15个常染色体和18个Y染色体STR基因座r复合扩增检测体系及法医学应用
多位点复合扩增STR技术在亲子鉴定和个体识别中的应用
多位点复合扩增STR技术在亲子鉴定和个体识别中的应用发布时间：2022-12-13T05:21:45.927Z 来源：《中国医学人文》2022年24期作者：徐丹丹[导读] 随着医疗技术水平的不断提升，近几年在我国医学上的亲子鉴定以及个体识别的技术也在不断提升，徐丹丹重庆市华兴司法鉴定所400000摘要：随着医疗技术水平的不断提升，近几年在我国医学上的亲子鉴定以及个体识别的技术也在不断提升，将亲子鉴定的准确度得到了提升。
本文在研究中选取了2个亲子鉴定和个体识别的案例，对案例中的CSF1P0、TPOX、TH01、VWA等10个基因位点的检测结果进行分析，最终得出案例1父子的遗传标记符合遗传规律，可以鉴定为亲子关系，而在案例2亲子鉴定和个体识别中，父子的遗传标记不符合遗传规律，不能鉴定为亲子关系。
由此来看，采用多位点复合扩增STR技术能够准确的获取基因位点的结果，更好的为亲子鉴定和个体识别带来参考，进一步将亲子鉴定的效率、可靠性以及准确性得到了提升，在医学鉴定上能够得到推广应用。
关键词：多位点复合扩增；STR技术；亲子鉴定；个体识别一、引言随着医疗技术水平的不断提升，我国医学上针对亲子鉴定以及个体识别的技术也越来越先进，传统的医学鉴定有DNA指纹技术，在现代分子生物学技术理论和克隆技术理论的支持下，人们也能研发出了更加高效、可靠的医学鉴定技术，更好的为法医学鉴定的稳定性带来了帮助。
多位点复合扩增STR技术在目前医学的鉴定中就得到了广泛的应用，在实际的应用中，针对亲子鉴定和个体识别的准确率能够达到99%，是当前一项十分重要的人类遗传认定系统，在医学鉴定中具有较高的应用价值[1]。
因此，本文也将结合具体的案例，通过多个基因位点的检测结果，来判断亲子鉴定率和个体识别率，现将研究的报告如下。
二、多位点复合扩增STR技术的优势相比于传统的DNA鉴定技术，多位点复合扩增STR技术在鉴定的过程、方法、结果等方面都具有更高的优势，也能够更好的为医学鉴定的可靠性和准确性带来保障。
-ABO血型异常遗传的肯定亲子案例分析
-----------------------------------Docin Choose -----------------------------------豆 丁 推 荐↓精 品 文 档The Best Literature----------------------------------The Best LiteratureABO 血型异常遗传的肯定亲子案例分析汤美云盛小奇黄健瞿志雄（湖南省第二人民医院芙蓉司法鉴定中心湖南长沙410007）摘要目的：对ABO 血型遗传异常而DNA 多态性检测又肯定亲生血缘关系案例进行分析，探究特殊案例的原因，与同行共享。
方法：收集近几年芙蓉司法鉴定中心违反ABO 血型遗传规律的三个案例，通过PCR 复合扩增和ABI3130遗传分析仪对3个亲子鉴定案例8份血样本进行检测。
双亲进行了15个常染色体STR 基因位点，单亲进行了22个常染色体STR 基因位点分析。
结果：三个案例均极强力支持父母（父亲）与孩子之间存在亲生血缘关系。
结论：凭违反ABO 血型遗传规律排除亲生血缘关系显然是不行的，必须以DNA 多态性检测为判断标准。
