常规甘油封片剂
抗荧光衰减封片剂 (Antifade Solution)
抗荧光衰减封片剂(Antifade Solution)SC1210 5 ml 200 元10 ml 350 元概述：抗荧光衰减封片剂以高纯度甘油为介质，内含抗荧光淬灭剂，有强烈的抗荧光衰减作用，用于对荧光组织和细胞样品的封片。
样品封片后4ºC或－20ºC避光保存2-3周，可最大限度延长荧光持续时间和维持荧光发光强度，同时封片剂中的其它成分有助于保持组织抗原抗体处于结合状态。
适用于所有光谱范围的荧光如FITC，Cy2, Cy3, Rhodamine, Texas Red, Cy5, Cy7，DAPI, AMCA, R6G, Hoechst 33258 and 33342。
适用：1. 组织细胞免疫荧光组织化学染色样品封片；2. 染色体荧光观察封片；3. 核酸荧光原位杂交样品封片。
对所有光谱范围的荧光均有抗衰减作用，如FITC，Cy2, Cy3, Rhodamine, Texas Red, Cy5, Cy7，DAPI, AMCA, R6G, Hoechst 33258 and 33342。
使用方法：1. 吸去载玻片上的液体，略微晾干残留液体。
2. 取约20µl封片试剂滴加在载玻片的样品处。
也可取适量直接加到细胞培养孔内。
3. 盖上盖玻片。
盖玻片规格为24 x 24 mm或24 x 60 mm大小。
4. 轻轻压盖玻片，用滤纸小心吸除盖玻片周围多余液体，室温放置数分钟。
5. 直接进行荧光显微镜观察。
片子于4ºC或－20ºC避光保存2周，荧光无明显衰减。
6. 如需永久封片可用市售指甲油封固盖玻片周围，但通常这样做并无必要。
规格：5 ml或10 ml包装，每一24 x 24 mm盖玻片用约10-20µl。
储存：自然温度运输，收到后－20ºC避光保存。
组织自发荧光淬灭剂AutoFluo QuencherSC1212 20 ml 200 元概述：许多组织会产生可透过各种波长滤光片的内源性自发荧光，显著干扰抗体标记荧光观察甚至导致荧光组化染色失败。
硫黄素S-淀粉体
硫黄素S –淀粉体目的：鉴别组织中的淀粉沉着物。
原理：淀粉体具有均质性和嗜伊红性。
沉着于细胞外，大量存在可能引起周围组织的损伤。
当使用硫黄素S染色时，淀粉体在荧光显微镜下呈苹果绿色的荧光。
对照：存在淀粉样变性的组织。
固定：推荐用Carnoy's 和无水乙醇。
10% NBF orBouin's.技术：10μ石蜡切片。
设备：蒸馏水清洗玻璃器皿，染色缸，量筒.试剂：1% 硫黄素S 溶液：硫黄素S 0.5 gm蒸馏水50.0 ml新鲜配制，用后丢弃。
警告：避免接触和吸入。
Mayer's苏木素。
详见刚果红染色70%酒精甘油明胶封片剂：详见备用液。
安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。
避免接触和吸入。
程序：1. 脱蜡至蒸馏水2. Mayer's苏木精5 minutes。
3. 流水冲洗5 minutes。
4. 蒸馏水稍洗。
5. 硫黄素S 5 minutes。
6. 70%酒精分化5 minutes。
7. 蒸馏水稍洗，2次。
甘油明胶封片剂封裱。
结果：淀粉体：荧光显微镜下呈苹果绿色的荧光。
背景黑色注意：硫黄素T可代替硫黄素S。
程序卡硫黄素S –淀粉体对照：存在有淀粉样变性的组织。
技术：10 microns石蜡切片程序：1. 脱蜡至蒸馏水2. Mayer's苏木精5 minutes。
3. 流水冲洗5 minutes。
4. 蒸馏水稍洗。
5. 硫黄素S 5 minutes。
6. 70%酒精分化5 minutes。
7. 蒸馏水稍洗，2次。
甘油明胶封片剂封裱。
结果：淀粉体：荧光显微镜下呈苹果绿色的荧光。
背景黑色Mayer's苏木素。
详见刚果红染色1% 硫黄素S 溶液：硫黄素S 0.5 gm蒸馏水50.0 ml新鲜配制，用后丢弃。
警告：避免接触和吸入。
70%酒精甘油明胶封片剂：详见备用液。
安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。
避免接触和吸入。
激光共聚焦制样
非损伤性导入法：在正常的生理条件下加入Ca2+荧光探针与植物细胞共同孵育, 使探针渗入到细胞内的方法。
