实验五-粪标本的微生物学检验
二、结果观察：
１、菌落形态描述: 分别描述1#、2#、3#、4#、5#标本在SS、Mac上的
菌落形态。（可疑菌落与正常菌群菌落分别描述）
2、革兰染色： 3、触酶试验： 4、氧化酶试验： 5、细菌分纯：挑取生长于SS平板、MaC平板中的可疑
菌落3～5个分别接种3～5支KIA。37℃培养18—24小 时后，观察结果。
伤寒杆菌及其它沙门菌、志贺菌、弯曲菌、致病大肠埃希菌、霍 乱弧菌、副溶血弧菌 、气单胞菌、邻单胞菌、小肠结肠炎耶尔森 菌
白假丝酵母菌
病毒
轮状病毒
粪便标本的检验程序
粪便标本或肛拭子标本
直接涂片
革兰染色 抗酸染色
分离培养
（SS、MaC、TCBS、碱性 蛋白胨平板）
35℃18～24h
菌落形态、革兰染色
氧化酶试验
• 实验器材：
1、标本：已增菌模拟粪便标本1#、2#、3#、4#、5#。 2、培养基：SS、MaC、 KIA、蛋白胨水、枸橼酸盐斜面、尿素、苯丙
氨酸斜面、硝酸盐蛋白胨水、甘露醇半固体培养基。 3、试剂：革兰染液、氧化酶试剂、3%H2O2、靛基质试剂、甲基红试
剂、10%FeCl3、硝酸盐还原试剂甲液、硝酸盐还原试剂乙液。 4、诊断血清：
• 肛拭子法：不易获得粪便的患者或作厌氧菌培养时，常采用此法。将 无菌棉拭子用无菌生理盐水湿润后，插入肛门约4～5厘米（幼儿约 2～3厘米）处，轻轻旋转，擦取直肠表面粘液后取出，置无菌试管内 送检。除婴幼儿外，不推荐用棉拭子做常规病原菌培养。
• 疑似痢疾患者应在发病初期、用药前采取标本；疑似伤寒患者应在发 病2～3周内采集粪便标本。
• 志贺菌属：若生化反应结果相符，则作玻片凝集反应： 1、做生理盐水对照, 看有无自凝。 2、用志贺氏菌属4种多价血清反应，若有凝集，再用单价
群诊断血清（福氏志贺菌多价诊断血清、宋内氏志贺菌 单价诊断血清）行凝集反应定群。 • 血清学试验结果判断： 血清凝集试验阳性：出现肉眼可见凝集颗粒 血清凝集试验阴性：液体呈乳状悬液
实验六
粪便标本的微生物学检验
• 实验目的： • 掌握粪便标本的采集与处理、常见病原菌
及一般微生物学检验程序。 • 掌握沙门氏菌和志贺氏菌的鉴定方法；熟
悉它们的生物学性状。
• 粪便标本的采集与处理：
• 自然排便采集法：自然排便后，挑取粪便2～3克于无菌的容器内送检。硒酸盐增菌液： • 本培养基中的0．4%亚硒酸钠可抑制革兰氏阳
性菌的生长，对革兰氏阴性菌也有毒性，但磷 酸钠有中和此毒性的作用，能使肠道致病菌迅 速繁殖。磷酸氢二钠与磷酸二氢钠有缓冲作用， 有利于肠道致病菌生长。
• SS平板：是专用志贺菌、沙门菌分离培养用的一种强选 择性培养基。
• 胆盐能抑制革兰氏阳性菌生长，煌绿抑制大肠杆菌的生长。促进 志贺菌、沙门菌生长（对胆盐和煌绿等染料有抵抗力）。
KIA、MIU及其他生化反应、 血清学凝集、药敏试验
报告结果
增菌培养（ GN增菌、 亚硒 酸盐增菌液、碱性蛋白胨水）
注：①GN增菌液、亚硒酸盐增菌液用于志贺菌、沙 门菌的增菌。
②直接涂片只适应于疑为霍乱、肠结核及伪膜 炎肠炎患者。
• GN增菌液：本培养基含有胆盐、枸橼酸盐对革兰氏 阳性菌有抑制作用，而对革兰氏阴性菌有增菌作用， 接种标本6小时内，大肠杆菌、变形杆菌及假单胞 菌在此培养基中生长迟缓，而志贺菌、沙门氏菌生 长较迅速。故常于接种粪便6～8小时，再自此增菌 液内接种至SS平板、MaC平板中。
取1#、2#、3#、4#、5#标本细菌分别接种于蔗糖半固 体发酵管、蛋白胨水、尿素、苯丙氨酸斜面、硝酸 盐蛋白胨水，37℃培养18—24小时后，观察结果。
五、血清学试验:
• 沙门菌属：如生化反应符合沙门氏菌属，则可按下述步骤进行血清学 诊断：
1、先用A—F群O多价血清作玻片凝集试验（做生理盐水对照, 看有无自凝） 2、A—F群O多价血清凝集则用O因子血清定群：
• 若疑为霍乱患者，标本应置碱性蛋白胨水中。 • 若疑有耶尔森菌或弯曲菌等，标本应置卡～布运送培养基送检。 • 粪便标本如不能立即送检，可将标本放入甘油盐水保存液中或保存于
冰箱内（勿超过2h）
粪便标本中常见的病原微生物
种类
病原菌
革兰阳性菌 革兰阴性菌
真菌
金黄色葡萄球、厌氧链球菌、肠球菌、结核分枝杆菌、产气荚膜 梭菌、艰难芽胞梭菌、蜡样芽胞杆菌
六、实验结果：
