黑木耳黑色素鉴定及提取工艺优化
收稿日期：2009-12-25 作者简介：李琦(1986 —)，男，硕士研究生，研究方向为食品科学与生物技术。E-mail：tomisqq@ * 通信作者：马爱民(1965 —)，男，教授，博士，研究方向为食品微生物与生物技术。E-mail：aiminma@
1.2.3 黑木耳黑色素的纯化 按参考文献[4]的提纯方法对黑色素粗品进行纯化，
纯化后的黑色素经真空冷冻干燥后置于－ 20℃冰箱保存 备用。
1.2.4 黑木耳黑色素的鉴定
1.2.4.1 溶解性实验 分别称取 0.0100g 纯化黑木耳黑色素置于试管中，
在室温条件下(20℃)分别加入蒸馏水、1mol/L 氢氧化钠 溶液、1mol/L 盐酸、无水乙醇、75% 乙醇、正丙醇、 正丁醇、柠檬酸、氯仿各 10mL 搅拌混匀，静置 30min， 观察其在溶液中的溶解性和溶液的颜色。
耳黑色素和溴化钾，研成细粉进行压片。在 5 0 0 ～ 4000cm-1 范围内测定其红外吸收光谱。
1.2.5 黑色素的提取工艺优化
1.2.5.1 黑色素的不同的提取工艺流程 在参考文献[8 ]的方法上对提取工艺进行优化。对
黑木耳不同的前处理：1) 60℃水浴 40min；2) 高温高压 处理( 1 1 8 ℃，4 0 m i n )；3 ) 原料用液氮研磨处理；4 ) 超声 波辅助浸提(超声功率 60W，40min)；5) 静置 40min(对 照) 。
目前，黑色食品如黑芝麻、黑米、黑豆、黑玉 米等含有天然黑色素等而具有滋补、养生、抗氧化和
抗衰老等方面的功效，已引起人们的浓厚兴趣[7]，但国 内外对食用菌所产生的黑色素的研究鲜见报道[3]。黑木 耳(Auricularia auricula)又名云耳，是我国珍贵的药食 两用菌。黑木耳营养丰富，含有人体不可缺少的蛋白 质、脂肪、碳水化合物，钙、铁，胡萝卜素、V B 1、 VB2 等，其具有益气强身、补气血、润肺、止血、止 痛、通便等功效。可防治动脉硬化、高血压和眼底出 血，增强抵抗力，延年益寿[ 8 - 9 ] 。开展黑木耳色素的提 取纯化及其性质研究，无论是黑木耳的高附加值综合利 用和深加工开发，还是对黑色素的深入研究都具有十分 重要的实用价值和理论意义。张莲姬等[10]曾报道用盐酸 提取黑木耳黑色素，本实验对黑木耳黑色素的鉴定及提 取工艺优化作进一步研究。
1.2.1 黑木耳原料预处理 黑木耳原料为干制品，首先将黑木耳捣碎，用粉
碎机进行充分碾磨，然后将磨好的黑木耳粉末过 55 目标 准筛，收集黑木耳干粉并置于密封容器内，于干燥处 保存备用。
1.2.2 黑木耳黑色素的粗品提取 按参考文献[ 8 ] 的提取方法对黑木耳黑色素进行提
取，提取得到的粗品黑色素经真空冷冻干燥后置于－ 20℃ 冰箱保存备用。
material-to-liquid ratio of 1:30 were found optimum, and the crude extract yield reached up to 9.107% under these optimum
conditions. Ultrasonic-assisted extraction has some advantages over conventional methods, such as simplicity, rapidity, better
2 结果与分析
2.1 黑木耳黑色素的溶解性 如表 1 所示，黑木耳黑色素在不同溶剂中的溶解性
不同。表明黑木耳黑色素与酪氨酸合成黑色素不溶于 水、酸溶液、盐溶液和正丙醇、正丁醇、氯仿等有 机溶剂中，这与文献[3-6]的黑色素溶解性质相符。黑木 耳黑色素与酪氨酸合成黑色素溶解性质相同，在溶解液 中颜色略有不同，黑木耳黑色素溶液为棕黑，而酪氨 酸合成黑色素为黑色。
one-factor-at-a-time and orthogonal array design methods were used to optimize the ultrasonic-assisted extraction technology of
Auricularia auricula melanin, and extraction duration of 80 min, ultrasonic power of 80 W, NaOH concentration of 1.25 mol/L,
素 0.0100g，再加入 5mL pH8 的柠檬酸磷酸氢二钠缓冲
液，40℃水浴 1h 使色素溶解，离心 1min，取上清液 1mL
加入 4mL 缓冲液，在最大吸收波长 207nm 处测定其吸光度。
A × r
E11c%m=
———— m
(2)
式中：A 为吸光度；m 为样品质量 /g；r 为测定吸
Abstract：Auricularia auricula melanin was measured for its solubility and UV and infrared spectral characteristics. Meanwhile,
optimization of its extraction technology was conducted. The melanin was soluble in alkaline solution, but insoluble in water,