在培养液中加人荧光探针和增强膜透性的药物, 如去垢剂digitonin(毛地黄甘)、表面活性剂Pluronic F-127等, 药物使细胞膜通透性增强, 利于荧光探针的导入【1】。
周平等发现：在PH5.6条件下，绿豆、花生、水稻、烟草等细胞原生质体用5~10um ol/L Indo-1-K+或Fura-2-AM共同孵育1.5h,荧光探针可导入部分原生质体【2】。
样品的制备1：样品制备是上机检测前的关键步骤。
样品需经荧光探剂标记( 单标、双标、三标) 。
标本可以是固定的或活的组织, 也可以是固定的或活的贴壁培养, 细胞应培养在Confocal 专用小培养皿或盖玻片上, 悬浮细胞, 甩片或滴片后, 用盖玻片封片。
样品的最大厚度约1~ 2 mm, 使用的盖玻片厚度应小于0117mm, 载玻片厚度应在018~ 112 mm 之间, 而且表面光洁, 厚度均匀, 没有明显的干扰荧光。
固定样品常用封片剂进行封片,常用PH815- 9 的PBS 配制的甘油封片。
样品准备2：样品的最大厚度大约1~2mm(10×/ 0.4 物镜), 它取决于物镜的数值孔径(NA) 、物镜的工作距离、激光的穿透力以及样品的透明度。
一般要求是单层贴壁细胞, 可以是经荧光探针标记(单标、双标、三标)固定的或活的组织; 固定的或活的贴壁培养细胞(Confocal 专用小培养皿, 盖玻片); 用盖玻片封片的经甩片或滴片后的悬浮细胞。
对于非贴壁细胞的粘贴, 一般常用的粘贴剂有多聚赖氨酸﹑伴刀豆球蛋白﹑cell- tak﹑vectabond﹑琼脂凝胶等。
选择粘贴剂的标准是: 不影响实验目的, 对标本无损害[1]。
激光扫描共聚焦显微镜的样品制备技术3：3.1 取材组织标本：包括活检标本、手术切除标本、动物模型标本及尸检解剖标本等，应在标本离体后立即冰冻切片或贮存于-70℃冰箱备用，以充分保存组织的抗原性。
封片剂说明书
封片剂说明书【产品名称】封片剂【包装规格】250mL/瓶【预期用途】主要用于对组织切片及细胞涂片等生物样本进行封固保存。
【检验原理】封片剂是一种天然树脂，折光率与玻璃近似，干燥后凝结成透明无色固体，无收缩变黄、裂纹等弊病。
切片样本中的苏木素、伊红、固绿、洋红等多种染料的色彩在封片剂封固的保护下数年颜色无明显变化。
【主要组成成分】试剂名称主要成分封片剂中性树脂、二甲苯【储存条件及有效期】10℃~30℃保存，有效期为12个月；【样本要求】涂片和切片等生物样本需染色透明完成。
【检验方法】1、根据样本大小取适量封片剂滴在样本上，盖上盖玻片，轻轻挤压去气泡；2、将封片剂封好的切片样本置于通风橱通风晾干；3、将封固好的切片样本置于显微镜下，观察记录结果，或置于标本保存盒进行样本保存。
【检验结果的解释】生物切片样本在显微镜下观察，样本周围的封片剂应无色透明无杂质，样本的染色剂无扩散溶解于封片剂。
【检验方法的局限性】仅供细胞和组织等生物样本的封固，封片剂的凝固时间受温度、通风条件等因素的影响。
【注意事项】1、本试剂的使用人员需严格按照说明书操作，实验人员操作时需穿戴工作服、手套、口罩，尽可能在通风柜里操作或保持操作环境通风；2、涂片或切片制好后应染色透明后在封固；3、夏季及温度较高时可缩短凝固的时间，冬季及温度较低时可延长凝固的时间；4、样本封固晾干时不要滑动盖玻片，以免样本周围的封片剂不均一透明；5、封片后样本周围有气泡可小心按压盖玻片排出气泡；7、需在有效期内使用；第1 页共2 页第 2 页 共 2 页8、废液及涂片的处理应按国家或其他相关规定进行。
【基本信息】备案人/生产企业名称：深圳市达科为生物工程有限公司 联系方式：*************网址：售后服务单位名称：深圳市达科为生物工程有限公司 联系方式：*************住所/生产地址：深圳市坪山区坑梓街道金辉路14号深圳市生物医药创新产业园区1号楼702、703【医疗器械产品备案号 /产品技术要求编号】 【医疗器械生产备案凭证编号】 【产品说明书批准日期】 【产品标签符号说明】产品标签符号说明产品标签符号说明产品编号产品批号生产日期储存条件10到30℃有效期至生产厂家易燃液体呼吸过敏公司标志皮肤腐蚀。
封片剂使用方法
封片剂：一般是指在涉及载玻片和盖玻片的实验中需要用到的一种粘稠剂。
方便标本样品的保存和信号的保留，具有隔绝空气的作用。
一般我们用到的有普通封片剂和抗荧光淬灭的封片剂。
下面以一个例子来讲讲吧。