关键词：ABO 血型；亲子关系；CisAB 型；STR 基因座中图分类号：Q75，R394.3文献标识码：A 文章编号：1673-6273（2009）15-2866-03Analysis of Parent-offspring Relationship of Abnormal ABO BloodGroup HeredityTANG Mei-yun,SHENG Xiao-qi,HUANG Jian,QU Zhi-Xiong（Judicial Testimony Center of Hunan.Furong,Changsha 41007,Hunan,China ）ABATRACT Objective:To analyze case of positive parent-offspring relationship of abnormal ABO blood group heredity,and discuss the reasons of special cases.Methods:Three cases were collected of Abnormal ABO Blood Group Heredity in our department in recent years.Three cases were experimented by using multiplexing PCR and 3130Genetic Analyzer,and 15STRs of parentage testing case,22STRs of motherless parentage testing case were tested.Results:There exist parent-offspring relationship between parents (or father)and children of three cases.Conclusion:It is not correct to exclude parent-offspring relationship according to abnormal ABO blood group heredity.Key words:ABO blood group;Parent-offspring relationship;CisAB blood group;STR genome Chinese Library Classification:Q75,R394.3Document code:A Article ID:1673-6273（2009）15-2866-03作者简介：汤美云（1974-），女，法医学硕士，主治医师，从事法医物证鉴定电话：*************,E-mail:************************.cn （收稿日期：2009-05-12接受日期：2009-06-06）人们对亲生血缘关系探求的欲望自古已有，“滴血认亲”从三国时开始应用，到近代西方医学的传入，一直被奉为圭臬，无人质疑。
17个Y-STR位点复合扩增检测在半同胞关系鉴定中的应用
Ｇ ｎＳａ ３ｖ ｅ ｅ ｃｎ ６ ｂ
＿
Ｐ Ｐ ｅ ｕ 。用收集软件（ ｏ ｅｔｎ记录 Ｏ４ ｆｌ Ｄ ａｔ Ｃ ｌ ｃｏ ） ｌｉ
电泳信息 ， 然后分别用基因扫描软件（ ｅ ｅｃｎ ． １分 Ｃ ｎＳａ ７ ） ３． 析 Ｄ Ａ片段长度， Ｎ 用基因型分析软件（－ ｏ ｐ ｒ ７确定 Ｃ ｎｌ ｅ３ ） ｅ ｙ ． 各位点基因型。
ａ ａｇ ａ ２ ０ ６ ． ｈｎ ） ｈｎ ｌｉ ０ ０ ３ Ｃ ｉ ｌ ａ
［ｂ ｔ ｔＧｎ ：ｉ －Ｔ ｏｉ 如 积 咖 ０州 ｒｅｉ Ａ ｓｍｏｌ ｅｍｒｎ ｏ ｙ ＳＲｌ ｐｇｆ ｃＰ ｏ ｎ ｌ ｔ ｈ ｅ ｏ ｅｓ ｅ６ｔａｏ ａｉｙｆ ｏｍ￣ｃｌＹ— ｆ如ｒｎｉ ｉ ｎ ｒ，ｉ￣Ａ ｖｒｔ ｃｔ ｅ ｌ ｃｄ ｃ ， ｅ ｌ ｒａ
