盐爪爪液泡膜H^+-ATPase B亚基基因克隆及盐胁迫液泡膜相关基因的表达

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木榄Na +／H +逆向转运蛋白基因的克隆

一
个花盆中，种约２粒胚轴，０盆中加入含有３ＮＣ的自来水，％ａ１自然光照状态下培养，每天分别用蒸馏水
收稿日期ｉ０９— ２—１０１２４
作者简介：郭庆水（９３一）男，１８，山东沾化人，海南大学农学院２００７级在渎硕士研究生通信作者：徐立新，，男副研究员，博士，．ａｌｘｌｉｎ１３ｅｍＥｍｉｕｉｎ＠６．ｏ：ｘ
表明它与蓖麻、胡杨、葡萄、百脉根等植物的液泡膜型ＮＨａ／逆向转运蛋白序列具有很高的同源性（０以８％
上）表明该序列确属ＮＨ，ａ／逆转运蛋白家族的基因，在细胞中起到Ｎ区隔化作用。ａ关键词：木榄；ｇＨＩＮＨＢＮＸ；ａ／逆转运蛋白；同源；跨膜
不知究竟应导人那些基因，入单个关键基因，一定程度上提高作物的耐盐能力是比较可行的方法。导在木榄作为一种盐生植物，在淡土中也可以正常生长，榄没有盐腺，根部的拒盐作用使木质部中的盐分木但下降¨ 可拒出９ “ ，９％的盐分，说明木榄ＮＨ这ａ／反向运输蛋白有很强的活性，研究植物耐盐机理是的较好材料。研究木榄的ＮＨａ／反向运输蛋白基因，以为耐盐作物的培育提供可能更有效的基因，可有
希望对耐盐基因的表达进行有效调控，助于对耐盐机理进行更深入的研究。有

盐生植物盐爪爪液泡膜钠氢反向运输载体基因(KfNHX1)遗传转化拟南芥的耐盐性鉴定

新疆农业科学 2621,55(3) ：522 -072Xinjiang Ag/chlturai Sciexcasdo):32.0443/j. Wo. 141 -4332. 0261.23: 424盐生膜体基因（KPHX 2 ）遗传转化拟南芥的耐盐性鉴定,5 ，曾（新疆大学生命科学与技术学；/新疆生物资源基因工（1!实验#，鸟鲁木齐734640）摘要：【目的】研究盐爪爪液泡膜N 示/H +反向运输载体KPHX 1 （AY725254-基因的耐盐功能，为耐盐育种提供候选基因。

【方法】泾用农杆菌介导花序浸染的方法，将KHX1转入拟南芥中，结合基因组PCR 和 RT- PCR 方法鉴定符合3： 1分离比的转基因株系；利用在盐胁迫下的萌发率、根长和表型分析，结合原子吸收分光光度计法测定叶片的N 示、K +含量，推断其耐盐性。

【结果】对抗生素筛选符合3：1的转基因纯合株系进行基因组PCR 和RT- PCR 分析，证实KNHX 1基因在拟南芥基因组中整合和表达。

盐胁迫下转基因株系的拟南芥种子的萌发率和根长明显高于野生型。

202 mM NaCi 胁迫处理15 d 的拟南芥成苗，相较野生型叶片萎黄和死亡,转基因植株的生长表型较好，且积累了较高的Na +和K +。

外源ABA 的处理下，转基因植株的发芽率和生长表型也好于野生型o 【结论】盐爪爪（Kdddm foPatum ）是一种藜科（Che 重/（菌示中写盐生灌木，对盐的耐受性很强。

液泡膜N a + /H +反向运输体（NHX ）是在离子稳态中起重要作用的膜蛋白，通过调节胞间离子的跨膜转运来维持细胞内离子和pH 平衡。

盐生植物盐爪爪KfJHX1能够提高转基因拟南芥的耐盐性，具有提高植物耐盐性的潜力。

关键词盐生植物;盐爪爪;KNHX 1 ；耐盐性；拟南芥;遗传转化中图分类号：S137 文献标识码:A 文章编号：141 -4334（2421）43 -4565 -084引言【研究意义】盐胁迫是影响作物产量的主要一。