就来讲讲组化最后的事吧--封片。
这个实验中我们可以选择的封片较多，可以用中性树脂和甘油明胶等。
那就以甘油明胶来说吧。
首先将甘油明胶加热融化。
因为在常温情况下，甘油明胶是半凝固状的，浓稠的粘稠体，不利于盖玻片的使用。
接下来就是利用移液枪或者干净的玻璃棒吸取或者沾取甘油明胶滴在组织上，观察液体表面是否有小气泡，若有，则尽量用一个盖玻片占去；若无，就直接用盖玻片和载玻片成一定角度（边缘靠近液滴）慢慢的靠近液滴，让液体慢慢的赶出盖玻片和载玻片之间的空气。
最后，只要将封好的片子晾干即可。
这里面需要注意的就是避免气泡出现在组织中，若不小心有气泡了，也要将气泡赶出组织的范围，不能影响观察结果和样品的保存。
-特殊染色
（二）网状纤维染色的原理
网状纤维的染色方法很多，但是染色原理 基本相同，有以下方面。 （1）氧化 使网状纤维具有选择性，不经氧化的切片，常 用的氧化剂是高锰酸钾。 （2）漂白 一般采用2%草酸，漂白后无色
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（3）媒染 多用2%硫酸铁氨（俗称铁明矾）。 这些试剂可增加网状纤维对银氨液的选择性。 （4）浸银 也称镀银，使银氨配位化合物与网状纤维结合， 带正电荷的二氨合银Ag（NH3）+2被具有嗜银性 物质的网状纤维吸附。 （5）还原 甲醛液是还原剂，能把与网状纤维结合的银氨配 位化合物还原成棕黑色的金属银。
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操作方法：
(1)切片常规脱蜡至水，蒸馏水洗； (2)Weigent氏苏木素液染核5分钟； (3)自来水洗； (4)1%盐酸分化 (5)自来水洗； (6)丽春红--酸性品红溶液染5-8分钟；
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(7)1%醋酸水溶液洗； (8)1%磷钼酸分化（1-3分钟）直到各种成分被
染清晰（胶原纤维呈淡红色，肌纤维、纤维素 呈鲜红色） (9)2%亮绿液染2-5分钟（或用2%苯胺蓝水溶液 替代） (10)水洗（快速） (11)常规脱水、透明、封片。
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【结果】 胶元纤维呈红色，肌纤维、胞质及
红细胞黄色。
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㈡ 胶元纤维染色应用
胶原纤维染色在病理诊断上主要用于鉴定梭 形、纤维形细胞肿瘤的组织来源；
常常要在纤维、平滑肌和神经三者之中作出 选择。
观察动脉硬化的心脏，在HＥ切片中，心肌 内散在的小疤痕灶和心肌均被染作红色，而作胶 原纤维染色可将胶原组织和肌肉上明显地区分开 来。
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【染色结果】
胶原纤维绿色(亮绿)（或苯胺蓝,蓝色） 肌肉、纤维素红色，红细胞橘黄色，核蓝 黑色。
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常规甘油封片剂
常规甘油封片剂简介：常规甘油片剂是一种用于常规封固剂，亦可用于减缓荧光淬灭的封固，主要由甘油组成。
对于减缓荧光淬灭，其效果不如抗荧光淬灭封片剂(Antifade Mounting Medium)。
按每个样本需要封片剂计算，可以用于样本的封片。
组成：自备材料：1、 载玻片2、 盖玻片3、 荧光显微镜操作步骤(仅供参考)：1、贴壁细胞样本①染色完成后，吸去染色液。
②滴甘常规甘油封片剂于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片液，尽量避免气泡。
③在显微镜下观察。
2、组织切片①染色完成后，吸去染色液。
②滴常规甘油封片剂于组织切片上，盖上盖玻片，让切片接触封片液，尽量避免气泡。
③在显微镜下观察组织切片。
3、其它样品其它样品参考细胞样品或组织切片进行操作。
注意事项：1、 荧光物质均易发生淬灭，染色后的样品宜避光保存。