1、KIA 结果：
KIA 标本号
乳糖 / 葡萄糖
• 胆盐、枸橼酸钠及硫代硫酸钠在一定比例时发挥联合抑菌作用。 • 硫代硫酸钠有缓和胆盐对志贺菌、沙门菌的有害作用并中和煌绿、
中性红的毒性作用。 • 本培养基除抑制肠球菌、革兰氏阳性菌外，还可抑制大部分大肠
艾希氏菌、产气肠杆菌等革兰氏阴性菌，对志贺菌、沙门菌也有 轻度的抑制作用。
• 由于该培养基抑制杂菌的能力强，故可以增加粪便接种 量而获得较高的阳性分离率。
三、KIA结果观察
KIA 菌名
福氏志贺菌 宋内氏志贺菌 甲型副伤寒杆菌 乙型副伤寒杆菌
伤寒杆菌
乳糖 / 葡萄糖
A/K A/K A/K A/K A/K
H2S
— — —/ + + +/—
动力
— — + + +
气体
— — + + —
分别描述1#、2#、3#、4#、5#标本的KIA结果。
四、生化反应： 根据KIA的结果进一步做生化反应。从KIA斜面上挑
O抗原有许多组成成分，有的是一种菌所独有的，有的是几种菌共 有的。将具有相同菌体抗原的沙门氏菌归属于同一组（群）。故O因 子血清只能定群。 3、A—F群O多价血清不凝集，做Vi因子血清凝集。如果凝集，需用生理 盐水制成浓稠菌悬液后隔水煮沸15～30分钟，再做凝集试验。（新分 离的伤寒及丙型副伤寒常带想此抗原。） 4、按照确定的O群分别用H因子血清检查H抗原。
• 志贺菌属：志贺菌四种多价诊断血清、福氏志贺菌多价诊断血清、 宋内氏志贺菌单价诊断血清。
• 沙门菌属：A—F群多价O血清、O因子血清（O2、O4 O9）、H因子血 清（Ha Hb Hd）、Vi血清。
• 实验方法：
一、分离培养 用无菌方法将1#、2#、3#、4#、5#模拟粪
便标本分别划线接种于SS、Mac上，置35℃ 培养18～24小时。
粪便分离实验报告
粪便中病原微生物的分离与鉴定二、实验目的1. 掌握粪便标本的采集、处理和病原微生物的分离方法。
2. 熟悉不同培养基的制备和使用，了解病原微生物的生物学特性。
3. 培养实验室操作技能，提高对医学微生物学基本原理的认识。
三、实验原理粪便中存在大量微生物，其中既有对人体有益的正常菌群，也有可能引起疾病的病原微生物。
通过特定的分离培养方法，可以将病原微生物从粪便中分离出来，并进行鉴定，从而为疾病的诊断和治疗提供依据。
四、实验材料与试剂1. 实验材料：新鲜粪便标本2. 试剂与仪器：- 牛奶琼脂培养基- 血琼脂培养基- 脱纤维蛋白血琼脂培养基- 碎琼脂培养基- 革兰氏染色液- 稀释液- 移液器- 灭菌镊子- 灭菌培养皿- 显微镜- 移菌环1. 标本采集：采集新鲜粪便标本，注意避免污染。
2. 标本处理：将粪便标本加入适量的稀释液中，充分混合均匀。
3. 分离培养：- 取适量稀释后的粪便标本，分别接种于牛奶琼脂培养基、血琼脂培养基和脱纤维蛋白血琼脂培养基上。
- 将培养皿置于37℃恒温培养箱中培养24-48小时。
4. 观察与记录：观察培养基上菌落生长情况，记录菌落特征。
5. 鉴定：- 对疑似病原菌进行革兰氏染色，观察菌体形态和染色特性。
- 根据菌落特征和染色结果，进行初步鉴定。
六、实验结果1. 牛奶琼脂培养基上观察到典型的金黄色葡萄球菌菌落，革兰氏染色呈阳性。
2. 血琼脂培养基上观察到典型的溶血性链球菌菌落，革兰氏染色呈阳性。
3. 脱纤维蛋白血琼脂培养基上观察到典型的大肠杆菌菌落，革兰氏染色呈阴性。
七、讨论与分析1. 本实验成功分离出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和大肠杆菌，表明粪便标本中存在这些病原微生物。
2. 金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌均为革兰氏阳性菌，具有致病性，可能引起皮肤感染、呼吸道感染等疾病。
3. 大肠杆菌为革兰氏阴性菌，通常存在于人体肠道中，但在某些情况下也可能引起感染，如尿路感染、腹泻等。
4. 本实验结果表明，粪便分离培养是诊断肠道感染的重要手段，对于疾病的预防和治疗具有重要意义。
2018-粪便检查实验报告-范文word版 (12页)