光度时所吸取样品的稀释倍数。
1.2.5.3 正交试验 为系统考查提取工艺参数对萃取结果的影响，根据
单因素试验结果选取不同因素进行正交试验确定最佳提取 工艺，并以测定的黑色素得率×色价为最终指标[11]。
1.2.6 数据统计分析 所有实验数据重复测定 3 次，所得结果为平均值±
标准差(x ± s，n=3)，利用 SPSS 软件对数据进行统计 分析。
88 2010, Vol. 31, No. 16
食品科学
※工艺技术
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器 黑木耳单片 5 号子实体 华中农业大学实验菌种中
心；黑色素标样(酪氨酸氧化合成) 美国 Sigma 公司； 其他试剂均为国产分析纯。
S-250D 超声波细胞破碎仪 美国 Branson 公司； J-E 高速冷冻离心机 美国 Beckman 公司；Alphal-2 真 空冷冻干燥机 德国 Eppendorf 公司；UV-1700 紫外 - 可 见分光光度计 日本 Shimadzu 公司；Nexus 470 傅里叶 变换红外光谱仪 美国 Nicolet 公司。 1.2 方法
※工艺技术
食品科学
2010, Vol. 31, No. 16 89
表 1 酪氨酸合成黑色素和黑木耳纯化黑色素溶解性 Table 1 Solubility of synthetic tyrosine melanin and purified
Auricularia auricula melanin
溶解实验 水
－
++ 棕黑色 －
注：+ 表示微溶，+ + 表示溶解，－表示不溶。
2.2 黑木耳黑色素的紫外图谱特征
1.0 B
0.8
吸光度
0.6
A 0.4
0.2
0
200
300
400
500
600
波长 /nm
图 1 酪 氨 酸 合 成 黑 色 素 和 (A)黑 木 耳 纯 化 黑 色 素 (B)的 紫 外 扫 描 图 谱
effectiveness, and so on.
Key words：Auricularia auricula；melanin；identification；extraction technology
中图分类号：TS202.3
文献标识码：A
文章编号：1002-6630(2010)16-0087-06
溶剂 蒸馏水
合成黑色素 －
黑木耳黑色素 －
有机溶剂
无水乙醇 75% 乙醇 正丙醇 正丁醇
氯仿
+ 淡黑色 + 淡黑色
－ － －
+ 棕色 + 棕色
－ － －
酸
1mol/L 盐酸溶液
－
－
3mol/L 盐酸溶液
－
－
碱
1mol/L 氢氧化钠溶液
++ 棕黑色
++ 棕黑色
盐
pH8 柠檬酸氢二钠缓冲液
++ 黑色
1mol/L 氯化钠溶液
1.2.4.2 紫外 - 可见光谱扫描 称取少量纯化黑木耳黑色素溶于 pH8 的柠檬酸磷酸
氢二钠缓冲液中，40℃温浴 1h 使色素溶解，4000r/min 离心 1min，取上清液在波长 200～600nm 进行紫外 - 可见 光谱扫描。
1.2.4.3 傅里叶红外变换光谱扫描 采用溴化钾压片法，按 1:200 的比例加入纯化黑木
acid solution and organic solvents. The UV and infrared spectral characterization indicated that the melanin had a structure
identical to that of synthetic tyrosine melanin, and belonged to the group of 3,4-dihydroxy phenylalanine (DOPA) melanins. The
黑色素(melanin)是由吲哚或酚类化合物氧化聚合而 成的非均质高分子化合物，一般呈黑色、褐色或者棕 色，广泛存在于动植物和微生物中[1-2]。它是一种结构 稳定的复杂生物大分子，难溶于水、酸及有机溶剂。 虽然黑色素在生物体的生长发育过程中并不是必需的， 但具有广泛的生物学功能，如降低生物体受紫外线辐 射、溶菌酶酶解、高温、氧化及重金属毒害作用所带 来的伤害，提高生物体在某些恶劣环境下的生存力，并 且它是目前所知的唯一能保护生物体免受辐射伤害的天 然内源生物聚合体[ 1 - 4 ] 。另外，某些微生物在各自的宿 主上产黑色素的能力还与毒力和致病力相关[5-6]。
黑木耳黑色素研究进展
黑木耳黑色素研究进展
姚秀鸽;郭燕;韩闯;王能爽;田爽;朱加楠;周舒扬;马银鹏
【期刊名称】《食用菌学报》
【年(卷),期】2024(31)2
【摘要】黑木耳(Auricularia heimuer)黑色素是天然无毒的生物色素,具有抗辐射、抗氧化和保护肝脏等作用,被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。
笔者综述了
黑木耳黑色素提取和纯化方法、结构表征、理化性质以及生物学功能,展望了其在
食品、医药和化妆品领域的应用,并阐述了当前存在问题及今后研究方向,以期为黑
木耳黑色素研究和应用提供参考。
【总页数】8页(P127-134)
【作者】姚秀鸽;郭燕;韩闯;王能爽;田爽;朱加楠;周舒扬;马银鹏
