蛋白酶的种类
蛋白酶的分类及酶切位点
蛋白酶的分类及酶切位点氨基酸0.ppt氨基酸的名称与符号alanine 丙氨酸Ala Aarginine 精氨酸Arg Rasparagine 天冬酰氨Asn Asx Naspartic acid 天冬氨酸Asp Asx Dcysteine 半胱氨酸Cys Cglutamine 谷氨酰胺Gln Glx Qglutamic acid 谷氨酸Glu Glx Eglycine 甘氨酸Gly Ghistidine 组氨酸His Hisoleucine 异亮氨酸Ile Ileucine 亮氨酸Leu Llysine 赖氨酸Lys Kmethionine 甲硫氨酸Met Mphenylalanine 苯丙氨酸Phe Fproline 脯氨酸Pro Pserine 丝氨酸Ser Sthreonine 苏氨酸Thr Ttryptophan 色氨酸Trp Wtyrosine 酪氨酸Tyr Yvaline 缬氨酸Val V血清终止胰酶消化的原理血清终止的原理其实是竞争抑制。
就是用过量的牛血清中含有的蛋白来和胰酶结合。
不给胰酶消化细胞蛋白的机会。
细胞传代时，血清为什么能终止胰酶消化？胰蛋白酶的酶切位点是肽链的Lys和Arg两个残疾的羧基端肽键，血清的加入可使酶饱和，严格上说不是竞争性抑制，因为血清蛋白不是抑制剂，还是底物！什么样的细胞不能用胰酶-EDTA消化植物细胞不能用胰酶-EDTA消化，要用纤维素酶消化。
应该是肿瘤细胞吧。
正常的细胞，貌似都需要用胰酶或者胶原酶消化。
EDTA-胰酶，只不过是在胰酶里加入了EDTA而已。
EDTA是乙二胺四乙酸，一种金属螯合剂。
一般和胰蛋白酶配合使用。
原因在于，钙，镁等金属离子会降低胰酶活力，故在使用胰酶消化液时要配合加入EDTA。
它可以螯合这些离子，消除对胰酶的抑制。
干细胞饲养层制作中，胰酶—EDTA消化成纤维细胞（MEF）时，EDTA的作用是什么？应该是胰酶分散细胞，EDTA鳌合金属离子使金属酶失活《军医进修学院学报》1992年02期加入收藏投稿正常人血浆蛋白酶解产物对胃癌细胞肺转移抑制作用的研究焦顺昌赵东海黄昌霞王洪海【摘要】：本文采用胰凝乳蛋白酶和胃蛋白酶联合消化方法得到正常人血浆(NHP)有限蛋白酶解产物(NHP-EP)。
蛋白酶的种类
蛋白酶的论述摘要：蛋白酶（英语：Protease）是生物体内的一类酵素（酶），它们能够分解蛋白质。
分解方法是打断那些将氨基酸连结成多肽链的肽键。
抑制蛋白酶活性的小分子化合物被称蛋白酶抑制剂。
许多病毒蛋白酶的抑制剂是很有效的抗病毒药。
1．木瓜蛋白酶1.1木瓜蛋白酶简介木瓜蛋白酶，是一种蛋白水解酶，可将抗体分子水解为3个片段。
是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶，活性中心含半胱氨酸，属巯基蛋白酶，应用于啤酒及食品工业。
1.2木瓜蛋白酶的特点木瓜蛋白酶（Papain）简称木瓜酶，又称为木瓜酵素。
是利用未成熟的番木瓜（Carica papaya）果实中的乳汁，采用现代生物工程技术提炼而成的纯天然生物酶制品。
它是一种含巯基(-SH)肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力，同时，还具有合成功能，能把蛋白水解物合成为类蛋白质。
溶于水和甘油，水溶液无色或淡黄色，有时呈乳白色；几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。
最适合PH值6～7(一般3～9.5皆可)，在中性或偏酸性时亦有作用，等电点（pI)为8.75；最适合温度55～65℃(一般10～85℃皆可)，耐热性强，在90℃时也不会完全失活；受氧化剂抑制，还原性物质激活。
木瓜蛋白酶由212个氨基酸残基组成，当用氨基肽酶从N末端水解掉分子中的2/3肽链后，剩下的1/3肽链仍保持99%的活性，说明木瓜蛋白酶的生物活性集中表现在C末端的少数氨基酸残基及其所构成的空间结构区域。
木瓜蛋白酶papain属巯基蛋白酶，具有较宽的底物特异性，作用于蛋白质中L-精氨酸、L-赖氨酸、甘氨酸和L-瓜氨酸残基羧基参与形成的肽键。
此酶属内肽酶，能切开全蛋蛋白质分子内部肽链—CO—NH—生成分子量较小的多肽类。
存在于木瓜胚乳中的蛋白酶。
EC3．4．22．2。
