实验操作中常见问题分析
实验中常见问题解决办法分享
实验中常见问题解决办法分享实验是科学研究的重要环节，但在实验过程中常常会遇到各种各样的问题。
解决这些问题不仅需要反复思考和实践，还需要借鉴他人经验和专业知识。
本文将分享一些实验中常见问题的解决办法，希望对读者有所帮助。
一、设备故障的应对方法实验设备的故障是实验中最常见的问题之一。
在实验前，要做好设备的检查和维护工作，确保其正常运行。
然而，即使如此，有时仍然会出现各种故障。
例如，实验设备无法正常启动，可能是由于电源故障或电路连接问题。
这时，可以尝试更换电源或检查电路连接是否正确，如此仍不能解决问题，可以向设备供应商或专业技术人员求助。
二、实验数据异常的处理方法实验数据的异常常常让人困惑。
当实验结果与预期不符时，首先要检查实验步骤是否正确执行。
有时，异常数据是由于操作失误或实验步骤出错造成的。
如果确认实验步骤正确，可以检查实验设备是否正常工作。
另外，实验数据异常还可能是由于环境因素的干扰引起的。
例如，温度、湿度或光照的变化可能会影响实验结果。
在收集数据时，要注意排除这些干扰因素，或在实验报告中说明这些变量对结果产生的影响。
三、实验操作的改进方法在实验中，经常会发现某些操作步骤不够合理或不够准确，导致实验结果出现偏差。
这时，需要进行操作的改进。
例如，某次实验中由于溶液的配制不准确，导致结果与预期不符。
为了避免这种情况的发生，可以采取多次重复实验，使用更精确的计量器具或改变某些实验条件，以提高实验结果的准确性。
四、实验安全的注意事项实验安全是实验中最重要的一环。
在实验过程中，要时刻注意操作的安全性。
例如，某些实验涉及到有毒物质的使用，要注意佩戴个人防护装备，确保操作安全。
此外，实验中可能产生化学品的废弃物，要对其进行正确的处理，避免对环境造成污染。
同时，实验室里常常有大量的仪器设备，要确保使用过程中不会造成人员伤害或设备损坏。
五、实验结果的分析与总结实验结果的分析与总结对于实验的价值评估和后续研究具有重要意义。
科学实验中的常见疑难问题解析与总结
科学实验中的常见疑难问题解析与总结科学实验作为学生培养科学素养的重要手段之一，不仅可以巩固理论知识，还能培养学生的观察分析和解决问题的能力。
然而，在实际操作过程中，我们常常会遇到一些疑难问题。
本文将对科学实验中的常见疑难问题进行解析与总结，帮助教师和学生更好地应对这些问题。
一、实验现象与预期结果不一致的问题在科学实验中，实验现象与预期结果不一致是一种常见的现象。
出现这种问题的原因可能有以下几点：1. 实验设计不合理：实验前的设计过程中，没有考虑到各种因素的影响，导致实验现象与预期结果不相符。
此时，我们应该反思实验设计的科学性和合理性，以及是否考虑到了可能存在的干扰因素。
2. 实验操作不当：实验中，学生在操作过程中可能存在疏忽或操作不准确的情况，导致实验结果出现偏差。
在这种情况下，我们需要通过观察实验现象和细致分析操作步骤，找出问题所在。
3. 实验条件不充分：某些实验需要一定的条件来保证实验结果的准确性。
如果条件不充分，可能会导致实验现象与预期结果不一致。
我们应该审视实验条件是否满足要求，如果不满足，需要采取相应的措施来改进。
解决这些问题的方法主要包括：加强实验设计和实验操作的培训，提高学生的操作技能；加强对实验条件的把握，确保实验的可重复性和可比较性；在实验过程中，引导学生观察和思考，帮助他们找出问题所在，并促使他们进行合理的解释和总结。
二、结果分析与结论落实不到位的问题科学实验的结果分析和结论落实是实验过程中非常重要的环节。
然而，在实际操作中，我们常常会遇到以下问题：1. 结果分析不到位：学生在对实验结果进行分析时，可能存在片面性或者不够深入的情况，导致对实验结果的解释不准确或缺乏科学依据。
对此，我们应该引导学生进行全面细致的结果分析，帮助他们从多个角度理解实验结果。
2. 结论落实不到位：有时候，学生对实验结果进行结论时，可能只是简单地概括，缺乏具体的数据支持或者实验设计的合理解释。
在这种情况下，我们应该鼓励学生加强对实验结果的深入思考，提出有具体依据的结论。
初中化学实验中的常见问题及解决方案
初中化学实验中的常见问题及解决方案化学实验是初中学习过程中不可或缺的一部分，通过实践操作，学生能够更好地理解化学理论知识。
然而，在实验过程中，常常会出现一些问题，影响实验的效果和学习效果。
本文将介绍一些常见的问题，并提供相应的解决方案，以帮助学生更好地进行化学实验。
一、实验装置不稳定实验装置不稳定是化学实验中常见的问题之一。
当实验装置不牢固时，容易导致实验记录不准确，甚至对实验人员造成意外伤害。
解决方案：在进行实验之前，确保实验装置牢固稳定，所有连接部件要严密无松动。
可以适当增加防滑垫或使用夹子固定玻璃仪器。
在操作过程中要轻拿轻放，避免碰撞。
二、试剂浓度计算错误试剂浓度计算错误是化学实验中常见的问题之一。