【作者单位】黑龙江省科学院微生物研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S64
【相关文献】
1.黑木耳黑色素的研究进展
2.黑木耳黑色素的液体发酵培养及提取工艺研究
3.肠道菌群参与黑木耳黑色素改善小鼠缺铁性贫血的代谢组学研究
4.外源因素对黑木耳
菌株生长、黑色素产量及酪氨酸酶活性的影响5.黑木耳黑色素对缺铁性贫血诱导
溃疡性结肠炎小鼠的保护作用
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黑木耳粗多糖提取工艺优化
本科毕业论文(设计) 黑木耳粗多糖提取工艺优化二级学院食品科学学院专业食品科学与工程班级2011级（2）班学生姓名刘晓静学号1110502229指导教师吴小勇2015 年 4 月诚信声明我声明，所呈交的毕业论文（设计）是本人在老师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
据我查证，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文（设计）中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。
我承诺，论文（设计）中的所有内容均真实、可信。
毕业论文（设计）作者（签名）：年月日黑木耳粗多糖提取工艺优化【摘要】目的：比较多个文献中对黑木耳粗多糖的提取方法，锁定几个最主要影响因素进行探讨实验，最终找出最优的提取工艺。
方法：以粗多糖得率为指标，用热水浸提-乙醇沉淀的方法得到黑木耳粗多糖，然后采用单因素实验和L(34)正交实验探究影响黑木耳多糖提取时的因素并得出最优提取方案。
其中研9究的因素包括颗粒大小（目数）、料水比、搅拌时的转速、浸提温度以及提取时间，测定的方法为蒽酮-硫酸法测定法。
结果：单因素实验显示最佳提取条件为：料水比1:35g/ml；搅拌速度150r/min；颗粒大小80目；浸提温度100℃；提取时间50min，而正交试验反映了黑木耳多糖提取工艺中影响最大的因素为颗粒的大小，其次是搅拌速度和浸取时间，而料水比在此实验范围内对测定结果的影响最小。
最后得到的最佳提取工艺条件为：颗粒大小80目、料水比1：35g/ml、提取时间70min、搅拌速度200r/min、温度100℃，且可以进行二次提取。
结论：通过验证实验显示，所得出的优选工艺条件稳定且合理。
【关键词】黑木耳；粗多糖；提取；蒽酮-硫酸法Auricularia auricula polysaccharides extraction processoptimization[Abstract]Objective: To compare multiple documents on the Auricularia auricula polysaccharides extraction methods, the lock several experiments to explore the most important factors, and ultimately find the optimal extraction process. Methods: The crude polysaccharide yield index, using hot water extraction-ethanol precipitation method to get Auricularia auricula polysaccharides, and single factor experiments and L9(34) orthogonal to explore factors AAP was extracted and when the optimal extraction scheme. Which factors include particle size (mesh), water ratio, speed, extraction temperature and extraction time of agitation, the method for the determination of anthrone-sulfuric acid assay. Results: Univariate experiments showed that the optimum extraction conditions: water ratio 1:35g/ml; stirring speed 150r/min; 80 mesh particle size; extraction temperature of 100℃; extraction time of 50min,while the orthogonal experiment reflects the Auricularia auricula polysaccharide extraction process in the biggest factor affecting the size of the particles, followed by stirring speed and leaching time, the minimum ratio of