作为植物来源的蛋白酶来说，此酶研究进展的最快。
此酶主要是以内肽酶的形态起作用。
蛋白酶类医学知识课件
9;最适温度65℃，作用温度范围30-70℃，生成 产物：氨基酸。 菠萝蛋白酶(Bromelain)、无花果蛋白酶(Ficin)： （3）微生物蛋白酶 酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶
2、医药工业： 含木瓜蛋白酶的药物，可起到消炎、利胆、止痛、
助消化的功效，进一步研究表明亦可治疗妇科病、青 光眼、昆虫的叮咬等。
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3、纺织工业：羊毛的防缩：用木瓜蛋白酶处理过的羊毛， 其抗张度比常规方法高，毛线手感柔软，收缩性为0；还 可用于蚕的脱胶和蚕丝的精炼。
金属离子对酶活的影响： Mn2+,Ca2+,Mg2+激活酶； Cu2+,Hg2+,Al3+抑制酶活。
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木瓜蛋白酶（Papain）
木瓜蛋白酶是从木瓜果实中提炼而得的纯天然生物酶，它是 由212个氨基酸组成，分子量为21000，属于含巯基（— SH）肽链内切酶，其活性受氧化剂氧化或重金属抑制。具 有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、 多肽、酯、酰胺等有较强的酶解能力，同时还具有合成的能 力，可把蛋白质水解物再合成蛋白质类物质，这种能力可用 来改善动植物蛋白的营养价值或功能性质。
（4）羧基蛋白酶：活性中心含天门冬氨酸等酸性氨基酸。 如米曲霉、黑曲霉产生的酸性蛋白酶。
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蛋白酶种类及使用方法对胶原水解程度的影响
影响 。 结果表 明 ， 胶 原的 最终水 解程度 主要 受蛋 白酶 种 类的影 响 ， 使 用过量 的酶 或延 长水 解 时间对胶 原 的水 解程度影 响 不大 ， 这与蛋 白酶 对氨基 酸残基 的作 用专 一性有 关 。 使 用 ２种蛋 白酶逐 步 水解胶 原
时， 胶原的水解程度并不会提 高， 表明不同的蛋白酶之间可能存在相互抑制作用。 同时发现， 当用相 同 量蛋 白酶 水解胶 原 时 ， 采 用一 步加 酶 方式 比分 次加 酶 方式 的水解程 度 高。 关键 词 ： 胶原 ； 蛋 白酶 ； 酶 法水 解 ； 胶原 水解 产物 中图分 类号 ： Ｔ Ｓ ５ １ ２ 文献标 识码 ： Ａ 文 章编 号 ： １ ６ ７ １ — １ ６ ０ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ — ０ ０ １ ０ — ０ ５
Ｐ ＡＮ Ｈｏ ｎ ｇ — ｙ ｉ ｎ ｇ ，ＣＨＩ Ｙｕ ａ ｎ － ｌ ｏ ｎ ｇ ２ ， ＬＩ ＡＯ Ｘｕ ｅ － ｐｉ ｎ ， ＳＨＩ Ｂｉ
ｆ １ ． Ｔ ｈ ｅ Ｋ ｅ ｙ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｏ ｆ Ｌ ｅ ｔ ａ ｈ ｅ ｒ Ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ａ ｎ ｄ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ｏ ｆ Ｍｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ｆ ｏ Ｅ ｄ ｕ ｃ ｔｉ ａ ｏ ｎ ， Ｓ ｉ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ｄ ｕ ６ １ ０ ０ ６ ５ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ２ ． Ｎ ｔｉ ａ ｏ ｎ ａ ｌ Ｅ ｎ ｉｎ ｇ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ Ｌ ｂｏ ａ ｒ ｔ ａ ｏ ｒ ｙ ｆ ｏ ｒ Ｃ ｌ ｅ ａ ｎ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｆＬ ｏ ｅ ｔ ａ ｈ ｅ ｒ Ｍａ ｎｕ ｆ ａ ｃ ｔ ｕ ｒ ｅ Ｓ ｉ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ｄ ｕ ６ １ ０ ０ ６ ５ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