本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！== 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ ==粪便检查实验报告篇一：脓汁和粪便标本中病原菌的检验实验报告脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：学号：姓名：一实验目的：从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。
了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理，树立牢固的无菌观念。
二实验器材：试管架,酒精灯,污物盘，普通冰箱，隔水式电热恒温培养箱，奥林巴斯 CX21型生物显微镜，乙醇乙醚，吸水纸，石蜡油，拭镜纸，染色架，革兰染色瓶，1500W电炉，石棉网，手套，酒精棉球，镊子，碘酒棉球,接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、冷藏室、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子三方法与步骤：1培养基的制备、消毒和灭菌: ○1. 调配→溶化→ 矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。
2. 干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定→保存。
②细菌的分离培养: 采用平板划线分离法，将取脓汁和粪便标本中混杂的多种细菌，分别在普通平板和伊红美蓝固体培养基表面划线，使之分散成单个细菌，在37℃培养18～24h ，从而分离出单个菌落。
③细菌的纯培养：脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落；粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落。
挑选这四种不同菌落分别在斜面培养基上接种④细菌的形态学检查：涂片制备→ 干燥→ 固定→ 革兰染色⑤细菌的生化试验等 : 糖发酵试验, 细菌药物敏感性试验, 血浆凝固酶试验, 半固体接种法, 痢疾血清玻片凝集反应⑥结果观察、分析、总结四结果与讨论结果讨论：1. 在制备好培养基后，我们首先采用的是平板划线分离法，从脓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落→在显微镜下观察，这两株细菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌→再结合菌落或菌苔颜色，可初步断定，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌→再通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡萄球菌是致病菌。
脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告
2016年秋季学期微生物学实验报告1、了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理。
2、熟悉常见病原性球菌及常见肠道致病菌的检查程序，掌握各检查实验操作。
3、了解脓汁和粪便标本中病原菌的检测的临床应用及临床意义。
4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。
5、熟悉抗生素对于不同细菌的作用机理。
6、树立牢固的无菌观念。
二、实验器材：1、培养基：营养琼脂平板、伊红美兰平板、斜面、营养肉汤、半固体琼脂2、标本：脓汁标本、粪便标本、空气细菌培养物、手指皮肤细菌培养物、细菌分离培养物、斜面培养物、营养肉汤培养物、药敏试验培养物3、器材：1）培养基的制备：天平、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、试管、试管架、刻度吸管、洗耳球、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、干粉培养基、酒精灯、火机。
