显微镜的结构及使用方法、动物细胞形态结构的观察

目镜（5×、6 × 、8 × 、10 × 、12 × 、15 × ） 物镜侧面符号的含义
10/0.30 表示放大10倍，数值口径为0.30 40/0.65 表示放大40倍，数值口径为0.65 100/1.25 oil 表示放大100倍，数值口径为1.25，为油镜 160/0.17 表示镜筒长度和所需盖玻片的厚度（mm） WD 表示工作距离
光学显微镜成像原理
光学显微镜是利用目镜和物
观察点
镜两组透镜系统来放大成像的。 A″B″和眼睛的距离为显微镜的明 视距离，标本AB的向经过物镜 （L1）后到A′B′处称谓一个放大
目镜L2
倒立的实像，F1为L1的后焦点， 当光线传到目镜（L2）时，在
中间所成的实像A′B′
A″B″处A′B′被放大成一个直立的
医学细胞生物学实验
林 刚
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第一次实验内容
实验一 显微镜的结构及使用方法 实验二 动物细胞形态结构观察
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实验一 显微镜的结构及使用方法 普通光学显微镜结构
• 机械部分 • 光学部分
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机械部分主要结构
度增强，提高分辨率，使物象明亮清晰。
在油镜观察结束后，切记将镜头和其他沾有油污的部件清擦净。
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光学显微镜的维护
一 、必须熟练掌握并严格执行使用规程。
二、取送显微镜时一定要一手握住弯臂，另一手托住底座。显微镜不能
倾斜，以免目镜从镜筒上端滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。 三、观察时，不能随便移动显微镜的位置。
虚像，然后传递到视网膜上，标 本AB就被放大了。人眼看到的是 AB被放大后的虚像，其与原样品 的方向相反。
物镜 L1 观察的物体A B 放大的虚像A″B″
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光学显微镜成像原理
数值孔径（NA，镜口率）：是指光线经过盖玻片引起 折射后成光锥底面的口径数值。即光线投射到物镜 上的最大开口角度一半的正弦乘上标本与物镜间介 质的折射率的乘积。 NA=n•sinα/2 n为介质的折射率， α为镜口角。 分辨率：能分辨被检物体细微结构最小间隔的能力。 D=0.61λ/NA λ为波长。数值孔径越高，分辨率越高。 放大率：最终成像大小与原物体大小的比值。 总放大倍数＝物镜的放大倍数×目镜的放大倍数 物镜的镜口角=AOB
是适用范围非常广泛的常规显镜。不
仅可作生物解，作观察分析，由于本 显微镜具有较高的分辨率及大视场范 围的清晰，因此还可作电子工业和精 密机械工业零件装配和检验，农业上 的种子检查等。
MODEL－Z45E体视显微镜
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其它光学显微镜
荧光显微镜是荧光显微术的基本装 置。荧光显微术是利用一定波长的光 （通常是波长短的紫外光和蓝紫光）照 射被检样品，激发荧光物质发出可见的 荧光。通过物镜和目镜的成像、放大，
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其它光学显微镜
倒置显微镜(invertcd m1Lfoscope) 是普通光学显微镜的一个类型，倒置显微镜有 几个特点不同于普通生物显微镜。 1） 透射光倒置显微镜的光源和聚光器位于载物 台的上方，照明光源自上方向下照射； 2） 物镜安装在载物台的下方，向上对焦；
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鸡血细胞
鸡血细胞低倍镜下观察
鸡血细胞油镜下观察 鸡血细胞高倍镜下观察
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动物神经细胞脊髓涂片
先用低倍镜观察,再用
高倍镜和油镜观察脊髓涂
片中的神经元（即神经细 胞），可找到染色深且具
有多个突起的脊髓前角运
动神经元。在其胞体内有 染色较浅的圆形的细胞核，
3） 物镜、聚光镜以及其他光学具组均适用于长 焦距观察；
4） 在医学、生物学领域中适合于观察培养瓶中 贴壁生长的细胞或浮游于培养液中的细胞。
XDS倒置生物显微镜
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其它光学显微镜
体视显微镜又称实体显微镜。它 在观察物体时能产生正立的三维空间 影像。立体感强，成像清晰和宽阔， 又具有长工作距离，并可根据观察物 的特点选用不同的反射和透射光照明，
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不同物镜的数值孔径与工作距离（10倍目镜）
物镜放大倍数 （×） 4 10 40
总放大倍数（×） 40 100 400
数值口径 0.10 0.25 0.65
工作距离（mm） 25 5.6 0.6
100
1000
1.25
0.14
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• 镜座、镜柱 • 粗调节螺旋和细调节螺旋 • 载物台、推进器和玻片夹
• 物镜转换器
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光学部分主要构件
