酸性转化酶(AI)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
β-淀粉酶(β-AL活性检测试剂盒说明书(DNS 显色法)__可见分光光度法UPLC-MS-4171
β-淀粉酶（β-AL）活性检测试剂盒说明书（DNS显色法）可见分光光度法UPLC-MS-417150T/24S试剂名称规格保存条件试剂一液体65mL×1瓶常温保存试剂二液体18mL×2瓶2-8℃保存试剂三粉剂×2支2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：若有黄色晶体析出，需加热溶解后再用；2、试剂二：临用前取1支试剂三加入到1瓶试剂二中，置于常温水中并加热至煮沸，期间不断搅拌粉剂至溶解，用不完的试剂2-8℃保存4周；3、标准品：10mg无水葡萄糖。
临用前加入1mL蒸馏水配制成10mg/mL的标准溶液，2-8℃保存两周。
淀粉酶负责水解淀粉，主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。
β-淀粉酶(EC3.2.1.2)从淀粉的非还原端切开α-1,4糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。
还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。
α-淀粉酶不耐酸，β-淀粉酶不耐热。
根据上述特性，钝化其中之一，就可测出另一种淀粉酶的活力。
Starchα-AL Reducing SugarReducing Sugar+3,5-dinitrosalicylic acid3-Amino-5-Nitrosalicylate(540nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器和蒸馏水。
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）称取约0.1g样本，加入0.8mL蒸馏水，研磨匀浆；将匀浆倒入离心管中，提取液在室温下放置提取15min，每5min振荡1次，使其充分提取；6000g，常温离心10min，取上清液加蒸馏水定容至10mL，摇匀，即淀粉酶原液。
吸取上述淀粉酶原液1mL，加入4mL蒸馏水，摇匀，即为淀粉酶稀释液，用于（α+β）淀粉酶总活力的测定。
组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
组织及血液酸性磷酸酶（ACP）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2130规格：50T/24S产品内容：提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体30mL×1瓶，4℃避光保存，变成蓝绿色不能使用。
标准品：液体1mL×1支，2μmol/mL酚标准液，4℃保存。
临用前蒸馏水稀释至0.5μmol/mL备用。
产品说明：ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸，常见于巨噬细胞的溶酶体内。
ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。
在酸性环境中，ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚，苯酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应生成红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510nm吸光度增加速率，来计算ACP活性。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：称取约0.1g组织，加提取液1mL充分研磨，4℃、10000rpm离心10min，取上清液待测。
血液可直接用于测定，如果浓度高的话，用提取液稀释。
二、测定步骤：1.分光光度计预热30min以上，调节波长到510nm，蒸馏水调零。
2.试剂一置于37℃水浴中预热30min以上。
试剂名称（μL）测定管对照管空白管标准管蒸馏水--100-0.5μmol/mL标准品---100上清液100---试剂一200200200200试剂二200200200200混匀后置于37℃水浴中保温15min试剂三600600600600上清液-100--混匀后于510nm测定吸光度，分别记为A测定管、A对照管、A空白管、A标准管。
三、ACP活性计算：1.按蛋白浓度计算活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。
糖化酶活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4239
糖化酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法UPLC-MS-423950T/24S试剂名称规格保存条件提取液液体110mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×2瓶2-8℃保存试剂二液体35mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：临用前取1瓶加入20mL提取液，充分混匀后沸水浴直至溶解（约10min），2-8℃保存4周；2、标准品：10mg无水葡萄糖。
临用前加1mL提取液溶解为10mg/mL的葡萄糖标准品备用，2-8℃保存两周；糖化酶，即葡萄糖淀粉酶（EC3.2.1.3），又称γ-淀粉酶。
糖化酶是由一系列微生物分泌的，具有外切酶活性的胞外酶，主要作用是从淀粉、糊精、糖原等碳链上的非还原性末端依次水解α-1,4糖苷键，切下一个个葡萄糖单元，对于支链淀粉，当遇到分支点时，它也可以水解α-1,6糖苷键由此将支链淀粉全部水解成葡萄糖。
多应用于酒精、白酒、抗生素、氨基酸、有机酸，甘油，淀粉糖等工业中，是我国重要的工业酶制剂之一。
糖化酶将可溶性淀粉生成葡萄糖，碱性条件下，葡萄糖与3,5-二硝基水杨酸共热后生成红棕色化合物，在540nm处有最大光吸收，在一定范围内葡萄糖的量与反应液颜色深浅成正比，以此测定糖化酶的活力。
Soluble Starch Glycosylase GlucoseGlucose+3,5-Dinitrosalicylic Acid3-Amino-5-Nitrosalicylate（540nm）注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、研钵/匀浆器，超声破碎仪、冰和蒸馏水。
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。
抗坏血酸氧化酶活性测定试剂盒使用说明
抗坏血酸氧化酶活性测定试剂盒使用说明分光光度法货号：BC1260规格：50管/48样产品说明：AAO是定位于植物细胞壁的糖蛋白，属“蓝铜氧化酶”家族。