material to water influence in this experimental range of the measurement results. Finally, the optimum extraction conditions were as follows: 80 mesh particle size, water ratio 1:35g/ml, extraction time 70min,stirring speed 200r/min, the temperature of 100℃and can be re-extracted. Conclusion: validation experiments show the results of the preferred process conditions stable and reasonable.[Keywords]Auricularia auricular polysaccharides extraction anthrone- sulfuric acid method目录1 前言 (1)1.1黑木耳的概述 (1)1.1.1黑木耳的历史 (1)1.1.2黑木耳的分布 (1)1.1.3黑木耳的各种药理作用 (1)1.2多糖的概述 (2)1.3研究的目的与意义 (2)2 材料与方法 (3)2.1 实验原料 (3)2.2主要仪器设备和化学药品试剂 (3)2.2.1主要仪器设备 (3)2.2.2主要化学药品与试剂 (4)2.3溶液的配制 (4)2.3.1葡聚糖标准溶液的配制 (4)2.3.2蒽酮-硫酸试液的配制 (4)2.4 实验方法 (4)2.4.1 黑木耳粗多糖的提取工艺流程 (4)2.4.2 粗多糖含量的测定 (5)2.5 实验数据处理 (9)3 结果与分析 (10)3.1 料水比对黑木耳粗多糖得率的影响 (10)3.2 搅拌速度对黑木耳粗多糖得率的影响 (10)3.3 颗粒大小对黑木耳粗多糖得率的影响 (11)3.4 提取温度对黑木耳粗多糖得率的影响 (11)3.5 浸提时间对黑木耳粗多糖得率的影响 (12)3.6 黑木耳粗多糖提取工艺正交试验的研究结果 (12)3.7 验证试验 (13)3.8 提取次数对黑木耳粗多糖得率的影响 (14)参考文献 (16)致谢 (17)1前言1.1黑木耳的概述黑木耳，又名光木耳、云耳、木茸等，属于层菌纲，木耳目，木耳科，木耳属，营养丰富，味道鲜美，不但是大家日常餐桌上的美味佳肴，还是具有药用价值极高的药用菌，更是世界公认的保健品之一。
[课程]黑木耳菌丝液体发酵培养产黑色素培养条件优化
![[课程]黑木耳菌丝液体发酵培养产黑色素培养条件优化](https://360docs-1393072327.cos.ap-beijing.myqcloud.com/a87ce61703020740be1e650e52ea551810a6c924.webp)
预实验：黑木耳液体发酵培养黑色素培养基优化1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 菌种：黑木耳1.1.2 主要试剂土豆KH2PO4 MgSO4葡萄糖蔗糖麦芽糖可溶性淀粉蛋白胨酵母膏硫酸铵尿素盐酸1.1.3 主要仪器摇瓶培养箱分析天平150r/min 摇床分光光度计离心机水浴锅真空冷冻机1.2 培养基的制备1.2.1 PDA培养基土豆汁20%+葡萄糖2%+琼脂2%，pH值自然。
1.2.2 发酵液液体种子培养基PDB土豆汁20%+葡萄糖2%，pH值自然。
1.2.3 摇瓶发酵实验培养基1）碳源筛选试验培养基：土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+蛋白胨0.15%+碳源2%2）氮源筛选试验培养基：土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+葡萄糖2%+氮源2%3）无机盐试验培养基：土豆汁20%+葡萄糖2%+蛋白胨0.15%+不同配比的微量元素4）pH试验培养基：土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+蛋白胨0.15%+葡萄糖2%+不同pH条件5）转速：土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+蛋白胨0.15%+葡萄糖2%+不同转速6）正交试验培养基：设计采用四因素三水平正交表1.3 实验方法1.3.1 黑木耳菌丝发酵培养1) 菌种培养（活化菌种）:从母种试管中取菌丝块接种于PDA平板中，于25℃培养7d2) 液体种子培养（扩大并制备液体菌种）:将活化的菌种切割成黄豆大小的菌丝块，接种入装有100mL液体培养的250mL三角瓶中，30℃，150r/min培养7d，备用。
3) 发酵培养（单因素实验）:摇瓶中装入不同的摇瓶发酵实验培养基100mL，接种量为10%，于30℃,150r/min培养4d。
1.3.2 黑色素的分离与提纯①将培养一段时间的发酵液取出，过滤除菌体；②用1moL/L的HCl调节滤液的pH为2,10000r/min离心15min；③去上清，取沉淀，在沉淀物中加蒸馏水震荡混匀，用1mol/L的HCl调节pH为2，10000r/min离心10min；④反复三次后，去上清，沉淀用蒸馏水洗离心3次；⑤取沉淀冷冻干燥，即为黑色素纯品。
