实验五 放线菌、真菌形态观察及各类微生物菌落特征观察(生科)
实验五放线菌、霉菌的形态观察
放线菌
放线菌的观察
霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，分为营养菌丝体和气生菌丝体， 气生菌丝生长到一定阶段后分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生 孢子。
特化的营养菌丝：吸取养料： 假根、吸器
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）其孢子的形态特征是分类的
重要依据。例如：青霉的繁殖菌丝无顶囊，经多次分枝，产生几
轮对称或不对称的小梗，小梗上着生成串的青色分生孢子，孢子
四、实验报告
1、绘图并说明放线菌基内菌丝、气生菌丝和孢子丝 的形态和结构特征。 2、绘图并说明你所观察到的霉菌的形态特征。 (1) 曲霉、青霉、根霉和毛霉的菌落颜色及特征。
(2) 绘制曲霉、青霉、根霉和毛霉的个体形态图，并 注明各部位名称。
五、思考题
1、你主要根据哪些形态特征来区分所观察的几 种霉菌？ 2、在平皿培养微生物时，为何要将平板倒置？ 3、 镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气 生菌丝？
实验五 放线菌、霉菌的形态观察
一、目的要求
1、观察和掌握放线菌、霉菌的形态结构 及其特征。
2．了解几类常见霉菌的基本形态特征。
二、基本原理
放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌.以链霉 属为例：细胞呈丝状分枝，菌丝直径很细（＜1μm，与细菌相似）。 在营养生长阶段，菌丝内无隔，故一般呈多核的单细胞状态。当其 孢子落在固体基质表面并发芽后，就不断伸长、分枝并以放射状向 基质表面和内层扩展，形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄 代谢废物功能的基内菌丝（substrate mycelium，又称基质菌丝、 营养菌丝或一级菌丝），同时在其上又不断向空间方向分化出颜色 较深、直径较粗的分枝菌丝，这就是气生菌丝（aerial mycelium， 或称二级菌丝）。不久，大部分气生菌丝成熟，分化成孢子丝 （spore-bearing mycelium）,并通过横割分裂方式，产生成串的 分生孢子（conidia，spore）。在显微镜下直接观察时，孢子丝依 种类的不同，有直、波曲、钩状、各种螺旋形或轮生。在油镜下观察， 放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状．能否产生菌丝体及由菌丝 体分化产生的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据。
微生物的菌落观察及藻类形态观察
一、实验目的 基本掌握细菌、放线菌、酵母菌、霉菌菌落形态特征及藻类形态特征
二、实验内容及菌种 1、代表性细菌、放线菌、酵母菌、霉菌菌落形态观察：
（1）金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、 霉（蕈）状芽 孢杆菌
（2）紫色直丝链霉菌 （3） 酿酒酵母 （4）青霉毛状
透明度:
透明，不透明
颜色:
正面和反面都需要写
菌落形态描述
菌名 青霉 黑曲霉 根霉 酿酒酵母
紫色直丝链霉菌
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌
苏云金芽孢杆菌
胶质芽孢杆菌 霉状芽孢杆菌