细胞壁内的抗坏血酸和AAO 与细胞壁代谢和生长有着密切的联系。
AAO氧化AsA所形成的MDHA可通过质膜上的细胞色素b还原，该过程中电子的跨膜运输能够促进细胞生长。
AAO可直接氧化AsA，通过测定AsA的氧化量，可计算得AAO活力。
实验中所需仪器及设备：低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入10mL蒸馏水充分溶解。
操作步骤：一、粗酶液提取：按照组织质量g：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。
16000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
二、AAO测定操作：1.分光光度计预热30min，调节波长到265nm。
2.试剂二在25℃水浴锅中预热30min。
3.空白管：依次在1mL石英比色皿中加入100µL蒸馏水、850µL预热的试剂二和50µL试剂三，迅速混匀后在265nm测定10s和130s光吸收A1和A2，△A空白管=A1-A2。
4.测定管：依次在1mL石英比色皿中加入100µL上清液、850µL预热的试剂二和50µL试剂三，迅速混匀后在265nm测定10s和130s光吸收A3和A4，△A测定管=A3-A4。
三、AAO活性计算：（1）按蛋白浓度计算AAO活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1µmol AsA为1U。
AAO(U/mg prot)=(△A测定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反总×106÷(Cpr×V样)÷T=0.0924×(△A测定管-△A空白管)÷Cpr（2）按样本质量计算AAO活性单位定义：25℃中每毫克样本每分钟氧化1µmol AsA为1U。
酸性蛋白酶(Acid Protease,ACP)试剂盒使用说明
酸性蛋白酶（Acid Protease，ACP）试剂盒使用说明分光光度法货号：BC2280规格：50管/24样产品内容：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加10mL蒸馏水溶解。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
临用前加入10mL试剂一，沸水浴溶解。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入50mL蒸馏水溶解。
试剂五：液体×1瓶，4℃保存。
标准品：液体×1支，0.25μmol/mL标准酪氨酸溶液，4℃保存。
产品说明：ACP是一种在酸性环境下催化蛋白质水解的酶。
该酶主要用于酒精发酵、啤酒酿造、毛皮软化、果酒澄清、酱油酿造、饲料等。
酸性条件下，ACP催化酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；钨蓝在680nm有特征吸收峰，通过测定其吸光度增加，来计算ACP活性。
所需仪器及设备：可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、1.5mL EP管和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即粗酶液。
2.血清或培养液：直接测定。
3.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
二、测定操作：1.分光光度计预热30min，调节波长到680nm，蒸馏水调零。
2.试剂二、试剂三和试剂四置于30℃水浴保温30min。
3.对照管：取一支EP管，加入100μL粗酶液，200μL试剂二，混匀后置于30℃水浴保温10min；加入200μL试剂三，混匀后8000g，4℃离心10min；取200μL上清液，加入新的EP管，再加入1000μL试剂四，200μL试剂五，混匀后置于30℃水浴保温20min，于680nm 测定光吸收，记为A对照管。
NADH氧化酶（NOX）活性检测试剂盒说明书
NADH氧化酶（NOX可见分光光度法货号：BC0630规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体25 mL×1瓶4℃保存试剂二液体5 mL×1瓶4℃保存试剂三液体0.5 mL×1支-20℃保存试剂四液体70 mL×1瓶4℃保存试剂五液体10 mL×1瓶4℃保存试剂六粉剂×2瓶-20℃保存溶液的配制：试剂六：临用前加入9 mL双蒸水，用不完的试剂-20℃分装保存。
产品说明：NOX（EC 1.6.99.3）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可在氧气存在下，直接将NADH氧化为NAD+。
该酶不仅参与NAD+的再生，而且与免疫反应密切相关。
NOX能够将NADH氧化为NAD+，NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝（DCPIP）的还原相偶联，蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP，在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：1.准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10µL试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2.将匀浆600g，4℃离心5min。
将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。
3.将上清液转移至另一EP管中，即胞浆提取物，用于线粒体中泄露NOX活性测定。
4.沉淀即为线粒体，加入200µL试剂二和2µL试剂三，反复吹打充分混匀，用于NOX活性测定，并用于蛋白浓度测定。
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4386
单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号：UPLC-MS-4386规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体30mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三粉剂×1瓶-20℃保存试剂四液体×1瓶-20℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入5mL蒸馏水充分溶解，4℃保存；2、试剂三：临用前加入5mL蒸馏水充分溶解，可溶解后分装-20℃保存，避免反复冻融；3、试剂四：液体置于试剂瓶内EP管中。
临用前加5mL试剂一充分溶解，可溶解后分装-20℃保存，避免反复冻融。