黑木耳黑色素的液体发酵培养及提取工艺研究
25、29、33℃的培养温度下，以 150 r/min 培养 7 d，每 对黑木耳黑色素得率的影响进行了研究。在单因素
个不同处理 3 个重复。随后，按照 1.2.3 和 1.2.4 中的 试验结果的基础上进行了正交试验优化研究，选取
方法进行黑木耳黑色素得率的测定。
最优的温度、pH 以及培养天数 3 个因素，每个因素选
净工作台制作 PDA 平板，并使用接种环挑取黑木耳 性[19]，所以分别设置起始 pH 值为 4.5、5.0、5.5、6.0、
斜面菌种，接种于 PDA 平板，然后将平板置于 28 ℃培 6.5 的液体发酵培养基，按照 40% 的装液量将摇瓶液
养箱中培养 10~14 d，冰箱 4 ℃保存备用。
体发酵培养基分装在 250 mL 三角瓶中，每个处理 3
1.2.2 液体发酵培养。液体发酵培养基配方[16]：20% 个重复，在 121 ℃下高压蒸汽灭菌 20 min。待灭菌
葡萄糖，2%酵母膏，0.2% KH2PO4，0.1% MgSO4·7H2O。 将上述液体发酵培养基按照 40% 的装液量分别装于
冷却后，无菌条件下分别接入 3~4 个约 1 cm2大小的 菌种块。接种后，置于 28 ℃恒温培养箱中静止培养
中图分类号 Q939.96
文献标识号 A
文章编号 1007-7731（2023）05-0031-06
Study on Liquid Fermentation Culture and Extraction Technology of Melanin from Auricularia auriculata
式压力蒸汽灭菌锅）；超净工作台（SW-CJ-1BU，苏 为黑色素纯品，干燥后置于-20 ℃保存。
州新区枫桥净化设备厂）；高速离心机（H2-16K，湖 1.2.4 黑色素得率的测定。黑色素的质量采用恒重
盐酸浸提木耳黑色素最佳工艺参数筛选研究
黑 木 耳 （ ｒ ｕａ ｕｉｕａ 是 我 国传 统 的食 药 兼 用 菌［ Ａｕｉ ｌ ｒａｒ ｉ） ｃ ｉ ｃ １ 】 。其子 实 体 营 养不 仅 丰 富 ， 且 具 有提 高免 疫 、 而 抗 癌 、 血脂 等功 效 ， 于滋 润 强壮 ， 降 适 清肺 益气 ， 血活 血 ， 补 产后 虚弱 及手 足抽 筋麻 木 等症［ ２ 】 木耳作 为 天然黑 色 。黑 食 品来 源 十分丰 富 。近年 来 随着黑 木 耳栽培 技 术 的不 断 革新 和 １ ３趋成 熟 ， 单产 和产 量有 了大 幅度 的增 长 ， 目前 世 界黑 木耳 年产 量 已达 ４ ２万 ｔ］ 国黑 木 耳 无论 是 产 量或 质 量均 居 世 界首 位 ， 我 国 的具 有 竞 争 力 出 口商 ［ ２ 。我 是 品 ， 销海 内外 ， 东南亚 各 国享有 很 高声誉 。但 目前 为止 国 内尚未 见从 黑木 耳 中提取 黑色 素 的有关 报道 。 远 在 天 然 黑 色素 （ ｌ ｉ ） 指 存 在 于植 物 、 物 和微 生 物 中 的色 素 ， Ｍｅａ ｎ 是 ｎ 动 它是 目前 已知 生 物 色素 中最 多 的一类 色 素［ 从天 然黑 色食 品 中提取 得 到 的天然 色素 已在 食 品工业 上 有很 广泛 的用 途 。 ３ 】 。 如黑 芝麻 、 米 、 黑 黑豆 中 的黑色 素 应用 在饮 料 、 糖果 、 糕点 、 克力 、 巧 果酱 生 产 中。天 然黑 色素 在化 学工 业 上也 １益 受到 欢迎 ， 在黑 发剂 、 ３ 可 防晒 霜 等产 品 中应用 。所 以 ， 以天 然黑 色素 替代 化工 合成 黑 色素 ， 有着 十分 广 阔 的应 用 开发 前景 。 近年 的研究 还表 明 ． 色素具 有 抗氧 化和 防止 衰老 等功 能［ 这 将大 大促 进天 然黑 色 素在保 健 食 品中 的应用 。为 了进一 步 开发 、 黑 ４ １ ， 研 究 和应用 黑色 素 ， 本试 验对 黑木 耳 中黑 色素 的提取 方 法进 行 了初步 研究 。
超声波提取黑木耳黑色素的工艺优化
吉林工商学院毕业论文题目名称：超声波提取黑木耳黑色素的工艺优化院系：食品工程学院专业：食品质量与安全学生姓名：邱洋学号：421212403026指导教师：周传新二〇一五年五月十二日超声波提取黑木耳黑色素的工艺优化【摘要】：文章所探讨的是黑木耳黑色素提取的工艺优化丶及其实验的方法，是以木耳粉末为材料，通过单因素试验筛选出氢氧化钠浓度、超声功率、超声时间和料液比 4 个因素，再对后 4个单因素进行正交试验设计，采用超声波法提取黑木耳黑色素的工艺条件。
得出的结果表明，黑木耳黑色素的最佳提取工艺条件是：氢氧化钠浓度 0.5 mol.L-1，超声功率 350 W，超声时间 9 min，料液比 1∶20g.ml-1。
此条件下黑木耳黑色素吸光度为 0.668，比传统溶剂法提取黑色素的提取率高26.94%。
所以与常规方法相比较，超声波提取具有萃取工艺简单、提取时间短、提起效果较好等优点。