2）细菌的分离培养：碘酒棉球，酒精棉球、眼科镊子、接种环。
3）细菌的纯培养: 接种环。
4）细菌的形态学检查：生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、结晶紫染液、芦戈氏碘液、95%酒精、稀释石炭酸复红、染色架、接种环。
5）细菌的生化试验:糖发酵管、抗菌素（青霉素、链霉素、庆大霉素）纸片、眼科镊子、接种针、接种环、小砂轮、葡萄糖发酵微量管、乳糖发酵微量管、兔血浆、生理盐水、载玻片。
6）结果分析：尺子。
三、方法与步骤1、营养肉汤培养基的制备取1.1g营养肉汤粉末于锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，摇晃锥形瓶使其几乎完全溶解。
将锥形瓶置于电陶炉上加热至沸腾，观察固体是否完全溶解，冷却后分装至试管内。
2、细菌的分离培养（平板划线分离法）甲→脓汁标本→营养琼脂平板乙→脓汁标本→营养琼脂平板丙→粪便标本→伊红美蓝平板丁→粪便标本→伊红美蓝平板1）接种环烧灼灭菌，以免污染标本。
2）取标本3～5ul。
3）转动平板，当看到平板表面象镜面有反光的时候，保持这个角度，划线时就能看清划线痕迹，以便控制划线。
4）接种环与平板呈30～40度角，在平板表面上方，以曲线的形式，作大幅度来回连续划线，边划边退，线段要划得长而密集，每区划线不少于30条5）甲、乙烧掉接种环上多余的标本。
临床微生物学检验的标本采集
临床微生物学检验的标本采集一、血液和骨髓细菌学检验标本的采集（一）适应症菌血症、败血症和感染性骨髓炎等感染菌的培养鉴定和药物敏感试验。
（二）病人准备1．凡怀疑菌血症和败血症的患者，采血培养时，应尽量在未使用抗菌素前采血，如已使用过抗菌素，应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血，或在病人第二次使用抗菌素之前采集血培养标本。
2．应在病人发热期或寒颤时采集（三）标本采集1．血培养瓶领取：凭医嘱和检验申请单到检验科细菌室领取。
按照实际情况选择相应类型的血培养瓶：如灰色瓶盖为普通成人培养瓶；粉红色盖为儿童需氧菌培养瓶；紫色盖为厌氧菌培养瓶。
2．将患者信息录入相应的血培养瓶条码中，并在作好病人姓名、科别、床号等标识。
2．采集方法：严格消毒病人采血部位和血培养瓶口，抽一定量血液或骨髓后，无菌注入血培养瓶内，轻轻摇匀。
3．标本量：成人每次采血5~10ml，小儿采血3~5ml，骨髓2~3ml，采血量足够则阳性率高，反之阳性率减低。
（四）注意事项1．抽血、抽骨髓和接种时，须严格注意无菌操作，避免污染杂菌。
2．从抽血、抽骨髓到接种入瓶，动作要快，防止血液凝固。
3．成人不明原因发热、怀疑血流细菌感染时宜在不同部位抽血2套，每套2瓶（需氧、厌氧各一瓶）。
4．怀疑伤寒、亚急性细菌性心内膜炎及布鲁氏菌病的病人等，一般一日抽血三次培养，必要时需追加次数。
（五）标本送检和保存1．标本采集后应及时送检，一般不超过1h送交细菌室。
2．送检过程中应注意防止培养瓶打破或其它潜在性污染可能。
二、痰液或下呼吸道分泌物细菌学检验标本的采集（一）适应症肺炎、肺气肿、支气管炎、鼻窦炎、肺结核等感染菌的培养鉴定、药物敏感试验和抗酸菌检查。
（二）病人准备1．尽量在未使用抗菌素前留取标本。
准备好无菌标本容器，贴上条码、标明标识。
2．住院病人应留取清晨起床第一口痰。
为减少正常菌群的污染，嘱患者早上起床后用清水或生理盐水漱口，不要刷牙，除去鼻咽分泌物。
（三）标本采集1．一般病人用力咳出气管深处或肺部痰液，留于无菌标本容器内。
粪细菌培养
粪细菌培养
粪细菌培养是一种常见的临床微生物检测方法，用于检测肠道中的细菌种类和数量，以帮助医生诊断疾病和制定治疗方案。
本文将介绍粪细菌培养的原理、方法和临床意义。
原理
粪便中包含大量的细菌，包括有益菌和病原菌。
通过将粪便样本接种到含有营养物质的培养基上，可以促进细菌的生长和繁殖。
不同类型的细菌在不同的培养条件下会呈现不同的形态和特征，通过观察细菌的形态、颜色和数量可以初步判断粪便样本中的细菌种类和数量。
方法
1.样本采集：患者需在大便后立即将新鲜的粪便样本采集到干净的容
器中，并尽快送至医院或实验室进行检测。