菌落 形状
表面及 质地
颜色
隆起
边缘 气味
正面 反面
带状叶绿体
合子
水绵形态图（10X）
硅 藻
2、藻类形态观察 水绵：固定片观察（营养藻丝体和接合生殖） 硅藻：水浸片观察
三、作业 1、以表格的形式描绘各种菌种的菌落形态特征： 形状、大小、表面及质地、隆起程度、透明度、边缘与颜色。 2、绘制水绵形态图 3、绘制硅藻形态图
菌落特征：
大小:
小，较小，中，较大，大
表面及质地: 干燥，湿润，粉粒状，颗粒状
实验五-放线菌与真菌形态结构观察
实验五-放线菌与真菌形态结构观察实验报告课程名称：环境微生物学实验实验类型：综合实验实验项目名称：放线菌与真菌形态结构观察学生姓名：专业：环境工程学号：同组学生姓名：指导老师：实验地点：实验日期：2018 年10月16日一、实验目的和要求1.学习并掌握放线菌(链霉菌)，真菌(酵母、霉菌)形态结构的观察方法，认识并理解它们的形态特征。
2.熟练掌握显微镜的使用。
二、实验内容和原理1.放线菌放线菌，是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强大的原核生物。
因在固体培养基上呈辐射状生长而得名。
大多数有发达的分枝菌丝。
菌丝纤细，宽度近于杆状细菌，约0.5～1微米。
可分为：营养菌丝，又称基内菌丝，主要功能是吸收营养物质，有的可产生不同的色素，是菌种鉴定的重要依据；气生菌丝，叠生于营养菌丝上，又称二级菌丝。
2.真菌[1]酵母菌：为单细胞真核生物。
呈圆形、卵形、椭圆形或柠檬型。
各体直径比细菌大几倍到几十倍。
菌落大而厚，湿润光华，颜色多为乳白色、灰白色、似细菌落。
繁殖方式包含无性繁殖(芽殖或裂殖)与有性繁殖(形成子囊与子囊孢子)。
[2]酵母菌的出芽生殖：在细胞的一端初生小突起，如芽状，逐渐增大。
细胞核一分为二，其中一个进入小突起，经细胞壁缢缩。
芽体与母细胞脱离，形成新个体。
若芽体不脱离母体而有继续生出新芽，而芽细胞聚集形成芽簇，芽簇细胞伸长呈丝状或藕节状，称做假菌丝。
[3]美兰染色法：美兰是一种无毒性染料，氧化型呈蓝色，还原型呈无色。
活细胞具有较强还原能力，使美兰由蓝色变成无色。
染色后，酵母活细胞无色，死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞呈蓝色或淡蓝色。
[4]酵母菌肝糖粒碘液染色：肝糖粒是酵母细胞的内含物，属于碳源及能源性贮藏物。
用碘液染色，菌体呈淡黄色，肝糖粒呈红褐色。
[5]霉菌：由菌丝体构成，分为基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝长到一定阶段分化产生繁殖菌丝。
由繁殖菌丝产生孢子。
菌丝和孢子的宽度比细菌和放线菌大几倍到几十倍。
实验五放线菌形态观察PPT课件
倍，在高倍镜下即可观察到。而一般细菌 必须在油镜下才能观察到。
如何区别酵母菌的营养细胞和释放出子囊 外的子囊孢子？p44，2
酵母菌的营养细胞呈红色，而释放出子囊 外的子囊孢子呈绿色。由此可加以区别。
气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据
放线菌模式图
孢子丝
菌丝
放线菌的菌落特征
三、实验材料
1.放线菌培养物
紫色链霉菌和灰色链霉菌的四天插片培养物。
2.培养基：高氏合成一号培养基 3.显微镜、无菌培养皿、无菌盖玻片、显微
镜、酒精灯、接种针、载玻片等。
四、实验步骤
放线菌的插片培养
接种位置
基内菌丝
绘图
孢子丝 气生菌丝
基内菌丝
气生菌丝和孢子丝
培养基界线
实验结束后载玻片先用擦镜 纸擦去镜油,再用洗洁精洗干 净,放到酒精箱里.