试剂浓度计算错误会导致实验结果偏离预期，无法得到准确的数据。
解决方案：在进行实验之前，要认真学习和掌握有关试剂浓度计算的知识，并按照实验要求准确计算试剂的使用量和质量。
在计量试剂时，可以使用量筒、容量瓶等精确的量具，避免使用感性判断。
三、实验室安全意识不强实验室安全意识不强是化学实验中常见的问题之一。
学生对于实验中的危险行为和事故原因了解不足，容易发生危险情况。
解决方案：在进行实验之前，要认真学习和掌握实验室安全知识，包括常见的化学品危险性和处理方法，使用实验装置的注意事项等。
在实验过程中，严禁违反实验室安全规定，做到带手套、戴护目镜，不随意闲逛和吃东西等。
若遇到突发情况，要及时向老师或实验室管理员寻求帮助。
四、实验记录不准确实验记录不准确是化学实验中常见的问题之一。
实验记录不准确会使得实验结果无法得到准确分析和比较，影响实验的意义和学习效果。
解决方案：在进行实验之前，要认真学习和掌握实验记录的方法和注意事项。
在实验过程中，要及时记录实验步骤、观察结果、数据计算等，并注明实验条件和操作注意事项。
记录时要清晰、准确，尽量使用单位和标准化的术语。
五、实验结果与理论预期不符实验结果与理论预期不符是化学实验中常见的问题之一。
学生实验中常见问题的解决方法与指导
学生实验中常见问题的解决方法与指导实验是学生学习科学知识和培养实践能力的重要环节。
然而，在实验过程中，学生常常会遇到一些问题，这些问题可能会影响实验结果的准确性和可靠性。
为了帮助学生更好地解决实验中的问题，提高实验的质量，以下是一些常见问题的解决方法与指导。
1. 实验设备不准确或损坏在实验中，学生可能会遇到设备不准确或损坏的情况。
这可能会导致实验结果的误差增大或实验无法进行。
解决这个问题的方法是在实验前检查设备的准确性和完好性。
如果发现设备有问题，应及时更换或修理。
同时，学生在实验中也应严格按照设备使用说明进行操作，避免不当使用导致设备损坏。
2. 实验操作不规范实验操作不规范是实验中常见的问题之一。
学生可能会因为操作不当而导致实验结果不准确或实验无法进行。
为了避免这个问题，学生应在实验前仔细阅读实验操作步骤，并确保理解每个步骤的意义和要求。
在实验过程中，学生应按照操作步骤进行，注意操作的顺序和方法。
如果有任何疑问，应及时向老师或同学请教。
3. 实验数据处理不当实验数据的处理是实验结果的重要环节。
学生可能会因为数据处理不当而导致实验结果的误差增大或实验结论的不准确。
为了避免这个问题，学生应在实验前了解实验数据的处理方法，并掌握相应的数据处理技巧。
在实验过程中，学生应准确记录实验数据，并及时进行数据处理。
同时，学生还应注意数据的有效性和可靠性，避免因为数据异常而影响实验结果的准确性。
4. 实验安全问题实验安全是学生实验中最重要的问题之一。
学生可能会因为安全意识不强或操作不当而导致实验事故的发生。
为了保证实验的安全性，学生应在实验前了解实验的安全要求和操作规范，并严格遵守。
在实验过程中，学生应佩戴适当的防护装备，如实验服、手套和护目镜等。
同时，学生还应注意实验环境的安全，如保持实验区域整洁、避免使用易燃物品等。
5. 实验结果分析不准确实验结果的分析是实验结论的重要依据。
学生可能会因为分析方法不当或数据处理不准确而导致实验结论的错误。
实验技术中常见问题及解决策略分享
实验技术中常见问题及解决策略分享在科研实验中，技术问题是不可避免的。
无论是初学者还是经验丰富的科研人员，都会遭遇各种实验技术上的困扰。
本文将分享一些实验技术中常见问题及解决策略，希望能够帮助读者更好地应对实验中遇到的挑战。
1. 实验操作困难实验操作困难是许多科研人员常常遇到的问题之一。
特别是涉及到新颖技术或特殊仪器的操作，很容易出现一些学习曲线陡峭的情况。
解决策略：- 仔细阅读实验操作手册，理解实验原理和步骤。
如果手册不够详细，可以尝试与同事、导师或相关领域的专家进行交流和讨论，寻求帮助和建议。
- 做好充分的准备工作，包括准备必要的试剂、仪器设备和实验辅助工具，确保实验环境的整洁和良好的操作条件。
- 进行模拟实验，预演整个实验过程，熟悉每个步骤，加深理解。
在没有真实样本的情况下，可以使用替代物进行实验，更好地掌握基本操作技巧。
- 反复练习，多次重复实验操作，渐渐掌握技巧。
2. 实验结果不重复在科研实验中，由于实验条件的变化或误差的存在，很容易导致实验结果的不重复。
这种情况给科研人员带来了很大的困扰，尤其是当不同实验结果之间出现了矛盾时。
解决策略：- 仔细检查实验操作的每一个步骤，并排查其中可能出现的操作失误。
检查实验条件是否与前期操作一致，比如温度、湿度、时间等。
- 分析实验结果的差异，思考可能的原因。
实验设计时是否有随机因素？是否存在某些未考虑到的控制变量？是否出现了实验设备的故障？逐一排查和解决这些问题。
- 检查实验材料的质量和纯度。
有时候实验结果的不重复可能是由于实验材料的质量差异引起的。