ＳＩ ｋ ｔ 珊 ｅ ｂ ｅ ｘ ｌ ｉ ＆ Ｒｅ ｅ ｔ ，Ⅱｎ Ｙ一 ｇ ｎＪ ｐ－ Ｒ ｉ ｓ＾ ｅ ｎ ｅ ｐ ｏｔ ｅ ｃｎｔ ｙ ｏ 耵 ｅｘｙ ｔ
ｒ ｉ ｎ ｍｅ ｔａ ｄ ｋ
ｌ ｉｎ ｏ ｄ ｃａ
ｌ ｉ ｍ ｅｃ －ｍ ｌ￣ ｎ“ｓ ｔｂ ．Ｔｅｋｔ ａ ｂ ｏ ａ ｐｉ ｄｉ ｅｃ ｆ ｆ ， ｕ ｅ ｈ ｉ
ｖ ｌ ｔ ｎ＂∞ ｓ ￣＆ｄｔ ｒ ｕ ｈ口ｐｒ ｃｋａ ∞ｅ ａｉ ｉ ’ ｔ ｄａ ｏ ｈｏｇ ａ ｔ．ｌｃ ．
Ｙ４ Ｔ Ｒ ＧＭ ｏｙ Ｉｇ Ｉ ｏ ｅ ｓ ｃ ｌｏ ｔ ｎ Ｕ ｉｇ Ｂ Ｉｐｎ ｎ Ｆ ｒｎ ｉ Ｉ ｍｔ ￣ ｌ ｓｎ ｃｄ ｆ ｏ ｌ
１ 一ｏ ｌ ｌｐｅ ＣＲ Ａ ７ ｃ ｔ ｌｘ Байду номын сангаас ｍ ｙ Ｍｕ ｉ
9个Y-STR基因座荧光复合扩增系统的法医学应用
9个Y-STR基因座荧光复合扩增系统的法医学应用石美森;李英碧;邓建强;冀强;于晓军;侯一平【期刊名称】《法医学杂志》【年(卷),期】2006(022)003【摘要】目的建立9个Y-STR基因座的复合扩增系统,提高Y-STR的法医学检测效能.方法6-FAM标记DYS434、Y-GATA-A10、DYS438、DYS439,HEX标记DYS531、DYS557、DYS448,TAMRA标记DYS456、DYS444引物,PCR复合扩增,毛细管电泳得到结果,考察扩增系统的个体识别能力、灵敏度、特异性、组织同一性.结果所建立的9个Y-STR复合扩增系统分型清晰,单倍型多样性达0.9968,特异性好,灵敏度高(0.5ng DNA),并且在男女混合斑检验上较常染色体STR分型更有优势.结论9个Y-STR复合扩增系统具有较高的识别能力,对建立Y染色体STR数据库,研究群体遗传学和进行法医学混合斑物证鉴定有重要意义.【总页数】4页(P204-206,209)【作者】石美森;李英碧;邓建强;冀强;于晓军;侯一平【作者单位】汕头大学医学院法医学教研室,广东,汕头,515031;四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室,四川,成都,610041;司法部司法鉴定科学技术研究所,上海,200063;南京医科大学法医学教研室,江苏,南京,210029;汕头大学医学院法医学教研室,广东,汕头,515031;四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室,四川,成都,610041【正文语种】中文【中图分类】DF795.2【相关文献】1.DYS19、DYS391、DYS439三个Y-STR荧光标记复合扩增的法医学应用研究[J], 朱传红;杨庆恩;王海生;申成斌;刘成昌2.DYS19、DYS391、DYS439三个Y-STR荧光标记复合扩增的法医学应用研究[J], 王海生;朱传红;杨庆恩;申成斌;刘成昌3.23个STR基因座荧光复合扩增体系的法医学应用评估 [J], 唐建新;李双琳;刘宏;翁玮霞;刘超;杜蔚安;黄杰4.Y染色体短串联重复序列基因座荧光复合扩增体系的法医学应用 [J], 黄艳梅;杨捷;董献红;王洁;陈林;武红艳;伍新尧5.十二个X染色体STR基因座荧光标记复合扩增体系的法医学应用 [J], 任峥;曾祥培;陈文静;吴晓洁;童大跃;李建金;孙宏钰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中国撒拉族常染色体STR基因座遗传多态性研究
中国撒拉族常染色体STR基因座遗传多态性研究本文利用常染色体的15个STR基因座，对西北特有少数民族撒拉族进行基因扫描，获得15个STR位点的A基因频率、杂合度、个体识别能力、非父排除率、累计非父排除率、耦合率和多态信息含量等遗传信息，显示15个STR位点具有中度或高度多态性，结论：所选择的15个STR位点具有中等或较高的个体识别力和多态性信息量，可用于群体遗传学和法医学研究。