2.处理：将粪便样本均匀搅拌后取适量的样品，并接种到含有培养基
的平板上。
3.培养：将接种后的平板放入恒温箱中，在适当的温度和湿度条件下
培养一定时间。
4.观察：观察培养基上细菌的形态、颜色、大小等特征，并记录不同
细菌的数量。
5.鉴定：根据细菌的形态特征以及进一步的生化和分子生物学方法鉴
定出不同种类的细菌。
临床意义
粪便细菌培养可以帮助医生诊断和治疗一系列肠道感染和疾病，包括：•感染性腹泻：通过培养检测病原菌如沙门菌、大肠杆菌等，帮助医生明确病原体，指导抗生素的使用。
•炎症性肠病：细菌培养可以帮助区分炎症性肠病的类型，指导治疗方案。
•肠道菌群失调：通过观察有益菌和病原菌的比例，评估肠道菌群的健康状况，指导益生菌或其他调节菌群的治疗。
总的来说，粪细菌培养是一种简单而有效的临床检测方法，对于肠道疾病的诊治具有重要的意义。
以上是关于粪细菌培养的介绍，希望能对读者有所帮助。
食品卫生微生物学检验 大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌计数
大肠菌群计数：第一法 6 操作步骤
6.2 初发酵实验 对每个样品，选择适宜的三个连续稀释度的样品匀液，液体 样品可以包括未经稀释的原液，每个稀释度接种三管月桂基硫酸 盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管接种1mL（如接种量需要超过1mL， 则用双料LST肉汤）。36℃±1℃培养24h±2h，检查倒管内是否有气 泡产生或轻摇试管时是否有密集连续的细小气泡从管底逸出，如 未产气则继续培养至48h±2h。记录在24h和48h内产气的LST肉汤管 数。未产气者为大肠菌群阴性；对产气者，则进行复发酵试验。
食品卫生微生物学检验 大肠杆菌计数
Microbiological examination of food hygiene -Enumeration of Escherichia coli
大肠菌群计数
大肠菌群
定义：一群在36℃条件下培养24~48小时能发酵乳糖、产酸 产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。 卫生学概念，包括埃希氏菌属，克雷伯氏菌属、肠杆菌属 和柠檬酸杆菌属等的细菌 检验比较简单，所以被广泛用做水源的卫生指标和食品加 工卫生状况的通用指标
Microbiological examination of food hygiene -Enumeration of Coliforms
食品卫生微生物学检验 粪大肠菌群计数
Microbiological examination of food hygiene -Enumeration of faecal coliforms
℃± 1 ℃ 36 36℃
验
24h~ 48h
报告结果
大肠菌群计数
大肠菌群计数
大肠菌群计数
第一法
MPN法
第二法 平板计数法 第三法 Petrifilm测试片法
2024年高级卫生专业技术资格考试微生物检验技术(094)(正高级)试卷及答案指导
2024年高级卫生专业技术资格考试微生物检验技术(094)(正高级)模拟试卷(答案在后面)一、多项选择题（本大题有30小题，每小题1分，共30分）1、以下哪些属于微生物检验技术的基本步骤？（）A. 样品采集与处理B. 微生物分离纯化C. 微生物鉴定D. 药物敏感试验E. 报告撰写2、在微生物分离纯化的过程中，以下哪种方法常用于分离革兰氏阳性菌？（）A. 霍夫曼平板法B. 沙氏平板法C. 肉汤培养法D. 培养基稀释法E. 稀释涂布平板法3、下列关于细菌培养基的选择与配制的说法正确的是：A. 所有细菌的培养都使用相同的培养基B. 选择培养基时需要考虑目标菌株的营养需求和生长条件C. 培养基配制完成后无需灭菌即可使用D. 鉴定肠道致病菌常用SS琼脂作为选择性培养基E. 血平板常用于初次分离培养细菌4、关于抗生素敏感性试验，以下叙述正确的是：A. 抗生素敏感性试验仅对革兰氏阳性菌有意义B. MIC（最小抑菌浓度）法可以定量测定细菌对抗生素的敏感度C. 纸片扩散法适用于所有临床分离菌株的药敏测试D. 抗生素敏感性试验的结果可以直接指导临床用药E. 在进行药敏试验前，必须确保菌悬液浓度符合标准5、下列关于细菌形态学的描述中，正确的是（）A. 