植物中液泡膜H~+-PPase的研究进展

与野生型拟南芥一起培养在干旱和盐胁迫条件下，转ＫｆＶＰ／
拟南芥不仅比野生型拟南芥生长的更好，叶子中Ｎａ＋含量也
植物体中存在Ｉ型（ＡＶＰ１类）和 Ⅱ型（ＡＶＰ２类）２种类
பைடு நூலகம்
Ｈ￣－ＰＰａｓｅ含量的升高会使Ｈ＋跨液泡膜电化学梯度升高，这有利于增强螯合离子和糖进入液泡。同样的，如果将ＡＩ，
型的Ｈ￣－ＰＰａｓｅ，其中Ｉ型Ｈ￣－ＰＰａｓｅ定位在液泡膜上，而Ⅱ
类与膜结合的不可溶酶类，广泛存在于植物和少数藻类、
原生动物、细菌以及原始细菌中［２１。在高等植物中，液泡膜Ｈ￣－ＰＰａｓｅ结构相似并且以二聚体形式存在【３】。早在２０世纪８０年代初期，Ｃｈｕｉｃｈｉｌｌ和Ｓｚｅ就利用燕麦根制备的膜微囊制剂检测到了ＰＰａｓｅ的活性与质子跨液泡膜转运的关系，发现了ＰＰｉ的水解驱动质子跨膜转运。现在人们普遍认为
型Ｈ＋一ＰＰａｓｅ定位在高尔基体膜上Ｉ ” 。笔者将定位于植物液泡膜上的Ｈ一ＰＰａｓｅ称为液泡膜Ｈ转运无机焦磷酸酶（Ｈ一ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，Ｈ＋ＰＰａｓｅ，ＥＣ３．６．１．１）。液泡膜Ｈ一ＰＰａｓｅ是

盐生植物盐爪爪种子营养成分评价

盐生植物盐爪爪种子营养成分评价赵鹏;徐先英;刘虎俊;詹科杰;袁宏波;王理德;郭春秀;刘光武【期刊名称】《草业科学》【年(卷),期】2022(39)7【摘要】为更好地发掘和利用治理土壤盐渍化的优良盐生植物盐爪爪(Kalidium foliatum),采用离子交换色谱仪法、火焰原子吸收光谱法等测定方法,分析评价了盐爪爪种子营养物质组成及食用价值。

结果表明,盐爪爪种子主要营养物质含量分别为蛋白质204 g·kg^(-1)、脂肪54 g·kg^(-1)、粗纤维45 g·kg^(-1)、碳水化合物379 g·kg^(-1)。

含18种氨基酸,氨基酸总含量为205.8 g·kg^(-1),其中必需氨基酸占氨基酸总量的26.82%,赖氨酸含量最高为11.3 g·kg^(-1),必需氨基酸指数为120.40,蛋白质营养价值较高。

