改良Masson三色染色液
改良Masson 三色染色液使用说明书
改良Masson三色染色液使用说明书货号：G1345规格：8×50ml/8×100ml有效期：室温保存，12个月有效产品简介：结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维（collagen fiber）是分布最广、含量最多的一种纤维。
Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
改良Masson三色染色与常规Masson三色染色的区别在于采用天青石蓝苏木素淡染细胞核。
其特点在于：分化时间短(1～2分钟)；色彩清晰鲜艳；适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；所染切片保存时间长且不易褪色。
改良Masson染色胶原纤维呈蓝色，肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色，细胞核呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
产品组成：名称规格8×50ml8×100ml Storage试剂(A):Bouin液50ml100ml RT试剂(B):天青石蓝染色液50ml100ml4℃避光试剂(C):Mayer苏木素染色液50ml100ml4℃避光试剂(D):酸性乙醇分化液50ml100ml RT试剂(E):丽春红品红染色液50ml100ml RT避光试剂(F):磷钼酸溶液50ml100ml RT避光试剂(G):苯胺蓝染色液50ml100ml RT避光试剂(H):弱酸溶液50ml100ml RT使用说明书1份自备材料：10%的福尔马林、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸操作步骤（仅供参考）：1、组织固定于10%的福尔马林中，常规脱水包埋。
Masson三色染色试剂盒说明书
Masson三色染色试剂盒说明书Masson 三色染色试剂盒说明书（南京森贝伽生物科技有限公司）【产品介绍】Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。
分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
淡绿分子量最大。
因此Masson 染色肌纤维红色，胶原纤维绿色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【用途】主要用于胶原纤维染色。
【产品特点】①染色稳定；②分化时间短，1～2 分钟；③色彩清晰鲜艳；④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
固定：甲醛升汞或甲醛盐溶液。
切片：所有类型。
【产品组成】编号名SBJ0126（7×50ml）SBJ0126（7×100ml）SBJ0126（7×500ml）Storage试剂（A）A1：苏木素染色液25ml 100ml 500ml RTA2：三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合，成为试剂（A），不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁会化合，形成不容性沉淀，等量混合后，一般24h 后失去染色力。
试剂（B）: 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂（C）: 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（D）: 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂（E）: 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（F）: 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（G）: 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】1、切片脱蜡至水。
2、试剂（A）染色5min～10min。
3、试剂（B）分化、水洗，试剂（C）返蓝、水洗。
Masson三色染色
Masso n三色染色：主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。
Mass on染色是最为常用的结
缔组织染色法，此法多用于观察病变组织中纤维结缔组织的增生和分布，纤维性肿瘤与肌源性肿瘤的鉴别。
对酒精性肝硬化/坏死后性肝硬化及各型肝炎导致的小叶汇管区纤维组织增
生程度的差别具有重要价值。
Masso n染色在肾穿刺活检中可以用于判别在肾小球毛细血管网的系膜氏和上皮下是否存
在嗜复红蛋白的沉积，对于肾脏疾病的病理诊断有重要意义。
天狼星红染色(Sirius red ):由于胶原呈碱性，与酸性染料起强烈反应。
天狼星红就是一种很强的酸性染料，它可以和胶原纤维反应使胶原纤维产生明显的双折光现象。
天狼星红染色胶原纤维呈红色，胞核呈绿色，余呈黄色。
偏光显微镜可以分辨不同的纤维类型，
HE染色：又称苏木素-伊红染色法，其中苏木素是Hematoxylin，简称H，伊红是Eosin，
简称E，这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。
这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色，
油红0脂肪染色法：显示组织内的脂肪，油红0为脂溶性染料，在脂肪内能高度溶解，可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色，。
Masson三色染色液G1006
Masson 三色染色液30ml+20ml*5RT产品简介：由Mallory 三色染色改造，利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色，与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色，便可把不同组织成分显示出来。
包装内容：产品货号产品名称规格G1006-1重铬酸钾媒染剂30ml G1006-2Weigert 铁苏木素A 液20ml G1006-3Weigert 铁苏木素B 液20ml G1006-4丽春红酸性品红染液20ml G1006-5磷钼酸溶液20ml G1006-6苯胺蓝染液20ml保存条件：室温保存，有效期1年。
操作说明：1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min ，自来水洗。