革兰氏染色法可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌B. 细菌的形态学观察主要用于细菌的鉴定C. 细菌的形态学观察包括细菌的大小、形状、排列等D. 细菌的形态学观察可以用于判断细菌的致病性6、以下关于细菌生理学的描述中，错误的是（）A. 细菌的生长繁殖需要营养物质、水分、适宜的温度和pH值B. 细菌的新陈代谢包括同化作用和异化作用C. 细菌的同化作用包括自养和异养D. 细菌的异化作用包括光合作用和化能作用7、关于细菌L型的描述，下列哪些是正确的？A. 细菌L型是指在某些条件下细菌细胞壁缺陷而形成的形态B. L型细菌可以通过常规培养基生长C. 它们通常在高渗透压培养基上生长D. L型细菌对青霉素类抗生素敏感E. 由于细胞壁的缺失，L型细菌可以在不利环境下存活8、关于真菌的基本特征，以下哪几项说法是准确的？A. 真菌属于原核生物界B. 大多数真菌通过产生孢子的方式繁殖C. 酵母菌是一种单细胞形式的真菌D. 所有真菌都是多细胞有机体E. 真菌能够进行光合作用9、以下哪些微生物属于革兰氏阴性菌？A. 肠杆菌属（如大肠杆菌）B. 铜绿假单胞菌C. 链球菌属（如肺炎链球菌）D. 霍乱弧菌 10、以下哪些指标可以用来判断细菌的耐药性？A. 最小抑菌浓度（MIC）B. 敏感性试验结果C. 药物敏感度指数D. 耐药基因检测11、下列关于细菌的细胞壁成分及其功能的说法，哪几项是正确的？A. 肽聚糖是所有细菌细胞壁的主要成分。
临床常见标本的微生物检验
主要内容
➢ 1.临床常见标本的微生物检验
一、血、骨髓、静脉导管标本 二、痰及下呼吸道标本 三、尿液标本 四、大便标本 五、生殖道系统标本
六、化脓和创伤标本 七、穿刺液标本 八、眼、耳、鼻、咽拭子标本 九、组织标本
一、血、骨髓、静脉导管标 本
（一）血培养检测采血指征 临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的 患者
无菌生长，需要进行末次接种。
双相培养瓶
二.导管相关性血流感染的标本培养
导管相关性血流感染：
最常见的为血管内导管相关性血流感染（CRBSI），发生率与导管种 类、导管相关医疗操作的频率、患者病情等因素有关。
短期留置的血管内导管，皮肤定值菌通过皮下隧道移植到导管尖端， 随后引发感染；
长期留置的血管内导管，导管头被细菌污染，导管腔发生细菌定植， 引发感染；
三、 尿培养标本
尿路感染是指尿道内有大量微生物繁殖而引起的尿路 炎症。尿路感染并非是一种单一的疾病，而是一种临 床综合征。根据感染部位可分为上尿路感染（如肾盂 肾炎）及下尿路感染（如膀胱炎），男性还可出现前 列腺感染，不同部位同时感染也很常见。尿路感染是 人类最常见的感染之一，可发生于各个年龄段的人群， 好发于女性，男:女之比为1:10。
2.延迟送检或待处理标本应置于4 ℃冰箱保存（疑似肺炎 链球菌、流感嗜血杆菌等苛养菌的例外），但应在24小时 内处理；
3.对可疑烈性呼吸道传染病（SARS、炭疽、鼠疫等）的 标本，必须全过程注意生物安全；
4.经口腔部污染的标本均不可以做厌氧菌培养。
痰标本的处理
一.痰标本的革兰染色涂片检测：
其目的是判定标本是否适合做细菌培养，并初步判定有否病原菌， 病原菌的数量级类别，有助于初步报告、培养基选择和培养结果 的判定。
实验五环境中微生物的检测和分离纯化
实验五环境中微生物的检测和分离纯化一、实验目的1．熟悉常用微生物培养基的配制方法。
2．学习并掌握各种无菌操作技术，并用此技术进行微生物稀释分离、划线分离接种。
3．用平板划线法和稀释法分离微生物。
4．认识微生物存在的普遍性，体会无菌操作的重要性。
二、实验原理(一)微生物的分离与纯化土壤是微生物生活的大本营，在这里生活的微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。
因此，土壤是微生物多样性的重要插所，也是发掘微生物资源的重要基地，可以从土壤中分离、纯化得到许多有价值的菌株。
从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
常用的是平板分离法。