光学部分包括照明系统和成像系统
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光学部分主要构件
物镜
低倍镜（1 × ~6 × ，常用的4 × 、10 × ） 高倍镜（25 × ~63 × ，常用的40 × ） 油 镜（90 × 、95 × 、100 × ）
光器的高度，把孔径光阑调至最大，使光线通过聚光器入射到镜筒内，
这时视野内呈明亮的状态。 四、将所要观察的玻片放在载物台上，使玻片中被观察的部分中科技大学生命科学与技术教学实验中心
光学显微镜的使用规程
五、先用低倍镜观察（物镜4X、10X、目镜10x）。观察之前，先转动粗动
调焦手轮，使载物台上升，物镜逐渐接近玻片。需要注意，不能使物镜
触及玻片，以防镜头将玻片压碎。然后，左眼注视目镜内，同时右眼不 要闭合（要养成睁开双眼用显微镜进行观察的习惯，以便在观察的同时 能用右眼看着绘图），并转动粗动调焦手轮，使载物台慢慢下降，不久 即可看到玻片中材料的放大物像。 六、如果在视野内看到的物像不符合实验要求（物像偏离视野），可慢慢 调节载物台移动手柄。调节时应注意玻片移动的方向与视野中看到的物 像移动的方向正好相反。如果物像不甚清晰，可以调节微动调焦手轮， 直至物像清晰为止。
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显微镜的使用练习
1. 羊毛交叉标本 2. 字玻片
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实验二 动物细胞形态结构观察
鸡血细胞
动物神经细胞
动物平滑肌细胞 华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
鸡血细胞
重点在高倍镜下和油镜下观察红细胞、嗜中性白细胞和血栓细胞（血小 板）的形态结构特点。 红细胞——为卵圆形细胞，有胞核，呈椭圆形，内有染色质块，胞质染 成淡红色。 嗜中性白细胞——由于颗粒具有多种嗜色性，故又称为异嗜性粒细胞， 细胞较大，胞质内含棒状或纺锤形的红色颗粒。胞质色淡，胞核分叶情况因 成熟程度而有不同，有的不分叶，有的分叶，染成淡紫色。 血栓细胞——是鸡血液内最小的细胞，成纺锤形。两端钝圆，常集聚成 群，胞质染成浅蓝色，核呈卵圆形。注意血栓细胞与红细胞的区别，主要是 体积较小，核较大，染成玫瑰紫色。
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油镜的使用
100×物镜是油浸物镜。使用前必需在镜头与盖玻片间加浸油。 油镜的透镜很小，光线通过玻片与油镜头之间的空气时，因介质 密度不同，发生折射或全反射，使射入透镜的光线减少，物象显现不 清。若在油镜与载玻片之间加入和玻璃折射率（n=1.52）相近的香柏 油（n=1.515），则可减少光线折射，使进入透镜的光线增多，视野亮
平滑肌与组织块
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细胞生物学实验绘图方法与要求
一、在仔细观察的基础上，选择典型结 构进行描绘，要求真实、准确(注意 各部结构的比例关系)。
核的中央有一个染成深色
的核仁。
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动物平滑肌细胞分离片
先用低倍镜再用高倍镜
和油镜下观察平滑肌分离片， 可见染成紫红色呈纺锤形的
肌细胞，细胞核为椭圆形，
位于细胞的中央，着色很深， 在细胞质中有淡红的肌原纤
维。略旋动细调焦螺旋，仔
细观察。
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相差显微镜
相差显微镜是一种将光线通过透明标本细节时所产生的 光程差（即相位差）转化为光强差的特种显微镜。 相差显微镜与普通光学显微镜的基本结构是相同的，所不同
的是它具有四部分特殊结构：即环状光阑、相板、合轴调节望
远镜及绿色滤光片。
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多媒体互动教学系统的使用
学生端的功能 学生端主要具备菜单显示、电子举手、作业提交、学 生交流、屏幕录制、屏幕回放、图象采集、系统设置八大 功能。
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多媒体互动教学系统的使用
四、学生交流 学生交流功能用于学生之间的交流。点击“学生交流”会出现一 个下拉窗口，窗口中列出了其他所有学生端的IP地址，选择想要观摩 的学生端的IP地址后点击“确定”，此时被请求方会收到一个观摩请 求的窗口，窗口中显示请求方的 IP地址及窗口关闭倒计时秒数，被 请求方同意后即可观看到其屏幕画面了。 五、图象采集 在显微镜下找到最佳影像后，点击“图象采集”即可以启动此学 生端的采集程序，从而可以采集图象。
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光学显微镜的使用规程
七、如果进一步使用高倍物镜观察，应在转换高倍物镜之前，把物像中 需要放大观察的部分移至视野中央（将低倍物镜转换成高倍物镜观察 时，视野中的物像范围缩小了很多）。 八、在转换高倍物镜并且看清物像之后，可以根据需要调节孔径光阑的 大小或聚光器的高低，使光线符合要求（一般将低倍物镜换成高倍物 镜观察时，视野要稍变暗一些，所以需要调节光线强弱）。 九、观察完毕，应先将物镜镜头从通光孔处移开，然后将孔径光阑调至 最大，再将载物台缓缓落下，并检查零件有无损伤（特别要注意检查 物镜是否沾水沾油，如沾了水或油要用镜头纸擦净），检查处理完毕 后即可装箱。