2、重铬酸钾染色：切片入重铬酸钾浸泡过夜，自来水洗。
3、铁苏木素染色：铁苏木素A 液与B 液等比混合成铁苏木素染液，切片入铁苏木素3min ，自来水洗，盐酸酒精溶液分化，自来水冲洗。
4、丽春红酸性品红染色：切片入丽春红酸性品红浸染5-10min ，自来水漂洗。
5、磷钼酸染色：磷钼酸水溶液浸染1-3min 。
6、苯胺蓝染色：磷钼酸之后不用水洗，直接入苯胺蓝染液染3-6min 。
7、分化：切片用1%冰醋酸分化，两缸无水乙醇脱水。
8、透明封片：切片放入第三缸无水乙醇5min ，二甲苯5min 透明，中性树胶封片。
9、显微镜镜检，图像采集分析。
染色结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色。
弹力纤维呈棕色。
肌纤维、纤维素和红细胞染红色。
细胞核染蓝黑色。
G 1006注意事项：1、Weigert铁苏木素分A、B两液，临用前将两液等比例混合使用。
不宜预先混合，否则容易氧化沉淀而失去染色力。
2、重铬酸钾染完后水洗要稍快，切片洗干净即可。
3、根据切片的数量对铁苏木素染液进行更换，也可以现配现用；4、丽春红的染色程度要控制好，胶原部分不能是红色或者太红，会影响后续苯胺蓝的着色；5、冰醋酸分化苯胺蓝的过程中，若是分化过度，胶原蓝色太浅，若分化不足，易与丽春红的颜色叠加呈紫蓝色。
masson染色步骤(临床医学研究中心总结)
试剂名：改良 Masson 三色染色液货号：G1345 品牌：索莱宝1、石蜡切片65℃烘烤1h（使组织更贴合玻片，并溶解石蜡。
如果是刚切好的切片，则烘烤2-3h），立即放入脱蜡剂中脱蜡；2、脱蜡：脱蜡剂Ⅰ（15min）、脱蜡剂Ⅱ（15min）水化：无水乙醇I（5min）、无水乙醇 II（5min）、95%乙醇I（5min）、95%乙醇II （5min）、85%乙醇（5min）、75%乙醇（5min）脱蜡处理，蒸馏水3min3、将 Bouin 液滴在组织上，于室温作用一晚或置入 37℃的温箱内 2h 进行媒染，然后流水冲洗至切片组织上的黄色消失。
4、天青石蓝染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。
5、Mayer 苏木素染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。
（显微镜下观察，细胞核呈现深蓝色，细胞质有蓝色）6、酸性乙醇分化液分化3-5s，流水冲洗 10min返蓝。
（细胞核呈现灰蓝色，细胞质应相对透明无色）7、丽春红品红染色液染 2-5min，稍水洗玻片上无染料即可。
（容易造成深红或紫红色，基本看不清细胞核。
建议先染色30s-1min，显微镜下观察，适当增加时间）8、磷钼酸溶液浸泡10min，倾去上液，切片不用水洗，直接滴入苯胺蓝染色液染 5-10min。
（如果丽春红染色过深，苯胺蓝也应该适当染久一些，最终应该是红蓝色分明，能明显分辨出胶原显微）9、弱酸溶液处理 2min。
10、透明：切片直接依次放入无水乙醇 I（5min）-无水乙醇 II（5min）- 脱蜡剂Ⅰ（5min）- 脱蜡剂Ⅱ（5min）。
然后用纸巾擦干玻片上残余脱蜡剂，或直接铺平玻片在通风橱内，干燥脱蜡剂。
使用中性树脂封片。
注：masson染色不像HE可以把颜色洗脱再重复步骤，建议使用同一批切片，先摸索染色时间。
Masson三色法
Masson三色法（根据Masson,1929）一、试剂配制（一）Weigert氏铁苏木素液（可用Herris苏木素代替）甲液：苏木素1g无水酒精（或95％酒精）100ml乙液：29％三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml （30%三氯化铁溶液则为100ml）盐酸1ml临用时，取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内，染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用，因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀，所以铁作媒染液时，必须与染液分别配制和分别保存，染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素，它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用，且不会被光线退色，因此比钾矾苏木素染色较为持久。
（二）丽春红酸性品红液丽春红（Ponceau 2R）0.7g酸性品红（acid fuchsin）0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml（三）1%磷钼酸水溶液磷钼酸（phosphomolybdic acid）1g蒸馏水加至100ml（四）2%苯胺蓝液苯胺蓝（aniline blue）2g冰醋酸（glacial acetic acid ）2ml蒸馏水加至100ml（五）亮绿液亮绿（light green）1g蒸馏水99ml冰醋酸（glacial acetic acid ）1ml（六）Bouin氏液苦味酸饱和液（1.22％）75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制，对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1．组织固定于Bouin氏液，流水冲洗一晚，常规脱水包埋。
2．切片脱蜡至水：（1）二甲苯中脱蜡10分钟×3次，用吸水纸吸干液体；（2）100%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；（3）95%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；；（4）流水2分钟，用吸水纸吸干水分；3．Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
马松三色染色原理masson
标签： 杂谈 分类： 实验日志
转载
masson 染色原理