确保实验材料的来源可靠，质量稳定。
- 尝试重复实验，并增加实验的重复次数。
多次实验并取平均值可以减小实验误差的影响，提高结果的可靠性。
3. 数据处理和分析问题实验数据的处理和分析是科研工作中至关重要的一环。
然而，对于初学者来说，很容易陷入数据混淆和分析难度大的困境。
解决策略：- 学习和掌握相关的数据处理和统计学方法。
实验中可能出现的常见问题与解决办法
实验中可能出现的常见问题与解决办法一．污染二．污染是指由于微生物的侵染，在组织培养容器中滋生大量菌斑，使组培材料不能正常生长和发育的现象，主要有以下5方面的原因：三． 1.器具灭菌：实验的所有器具都要在121°C消毒25min，若灭菌温度不够或者时间不足，都会导致污染。
灭菌时要求冷空气完全排除，否则会达不到指定温度。
其次，要做好灭菌登记，杜绝出现人为失误造成的污染。
此外，在接种过程中，每用一次都要在火焰上彻底灼烧，特别在接触到污染物时极易引起器具污染。
2.外植体：很多材料在灭菌后其实还是带菌的，不过量比较少，短期应该观察不到被感染的现象。
3.接种操作：首先，接种人员的手，手腕要用酒精棉球好好擦拭。
其次，对于放置在外的培养物（灭菌好的培养基）其瓶子外壁上有灰尘与微生物，放入超净台前可以用酒精消毒一下。
再者，很容易出现瓶口的污染，所以接种人员的技术要娴熟，干练。
4.环境条件：加强环境的灭菌消毒。
若有污染的材料不可以就地清洗，必须高压杀菌后再清洗，否则会导致大量孢子弥漫。
此外，要及时打扫卫生，定期蒸熏消毒。
保证环境的干净。
5.超净工作台：要定期对初过滤器进行清洗和更换。
此外，每次使用前要提前20min打开机器预处理，并对台面进行酒精喷雾消毒。
四．材料死亡五．实验过程中，很可能出现材料死亡，主要有以下几个方面：六． 1.外植体灭菌过度：一旦材料太小或灭菌时间太长，剂量太大，就会导致材料死亡，所以要严格控制时间。
七． 2.污染：大量污染会造成材料死亡。
八． 3.培养基配置出现问题：在激素配置或营养成分配置出现问题时，材料易死亡，常常发生在无生长点的材料和愈伤组织中。
九． 4.培养环境的恶化：温度过高，透气不好，培养过于密集，久不转移，有害气体的累积都会造成培养材料的死亡。
十．【措施】：【1】.选用较为温和的灭菌剂，降低药物浓度，减少灭菌时间，或选取较为坚强的外植体（eg：生长季节取芽）【2】注意个人卫生，严格按照规则进行操作。
实验存在的问题与建议
实验存在的问题与建议一、引言实验是科学研究中不可或缺的重要环节，通过实验可以验证假设、观察现象和分析数据。
然而，在进行科学实验的过程中，我们可能会遇到一些问题。
本文将探讨几个常见的实验存在的问题，并提出对应的建议。
二、实验设计问题及解决方案1. 实验设计不合理在一些科学研究中，我们可能会遇到实验设计不合理导致结果失真的情况。
例如，样本选择方法不当、变量控制不严格等。
为解决这个问题，首先应进行充分的前期调查和资料搜集，确保已有相关研究为基础；其次，在确定样本时要注意确保代表性以及适当使用随机抽样等方法。
2. 数据收集与处理缺陷数据收集与处理是一个关键步骤，但很容易出现误操作、记录错误或者数据处理方法选择不当等问题。
为了解决这个问题，需要加强对操作技能和标准程序的培训，并在每次数据记录前后仔细核对；另外，在处理数据时要根据具体情况选择恰当统计分析方法，并多角度思考复杂结果是否具有显著统计差异。
三、实验仪器与设备问题及解决方案1. 仪器不准确或老化使用老旧的实验仪器可能导致测量结果不准确，并且降低实验可重复性。
为了避免这种情况，建议定期维护和检测实验仪器，积极更新设备以保持其工作良好状态；同时，在数据处理中采用多次重复检测或者引入标准物质进行校正。
2. 实验环境控制不当实验室环境控制对一些精密的实验尤为重要。
如温度、湿度等参数的变化可能影响到实验结果。
因此，需要在恒温室、洁净室等适当的环境条件下进行相关操作，并通过合理调节来保证每次试验过程中环境稳定。
四、人员操作问题及解决方案1. 操作技术和流程疏忽科学家在进行复杂的操作时往往需要经过长时间的学习和训练才能达到娴熟的程度。
然而，在现实情况下，有时候会出现一些未经训练或资质较差人员操纵相关设备进行实验的情况。
为规避操作问题，首先应加强对人员的培训，确保其基本技能和流程掌握到位，并在每一个关键步骤上设置必要的检查点。
2. 实验记录不全面或有误科学实验需要精细的、准确的数据记录。
实验操作中常见的细节问题及解决方法
实验操作中常见的细节问题及解决方法实验操作中常见的细节问题及解决方法2023年，实验操作在科研工作中依旧扮演着重要的角色。
然而，在实验操作中常常会出现一些细节问题，这些问题可能看似微不足道，但却可能对实验结果产生重要的影响。
因此，科研人员需要十分注意这些细节问题，并做好解决方法的准备。
一、实验室环境问题在实验操作中，实验室的环境问题是一个需要注意的关键因素。