擦油镜30秒,再离开实验室
下次实验内容
霉菌的形态观察
——小培养法
上次试验习题解答
在显微镜下，酵母菌有哪些突出的特征区别 于一般细菌？ P43 ，2（2）
玻片，擦去背面培养物，然后将有菌的一面朝下
放在滴有美兰的载玻片上，放下后不要再移 动盖玻片，观察。
霉菌的载玻片培养
1、培养小室的灭菌：平皿底铺一张滤纸，再放一个U形玻璃棒， 其上放一张载玻片和两个盖玻片，160-170℃干热灭菌2小时。
2、琼脂块的制作：取已灭菌的马铃薯或查氏培养基6-7mL注入 灭菌平皿中，使之凝固成薄层（培养基不要太厚）。用解剖刀 切成边长0.5-1cm的小块，将其移至培养室中的载玻片上（每 片放两块）。
实验五放线菌、霉菌及真菌的形态观察
对实验结果的理解与思考
• 通过本次实验，我们观察到了放线菌、霉菌及真菌的形态特征， 了解了它们在形态学上的差异。这些微生物在自然界中广泛分 布，对环境和生物体产生重要影响。例如，某些放线菌可以产 生抗生素，对人类医疗和农业具有重要意义；而某些霉菌可以 引起食品和物品的霉变，对人类生活造成困扰。因此，对微生 物形态学的深入了解有助于我们更好地认识和利用这些微生物 资源。
放线菌
放线菌是一种呈辐射状排列的细菌，其菌落形态通常为圆形或不规则形，表面粗糙、干燥 ，颜色多样。放线菌的细胞壁厚，呈革兰氏阳性。
霉菌
霉菌的菌落形态通常为绒毛状、絮状或蜘蛛网状，颜色多样，包括白色、灰色、褐色等。 霉菌的菌丝体非常发达，且具有分支。
真菌
真菌的形态多种多样，包括酵母、霉菌和大型真菌。真菌的菌落形态通常为圆形或椭圆形 ，表面光滑、湿润，颜色多样。真菌细胞壁薄，呈革兰氏阳性或阴性。
04 结果分析
放线菌形态分析
01
02
放线菌的形态多样，包 括链状、球状和杆状等。
放线菌的菌落形态也较 为多样，有的呈圆形， 有的呈不规则形状。
03
放线菌的菌落表面粗糙 或光滑，颜色各异，有 的呈白色，有的呈黄色 或橙色。
04
放线菌的细胞壁通常较 厚，具有分枝的菌丝， 有利于在各种环境中的 生存和繁殖。
03 实验步骤
样品采集与制备
样品采集
从不同环境（土壤、水体、空气 等）中采集放线菌、霉菌及真菌 的样本。
样品制备
将采集的样本进行分离、纯化， 制备成适合显微镜观察的样品。
显微镜观察
显微镜选择
选择适合观察放线菌、霉菌及真菌的 显微镜，如光学显微镜或电子显微镜 。
观察方法
将制备好的样品放置在显微镜下，观 察放线菌、霉菌及真菌的形态特征， 如菌丝、孢子等。
实验五 放线菌、真菌形态观察及各类微生物菌落特征观察(生科)
4 实验步骤
1 实验要求
学习并掌握印片法制备标本片的方法
观察放线菌各部分菌丝特征
巩固显微镜油镜的使用
按要求绘放线菌的形态图
2 实验原理
放线菌形态结构介于细菌与真菌之间，菌体由无隔、 分支状菌丝构成，可分为基内菌丝和气生菌丝两类， 基内菌丝伸入营养基质内；气生菌丝位于营养基质 上方。在发育过程中，气生菌丝分化形成孢子丝， 孢子丝产生孢子。孢子丝形态因菌种不同而不同，
4 操作步骤
（1） 在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染液，用 拨针以无菌操作方式挑取少许根霉菌丝在染液
中铺展开，盖上盖玻片。
（2） 用低倍镜观察菌丝结构及孢子形态。
（3） 绘出黑根霉形态图
孢囊孢子 孢子囊
孢子囊梗 匍匐枝 假根
足细胞 黑曲霉
青霉的帚状枝