酶学-蛋白酶
蛋白酶
成员：杨超越 李星宇 舒皓钰 王睿飞 徐也甜 李锐涛
蛋白酶
蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。到本
世纪初，已经报导的微生物蛋白酶估计超过900
种，生物体的生理活动和疾病的发生，如食物之
消化吸收、血液之凝固、溶血作用、炎症、血压
调节、细胞分化自溶、机体衰老、癌症转移、生
蛋白酶的应用
蛋白酶在烘焙中的应用
蛋白酶的作用机理
蛋白酶能作用于蛋白质和多肽形成多肽 和氨基酸。完好的面粉中蛋白酶活力很 低，制作面包时添加蛋白酶会使面团中 多肽和氨基酸含量增加，氨基酸是形成 香味物质的中间产物，多肽则是潜在的 滋味增强剂、氧化剂、甜味剂或苦味剂。 蛋白酶种类不同，产生的羰基化合物也 不同，若蛋白酶中不含产生异味的脂酶， 适量添加有利于改替面包的香气。
2009年 以色列 用了4500磅的原料 在特拉维夫做了世界最大的鹰嘴豆泥 昭示自己正宗
黎巴嫩人表示不服， 2010年300大厨做了两倍的量 许多人围着大盘载歌载舞
2015年以色列本来打算做一个15吨的 后来因为安全问题而作罢。。。。。。。。
赋予我们食物想象的豆类 粉身碎骨后带来了更多的惊喜
老祖先赠予人类的实惠食物 滋养了中东地区来来去去的民族 文明的兴盛和交流让其传遍地中海各个领域 融入了中东各国人民的血液 在交错分裂的历史和政治图景中 又成为了各自民族想象和身份认同的一部分
内源蛋白酶对肉类食品滋味的影响
滋味是肉制品的重要感官特性之一，公认的基本味 觉有酸、甜、苦、咸和鲜。肉类食品的滋味物质主要有 游离氨基酸、肽、核苷酸和无机盐。 蛋白质的降解是氨基酸和肽形成的重要途径之一， 不同的肽与氨基酸具有不同的呈味特性，从而使肉呈现 不同的滋味。
蛋白酶ppt课件
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（1）木瓜蛋白酶（EC 3.4.22.2）
• 在pH5的弱酸性条件下最稳定。底物不同，它 的最适pH也会改变，酪蛋白最适pH为7，明胶 则为5。 • 最适作用温度一般在65℃,在较高温度下仍然保 持活性，例如在中性条件下70℃加热处理 30min，对牛乳的凝结活性仅下降20%； • 商品化的木瓜蛋白酶中，真正的木瓜蛋白酶一 般只占可溶性蛋白质总量的10%，另外的蛋白 酶还有木瓜凝乳酶、溶菌酶以及木瓜肽酶等。 在肉品嫩化、啤酒加工中有应用。
* Ser-Ser-Cys-Met-Gly-Asp-Ser-Gly-Gly-Pro-Leu-Val-Cys-Lys-Lys-As *
Ser-Gly-Cys-Gln-Gly-Asp-Ser-Gly-GlyPro-Leu-His-Cys-Leu-Val-As
Asp-Ala-Cys-Glu-Gly-Asp-Ser-Gly-Gly-Pro-Phe-Val-Met-Lys-Ser-Pr
• 由三个肽链组成，由双硫键将各部分结 合在一起。胰凝乳蛋白酶原A由245个氨 基酸残基（分子量约为25,000），分子中 有五个双硫键，它没有酶的活性；在胰 蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的作用下，裂解 生成了-胰凝乳蛋白酶。
图
1 Cys
胰凝乳蛋白酶原的激活过程示意图
245 胰凝乳蛋白酶原A 胰蛋白酶 15 Arg 16 胰凝乳蛋白酶 146 Tyr B链 15 147 148 149 Ala C链 Thr Asn 245 胰凝乳蛋白酶 Asp Asp 胰凝乳蛋白酶
蛋白酶
第11问题
蛋白酶的分类、常见的种类
3.1.1、蛋白酶的作用
水解蛋白质或多肽中的酰胺键（肽键）。
COOH R1—CH—N—H + HO—C—CH—R2 H O COOH R1—CH—N—C—CH—R2 + H2O H O NH2 NH2
蛋白酶适宜ph
蛋白酶的适宜pH值因不同的酶而异，不同类型的蛋白酶在不同的pH条件下具有最佳的活性。