实验室的温度、湿度、气压以及光线等环境因素都可能对实验结果产生影响。
因此，科研人员需要对实验室的环境进行控制，并确保实验室环境的稳定性和一致性。
解决方法：1. 尽可能保持实验室环境的稳定性和一致性。
例如，保持实验室的温度、湿度、气压等因素在合适的范围内。
2. 预先评估实验室的环境因素对实验结果的可能影响，并记录相关数据。
如此，可以在分析实验结果时对这些因素进行控制。
二、实验操作问题实验操作中常常会出现一些细节问题，如称量误差、仪器校准不准确等问题，这些问题可能导致实验结果的误差增大，或者对实验影响不利。
解决方法：1. 在进行实验操作前，需仔细阅读实验操作手册，并准确理解实验步骤和各项操作要求。
2. 做好实验操作的准备工作，如检查仪器设备是否运转正常，确认量具准确度是否达标。
3. 确保实验操作的数据可靠性和一致性。
例如，尽可能重复实验，并记录实验数据。
如果数据的变异过大，可以考虑调整实验步骤或改进实验方法，以提高数据的可靠性和一致性。
三、实验数据分析问题在实验操作完成后，对实验数据的分析是科研工作中至关重要的一步。
然而，实验数据分析也常常出现一些问题，如数据处理不当、统计方法不准确等问题，这些问题可能导致实验结果的不准确或误判。
解决方法：1. 选择合适的数据处理和统计方法。
对于不同类型的数据，需要选择不同的数据处理和统计方法。
在选择方法时，需根据实验数据的性质和特点进行评估，并确认方法的准确性和适用性。
2. 保持数据分析的一致性和可重复性。
在数据分析中，应注意数据的来源和时间，需确保数据的一致性和可重复性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
由于ELISA(酶联免疫试验)具有灵敏度较高、特异性好的特点，已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。
虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个，但作为专业的洗板机生产厂家，我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。
优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。
如不注意，就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。
尤其是花板现象（就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常，而标本孔的OD值却明显偏高）是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。
现将ELISA实验操作中注意事项总结如下，以期给大家带来一些启发，以改善洗板机的安装调试水平，提高临床检测质量。
1 标本及采集、贮运因素严重溶血，以HRP 为标记的ELISA 测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色造成假阳性；混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净；如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应；标本凝固不全，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；采血试管洗涤不彻底、反复使用易交叉污染；塑料试管能吸附抗原物质，样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
血清标本宜在新鲜时检测，严重溶血标本禁用。
一般说来，在5 天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合，使间接法的试剂本底加深。
超过一周测定的需－20℃保存。
冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀并避免产生气泡。
混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。
反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存；最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管；并使用非抗凝标本，肝素抗凝血浆会增加OD值，可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关；EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性；血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