标签：西北特有少数民族；STR基因座；遗传多态性撒拉族是三个位于中国西北部的特有少数民族，其语言属阿尔泰语系突厥语族西匈奴语支的乌古斯语组，主要聚居在今天甘青结合部的青海循化、化隆二县以及甘肃省积石山县大河家一带。
据2000年第五次全国人口普查资料，全国的撒拉族人口为104503人。
短串联重复序列（short tandem repeat，STR）属微卫星DNA序列，重复单位为2～7 bp。
STR基因座在人类基因组中含量丰富，分布广泛，据估计三核苷酸和四核苷酸重复序列的STR基因座约有20万个，平均每隔15～20 kb就有一个。
它不仅是绘制基因组物理图谱和遗传连锁分析的理想标记，也是群体遗传学和法医遗传学高信息基因座的丰富来源。
在法医同一认定、亲缘关系鉴定、人口遗传结构和疾病相关性研究等方面发挥重要作用[1]。
1资料与方法1.1一般资料撒拉族多名无关个体FTA血卡样本全部来自日常案检积累。
1.2方法采用美国AB公司AmpFSTR○R华夏TMPCR直接扩增试剂盒，在AB 9700型扩增仪上对15个STR基因座进行复合扩增。
PCR扩增体系为10？滋l，PCR产物经AB 3500XL毛细管电泳，用GeneMapper○RID-X 1.0.1版进行电泳数据分析。
应用PowerStats软件计算，得到15个STR基因座的基因频率、观察杂合度（Ho）、个体识别能力（DP）、非父排除率（PE）、耦合率（Pm）和多态信息含量（PIC）[2]。
十二个X染色体STR基因座荧光标记复合扩增体系的法医学应用
ｇｎｔ ｅ ｉ ｐ ｌ ｅｔｐｏ ｓ ． Ｒ ｓｌ】Ａｔ ａｏ ２２ ａ ｐ ｓ ｅ ｎｔ ｅ ｅｐｃｌ Ａ ｏｇｈｍ， ５ ｌｌ ｅ ｅｏ ｐｄ ｔ ｃ ｉ ｒ ｅ ｃｏｈｒ ｉ 【 ｅ ｔ ｔ ｍ ｌ ｒ ｇ ｏ ｐｄ ｘｌｉｙ ｍ ｎ ｅ １３ ｌｅ ｗ ｒ ｙ ｗ ｈ ａ ｌｙ ｌ ｒ ａ ｅｓ ｕｓ ｏ ｌ ｆ ７ ｓ ｅ ｗ ｅ ｅ ｙ ｉｔ． ｔ ａｅ ｓ ｅ
Ｊｎ ２ １ ａ． ０１
十二个 ｘ染色体 Ｓ Ｒ基 因座荧光标记复合扩增体系 Ｔ 的法医学应用
任 峥 曾祥培 陈文静 吴晓洁 童大跃 李建金 孙宏钰 ， ， ， ， ， ，
３司法 部司法鉴定科 学技术研究 所上海市法 医学重点实验 室 ， ． 上海 ２ ０ ６ ） ００ ３ （． １ 中山大学 中山医学院法 医学 系 ， 东 广州 ５ ０ ８ ；． 东省清远市公 安局 ， 广 １０ ０ ２ 广 广东 清 远 ５ １ １ ； １ ５５
Ａｍ ｐｉ ｃ ｔｏ ｙ ｔ ｍ ｌ ａ ｉｎ Ｓ ｓｅ ｉ ｆ
Ｒ Ｎ Ｚ ｅ ｇ， Ｅ ＧＸｉ ｇｐ ｉ Ｃ Ｎ Ｗｅ － ｎ ＷＵ Ｘ ａ－ ｅ， Ｏ Ｇ Ｄ －ｕ Ｌ ｉ －ｎ ， Ｕ ｏ ｇｙ Ｅ ｈ ｎ Ｚ Ｎ ａ —ｅ ， ＨＥ ｎｊ ｇ， ｉ ｊ Ｔ Ｎ ａｙ ｅ， Ｉ ａ ｊ Ｓ Ｎ Ｈ ｎ —ｕ， ｎ ｉ ｏｉ Ｊｎｉ
０９ ９９ ９９ ９ｉ ｆ ｌ （ Ｄ Ｆ ， ａｄｔｅｃｍ ｉｅ ａ ｘｌｓ ｎｃａ ｃ ａ ．９ ９ ３ ｕ ａｅ Ｃ Ｃ ｕ ）ａｄ ．９ ９ ９ ｍａ ｓ Ｃ Ｐ ） ｎ ｏ ｂｎ ｄｍｅｎｅｃｕｉ ｈｎ ｅｗ ｓ０９ ９９ ８３ ６ｉ ｄ ｏｃｓｓ（ ＭＥ ｄ ｏ ，ｎ ｎｅ ｅ ｈ ｏ ｎ
过五色荧光标记引物进行复合扩增， 采用毛细管电泳技术进行产物分离和基因分型， 统计相关法医学应用参数。【 结果 】７ ２２
20个常染色体STR基因座的突变分析