一般来说，蛋白酶可以分为碱性蛋白酶、中性蛋白酶和酸性蛋白酶。
-碱性蛋白酶（如胃蛋白酶）通常在较低的pH范围内活性较高，最适宜pH约为2-4。
-中性蛋白酶（如胰蛋白酶）的最佳活性pH通常在中性范围，大约在pH 6-8之间。
-酸性蛋白酶（如木瓜蛋白酶）在较高的pH条件下活性较高，最适宜pH约为4-6。
需要注意的是，这些数值仅作为一般参考，实际情况可能因酶的来源、特性和应用环境的差异而有所变化。
因此，在具体实验或工业应用中，最好根据具体蛋白酶的要求和实际情况进行优化和调整。
1。
蛋白酶种类
蛋白酶种类蛋白酶是一类具有催化作用的蛋白质分子，它们在生物体内起着至关重要的作用。
根据其催化的反应类型和底物特异性，蛋白酶可以分为多个种类。
本文将介绍几种常见的蛋白酶及其功能。
一、胰蛋白酶（trypsin）胰蛋白酶是一种水解蛋白质的酶，主要在胰腺中产生。
它能够将蛋白质分解为小分子的胺基酸，从而提供给机体进行能量代谢和新陈代谢。
胰蛋白酶的活性受到胃酸的抑制，一般在小肠中发挥作用。
二、淀粉酶（amylase）淀粉酶是一种水解淀粉为糖的酶，主要存在于唾液和胰液中。
它能够将淀粉分解为葡萄糖等小分子糖类，为机体提供能量。
淀粉酶在口腔中开始发挥作用，继续在胃和小肠中进行消化。
三、脂肪酶（lipase）脂肪酶是一种水解脂肪的酶，主要存在于胰液中。
它能够将脂肪分解为甘油和脂肪酸，从而使脂肪被人体吸收和利用。
脂肪酶主要在小肠中发挥作用，与胆汁中的胆盐一起协同作用，促进脂肪的消化和吸收。
四、蛋白酶K（proteinase K）蛋白酶K是一种特殊的蛋白酶，具有广泛的蛋白质水解能力。
它能够降解各种酶、蛋白质、肽链等，对于研究蛋白质结构和功能具有重要意义。
蛋白酶K在实验室中常用于DNA和RNA的提取过程中，用来去除蛋白质的污染物。
五、胃蛋白酶（pepsin）胃蛋白酶是胃液中的一种主要酶类，能够水解蛋白质。
胃蛋白酶在胃酸的酸性环境下才能发挥活性，它能够将蛋白质分解为小分子的多肽，为后续消化和吸收提供条件。
六、胰凝乳蛋白酶（chymotrypsin）胰凝乳蛋白酶是一种水解蛋白质的酶，主要存在于胰液中。
它能够将蛋白质分解为多肽和氨基酸，具有较强的蛋白质分解能力。
胰凝乳蛋白酶主要在小肠中发挥作用，与胰蛋白酶协同作用，促进蛋白质的消化和吸收。
七、胃蛋白酶原（pepsinogen）胃蛋白酶原是胃液中的一种前体酶，它在胃酸的作用下转化为活性的胃蛋白酶。
胃蛋白酶原的转化是一个自动催化的过程，它能够保护胃黏膜免受胃酸的腐蚀。
胃蛋白酶原的转化是胃液中消化蛋白质的重要步骤之一。
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蛋白酶的种类
1．木瓜蛋白酶
木瓜蛋白酶，是一种蛋白水解酶，可将抗体分子水解为3个片段。
是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶，活性中心含半胱氨酸，属巯基蛋白酶，应用于啤酒及食品工业。
木瓜蛋白酶papain属巯基蛋白酶，具有较宽的底物特异性，作用于蛋白质中L-精氨酸、L-赖氨酸、甘氨酸和L-瓜氨酸残基羧基参与形成的肽键。
此酶属内肽酶，能切开全蛋蛋白质分子内部肽链—CO—NH—生成分子量较小的多肽类。
木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质的蛋白酶。
它的外观为白色至浅黄色的粉末，微有吸湿性。
木瓜蛋白酶（Papain）简称木瓜酶，又称为木瓜酵素。
是利用未成熟的番木瓜（Carica papaya）果实中的乳汁，采用现代生物工程技术提炼而成的纯天然生物酶制品。
它是一种含疏基(-SH)肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力，同时，还具有合成功能，能把蛋白水解物合成为类蛋白质。
溶于水和甘油，水溶液无色或淡黄色，有时呈乳白色；几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。
最适合PH值6～7(一般3～9.5皆可)，在中性或偏酸性时亦有作用，等电点（pI)为8.75；最适合温度55～65℃(一般10～85℃皆可)，耐热性强，在90℃时也不会完全失活；受氧化剂抑制，还原性物质激活。
2．胃蛋白酶