为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对雪养、酸碱度、浓度和氧等条件要求不同，而供给它适宜的培养条件，或加入某些抑制剂抑制其他菌生长而利于此菌生长的环境，从而淘汰其他一些不需要的微生物．再用稀释涂布平板法或稀释后平板划线分离，纯化该微生物，直至得到纯菌株。
(二)平板菌落计数法平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释，使其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞．统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品含菌数。
平板菌落计数法虽然操作繁琐，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是，由于该计数方法的最大优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验(如活菌制剂)，以及食品、饮料和水(包括水源水)等的含菌指数或污染程度的检测。
三、实验材料土样10g，未知菌变形杆菌单菌落平板和无菌水．取液器(5m1、l000ml各一支)，培养箱，培养皿(20个)，无菌有帽试管，三角瓶，无菌涂棒，接种环，5ml、1ml 无菌吸头（移液管），记号笔，酒精灯，火柴，试管架，牙签，。
四，实验步骤(一)培养基的制备(提前准备)按以下步骤制备牛肉膏蛋白胨平板培养基，每组20个平板。
微生物实验报告细菌
微生物实验报告题目脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业2013级临床医学八年制实验者学号小组成员指导老师一、实验目的1.了解细菌生长的基本营养条件，熟悉培养基的类型，学习并掌握培养基的原则与方法。
2.掌握无菌操作技术，掌握病原菌的分离与培养方法。
3.了解并比较细菌在固体、半固体和液体培养基的生长特征。
4.学习并掌握空气及人体细菌检测学方法。
5.掌握细菌涂片标本的制备以及革兰染色法，熟悉不同类型细菌的基本形态。
6.掌握糖发酵实验、抗菌素敏感性实验和血浆凝固酶实验的原理与方法。
7.从脓汁和粪便标本中分离培养和检测出病原体。
二、实验器材1.培养基的制备：干粉培养基、天平、蒸馏水、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、电炉、试管、洗耳球、试管筐、移液管、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、手套、石棉网2.空气与人体体表细菌学检查：琼脂培养基、酒精、碘酒3.细菌的分离培养：脓汁标本、粪便标本、伊红美蓝平板、营养琼脂平板、接种环、酒精灯、打火机4.细菌的纯培养：接种环、酒精灯、打火机、中性笔、斜面培养基5.细菌的形态学检测：斜面培养物、营养肉汤、生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、显微镜、接种环、酒精灯、打火机、中性笔、革兰染色试剂、液体培养基6.细菌的生化试验：葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、接种针、酒精灯、打火机、中性笔、菌液、营养琼脂平板、接种环、药物纸片（青霉素、庆大霉素、头孢曲松）、玻片、兔血浆、生理盐水7.细菌的血清学试验：玻片、福氏志贺菌诊断血清、生理盐水、接种环、酒精灯三、实验方法与步骤1.培养基的制备称量琼脂粉→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌2.空气与人体体表细菌学检查2.1空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板，选择实验楼女厕所→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15分钟→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24小时→观察结果。