Tris-氯化铵红细胞裂解液说明书
脾细胞分离 红细胞裂解液配制
1.小鼠脾细胞的制备：
Balb/c小鼠摘眼球放血，处死，75％浸泡消毒2~3min
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超净台内解剖、取脾，剪碎
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于200目筛网中研磨过筛，小平皿收集（小皿放约5ml 20%血清的1640）
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移至离心管中，800rpm，离心5min，弃上清
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加入5ml红细胞裂解液，吹打均匀，静置3～4min
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1000rpm离心5min，弃上清，少量RPMI 1640洗涤2～3遍
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加入2ml RPMI 1640（含10％FBS），吹打均匀，计数
红细胞裂解液配方：
NH4Cl: 0.747g
Tris：0.26g
定容100ml
PH=7.4
0.22um的滤膜抽滤除菌。
注：红细胞裂解液可以从冰箱拿直接出来用，预冷的红细胞裂解液加到细胞中后可以在冰上放置1min左右，裂解更充分些。
我做实验时，一般红细胞裂解液加完离心后，只用1640洗一次，一只小鼠的脾脏细胞最后悬浮于3ml 1640中，稀释50倍计数，即：100ul台盼蓝+880ul 1640（或PBS）+20ul 细胞。
那个问题等师兄过来了帮你问一下。
组织裂解液和细胞裂解液如何配制
组织裂解液和细胞裂解液如何配制组织裂解液和细胞裂解液是在实验室中用于将组织或细胞中的生物分子（如蛋白质、核酸等）裂解或溶解的溶液。
这些液体通常包含一系列试剂和缓冲液，以帮助维持理想的酸碱平衡和溶解条件。
以下是组织裂解液和细胞裂解液常见的配制方法。
1. 常用的组织裂解液配方为RIPA裂解液（RIPA lysis buffer），其成分包括：- 50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）-150mM氯化钠（NaCl）- 1% NP-40或Triton X-100-0.5%钠脱氧胆酸或SDS-0.1%SDS-1mMEDTA-1mM苯甲硫酸酯（PMSF）2.配制方法：a. 称取所需量的Tris-HCl缓冲液和NaCl溶解于蒸馏水中；b. 加入适量的PMSF和其他表面活性剂（如NP-40、Triton X-100）；c.配制完毕后，pH应调整至理想值；d.将裂解液过滤或使用高速离心去除悬浮物。
细胞裂解液的配制：1.常用的细胞裂解液配方为RIPA裂解液（同组织裂解液配方）或RIPA缓冲液（不含表面活性剂），以避免破坏裂解液中的蛋白质。
2.配制方法：a.同组织裂解液的步骤1；b.不加入表面活性剂，方便后续蛋白质的分析。
同时，裂解液的配制可以根据实验需要做出适当更改，以满足特定的研究目的和条件。
在裂解液的配制过程中，需要注意以下几点：1.所选择的缓冲液的pH应调整到适合所需实验的范围内，以确保溶液的稳定性；2.表面活性剂的添加量应适中，以满足蛋白质溶解的需要，但过多的添加会造成裂解液的稀释和稳定性下降；3.裂解液的配制应注意在低温下进行，以防止试剂的降解和活性的损失；4.在裂解液的使用过程中，最好将裂解液与细胞/组织充分接触，并且较长时间地孵育，以满足完整的裂解过程。
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer ,10×)简介： 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH 4Cl 。
RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
使用1×RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测，尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成：操作步骤(仅供参考)：注意：绝大多数情况下，应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用，流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer ，轻柔吹打混匀，裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃离心，弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤：根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。
4℃，离心，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要，重复上述步骤5一次，共洗涤1～2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液：新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，制备细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解：加入1×RBC Lysis Buffer ，轻柔吹打混匀，裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
细菌细胞裂解液配方
细菌细胞裂解液配方细菌细胞裂解液是一种含有多种细胞成分的液体，可以用于分离、纯化、检测和分析细胞内的各种基因、蛋白质和代谢产物。
以下是一组常用的细菌细胞裂解液配方：配方一：Tris-HCl裂解液- Tris-HCl缓冲液（pH 8.0） 50mM- EDTA 1mM- Lysozyme 1mg/mL步骤：将含菌量为10^8cfu/mL的蒸馏水悬液加入裂解液中（10mL/1mL），在室温下振荡30min-1h，最终离心，将沉淀洗涤后获取裂解液。
配方二：甘油-SDS裂解液- Tris-HCl缓冲液（pH 8.0） 50mM- EDTA 1mM- Lysozyme 1mg/mL- 10%甘油 10mL- 10%SDS 10mL步骤：将含菌量为10^8cfu/mL的蒸馏水悬液加入裂解液中（10mL/1mL），在室温下振荡30min-1h，最终离心，将沉淀洗涤后获取裂解液。
配方三：BugBuster裂解液- BugBuster蛋白质裂解液 20mL- Benzonase 70U/mL步骤：将含菌量为10^8cfu/mL的蒸馏水悬液加入裂解液中（10mL/1mL），在室温下振荡30min-1h，最终离心，将沉淀洗涤后获取裂解液。
配方四：液氮裂解液- 液氮 200-300mL步骤：将含菌量为10^8cfu/mL的细胞悬液倒入液氮中，将混合物充分研磨，研磨时需要在液氮中浸泡，并间歇性振荡，直到细胞破裂。
然后将混合物离心，将上清液收集。
以上是常用的几种细菌细胞裂解液配方。
每种配方针对不同的细胞类型、目的和实验需求，都有其独特的优点和适用性。
根据实验情况和需要，选择适宜的裂解液，能更加高效、准确地进行细胞裂解和成分分离分析。
红细胞裂解液使用说明书
红细胞裂解液红细胞裂解液红细胞裂解液是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
应用对于组织细胞样品1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2. 加入3~5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4~5min。
例如细胞沉淀的体积为1mL，则加入3~5mL的红细胞裂解液。
3. 1000g离心5 min，弃红色上清。
4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5. 洗涤1~2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，1000g离心2~3 min，弃上清。
可再重复1次，共洗涤1~2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2. 对于0.2mL细胞沉淀加入1mL红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4~5min。
3. 加入15~20mL PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。