2、 在使用常规甘油封片剂的情况下，虽然可减缓淬灭，仍需尽量避光。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 IH0272 IH0272 Storage 常规甘油封片剂 10ml 50ml RT 使用说明书 1份有效期：12个月有效。
相关：编号名称DH0005Mayer苏木素染色液IH0091多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml)IH0142PBS磷酸盐缓冲液(0.01mol/L,pH7.2-7.4)IH0270甘油明胶封固液IH0305柠檬酸钠抗原修复液(50×)PW0053Western抗体洗脱液(碱性)TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP单试剂比色法)。
抗荧光淬灭封片剂配方
抗荧光淬灭封片剂配方一、简介抗荧光淬灭封片剂是一种用于荧光显微镜下观察细胞的试剂。
在荧光显微镜下，由于荧光分子的不可逆性猝灭作用，会导致样品中的荧光信号逐渐减弱或消失，影响观察效果。
抗荧光淬灭封片剂可以有效地减轻这种猝灭作用，提高样品中荧光信号的稳定性和持久性。
二、配方1. PVA（聚乙烯醇）：PVA是本试剂的主要成分之一，在封片剂中起到增稠、降低表面张力、防止气泡生成等作用。
常见的PVA型号有17-88和10-98两种，前者的粘度较低，后者较高。
2. Glycerol（甘油）：甘油是一种具有保湿性质的化合物，在本试剂中起到保持细胞膜完整性、减少蒸发和挥发等作用。
3. DABCO（1,4-二氨基环己烷）：DABCO是一种具有活性氮原子的化合物，在本试剂中起到抗荧光淬灭的作用。
它可以与氧气、水和其他有机分子形成复合物，从而减少荧光分子的不可逆性猝灭作用。
4. PBS（磷酸盐缓冲液）：PBS是一种缓冲液，可以调节试剂的pH 值，使其适合于细胞生长和显微镜观察。
5. DAPI（4',6-二氨基-2-苯基吡啶）：DAPI是一种DNA染料，在本试剂中起到标记细胞核的作用。
它可以与DNA结合，发出蓝色荧光。
6. Mounting medium（封片剂）：封片剂是一种用于固定细胞和显微镜观察的介质。
常见的封片剂有DABCO、Vectashield等。
三、制备方法1. 加入PVA：将适量的PVA加入PBS中，并在50℃下搅拌至完全溶解。
2. 加入甘油：将适量的甘油加入PVA溶液中，并搅拌至均匀混合。
3. 加入DABCO：将适量的DABCO加入甘油-PVA溶液中，并搅拌至均匀混合。
4. 加入DAPI：将适量的DAPI加入甘油-PVA-DABCO溶液中，并搅拌至均匀混合。
5. 制备封片：将制备好的样品滴在载玻片上，加入适量的封片剂，然后用盖玻片覆盖。
最后用胶水固定盖玻片。
四、注意事项1. 避免过度搅拌：过度搅拌会使PVA分子链断裂，导致溶液黏度降低。
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常规甘油封片剂
简介：
常规甘油片剂是一种用于常规封固剂，亦可用于减缓荧光淬灭的封固，主要由甘油组成。
对于减缓荧光淬灭，其效果不如抗荧光淬灭封片剂(Antifade Mounting Medium)。
按每个样本需要50～100μl 封片剂计算，5ml 可以用于至少50样本的封片。
组成：
自备材料：
1、 载玻片
2、 盖玻片
3、 荧光显微镜
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞样本
①染色完成后，吸去染色液。
②滴一滴甘常规甘油封片剂于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片液，尽量避免气泡。
③在显微镜下观察。
2、组织切片
①染色完成后，吸去染色液。
②滴一滴常规甘油封片剂于组织切片上，盖上盖玻片，让切片接触封片液，尽量避免气泡。
③在显微镜下观察组织切片。
3、其它样品
其它样品参考细胞样品或组织切片进行操作。
注意事项：
1、 荧光物质均易发生淬灭，染色后的样品宜避光保存。
2、 在使用常规甘油封片剂的情况下，虽然可减缓淬灭，仍需尽量避光。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 IH0272 IH0272 Storage 常规甘油封片剂 10ml 50ml RT 使用说明书 1份。