关键词：超声波法；正交试验；黑色素；提取Determination of 6 kinds of benzene substances in plastics food Process optimization of ultrasonic extraction of melaninfrom black fungusAbstract :Objective:Technology optimization of the extraction of melanin from black fungus;Methods:With the fungus powder as material, the ultrasonic power, ultrasonic power, ultrasonic time and material liquid ratio of 4 factors were selected by single factor test, and the process conditions of 4 single factor orthogonal experiment were designed.Results:The optimal extraction conditions of Auricularia auricula melanin: sodium hydroxide concentration of 0.5 mol.L-1, ultrasonic power 350 W, ultrasonic time 9 min, solid-liquid ratio of 1 to 20g.ml-1. under this condition of black fungus black pigment was 0.668. The extraction of melanin was 26.94 higher than the traditional solvent method.Conclusion:Compared with the conventional method, ultrasonic extraction has the advantages of simple extraction process, short extraction time and good effect.Keywords: ultrasonic method ,orthogonal test,Melanin, abstract目录前言1材料与方法…………………………………………………………………………………1.1试验材料………………………………………………………………………………………1.1.1原料……………………………………………………………………………………………1.1.2试剂……………………………………………………………………………………………1.1.3仪器……………………………………………………………………………………………1.1.4工艺流程……………………………………………………………………………………1.1.5单因素试验…………………………………………………………………………………1.2试验方法…………………………………………………………………………………………1.2.1黑木耳原料预处理…………………………………………………………………………1.2.2溶剂法提取黑色素工艺…………………………………………………………………1.2.3黑木耳黑色素的不同提取工艺的粗品得率………………………………………1.3单因素对黑色素提取的影响………………………………………………………………1.3.1氢氧化钠溶液浓度对黑木耳提取黑色素的影响………………………………1.3.2超声功率对黑木耳提取黑色素提取的影响……………………………………1.3.3超声时间对黑木耳提取黑色素的影响……………………………………………1.3.4料液比对黑木耳提取黑色素的影响…………………………………………………1.4黑木耳黑色素提取正交试验的设计……………………………………………………1.4.1黑木耳黑色素的提取纯化………………………………………………………………1.4.2 黑木耳黑色素溶解性实验的鉴定…………………………………………………1.4.3超声波优化实验……………………………………………………………………………2结果与讨论………………………………………………………………………………………2.1黑木耳黑色素的溶解性………………………………………………………………………2.2单因素试验…………………………………………………………………………………………2.2.1氢氧化钠浓度的确定………………………………………………………………………2.2.2超声时间的确定………………………………………………………………………………2.2.3超声功率的确定………………………………………………………………………………2.2.4料液比的确定…………………………………………………………………………………2.3正交试验……………………………………………………………………………………………3结论……………………………………………………………………………………………………前言波可以分为次声波、声波、超声波三种。
黑木耳多糖酶法提取条件的优化及脱蛋白工艺的研究
应时间， 蛋白酶添加量及反应时间。针对这些因素， 采用四因素三水平的正交实验确定黑木耳多糖 酶 法 提取的最佳反应条件， 因素水平见表 & 。