4. 1000g离心5min，弃红色上清。
5. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。
快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。
裂解液配制方法
裂解液配制方法 The manuscript was revised on the evening of 20211、红细胞裂解液（去除红细胞）配制试剂所需材料：1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solutiona) NH4Cl (1.5 M) 80 gb) KHCO3 (100 nM) 10 gc) Na4EDTA (10 nM) 3.7 gd) Distilled H2O 1000 mL2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用）配制步骤：1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中；2.调节溶液pH值到，加去离子水定容到1000ml；3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。
保存：储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）；2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。
2、ripa裂解液NP-40 or Triton-100 1%TrisHCl (pH 50mmol/LNaCl 150mmol/LPMSF（苯甲基磺酰氟） L(100μg/ml)Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/Lμg/ml)Leupeptin（亮抑制肽） mlAprotinin（抑蛋白酶肽）μmol/L(1μg/ml)（注：PMSF 贮存液：100mmol/L即ml于异丙醇中；Aprotinin 贮存液：10mg/ml溶于LHEPES；Leupeptin 贮存液：10mg/ml溶于水中；Pepstatin 贮存液 10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存）3、细胞裂解液（Tris－HCL）1．1M Tris 溶液的配置取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。
2．1M Tris－HCL Ph=溶液的配置取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=（需浓盐酸约），加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。
红细胞裂解液的配制
红细胞裂解液的配制我在一个公司的网站上看到的红细胞裂解液的说明书上说操作要点是：1.在37度预热；2.充分混匀细胞我就是这样做的，效果还可以。
不过我只做流式细胞仪的检测，活性没测。
我的裂解液是0.16M NH4Cl，0.13mM EDTA，12mM NaHCO3我用的方法：全血：裂解液=1：3，如2ml的全血加上6ml的红细胞裂解液，充分混匀后，室温静置5mim，1000rpm离心6~10min。
红细胞裂解得非常充分。
0.15 M NH4CL, 0.01 M NaHCO3 and 1 mM EDTA (Sigma)Ammonium chloride (NH4Cl) 8.29 g 0.155 MPotassium bicarbonate (KHCO3) 1 g 10mMEDTA 0.37 g 1mMH2O 1l.Filter with 0.45µm filteraliquot in 100 ml aliquotsfilter the solution to be used with 0.2µm filter.我们用的是Tris-NH4Cl,具体配方如下:NH4Cl:4.15克加双蒸水500ml,取450ml;Tris:1.0297克加双蒸水50ml,再加上上面的450ml,共计500ml,高压灭菌,用时加10-20ml,静置5min,效果蛮好.9月29日我用的配方氯化铵3.735g，tris 1.3g，加在500ml水中，ph约7.2。
将全血约5ml加入配好的加入30ml裂解液的50ml试管中5分钟或15分钟，发现5分钟组细胞要多些，15分钟组细胞要少些，而且红细胞仍然有。
Tris-氯化铵红细胞裂解液使用说明
Tris-氯化铵红细胞裂解液使用说明Tris-NH4Cl Lysis Buffer货号：R1012规格：100ml/500ml保存：4℃保存，有效期至少6个月。
产品简介：Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为氯化铵。
Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
对于裂解、去除有细胞核红细胞，例如鸟或禽类的红细胞，效果不佳，裂解类似细胞时，不建议采用。
本裂解液经过滤除菌，经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
自备材料：胰蛋白酶、胎牛血清(FCS)、离心机、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液操作步骤（仅供参考）：（一）组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解:加入3～5倍细胞沉淀体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～2min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3、离心:4℃，400～500g离心5min，弃红色上清。
如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤：根据具体实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。
4℃，400～500g离心2～3min，弃上清，离心步骤亦可在室温下操作。
所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
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北京索莱宝科技有限公司
Tris-氯化铵红细胞裂解液说明书
货号：R1012
规格：500mL
保存：4℃保存，12个月有效。
产品说明：
在生物科研领域，经常需要去除红细胞，去除红细胞的方法有多种，如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。
Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH4Cl。
Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。
本裂解液经过滤除菌，经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
自备材料：
胰蛋白酶、离心机、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液、胎牛血清
注意事项：
1、制备细胞悬液时应根据实验需要，不一定要制备成单细胞悬液。
2、后续试验如果是用于细胞培养，操作过程中应注意无菌操作，尽量在超净工作台内操作。
3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
4、常规步骤与快速步骤的区别在于：常规步骤多了一步洗涤过程的离心，可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好，不需要大体积的离心管；快速步骤少了一次离心过程，洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。
5、离心洗涤后，通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6、如果经过ACK Lysis Buffer处理后的样品后续用于总RNA的提取，在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液，即无需在该操作中特意去除RNase。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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