20个常染色体STR基因座的突变分析随着DNA分析技术的普及和发展，日益多的法医学案例开始运用STR DNA分析技术进行生物鉴定。
STR，即短串联重复序列，是人类基因组DNA中公认比较有效的遗传标记。
STR是由两个至九个碱基组成的简短的DNA序列，这些序列在每个基因座位置可以有不同数量的重复。
基于20个常染色体STR基因座的DNA分析技术，可实现在极短时间内对样品DNA进行鉴定。
因此，20个常染色体STR基因座的突变分析具有很高的意义。
本文将对20个常染色体STR基因座的突变分析进行研究和探讨。
一、突变类型和特点1. 育种突变：育种突变在基因座位点上的重复序列数量增加或减少，有以下三种类型：（1）增加重复序列或其倍数：如三联重复序列从三个到四个或六个等。
（3）重排重复序列：如将序列中的CAG改为AGC等。
2. 空穴突变：由于DNA测序过程中错误的读取或缺失，使得在某个位点上产生了“空穴”，即该位点长序列与短序列之间出现了差异，这种现象被称为“空穴突变”。
3. 插入/缩短突变：插入突变是指在重复序列中插入了1-3个碱基，而缩短突变则是在重复序列中删除了1-3个碱基，插入/缩短突变通常只影响单一重复序列的长度，而不影响所有重复序列长度。
4. 点突变：点突变是一种较为罕见的突变方式，它可能会发生在某些特定的基因座位点上，会导致碱基发生改变，从而影响序列长度。
5. 复合突变：当在同一碱基位置同时发生多种突变，被称为复合突变。
二、突变分析的意义对于追查罪案和建立亲子关系，使用20个常染色体STR基因座的突变分析技术能够快速、准确地分析样本DNA，从而为司法鉴定提供重要的分析依据。
突变分析技术可以识别和鉴定DNA样本中存在的核苷酸参考相关的变异，但在DNA样本较小的情况下，突变分析技术的结果将受到更大的噪声和误差的干扰，因此，需要进行多次试验，确保测试的准确。
在实际应用中，突变分析技术被广泛应用于DNA数据处理、亲子鉴定以及刑事案件调查等领域。
同步扩增常染色体和Y染色体STR SureID
同步扩增常染色体和Y染色体STR SureID®Compass试剂盒性能测试分析田芳;王旭;王顺霞;张庆霞;焦章平;路志勇【摘要】目的研究SureID?Compass试剂盒性能指标,建立适合其特点的测试方案.方法选择合适的DNA标准物质,从标准品灵敏度、混合样本、种属特异性、不同检材适应性、降解样本和含抑制剂样本的耐受性、不同仪器间一致性、峰值均衡性、反复冻融稳定性等8个方面对试剂盒进行测试.结果经检测,SureID?Compass 试剂盒灵敏度较高,对混合样本、酶切降解以及含抑制剂的样品具有一定的检验能力,种属特异性、适应性和峰值均衡性也均较好,所选择的DNA标准物质适用于该试剂盒测试.结论本测试方案适用于同步扩增常染色体和Y染色体STR试剂盒的性能指标测试.【期刊名称】《刑事技术》【年(卷),期】2019(044)002【总页数】5页(P175-179)【关键词】法医遗传学;SureID®Compass试剂盒;确证实验;阳性对照;标准物质【作者】田芳;王旭;王顺霞;张庆霞;焦章平;路志勇【作者单位】北京市石景山区公安司法鉴定中心,北京 100043;北京市公安司法鉴定中心,北京 100192;北京市公安司法鉴定中心,北京 100192;北京市公安司法鉴定中心,北京 100192;北京市公安司法鉴定中心,北京 100192;北京市公安司法鉴定中心,北京 100192【正文语种】中文【中图分类】DF795.2SureID®Compass试剂盒是一款六色荧光复合扩增试剂盒，该试剂盒整合了15个常染色体STR基因座、1个性染色体Amelogenin基因座、1个Y染色体插入缺失Y-indel以及16个Y染色体STR基因座，可以同步检测常染色体及Y染色体的STR分型，适合于混合斑（比如男女混合）样本的检验。