2、试剂的影响ELISA 诊断试剂经历了从合成肽向基因工程抗原的过渡。
由于历史的原因，人们往往以反应本底的好坏来衡量ELISA 反应试剂盒，因此有些厂家为了保持较好的本底采用了单片段基因工程抗原及合成肽包被，该类试剂盒的流行病学敏感度不够，稳定性也成问题。
也有厂家坚持试剂盒高的流行病学敏感度，科学地对待反应结果。
基因工程抗原较合成肽抗原有无可比拟的优越性，就HCV-ELISA 试剂盒来讲，第一代产品为合成肽抗原，主要是HCV 特异性抗原决定簇的肽片段；第二代产品包被的抗原既有基因工程抗原又有合成肽，只是当时的基因工程抗原不全，仅包括了HCV 的核心区片段；第三代产品基本上采用了基因工程抗原，而且这些抗原包括更多、更稳定、纯度更高的HCV 特异性抗原。
第三代试剂的敏感度大大提高了。
基因工程抗原与合成肽抗原的区别如下：基因工程抗原是抗原基因在质粒载体中原核或真核表达的蛋白质抗原，多以大肠杆菌或酵母菌为表达系统。
该类抗原与合成肽相比具有以下特点：a.分子量大。
合成肽采用化学方法制备，由于工艺的局限，合成数量有限，只能达到数百个氨基酸；而利用基因工程制备的抗原，分子量更大。
b.稳定性好。
包被的抗原的稳定性可使试剂盒的效期得到保证，早期以合成肽为包被抗原的试剂盒效期只有3-4 个月，采用基因工程抗原后效期大大延长了。
c.基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达，表达产物包含更多的抗原决定簇，可提高试剂盒的灵敏度，提高检出率。
d.纯化难度大。
基因工程抗原的纯化技术难度较大。
合成多肽抗原是根据蛋白质抗原分子的某一抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。
合成肽抗原有以下特点： a.分子量太小；b.一般只含有一个抗原决定簇；c.纯度高；d.稳定性差。
国内乙肝两对半试剂厂家较多；不同厂家出产的试剂灵敏度与特异性存在一定的差别，资料显示，不同厂家试剂的特异性和敏感性分别为89.4%—99.3%,78%—89%存在较大差异。
有的厂家酶标板孔间A值差大于15%；标记酶的活性及显色液的稳定比较差。
使用质劣的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。
因此。
选择高质量的试剂是保证结果准确的关键之一。
•选择试剂时应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便省时的优良检测试剂，国家参比实验室每年对各厂家的试剂进行质量评估并定期公布评估结果，可作为选择试剂的主要依据。
•要注意试剂的批号和出厂日期，虽然试剂的有效期多为1年。
最好选择刚出厂的试剂使用。
不同厂家的试剂不能混用。
不同方法学的检测试剂，会使两对半结果出现一些不同。
例如：在实际工作中常用ELISA检测HBsAg 结果为阴性，而电化学发光检测为阳性。
除方法学的灵敏度外；还存在使用单抗或多克隆抗体试剂的差别。
单抗对变异抗原或亚型乙肝标志物检测存在差异，建议试剂厂家对剂的制备应该考虑亚型及型浓度的问题。
3、操作技术的影响操作过程的控制：⑴严格按照试剂说明书进行操作。
操作前将试剂在室温下平衡30～60min。
⑵加样后及时放人孵箱。
标本较多时，要分批操作。
按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。
(3)封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板”的出现。
(4)用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
(5)合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。
(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
(7)显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
(8)加样时保持显色剂不外流；A、B液应避免接触金属器械。
加终止液时应避免产生气泡。
(9)应保证酶标板清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。
以上的措施可以使“花板”降至最低限度。
从而提高检测的特异性。
并得到更准确、可靠的实验结果。
加样吸嘴的洁净与否和吸量的准确性，直接影响检测结果。
由于吸嘴构造特殊，导致清洗困难，加大了交叉污染的机会。
建议用一次性吸嘴。
加样器也要经常清洗，定期校准。