实验报告：
1 填写细菌、放线菌、酵母菌、霉菌菌落的一般特征
特征。
表1 细菌、放线菌、真菌菌落形态特征观察
描述的特征 微生物种类 枯草杆菌
菌落特征
大小 表面 边缘 致密 程度 厚薄 程度 透明 程度 色泽
细菌 放线菌
八叠球菌
霉状芽孢杆菌
细黄链霉菌 5406放线菌 酵 母 菌 霉 菌 啤酒酵母
真 菌
毛霉 黑曲霉 青霉
二 放线菌形态观察
1 实验要求
2 实验原理
着生部位、排列方式以及孢子形态可作为真菌鉴定的重要依
据。菌丝特化形成假根等特化菌丝。 霉菌由于菌丝粗大，细胞易收缩变形，且孢子易飞散，制片 时常用乳酸石炭酸棉蓝染液，它一方面杀菌防腐，保持细胞
不变形，另一方面有染色作用。
3 实验材料
黑根霉平板菌落（每个学生必须自己制片）
实验5-放线菌形态观察
实验六放线菌的形态观察；霉菌子实体、分生孢子及菌落形态观察Ⅰ放线菌的形态观察一、目的要求1、学习并掌握观察放线菌的操作方法。
2、巩固掌握放线菌的形态特征。
二、实验原理放线菌是单细胞原核微生物。
菌丝无隔、分枝、纤细，分为生长于培养基内或匍匐于培养基表面的、从培养基吸取营养物质的基内菌丝，以及伸出培养基表面的气生菌丝。
气生菌丝的上部分化出孢子丝，呈螺旋状、波纹状，或分枝状等，孢子丝的着生方式因种而。
放线菌多可产生色素，菌丝呈各种颜色，有的放线菌能产生水溶性色素分泌至培养基中使培养基变色。
孢子丝长出各种形态的孢子，孢子有不同的颜色。
放线菌的菌落在培养基上着生牢固，与基质结合紧密，难以用接种针挑起。
而且由于有大量孢子存在，因而表面呈干粉状，使得易于与其他类型的微生物相区别。
放线菌的形态特征是其菌种鉴定与分类的重要依据。
三、实验器材1、菌种未鉴定放线菌菌株；2、仪器显微镜；3、材料玻璃纸、载玻片、盖玻片，镊子、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯。
4、染料石炭酸复红染色液。
四、操作步骤1、观察自然生长状态的放线菌用镊子小心取出用插片法培养的放线菌培养皿中的一张盖玻片，将其背面附着的菌丝体擦净。
然后将长有菌的一面向上放在洁净的载玻片上，用低倍镜、高倍镜观察。
找出3类菌丝及其分生孢子，并绘图。
注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。
2、水封片观察取石炭酸复红染色液一滴滴于载玻片中央，从培养皿中取出插片法培养放线菌的盖玻片，将无菌或菌较少的一面以擦镜纸擦净，并将有菌面朝下，放在载玻片上，浸在染色液中，制成水封片，用高倍镜观察其单个分生孢子及其基内菌丝，并绘图。
五、注意事项1、培养放线菌中要注意，放线菌的生长速度较慢，培养期较长，在操作中应特别注意无菌操作，严防杂菌污染。
并控制培养时间。
2、在镜检观察时，要仔细观察放线菌的营养菌丝、气生菌丝和孢子丝等。
六、实验报告1、绘图绘出观察的放线菌基内菌丝、气生菌丝和孢子丝的形态。
实验五放线菌、霉菌及真菌的形态观察
放线菌在显微镜下一般气丝在上，基丝在 下，气丝色暗，基丝较透明。有的放线菌 只产生基丝而无气丝。 本实验采用插片法来观察放线菌的菌丝形 态。
2．酵母菌：酵母的菌落形态与细菌的相仿， 由于酵菌细胞比细菌的大，细胞内有许多分化 的细胞品，细胞间隙含水量较少，不能运动， 帮菌落较大、较厚，外观较稠和、不透明，菌 落颜色多为乳白色或矿烛色。
实验五
放线菌、霉菌及酵母菌的 形态观察