本文建立的实验方法参照常染色体STR试剂盒检测方案并做了改良，使之更适合于所测试剂盒的特点，且又同时符合国际公认的确证试验指南和国家标准要求[1]，故检测结论应更具有说服力和公正性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
15个常染色体和18个Y染色体STR基因座r复合扩增检测体系及法医学应用顾丽华;杨帆;梅兴林;周怀谷【摘要】目的建立15个常染色体和18个Y染色体STR基因座以及性别基因座的六色荧光标记复合PCR直扩检测体系,并评估其法医学应用价值.方法采用六色荧光标记技术,建立15个常染色体STR基因座(D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、TPOX、TH01、D2S1338、CSF1PO、D19S433、vWA、D21S11、D18S51、D8S1179、D5S818、FGA)和18个Y染色体STR基因座(DYS527a/b、DYS448、DYS456、DYS385a/b、DYS458、DYS391、DYS390、DYS19、DYS438、DYS393、DYS389Ⅰ、DYS439、DYS389Ⅱ、DYS392、GATA、DYS635)以及Amelogenin的复合扩增体系,收集800份无关人员血样进行基因座检测,评估所建复合扩增体系的稳定性、灵敏度、种属特异性、直扩可行性以及抗抑制性.结果本检测体系对800份无关人员血样复合扩增后,结果准确,灵敏度达0.125ng;种属特异性高;38份案件检材全部准确分型.在对照男性与女性的DNA浓度比值大于等于1:4时,男性DNA的所有基因座均能准确分型.若模板DNA中含一定浓度的已知抑制剂时,所有基因座也均准确分型.结论本文建立的复合扩增检测体系可同时检测15个常染色体和18个Y染色体基因座以及性别基因座,结果稳定准确,灵敏度高,可为法医DNA检测分析提供一个新选择.【期刊名称】《刑事技术》【年(卷),期】2018(043)001【总页数】5页(P30-34)【关键词】STR;复合PCR;直扩体系;六色荧光标记;法医遗传学【作者】顾丽华;杨帆;梅兴林;周怀谷【作者单位】上海市公安局物证鉴定中心,法医物证学现场应用技术公安部重点实验室,上海市现场物证重点实验室,上海 200083;上海市公安局物证鉴定中心,法医物证学现场应用技术公安部重点实验室,上海市现场物证重点实验室,上海 200083;无锡中德美联生物技术有限公司,江苏无锡 214174;上海市公安局物证鉴定中心,法医物证学现场应用技术公安部重点实验室,上海市现场物证重点实验室,上海 200083【正文语种】中文【中图分类】DF795.2司法鉴定中，常染色体和Y染色体的STR基因座检测已成为常规手段。
Y染色体呈父系、单倍型遗传，故在父系亲缘鉴定中有重要作用。
在一些父系家族的亲权鉴定、混合斑男性成分的检测、不同男性个体混合物的分析等当中，联合应用常染色体及Y染色体的STR分型技术会起到关键作用[1-6]。
为减轻工作量、节约成本、缩短检测时间，进一步满足司法鉴定需求，15个常染色体与18个Y染色体STR 基因座以及性别基因座的复合检测体系被建立，本文对此报道并评价其法医学应用价值。
1 材料与方法1.1 样品本实验室法庭科学DNA数据库建库的无关个体血样800份，其中400份用Chelex-100提取，另400份用于直接扩增（取样直径 1 mm）。
购自农贸市场的猪、牛、羊、鸡、鸭、鱼血用于种属特异性检测。