加样时应将所加物加在ELISA 板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出。
温浴影响，在建立ELISA 方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2 小时，产物的生成可达顶峰。
为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，反应板不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。
应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。
由于公司的试剂盒温育是在空气浴中完成，采用水浴会造成值偏高或花板。
另外温育中还有边缘效应，边上的值会偏高，建议为了客观的判断结果，将质控放在非边缘位置。
96孔酶标板结构特别；易产生边缘效应，抗原抗体结合及酶促反应对温度有严格要求，酶标板周围与内部孔升降温速率不同，造成周边与内部孔结果差异；干浴与水浴存在明显的差异，尽可能使用水浴，并要求固相板放入水中，减少受热不均，贴密封膜，防止污物浸入。
洗涤在ELISA 过程中虽不是一个反应步骤，但却决定着实验的成败。
ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。
通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。
聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。
可以说在ELISA 操作中，洗涤是最主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎。
洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液，各种试剂盒的洗液不要混用。
聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。
洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
洗液需要稀释，应按要求稀释。
配制洗液应用新鲜的和高质量的纯化水，电导率小于1.5μs/cm，洗液如果结晶应待其融解后配制。
手洗条件一致性较差，对结果影响较大，防止洗液在孔内形成气泡。
半自动与全自动冼板机使用不当也会影响结果，血清中残留的的纤维蛋白丝或洗涤液析出的结晶易使洗板机针小孔全阻塞或半阻塞状态，造成未结合标记酶洗脱不彻底，导致“花板”造成假阳性或假阴性；所以操作洗板机过程中要不时观察洗板机针孔内洗液的通畅状况，及时纠正，洗板机不用时应用去离子水清冼几遍。
保证洗板浸泡时间为40 秒左右，孔内液体被洗板机吸得越干净洗涤效果更好，手工洗板4.显色和比色TMB 经HRP 作用后，约40 分钟显色达顶峰，随即逐渐减弱，至2 小时后即可完全消退至无色。
TMB 的终止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠（SDS）等酶抑制剂均可使反应终止。
这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间（12-24 小时）不褪，是目视判断的良好终止剂。
此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色，此时可用特定的波长（450nm）测读吸光值。
酶标比色仪简称酶标仪，通常指专用于测读ELISA 结果吸光度的光度计。
酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。
优良的酶标仪的读数一般可精确到0.001，准确性为±1%，重复性达0.5%。
酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15 -30℃，使用前先预热仪器15-30 分钟，测读结果更稳定。
测读A 值时，要选用产物的敏感吸收峰，如OPD用492nm 波长。
有的酶标仪可用双波长式测读，即每孔先后测读两次，第一次在最适波长（W1），第二次在不敏感波长（W2），两次测定间不移动ELISA 板的位置，最终测得的A 值为两者之差（W1-W2）。
双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
肉眼判断结果时，显色浅不易观察，影响结果的准确性，必须使用酶标仪检测，以保结果一致性。
5.HooK效应影响随着ELISA一步法的应用，一些标本中抗原含量过高，产生HooK效应。
影响检测结果，采用同步稀释测定或使用线性范围高的两对半定量法可以减HooK反应的发生。