胃蛋白酶（英文名称：Pepsin）是一种消化性蛋白酶，由胃部中的胃粘膜主细胞所分泌，功能是将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。
胃蛋白酶原由胃底主细胞分泌，在pH1.5～5.0条件下，被活化成胃蛋白酶，将蛋白质分解为胨，而且一部分被分解为酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。
可分解蛋白质中苯丙氨酸或酪氨酸与其他氨基酸形成的肽键，产物为蛋白胨及少量的多肽和氨基酸，该酶的最适pH为2左右。
3．中性蛋白酶
中性蛋白酶是由枯草芽孢杆菌经发酵提取而得的，属于一种内切酶，可用于各种蛋白质水解处理。
在一定温度、PH值下，本品能将大分子蛋白质水解为氨基酸等产物。
可广泛应用于动植物蛋白的水解，制取生产高级调味品和食品营养强化剂的HAP和HVP，此外还可用于皮革脱毛、软化、羊毛丝绸脱胶等加工。
利用中性蛋白酶的酶促反应，可把动植物的大分子蛋白质水解成小分子肽或氨基酸，以利于蛋白质的有效吸收和利用，其水解液AN%高，水解度高，风味佳，已广泛用于生产高级调味品和食品营养强化剂，各种动物来源性抽提物生产功能性骨、肉提取物（骨素）、水产提取物、蛋白胨、肽等及研究开发一些高附加值的功能食品。
4．胰凝乳蛋白酶
胰凝乳蛋白酶chymotrypsin 又叫糜蛋白酶，是一种典型的丝氨酸蛋白酶，脊椎动物的消化酶。
属于肽链内切酶，主要切断多肽链中的芳香族氨基酸残基的羧基一侧。
5．胰蛋白酶
胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 为蛋白酶的一种，是肽链内切酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。
它不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。
是特异性最强的蛋白酶，在决定蛋白质的氨基酸排列中，它成为不可缺少的工具。
6．羧肽酶
一类肽链端解酶，作用于肽链的游离羧基末端释放单个氨基酸。
羧肽酶是催化水解多肽链含羧基末端氨基酸的酶。
酶活性与锌有关。
羧肽酶A：是水解由芳香族和中性脂肪族氨基酸形成的羧基末端。
比如酪氨酸，苯丙氨酸，丙氨酸等
羧肽酶B：主要水解碱性氨基酸形成的羧基末端。
羧肽酶A可以切割C端除了Lys、Arg、Pro的氨基酸
羧肽酶B可以切割C端的Lys或Arg
但如果倒数第二个氨基酸为Pro，两种羧肽酶均不能作用
羧肽酶是一种消化酶。
可专一性地从肽链的C端开始逐个降
解，释放出游离氨基酸的一类肽链外切酶。
以酶原形式存在于生物体内。
常用的有A、B、C及Y ，4种羧肽酶。
羧肽酶A能水解蛋白质和多肽底物C端芳香族或中性脂肪族氨基酸残基，释放除脯氨酸、羟脯氨酸、精氨酸和赖氨酸之外的所有C末端氨基酸，更易于水解具有芳香族侧链和大脂肪侧链的羧基端氨基酸。
比如酪氨酸，苯丙氨酸，丙氨酸等。
羧肽酶A （carboxypeptidase A）,CPA，因其底物的首位字“A”而得名羧肽酶A 。
7．弹性蛋白酶
催化弹性蛋白的肽键或由中性氨基酸形成的其他肽键水解的一种酶。
别名: 胰酞酶E；胰肽酶Ⅰ；弹性蛋白酶(猪胰)；胰弹性蛋白酶(猪胰)。
化学性质: 弹性蛋白酶的性状：
1.其外观呈淡黄色至深黄色粉末，也可是浅褐至深褐色液体。
可溶于水，不溶于乙醇，有吸湿性。
2.纯胰弹性蛋白酶，由240个氨基酸残基组成的单一肽链，相对分子质量约为25000，等电点为9.5。
3.弹性蛋白酶可使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白消化分解，包括肽键结合的、酰胺结合的和酯结合的进行加水分解。
作用的最适pH值7.8，最适作用温度25℃。
4.弹性蛋白酶具有明显的β-脂蛋白酶作用，能活化磷酯酶A，降低血清胆固醇，改善血清脂质，降低血浆胆固醇及第密度脂蛋白、甘油三酯，升高高密度脂蛋白、阻止脂质向动脉壁沉积和增大动脉的弹性，具有抗动脉粥样硬化及抗脂肪肝作用。
弹性蛋白酶的用途：
在医学临床主要用于治疗高血脂症，防止动脉粥样硬化、脂肪肝。
也可用于肉类和水产加工中的嫩化。
弹性蛋白酶的制备方法：
一般由动物的胰脏用水提取而得，也可用细菌的培养液在低温下用水提取而得。