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工 艺 技 术
!"#$%"$ &%’ ($")%*+*,- *. /**’ 0%’1234表! 水平 （4） < 因素水平表 因素 （4） = （+9: ） >
由实验得出的结果绘制总糖标准曲线 ， 其 结 果
见图 ! 。
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吸光度值
E3*"**76F0*"*!7 G#3*"77A$
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葡萄糖含量 （!) H +,） 总糖标准曲线
! # 6 B $ . C A 7 J! J# J6 K! K# K6 G
89&(( 型 高 速 万 能 粉 碎 机 ， :;" )*< 精 密 :;
计，电子分析天平， ;;"#&)- 电热恒温水浴锅， ==)& 型电动搅拌器， >6-)# 离 心 机 ， ?)#(& 旋 转 蒸 发 仪 ， 微 9#(&0 恒 温 水 浴 锅 ， ";0)* 循 环 水 多 用 真 空 泵 ， 玻璃仪器气流烘干 型漩涡混合器， @## 分 光 光 度 计 ， 器等。
注： < 为复合酶添加量， = 为蛋白酶添加量 （占黑木耳干重 的百分比） ， > 为复合酶反应时间， 1 为蛋白酶反应时间。
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黑木耳凝集素的提取工艺
黑木耳凝集素的提取工艺作者：邓政东程爱芳蒲玉婷来源：《江苏农业科学》2015年第03期摘要：以黑木耳为原料，采用磷酸缓冲液浸提，在料液比、浸提时间、浸提温度等单因素试验的基础上，设计正交试验，以研究黑木耳凝集素的最佳提取工艺。
结果表明，以磷酸盐缓冲液为提取剂，料液比1 g ∶15 mL，提取温度为 30 ℃，提取时间为16 h条件下，黑木耳凝集素的凝集活性最高，达到0.742。
关键词：黑木耳；凝集素；提取工艺；凝集活性中图分类号： S646.601；R284.2 文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）03-0259-02黑木耳（Auricularia auricula）营养丰富，是我国传统的食药兼用菌，含有多糖、凝集素、三萜类等药用成分，具有提高免疫功能、抗癌、降血脂等功效。
随着双孢菇、灵芝、金针菇和口蘑等真菌凝集素及抗肿瘤效果的发现，真菌凝集素的作用被逐渐认识，它具有凝集细胞、活化淋巴细胞、免疫调节、抑制癌细胞、抑制植物病原真菌等作用[1-3]。
我国是黑木耳的生产和消费大国，研究黑木耳中包括凝集素在内的多种活性成分的提取工艺，对黑木耳的开发和利用具有重要意义。
本研究利用磷酸缓冲液（phosphate buffered saline，PBS）浸提法，采用正交试验，优化提取工艺条件，以期为黑木耳凝集素在食品、医药、保健方面的研究提供依据。
1 材料与方法1.1 试验材料黑木耳干品从市场购买，经粉碎、筛分、密封后存放于阴凉处备用。
鸡血由武汉生物工程学院基础生物学实验室提供。
试验所需试剂均为分析纯。
1.2 试验方法1.2.1 黑木耳凝集素的提取方法取黑木耳干品粉末2.5 g，选取合适的提取试剂，以料液比1 g ∶20 mL在4 ℃条件浸提过夜。
浸提液经过滤，4 000 r/min冷冻离心30 min。
上清液加入固体硫酸铵至饱和度为50%，4 ℃盐析12 h。
沉淀经冷冻离心、透析后，用PBS溶解，获得凝集素粗品。
植物黑色素的研究进展
植物黑色素的研究进展马养民;王改利;杨秀芳【摘要】植物黑色素是一类具有复杂化学结构的大分子物质,在食品、药品、化妆品等行业有潜在的应用价值.本文对近年来植物黑色素的提取工艺、理化性质、结构归属、生理功能等进行了详细阐述,并对植物黑色素的研究趋势进行了展望.【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2013(041)008【总页数】6页(P189-194)【关键词】黑色素;提取工艺;理化性质【作者】马养民;王改利;杨秀芳【作者单位】陕西科技大学教育部轻化工助剂化学与技术重点实验室,陕西西安710021;陕西科技大学教育部轻化工助剂化学与技术重点实验室,陕西西安710021;陕西科技大学教育部轻化工助剂化学与技术重点实验室,陕西西安710021【正文语种】中文【中图分类】TS202.3植物黑色素(melanin)是一种无定性的大分子物质，广泛存在于植物体内，其难溶于水，不溶于有机溶剂，而且结构复杂，性能各异。
按植物黑色素的结构可以将植物黑色素分为2大类：一类为酪氨酸、多酚及其相关化合物代谢的最终产物；另一类为花色苷类[1]。
研究表明，植物黑色素具有增强免疫、保护神经和较强的清除自由基[2-4]功能，对人的健康有重要作用。
植物黑色素富含人体必需的营养物质和对人体有益的微量元素，如Fe、Mn、Cu等；同时，相对于合成黑色素而言，植物黑色素副作用小、安全性高，作为食品和日用添加剂，被广泛应用于饮料、糖果、酒类等食品的着色和化妆品行业，有着广阔的应用前景和发展潜力。
目前，人们在提取工艺、理化性质和功能等方面对植物黑色素已经有了初步的认识。