一．实验目的
学习并掌握观察放线菌、霉菌及酵母菌 形态的基本方法；
初步了解放线菌、霉菌及酵母菌的形态 特征。
二．实验原理
1．放线菌：是一类主要呈菌丝状生长和孢子繁 殖的陆生性较强的革兰氏阳性细菌，广泛分布 于含水量低、有机质丰富的微碱性土壤中。
放线菌的菌落形态特征为：形成干燥、不透 明、表面呈致密丝绒状，上有一层彩色“干粉” 的菌落。菌落与培养基连接紧密，难以挑取， 菌落正反面颜色不一致，在菌落边缘的琼脂平 板上有变形的现象，有泥腥味。
1. 放线菌形态观察： A. 用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培 养基切下一小块，菌面朝上放在一载玻片上。 B. 另取一洁净载玻片置火焰上微热后，盖在 菌苔上，轻轻按压，使培养物（气丝、孢丝或 孢子）粘附在后一块载玻片中央，有印迹的一 面朝上，通过火焰2～3次固定。 C. 用番红染液覆盖印迹，染色约1min后水洗 D. 干后用油镜观察
3. 霉菌的形态观察： A. 先观察霉菌的菌落形态; B. 然后在载玻片上滴加一滴0.1％的美蓝染液； C. 用解剖针或镊子从霉菌菌落底部小心挑取少 量已经产孢子的霉菌菌丝； D. 放在载玻片上的染液中 E. 盖上盖玻片，置于低倍镜下观察，必要时换 高倍镜。
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4 实验步骤
1 实验要求
学习并掌握印片法制备标本片的方法
观察放线菌各部分菌丝特征
巩固显微镜油镜的使用
按要求绘放线菌的形态图
2 实验原理
放线菌形态结构介于细菌与真菌之间，菌体由无隔、 分支状菌丝构成，可分为基内菌丝和气生菌丝两类， 基内菌丝伸入营养基质内；气生菌丝位于营养基质 上方。在发育过程中，气生菌丝分化形成孢子丝， 孢子丝产生孢子。孢子丝形态因菌种不同而不同，
实验五 放线菌、真菌形态观察 及各类微生物菌落特征观察
实验内容
一 各类微生物菌落特征观察
二 放线菌形态观察
三 酵母菌形态观察
四 霉菌形态观察
一 各类微生物菌落特征观察
1 实验目的要求
2 实验原理
3 实验步骤
1 实验目的要求 （1）观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等微生
物菌落的形态特征。
（2）总结几类微生物菌落的一般特征并能识别。
特征。
表1 细菌、放线菌、真菌菌落形态特征观察
描述的特征 微生物种类 枯草杆菌
菌落特征
大小 表面 边缘 致密 程度 厚薄 程度 透明 程度 色泽
细菌 放线菌
八叠球菌
霉状芽孢杆菌
细黄链霉菌 5406放线菌 酵 母 菌 霉 菌 啤酒酵母
真 菌
毛霉 黑曲霉 青霉
二 放线菌形态观察
1 实验要求
2 实验原理
特征描述：形状、大小、颜色、边缘、隆起、
光泽、质地等。
粘质 沙雷 氏菌
细菌菌落特征：凝胶状、表面较光滑、湿润、 与培养基结合不紧密，易挑取，正反颜色一致。
放线菌特征
致密、坚硬、多皱、 不易用针挑起，不 透明。孢子成熟后， 表面粉末状，干燥。
酵母菌菌落特征 与细菌相似 比细菌大而厚， 不透明，表面光滑、 湿润、粘稠，易用 针挑起。多呈乳白 色。
4 操作步骤
（1） 在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染液，用 拨针以无菌操作方式挑取少许根霉菌丝在染液