Masson三色法 （根据Masson,1929） 试剂配制 （一） Weigert氏铁苏木素液（见苦味酸——酸性品红法） （二） 丽春红酸性品红液 丽春红（Ponceau 2R） 0.7g 酸性品红（acid fuchsin） 0.3g 蒸馏水 99ml 冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml （三） 1%磷钼酸水溶液 磷钼酸（phosphomolybdic acid） 1g 蒸馏水加至 100ml （四） 2%苯胺蓝液 苯胺蓝（aniline blue） 2g 冰醋酸（glacial acetic acid ） 2ml 蒸馏水加至 100ml （五） 亮绿液 亮绿（light green） 1g 蒸馏水 99ml 冰醋酸（glacial acetic acid ） 1ml 操作方法 1． 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液，流水冲洗一晚，常规脱水包埋。 2． 切片脱蜡至水。 如用Zenker氏液固定者，应进行除汞处理，其步骤如下： （1） 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。 （2） 稍水洗 （3） 5%硫代硫酸钠作用5分钟。 （4） 流水冲洗10分钟 3． Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。 4． 流水稍洗。 5． 1%盐酸酒精分化。 6． 流水冲洗数分钟。 7． 丽春红酸性品红液染5-10分钟。 8． 蒸馏水稍冲洗。 9． 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。 10．不用水洗，直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。 11．1%冰醋酸处理1分钟。 12．95%酒精脱水多次。 13．无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固 结果： 胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染)或绿色(用亮绿复染)。胞质、肌纤维和红细胞红色。胞核蓝褐 色。 注意事项: 1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入 Bouin氏液作用一晚或置37。C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。 2.铁苏木素染核(见苦味酸一酸性品红法)。 3.如没有丽春红染料,可把酸性品红加至1克来配制。 4.用1%磷钼酸处理时可在镜下控制.见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。 染色原理: 上面介绍的胶原纤维染色如苦味酸-酸性品红法和三色染色法,都是利用两种或三种阴离子染料混合 一起或先后作用而完成鉴别染色的。Van Gieson氏染色中,为什么胶原纤维呈红色(被酸性品红所 染),肌纤维呈黄色(被苦味酸所染).而Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所 染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。 组织的渗透性(Permeability),取决于组织的结构密度。如果细致地观察,会发现组织和细胞成分都
masson三色染色 原理
masson三色染色原理马森三色染色的原理马森三色染色是一种组织学染色技术，用于区分神经组织的不同成分。
它基于通过磷钨酸-血红素溶液和靛胭脂溶液的顺序染色，这赋予神经元不同的颜色。
磷钨酸-血红素溶液的染色原理磷钨酸-血红素溶液是一种呈酸性的溶液，含有磷钨酸和血红素。
磷钨酸是一种多价阴离子，对组织中的碱性成分，如细胞核和细胞质，具有亲和力。
血红素是一种铁卟啉分子，与氧气结合形成稳定的络合物。
当磷钨酸-血红素溶液应用于组织时，磷钨酸会与细胞核和细胞质中的碱性成分结合，形成不溶性沉淀。
血红素与氧气结合，形成棕红色的血红素氧络合物，沉积于这些碱性成分上。
因此，细胞核和细胞质被染成深棕色。
靛胭脂溶液的染色原理靛胭脂是一种阳离子染料，对组织中的酸性成分，如细胞外基质和神经胶质纤维，具有亲和力。
当靛胭脂溶液应用于组织时，它会与这些酸性成分结合，形成不溶性蓝紫色沉淀。
神经胶质纤维是神经胶质细胞产生的长而细的纤维，它们包裹着神经元并提供支持。
通过与靛胭脂结合，这些纤维被染成蓝色。
神经元的染色神经元的细胞体主要由细胞核和细胞质组成，它们富含碱性成分。
因此，它们在磷钨酸-血红素溶液中被染成深棕色。
神经元的轴突和树突是神经元的细胞突起，它们由神经胶质细胞包裹。
神经胶质细胞产生的神经胶质纤维含有酸性成分，因此它们在靛胭脂溶液中被染成蓝色。
通过磷钨酸-血红素溶液和靛胭脂溶液的顺序染色，马森三色染色可以区分神经元的不同成分：细胞核和细胞质呈深棕色，神经胶质纤维呈蓝色。
这种差异允许在显微镜下对神经组织进行详细的观察和分析。
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改良Masson三色染色液
简介：
Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
改良Masson三色染色与常规Masson三色染色的区别在于采用天青石蓝苏木素淡染细胞核。
胶原纤维呈蓝色，肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色，胞核呈蓝褐色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
自备材料：
1.10% 福尔马林固定液
2.蒸馏水
3.系列乙醇
操作步骤(仅供参考)：
1、组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。
切片厚4μm，常规脱蜡至水。
2、切片入Bouin液，室温作用一晚或置入37℃温箱内进行媒染，然后流水冲洗至切片上的黄色消失。
3、天青石蓝染色液滴染2~3min，稍水洗。
4、 Mayer苏木素染色液滴染2~3min，稍水洗。
5、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗10min。
6、丽春红品红染色液滴染10min，蒸馏水稍冲洗。
7、磷钼酸溶液处理约10min。
8、倾去上液，切片不用水洗，直接滴入苯胺蓝染色液染5min。
9、弱酸溶液处理2min。
10、95%的乙醇快速脱水。
无水乙醇脱水3次，每次5~10s。
11、二甲苯透明3次，每次1~2min，中性树胶封固。
染色结果：
胶原纤维蓝色
肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞红色
细胞胞核蓝褐色
注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净。
酸性乙醇的分化时间应根据切片薄厚，组织的类别和新旧而定。
2、磷钼酸的作用一方面是使染上红色的胶原纤维被分化成无色或淡红色
3、苯胺蓝液染色后用弱酸溶液处理，目的是除去原浆内的蓝色，使染色鲜艳和清晰。
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