失活,关闭信号通过。

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