本文主要对植物黑色素的提取工艺、理化性质、结构归属和生理功能进行了综述，并对植物黑色素的研究趋势进行了展望，以期为植物黑色素的深入研究及其资源的开发利用提供参考。
1 植物黑色素的提取工艺植物黑色素的提取工艺很多，目前报道的有碱液、醇液、酸液和混合溶剂提取等方法。
黑木耳黑色素的研究综述
第34卷第1期 海南师范大学学报（自然科学版）V〇l.34N〇.l 2021 年3 月Journal of Hainan Normal University(Natural Science)Mar.2021Doi ： 10.12051/j.issn. 1674-4942.2021.01.010黑木耳黑色素的研究综述陈雅，徐苗，王欣宜，单欣荷，季琳凯，张拥军*(中国计量大学生命科学学院，浙江杭州310018)摘要：黑木耳是中国一种分布极为广泛且具有独特的营养价值与保健功能的食用菌，含有多 种生物活性化合物，其中黑色素是主要生物活性成分之一，且具有极高的安全性，可进一步开发具 备保健作用的功能色素，该方面的研究已初见成效且应用前景广阔。
文章综述了黑木耳黑色素的 理化性质、分子组成与结构表征、分离制备手段以及其清除自由基、抑菌抗病毒、抗辐射、改善肝损 伤、保护D N A等生物活性的国内外研究现状，分析了限制黑木耳黑色素开发应用的实际问题并提 出展望，并为今后黑木耳黑色素生物活性作用机制的研究及其在食品、药品、化妆品等领域的应用 提供参考。
关键词：黑木耳；黑色素；分离提取；生物合成；分子结构；生物活性中图分类号:0629.1 文献标志码:A文章编号：1674-4942(2021)01-0063-07Summary of Melanin of A u ricu la ria au ricu laCHEN Ya, XU Miao, WANG Xinyi, SHAN Xinhe, Jl Linkai, ZHANG Yongjun' (College of L ife Science,China Jiliang University,Hangzhou 310018, China) Abstract：Auricularia auricula is an edible fungus with a unique nutritional value and healthy function and is widely distributed in China. It contains a variety of bioactive compounds. Melanin is one of the main bioactive components with high safety. It can be further developed into func tional pigments with health care function. The research in this field has broad application prospects. In this paper, the physicochemical properties, molecular composition, structural characterization, separation and prej)aration methods of Auricularia auricula melanin, as well as its biological activities such as scavenging free radicals, antibacterial and antiviral, antiradiation, improving liver injury, protecting DNA and so on, were reviewed. The problems limiting the development and application of Auricularia auricula melanin were analyzed, and the prospects were put forward, which would be helpful for the study of the biological mechanism of Auricularia auricula melanin and its application in food, medicine, cosmetics and other fields.K ey w〇r d s：/lz/m*z//rtrirt ai/rzcw/a;melanin;separation and extraction;biosynthesis;molecular stnicture;biological activity黑木耳(4w r/c a/a r i Y/aur/cu/fl)隶属担子菌亚门（Basi(liomycotina)层菌纲（Hymenomycetes)木耳目（Auricu- I a r i a les)木耳科(A u r i c u1a riaceae)木耳属(yWfcw/rmVz )，为中国珍贵的药用和食用菌，早在19世纪，黑木耳就被 用于民间医药，用于治疗咽喉痛、眼痛、黄疸等病症，并作为收敛剂"_21。