标准DNA：9947A (女性DNA)，9948 (男性DNA)。
混合样品：9948与9947A混合比为1：1、1：2、1：4、1：9、1：19。
刑事案件检材38份，其中血斑8份，烟蒂21份，肋软骨5份，精斑4份。
含抑制剂（血红素、血红蛋白和腐殖酸）的模板DNA。
1.2 主要仪器及试剂自动提取工作站 (瑞士TECAN公司)，DB-100A全自动打孔机，美国AB公司的9700型PCR扩增仪与3500遗传分析仪。
美国AB公司的Sinofi ler试剂盒、Identi fi ler-plus试剂盒和Y- fi ler试剂盒，以及无锡中德美联生物技术有限公司的AGCU Y-24试剂盒。
1.3 复合扩增体系的建立1.3.1 基因座的选择选定国内外行业通用的Identi fi ler-plus的所有基因座和Y- fi ler中的16个基因座（减去DYS437），增加AGCU Y-24试剂盒中的DYS527基因座（见表 1）。
表1 15个常染色体和18个Y染色体的STR基因座复合直扩体系中各基因座Table 1 Information of 15 autosomal and 18 Y STR loci in the multiplex PCR direct ampli fi cation kit注：DYS385和DYS527具有回文结构，各有其a/b之分，图谱表现为两个峰，它们都按两个基因座计算，故Y-STR基因座总数为18个。
STR标记位置重复基序等位基因范围片段长度范围（bp）荧光标记物Amel Xp22.1,Yp22.1 NA x,y 105-110 ROX D3S1358 3p21,31 AGAT 12-19 123-156 FAM D13S317 13q22-31 GATA 6-15 160-204 FAM D7S8207q11.21-22 GATA 6-15 208-252 FAM D16S539 16q24.1 GATA 5-15 260-307 FAM DYS527a/b Yq11.223 GAAA,GGAA 20-27 326-373 FAM DYS448Yq11.223 AGAGAT 17-22 384-444 FAM DYS456 Yp11.2 AGAT 13-18 84-119 HEX TPOX 2p23-2per AATG 6-13 124-163 HEX TH01 11p15.5 AATG 4-11 169-208 HEX D2S1338 2q35 TGCC,TTCC 15-26 215-268 HEX CSF1PO5q33.2-34 AGAT 7-15 277-327 HEX DYS385a/b Yq11.222 GAAA 10-24 340-440 HEX DYS458 Yp11.2 GAAA 14-22 444-485 HEX DYS391 Yp11.21 TCTA 6-12 78-115 TAMRA D19S433 19q12 AAGG 9-12 117-155 TAMRA vWA12p13.31 AGAT 14-21 165-230 TAMRA D21S11 21q11.2-q21 TCTA,TCTG 25-37 234-291 TAMRA D18S51 18q21.33 GAAA 10-25 303-382 TAMRA DYS390 Yp11.221 TCTG,TCTA 19-27 400-465 TAMRA D8S1179 8q24.13 TATC 8-19 118-171 ROX D5S818 5q21-31 AGAT 7-15 183-226 ROX DYS19 Yp11.2 TAGA 13-18 230-274 ROX FGA 