中铺展开，盖上盖玻片。
（2） 用低倍镜观察菌丝结构及孢子形态。
（3） 绘出黑根霉形态图
孢囊孢子 孢子囊
孢子囊梗 匍匐枝 假根
足细胞 黑曲霉
青霉的帚状枝
实验报告：
1 填写细菌、放线菌、酵母菌、霉菌菌落的一般特征
青 霉 菌 落
霉菌的菌落特征 比细菌菌落大，由菌丝组 成疏松的绒毛状、絮状或 蜘蛛网状，有的无固定大 小，延至整个培养基中， 产色素，使菌落显色。
4 实验步骤
▲ 借助放大镜分别观察各类微生物的菌落的 大小，表面粗糙及含水分状况，边缘，致 密程度、透明程度，及厚度等特征，并填 写记录表。 ▲ 根据观察结果总结各类微生物菌落的一般
但有时某些酵母菌可形成假菌丝。酵母菌无性繁殖以
出芽方式生殖。常用碘液制水浸片。
3 实验材料 啤酒酵母斜面菌种 （马铃薯斜面培养基培养24小时）
4 操作步骤 水浸片观察
（1）在载玻片上滴加一滴碘液，用接种环以无菌操作 方式挑取少许啤酒酵母，在碘液中充分混匀，盖上
盖玻片。
（2）镜检：先低倍镜观察，后换用高倍镜观察细胞形态
2 实验原理
菌落：单个菌体在固体平面培养基上生长繁殖形成
的肉眼可见的群体。 粘质 沙雷 氏菌
沙 门 氏 菌
（群体形态）和细胞形 态（个体形态）两方面进行，菌落形态是无数细胞形态的集 中反映，因此，每一大类微生物都有其一定的菌落特征，可 通过这些特征差异区分和识别之。
孢子丝
气生菌丝
营养菌丝
气生菌丝
孢 子 丝
分 生 孢 子
三 酵母菌形态观察
1 实验要求 2 实验原理
3 实验材料
4 操作步骤
1 实验要求
学习并掌握水浸片法制备标本片的方法
观察酵母菌的菌体形态特征及出芽生殖
按要求绘酵母菌形态图
2 实验原理
真菌形态结构比细菌复杂。习惯上，真菌可分为酵母 菌和霉菌。 酵母菌是单细胞构造，个体形态多为卵圆形、圆柱形，
记录表。
2 绘出放线菌形态图 3 绘出酵母菌形态图 4 绘出黑根霉形态图
（3）绘出酵母菌形态特征图
四 霉菌形态观察
1 实验目的要求
2 实验原理
3 实验材料
4 操作步骤
1 实验目的要求
▲学习并掌握水浸片法制备标本片的方法
▲观察黑根霉的菌丝形态特征（自制片） ▲观察曲霉、青霉的典型菌丝特征（示范片） ▲按要求绘制黑根霉形态图
2 实验原理
霉菌由粗大、有隔或无隔分支状菌丝构成，菌丝分为基内菌 丝、气生菌丝，气生菌丝上产生多种无性、有性孢子，孢子
着生部位、排列方式以及孢子形态可作为真菌鉴定的重要依
据。菌丝特化形成假根等特化菌丝。 霉菌由于菌丝粗大，细胞易收缩变形，且孢子易飞散，制片 时常用乳酸石炭酸棉蓝染液，它一方面杀菌防腐，保持细胞
不变形，另一方面有染色作用。
3 实验材料
黑根霉平板菌落（每个学生必须自己制片）
黑曲霉平板菌落（示范片观察） 青霉平板菌落（示范片观察）
有直线形、波曲形、螺旋状等形态，而孢子一般有
球形、圆柱形、椭圆形等。
3 实验材料 5406 （细黄链霉菌）培养平板（在高氏一 号培养基平板上以涂布法接种细黄链霉菌稀
释液，28℃培养5--7日）。
4 操作步骤
1 用拨针将平板上的菌落培养基切割成小方块，并用拨针挑起 一块菌落培养基（注意无菌操作），用火焰微加热的洁净载 玻片，以生长的菌落面朝向载玻片，在载玻片上不同部位印 压。 2 将印片加热固定。 3 用蕃红染色2-3min，水洗风干。 4 镜检：先用低倍镜观察，后换用油镜观察气生菌丝、孢子丝 孢子等结构。 5 绘出放线菌形态图