产品说明：MDHAR催化MDHA还原生成AsA，在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。
MDHAR催化NADH还原MDHA生成AsA和NAD+，NADH在340nm有特征吸收峰，但是NAD+没有。
通过测定340 nm光吸收下降速率，来计算出MDHAR活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：研钵/匀浆器、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）1：5-10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆。
10000rpm，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
2、细菌、细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
碧云天酸性磷酸酶检测试剂盒说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-168-3301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************碧云天网站微信公众号网址：酸性磷酸酶检测试剂盒产品编号产品名称包装P0326 酸性磷酸酶检测试剂盒120次产品简介：碧云天生产的酸性磷酸酶检测试剂盒(Acid Phosphatase Assay Kit)是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织样品的裂解或匀浆产物的上清液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的酸性磷酸酯酶活性的试剂盒。
酸性磷酸酶(Acid Phosphatase)，也称酸性磷酸酯酶，是一种在溶酶体中含量较高的酸性水解酶，被认为是鉴定溶酶体亚细胞组分的标志物。
酸性磷酸酶是一个蛋白家族，哺乳动物中其分子量从18kD到100kD不等。
酸性磷酸酶分为两类，一类为酒石酸盐敏感型，一类为氟离子敏感型。
溶酶体中的酸性磷酸酶为酒石酸盐敏感型，而红细胞和巨噬细胞中的酸性磷酸酶为氟离子敏感型。
血浆中的酸性磷酸酶活性范围在2-7.9U/L，血清中酸性磷酸酶的活性范围在2.5-11.7U/L。
精液(semen)中含有高浓度的酸性磷酸酯酶，活力可以达到87-436KU/L。
本试剂盒可以检测细胞或组织样品的裂解或匀浆产物的上清液、血浆、血清、尿液或纯化的酶样品等中的酸性磷酸酶活性。
Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物，在酸性条件下，可在酸性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。
para-nitrophenol (p-nitrophenol)在碱性条件下，呈黄色产物，可以在400-415nm检测吸光度。
产物黄色越深，说明酸性磷酸酶检活性越高，反之则酶活性越低。
据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。
包括标准品和空白对照，本试剂盒共可进行120个样品的检测。
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酸性转化酶（AI）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0560
规格:50T/24S
产品内容：
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入30mL试剂一充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存；
试剂三：液体35mL×1瓶，4℃保存。
标准品：粉剂×1支，4℃保存，10mg无水葡萄糖。
临用前加入1mL蒸馏水溶解,制备10mg/mL葡萄糖标准液备用。
产品说明：
蔗糖转化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。
根据最适pH，将高等植物Ivr分为酸性转化酶（AI）和中性转化酶（NI）两种类型。
AI(EC3.2.1.26)主要存在于细胞液泡或自由空间中，最适pH为4.5~5.0（酸性），通过降解液泡中蔗糖，调节液泡中蔗糖的利用和果实内糖类的积累。
AI催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在540nm 有特征光吸收，在一定范围内540nm光吸收增加速率与AI活性成正比。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
12000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、标准曲线绘制
将标准品稀释成1.0、0.8、0.6、0.4、0.2、0mg/mL葡萄糖标准液，分别测定1.0、0.8、0.6、0.4、0.2、0mg/mL葡萄糖标准液在540nm下的吸光度（A），以各浓度下吸光值减空白管（浓度为0mg/mL）的吸光度为y轴，葡萄糖浓度为x轴绘制标准曲线。
三、测定步骤及加样表：
按下表操作：
试剂名称（μL）测定管对照管标准管
样本200200-
试剂一-800-
试剂二800-800
标准液--200
混匀，37℃准确水浴30min后，煮沸10min左右（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混
匀（以保证浓度不变），12000g，4℃离心5min，取上清。
试剂三500500500
混匀，煮沸10min左右（盖紧，以防止水分流失），流水冷却后充分混匀，540nm处蒸馏水调零，记录各管吸光值A，ΔA=A测定-A对照。
四、注意事项：
1、如果加入试剂三，煮沸10min后有混浊物出现，建议离心除去沉淀后，取上清测定吸光度；
2、如果吸光值大于1，可以用蒸馏水将样本稀释后测定（计算公式中乘以相应稀释倍数）
五、A I活性计算：
标准条件下测定的回归方程为y=kx+b；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
1、按蛋白浓度计算
单位定义：37℃每mg蛋白每分钟产生1µg还原糖定义为一个酶活性单位。
AI活性（U/mg prot）=(x×V1×1000)÷(V1×Cpr)÷T=33.3×x÷Cpr
2、按鲜重计算
单位定义：37℃每g组织每分钟产生1µg还原糖定义为一个酶活性单位。
AI活性（U/g）=(x×V1×1000)÷(W×V1÷V2)÷T=33.3×x÷W
1000：1mg/mL=1000µg/mL；
V1：加入反应体系中样本体积，0.2mL；V2：加入提取液体积，1mL；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本鲜重，g；
T：反应时间：30min。