微量元素含量分别为铁332 mg·kg^(-1),锌44.1 mg·kg^(-1),钙1590 mg·kg^(-1)。

脂肪酸主要成分为亚油酸、油酸和亚麻酸,人体必需脂肪酸为73.91%。

综上所述,盐爪爪种子有益营养成分种类丰富,可作为高蛋白、高粗纤维、富铁功能型食品加工的理想原料。

【总页数】6页(P1399-1404)【作者】赵鹏;徐先英;刘虎俊;詹科杰;袁宏波;王理德;郭春秀;刘光武【作者单位】甘肃省荒漠化与风沙灾害防治国家重点实验室/甘肃省治沙研究所;甘肃民勤荒漠草地生态系统国家野外科学观测研究站/甘肃省治沙研究所;兰州大学西部生态安全省部共建协同创新中心【正文语种】中文【中图分类】TS2【相关文献】1.盐生植物盐爪爪的耐盐生理特性探讨2.盐生植物盐爪爪甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆及在盐胁迫下的BADH基因的表达3.盐生植物盐爪爪的资源特点及研究进展4.盐生植物盐爪爪液泡膜钠氢反向运输载体基因(KfNHX1)遗传转化拟南芥的耐盐性鉴定5.盐分和水分胁迫对两种盐生植物盐爪爪和盐穗木种子萌发的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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ａｎｄＫｆＮＨＸｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙｑＲＴ— ＰＣＲ．【Ｒｅｓｕｌｔ】Ｔｈｅｆｕｌｌ — ｌｅｎｇｈｔｃＤＮＡｏｆｔｈｅＶ— Ｈ一ＡＴＰａｓｅＢ（ＶＨＡ
ＶａｃｕｏｌａｒＲｅｌａｔｅｄＧｅｎｅｓｕｎｄｅｒＳａｌｔＳｔｒｅｓｓ
ＹＩＸｉａｏ—ｙａ，ＹＡＮＧＲｕｉ —ｒｕｉ，ＺＥＮＧＹｏｕ—ｌｉｎｇ
（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｆｉｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉ￣ｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ／ＸｉｎｊｉａｎｇＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＲｅ —
ＣｌｏｎｉｎｇｏｆａＶａｃｕｏｌａｒＨ一ＡＴＰａｓｅＢＧｅｎｅｆｒｏｍｔｈｅＨａｌｏｐｈｙｔｅ
ＺｕｍｆｏｌｉａｔｕｍａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆ
新疆农业科学
２０１５，５２（５）：９０２— ９０７
ＸｉｎｊｉａｎｇＡｇｉｒｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ
ｄｏｉ：１０．６０４８／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１— ４３３０．２０１５．０５．０１９
一Ｂ、Ｎａ／Ｈ逆向转运蛋白基因
关基因的表达分析。【方法】采用ＲＴ—ＰＣＲ和ＲＡＣＥ技术克隆盐爪爪Ｖ—Ｈ一ＡＴＰａｓｅＢ亚基基因（ＶＨＡ—
Ｂ），利用实时荧光定量ＰＣＲ（ｑＲＴ—ＰＣＲ）技术分析液泡膜相关基因
ＫｊＷＨＸ的表达情况。【结果】ＫｆＶＨＡ一全长１８８１ｂｐ，含１４６７ｂｐ的ＯＲＦ阅读框，命名为ｔｑＶｎＡ—Ｂ（ＧｅｎＢａｎｋ
登录号：ＥＦ１１４３１６），编码４８８个氨基酸，推测的蛋白分子量大小为５４．０１ｋＤ，理论等电点为４．６８，含一个保
ｓｏｕｒｃｅｓａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｕｒｕｍｑｉ８３００４６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】ＴｏｃｌｏｎｅｔｈｅＶ— Ｈ一ＡＴＰａｓｅＢ（ＶＨＡ— Ｂ）ｆｒｏｍＫａｌｉｄｉｕｍｆｏｌｉａｔｕｍａｎｄｃａｒｒｙｏｕｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓ．【Ｍｅｔｈｏｄ】Ｔｈｅｆｕｌｌ — ｌｅｎｇｔｈｅＤＮＡｏｆｔｈｅＶ— Ｈ’ 一ＡＴＰａｓｅＢ（ＶＨＡ— Ｂ）ｆｒｉａｔｕｍｗａｓｃｌｏｎｅｄｂｙＲＴ — ＰＣＲａｎｄＲＡＣＥ，ａｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｏｆｖａｃｕｏｌａｒｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｖＨＡ —Ｂ
盐爪爪液泡膜Ｈ＋一ＡＴＰａｓｅＢ亚基基因克隆及盐胁迫液泡膜相关基因的表达
易小娅，杨瑞瑞，曾幼玲
（新疆大学生命科学与技术学６／新疆生物资源基因工程重点实验室，乌鲁木齐８３００４６）
摘
要：【目的】研究藜科盐生植物盐爪爪（Ｋａｌｉｄｉｕｍｆｏｌｉａｔｕｍ）Ｖ— Ｈ一ＡＴＰ￣ｅＢ亚基基因的克隆与液泡膜相
守的ＡＴＰ结合位点 ‘ ３２３一ＳＧＳＩＴ一３２７ ’和两个推测的多聚腺苷酸化的信号保守序列；基因编码蛋白的系统
进化树分析表明，盐爪爪ＶＨＡ—Ｂ与盐穗木的ＶＨＡ—Ｂ聚类关系最近；ｑＲＴ—ＰＣＲ检测了液泡膜相关基因ＫｆＶＨＡ— Ｂ、Ｎａ／Ｈ逆向转运蛋白基因ＫｆＮＨＸ的表达，１００、５００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣ１处理下，ｒＣＶＨＡ一在转录水平表达量始终保持较稳定，ＫｆＮＨＸ基因在转录水平随盐浓度的增加其表达量呈现递增趋势，而且１００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣ１
处理下７２ｈ时其表达量达到最大。【结论】＾
— Ｂ可能在盐爪爪应对盐胁迫中起着重要的作用。
关键词：盐爪爪；液泡膜Ｈ一ＡＴＰａｓｅＢ亚基；盐胁迫；克隆；表达分析
中图分类号：Ｓ１８８２文献标识码：Ａ文章编号：１００１— ４３３０（２０ｌ５）０５— ０９０２— ０６