4q28 CTTT 17-30 290-430 ROX DYS438 Yq11.21 TTTTC 9-13 443-485 ROX DYS393 Yp-11.2 AGAT 12-16 98-141 VIG DYS389Ⅰ Yq11.21 TCTA 11-14 150-188 VIG DYS439 Yq11.21 GATA 10-14 205-248 VIG DYS389Ⅱ Yq11.21 TCTG,TCTA 26-32 260-311 VIG DYS392 Yq11.222 TAT 7-17 314-356 VIG GATA-H4 Yq11.1 TAGA 9-14 373-413 VIG DYS635 Yq11.21 TCTA,TGTA 19-25 421-470 VIG1.3.2 引物的设计和合成根据引物系统的灵敏度、均衡性、适用性要求，试剂盒采用六色荧光：第一组D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、DYS527、DYS448，引物用FAM 标记；第二组DYS456、TPOX、TH01、D2S1338、CSF1PO、DYS385、DYS458，引物用HEX标记；第三组DYS391、D19S433、vWA、D21S11、D18S51、DYS390，引物采用TAMRA标记；第四组 Amel、D8S1179、D5S818、DYS19、FGA、DYS438，引物用ROX标记；第五组DYS393、DYS389Ⅰ、DYS439、DYS389Ⅱ、DYS392、GATA_H4、DYS635，引物用VIG标记；第六组是内标，用SIZ标记。
1.3.3 复合扩增体系的建立和优化PCR扩增体系为20 μ L，含PCR反应液8.0 μ L、引物液0.6 μ L、热启动 Taq 酶0.6 μL、模板DNA 液10.8 μ L (含 H2O) 。
扩增程序：95 ℃ ×11 min，94 ℃ ×45 s，55℃×1 min，72℃×1 min，33个循环，60℃×60 min，4℃保温。
1.3.4PCR产物的检测采用ABI3500型遗传分析仪及 Gene Mapper ID-X软件对PCR产物进行检测和分型。
1.4 检测体系性能指标验证1.4.1 批量样本测试和直扩批量样本测试取400份Chelex-100法提取的建库血样，进行PCR扩增和DNA分型检测。
取400份建库血样，打孔直径1 mm，进行直接PCR扩增和DNA分型检测。
与Sino fi ler试剂盒、Identi fi ler-plus试剂盒和Y- fi ler试剂盒以及AGCU Y-24试剂盒进行一致性和成功率比较。
1.4.2 灵敏度检测取9948 (男性DNA)标准对照，分别以1.0、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.031 ng的模板量，进行PCR扩增和DNA分型检测，每种浓度进行两次平行实验。
1.4.3 混合样本检测取9948 (男性DNA)和9947A (女性DNA)标准品，按两者浓度比1：1，1：2，1：4，1：9，1：19的比例混合，进行PCR扩增和DNA分型检测，每种混合比浓度进行两次平行实验。
1.4.4 种属特异性检测取购自农贸市场的猪、牛、羊、鸡、鸭、鱼的血，进行PCR扩增和DNA分型检测。
1.4.5 案件生物检材检测取日常刑事案件检材38份，其中血斑8份，烟蒂21份，肋软骨5份，精斑4份，进行PCR扩增和DNA分型检测。
1.4.6 对不同种类和浓度抑制剂的耐受检测取分别含有不同浓度的血红素、血红蛋白、腐殖酸等抑制剂的模板DNA，进行PCR扩增和DNA分型检测。